国内外叶片内生菌研究现状论文

观赏植物马尾杉内生菌及其次生代谢产物对AChE的抑制活性 【作者】 杜晓华 【导师】 巩振辉 郑珍贵 【学位授予单位】 西北农林科技大学 【学科专业名称】 蔬菜学 【论文级别】 硕士 【出版时间】 20030301 【关键词】 观赏植物 马尾杉 内生菌 乙酰胆碱酯酶抑制活性 【中文摘要】 该实验以观赏植物马尾杉为材料,研究了其内生菌的种类分布、组成及其在植物不同器官分布的特点;通过体外实验,筛选出了对乙酰胆碱酯酶有抑制作用的内生菌种,对效果最明显的一株菌种进行了适宜培养条件的探索;并对此菌种产生的活性成分进行了初步分离与检测.结果如下:1.从观赏植物马尾杉中共分离到分别属于子囊菌,藻菌和半知菌的56种内生真菌,其中子囊菌占73％,藻菌占21％,半知菌占14％;内生菌在观赏植物马尾杉器官中的分布以茎中最多,其次为叶片,假根中最少.2.共筛选出对乙酰胆碱酯酶有抑制作用的菌种13株,其中珠网霉属K11菌种表现出较强的抑制率,其发酵液的生物碱粗提物对乙酰胆碱酯酶的抑制率与从蛇足石杉(观赏用马尾杉的同科植物)植株提取的总生物碱相当,IC50分别为410μg/L.该菌种生长和乙酰胆碱酯酶抑制物合成最适培养基为马铃薯培养基,适宜培养温度为26℃±1℃,液体震荡培养速度为120rpm以上.在接种量为2mL时,菌种生长适宜培养天数为四天,乙酰胆碱酯酶抑制物合成适宜培养时间为五天以后.、HPLC分析结果表明,珠网霉属K11菌能够在其发酵液中合成石杉碱甲类物质.

考虑到植物自身的免疫系统。内生菌群可能是通过激活植物自身免疫从而增强DC3000抗性。因此作者把内生菌液注射到了bak1/bkk1拟南芥中。作者利用比较基因组学手段，对比了产生保护的菌和不产生保护的菌基因组之间的差异。并且鉴定出25个同源基因簇。其中14个都是T6SS相关。因此文章对leaf202的T6SS基因进行了突变以验证内生菌激活植物免疫与T6SS的依赖度。将内生菌提高宿主免疫的能力归结为T6SS分泌系统的加持。 从分离并筛选内生菌，配置人工菌群，分析富集单菌功能，再到比较基因组揭示菌的T6SS对宿主免疫的功能。全文的思路比较清晰，工作量主要集中于前中期的组学分析和筛选。早先分离的内生菌库是后继实验和生信数据的重要支撑。