1有机溶剂提取法甲醇和乙醇是最常用的黄酮类化合物提取溶剂,高浓度的醇( 如90 % 左右) 适宜于提取苷元,60 % 左右浓度的乙醇或甲醇水溶液适宜于提取苷类。欧美国家采用的主要溶剂法工艺有:醇( 酮) 浸提-卤代烃萃取-酮/ 铵盐萃取法、酮浸提- 氨水沉淀- 混合酮萃取法、酮浸提卤代烃萃取-铅化物沉淀法和醇(酮)浸提-甲苯/丁醇萃取树脂法[10]。该工艺采用中等温度50℃~60 ℃浸泡,杂质较少,经浓缩、水析可除去烷基酚等脂溶性物质。用CCl4等非极性溶剂萃取除去蜡质、叶绿素等脂溶性杂质;调节pH8~9或Pb(OH)2沉降, 可除去原花青素、蛋白质、高分子单宁等杂质,有利于C4-C6酮和醇萃取有效成分和减少乳化现象,改善分层,提高有效成分的萃取率。2微波提取法微波加热是透入内部的能量被物料吸收置换成热能对物料的加热, 形成独特的物料受热方式, 具有均匀性的特点, 同时具有反应高效性和强选择性等特点, 而且具有操作简便、副产物少、提取率高等优点。本法多用在药材的浸出, 在黄酮类化合物的提取上取得了良好的效果。李姣娟等人[11]对微波法提取川桂叶总黄酮工艺条件进行研究,以65 %乙醇按照固液比1∶20,在85 ℃条件下提取9 mi n ,连续提取2次, 总黄酮得率22.36 mg/g。此外,张瑞菊[12]采用单因子及正交实验, 考察了乙醇浓度、微波时间、微波功率及固液比对苦参黄酮类化合物提取量的影响规律。结果表明苦参黄酮类化合物提取工艺的最佳参数组合为: 乙醇体积分数10%, 微波作用时间6min,功率420W, 固液比为1∶25(g/mL)。在最佳参数组合下苦参中总黄酮的提取量可达4.83%。3超临界萃取法超临界流体萃取是利用超临界流体在临界压力和临界温度附近具有的特殊性能作为溶剂进行萃取的一门科学, 最常用的超临界流体为CO2。应用CO2-SPE 技术提取分离黄酮类物质, 具有萃取速度快, 效率高, 操作简单等特点, 产品中没有残留有机溶剂, 与传统的萃取分离工艺相比优势是明显的。此外, 超临界CO2萃取较易与其它先进技术联用, 成为新型而有效的分离分析技术。余希成通过单因素和正交实验研究,对超临界CO2流体萃取海金沙黄酮类化合物的工艺进行了优化设计[13]。实验结果表明, 影响萃取得率的各因素大小顺序是:萃取温度>萃取压力>流体流量>萃取时间。最佳萃取实验工艺条件为萃取温度45 ℃, 萃取压力25 MPa,流体流量3.0 L/h , 萃取时间3 h 。王正云采用超临界CO2萃取技术对芦笋中的黄酮类化合物进行了萃取研究,运用L9(34)正交表系统研究了萃取压力,萃取温度,萃取时间以及夹带剂用量对萃取率的影响[14]。确定了超临界CO2萃取芦笋总黄酮的最佳工艺条件为:温度为70 ℃、时间为2h、压力为30MPa、夹带剂(75%乙醇)用量2.0mL/g。此条件下得到总黄酮比率为1.35%,其黄酮得率是常规溶剂乙醇提取法总黄酮得率的2.7倍。4酶辅助提取法最近几年,随着酶技术的快速发展,科学工作者充分利用了酶的特性发展了新的提取方法。由于传统的水、酸、碱、有机溶剂提取黄酮类物质方法是利用浓度梯度使存在于植物纤维组织之内的有效成分逐步扩散到提取溶剂中,因受植物细胞壁纤维组织的屏障作用,往往萃取时间长, 需要使用大量溶剂,而且提取率较低。植物细胞壁的主要成分是纤维素, 恰当地利用纤维素酶处理,可使细胞壁发生不同程度的改变,如软化、膨胀和崩溃等,从而可改变细胞壁的通透性, 提高黄酮类化合物的提取率,黄剑波采用甜茶作材料, 采用纤维素酶辅助的方法, 从中提取黄酮类化合物[15]。首先, 确定纤维素酶的最佳作用效果, 然后通过单因素实验, 得出酶法辅助的最佳提取工艺为: 水做溶剂, 先用40 ℃下茶粉质量3%的纤维素酶作用15min,再在80℃下浸提1 h,固液比为1∶30,试验结果表明:黄酮类物质的提取率为91%,提取纯度为54 %。5超声波辅助提取法用超声波法提取黄酮类物质,是目前比较新的方法。其原理主要是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成份的浸出。王立升采用超声波提取工艺以乙醇为溶剂提取小叶榕叶中的黄酮类物质, 工艺上增加对脂溶性成分的处理[16]。通过单因素试验研究了各因素对提取率的影响, 正交试验表明影响黄酮提取率的因素主次顺序是:液固比>提取时间>乙醇浓度>超声功率。小叶榕叶提取黄酮类成分的最佳条件为:乙醇浓度60%,液固比1∶30,每次提取时间20min,功率240W,最佳条件下小叶榕叶中总黄酮的提取率达到4.38%。