组织与胚胎学研究技术方法论文

谈谈《组织学与胚胎学》课程的教学体会

引言：《组织学与胚胎学》内容较多，复杂难懂，学习阅读易产生枯燥乏味之感。我浅谈《组织学与胚胎学》课程的教学体会，欢迎大家阅读!

《组织学与胚胎学》是高等医学院校一门重要的基础医学形态学科，以研究人机体正常微细结构与功能的关系，以及人体胚胎发生发育的基本过程及其变化规律的学科。有人把《解剖学》形容成解剖刀下的风景，而《组织学与胚胎学》也可以说成是显微镜下的风景[1]。这门学科由人的大体结构逐渐深入到人体的正常微细结构，因此对学生的学习能力具有更高的要求，学生必须在理解掌握正常组织学的结构及微细结构与生理功能之间的关系，明确其具体位置及作用等，这门课的研究方法比较多，存在内容较多、复杂枯燥等问题，且每个章节之间的系统性不强，需要记忆和掌握的名词也多，这给学习者带来一定学习难度，也给授课经验尚浅的青年教师的教学带来一些困扰。笔者就如何上好这门课进行了探索和实践，总结以下几个方面。

1.教材选用、课程设计及定位

《组织学与胚胎学》是随着显微镜的出现从宏观向微观发展形成的两门独立的学科，根据研究方法的不同有不同的分类。中医院校兼收文理学生生源，因此学生的生物学基础差别很大，所以在教材选取上要兼顾这个方面，选择适用中医类专业用的教材。

大部分学生是在学习完《解剖学》之后学习《组织学与胚胎学》，学生已经对人体结构有了初步认识，对一些结构的功能有所了解，再学习起来较容易些。但有些专业的学生没有解剖学等相关基础课的学习，这样学习起来难度较大。这对讲课教师要求也较高。《组织学与胚胎学》涉及组织、细胞、亚细胞和分子四个水平，是很多学科的基础学科。因此，在开始上课时就要让学生充分了解《组织学与胚胎学》的学术地位即是学习其他医学基础课和临床医学的基础。形态结构与功能的密切联系是学习《组织学与胚胎学》的重要基本方法。

2.教师准备

教师在上课前应充分准备。可以采用多种教学模式，如PBL教学法、多媒体教学法、案例教学法等[2]。课前做好课件，平时备课时多查阅每个章节相关的临床病例、较前沿的研究动向、相关的先进实验技术及尚未解决的难题，并进行总结归纳，与教科书上的理论知识融会贯通，以便在讲解内容时穿插引用;增加课堂的生动性，丰富教学内容，培养学生兴趣。比如讲述神经组织内容时可以引入神经元完整结构的发现过程：神经组织学家高尔基和卡哈尔发展了硝酸银染色法才使我们见到神经元的庐山真面目，从而揭示出了一个丰富而复杂的神经元世界，为神经科学奠定了基础。教师本身还应具有强烈的责任感和事业心及熟练的实验技能，对学生也可以起着潜移默化的作用，为提高学生的学习兴趣和掌握实验技能打好基础。

3.提高学生的自学能力

由于课时所限，《组织学与胚胎学》有些章节设计成自学内容，这需要加强学生的自学能力和学习兴趣。教师在授课过程中除了串解、阐释、启发、总结外，还要适当地讲专业内容与社会、历史、文艺等有机结合，旨在引起学生的阅读学习兴趣、启发思考、扩展知识范围，使教学孕育人文内涵，增强人文气息。如讲述内分泌系统内容时引入人体因为缺少一种激素会形成侏儒症。在古代宫廷，侏儒症被当作贵族阶级的玩偶。当前最矮的侏儒症尼泊尔人身高仅有米，于2012年2月26日被授予吉尼斯世界认证证书。侏儒症是因为在生长发育时期生长激素分泌过少导致的，从而引导学生去思考体内一些激素分泌过少或过多会引起哪些疾病及分泌过多过少的原因，激发学生学习的兴趣。对于某些不易理解的内容，可以引导学生去查询相关文献及临床资料，加深理解和运用。同时，也可以推荐一些医学科教片让学生课下观看，这样学生在学习中就不会仅局限于所学教材，也可以通过网络、参考书等途径拓宽学习视野。

4.提高学生学习热情

《组织学与胚胎学》内容较多，复杂难懂，学习阅读易产生枯燥乏味之感。有小部分学生只是为了应付考试，使教学效果较差。如何提高学生的学习热情对于教学的效果和学习组织学与胚胎学的知识是至关重要的。学习兴趣是提高教学质量、获得良好教学效果的关键所在。因此，根据不同内容、不同章节，采用灵活多变的教学方法和手段，对培养和提高学生的`学习兴趣有一定帮助。而且，在教学过程中，适当应用多媒体教学等多种教学模式，形成合理的教学结构，避免或减少传统教学方法的枯燥单调的缺点，使得课程内容更为直观，新颖生动，增强学生的学习兴趣[3]。此外，课堂教学中要注意教师和学生的互动。在教师与学生角色互换的教学活动中，营造良好的教学气氛，同时有效的拉近了学生与教师之间的距离，加强了教学互动中的师生互动环节，充分调动学生学习组织学与胚胎学的学习兴趣，最终提高课堂的教学效果[4]。比如男女性生殖系统的观察切片时，引导学生课前查阅一些常见的引起男女性不育不孕的原因，对照实验课堂上所观察到的结构进行讨论，并由教师做出总结并纠正错误理解。

5.开放学生实验室，鼓励学生课余参与实验

在《组织学与胚胎学》实验教学中增设操作实验有其积极的一面，但由于实验教学学时及实验场所和教学师资的限制，无法使所有的学生在实验教学中更多地参与，特别有些周期较长的实验，更是限制了学生在平时课堂中的参与。为提高教学水平，加强素质教育，我们在组织学实验教学中适当增设操作实验的同时，鼓励对科学研究感兴趣的学生在课余时间参加导师的科学实验，对某些特别优秀的学生，导师指导学生整理实验数据并撰写实验论文。总之，在组织学实验教学中，充分调动学生学习积极性，引导学生由苦学变为乐学，由学会变成会学。

综上，从《组织学与胚胎学》教学体会可以得出，这是理论和实验高度结合、老师传授与学生自学相互配合、课程内容严谨与教学形式生动融合的一门必要的基础课。理解这门课程的特点是教好这门课的前提，通过选好教材、做好课程设计及定位，加之各位教师同仁不断创新教学模式和方法，注重课前准备，充分激发学生的学习兴趣和能力，创造更多实验机会等，一定能将这门课讲授地更加生动精彩。

随着社会的发展，行业和行业发展之间实现了更多的交融和渗透，比如一些医疗机构需要一些非医护专业人员，这些人员可能更多地从事管理工作以及一些医院内部事情的细化处理。在此基础上，医药院校为了适应社会的发展需求，陆续开设了一些针对非医学人员的医疗知识学习课程。

1组织学的学习特点

组织原理的掌握是组织学学习的核心

组织学作为一门科学技术，其学习的核心就是对组织原理的掌握，从而指导有关人员具体的操作步骤，帮助有关人员对实验结果进行有根据的验证，并能够及时处理操作时出现的问题，从而减少结果出现意外时候的手足无措现象。

独立操作是组织学技术掌握的途径

实践是医学组织学学习的关键，只有通过实践才能让学生获取组织学知识的精髓，而实践就要求学生进行独立操作。学生在组织学的学习中，往往在老师的带领下能够验证理论结果，但是自己操作就会出现实验结果和理论不符合的情况，这是因为他们不注重实验操作的细节。

2基础医学概论课程开设的意义

基础医学概论是一门帮助医学生和非医学生在完成了计算机、管理、英语等专业学习的基础上了解医学概况，掌握必要的医学基础知识的重要课程。主要包括人体解剖学、生物化学、病理学、组织胚胎学、药理学等有关医学的十几门课程。基础医学概论是对医学基础知识、技术的简要性概括，能够帮助专业和非专业的医学人员对人体的组织结构、生理结构、疾病发生等问题进行基础性的了解，为医学人员开展不同的医学活动打下基础。基础医学概论对于非专业的医学人员培养方面，更加注重对其主体性和创造性的培养，旨在提升学生的综合素质，为其日后的医学相关工作奠定基础。比如日后从事法学专业的医疗有关人员要着重培养其医事法律能力，在其掌握法学知识的基础上向其灌输一定的医学知识；从事信息管理的医疗人员，要加强对其从事医院管理以及医院信息系统开发方面的医学知识。基础医学概论作为研究人体、形态、功能结构以及疾病发展的学科，其内容涵盖了初学医学人员必备的医学知识，能够为其深入的医学学习奠定基础。由此可见，基础医学概论课程的开设对于培养医学方面的复合型人才有着重要的意义。

3基础医学概论教学中存在的问题

各个学科之前缺少交流

基础医学概论教学的模式主要分为两种，第一是按照教材编订的顺序，由不同教师承担不同教学内容进行分学科讲解；另一种是将各个医学系统的内容在衔接后分系统讲解。很多学校采取的是分学科讲解，使得教师的备课内容较多，在繁重的教学任务下不能对学科之间的联系进行分析和关联，从而造成了学科之间缺少交流现象的发生，甚至造成知识脱节的问题。

面对繁多的教学内容课时安排不够

基础医学概论的学习涵盖的知识面很广，但学校由于各种原因对其课时的安排不够，导致学生对基础医学概论学习中的很多知识要点理解不够。比如教师在对组织学绪论进行讲解时，一些学生对细胞的认识没有概念，让他们进一步认识嗜酸性等概念就显得很困难。

学生学习意识不够

基础医学概论的教学内容较为枯燥、冗杂，且具有很强的理论性，需要学生在具备化学、生物知识的基础上进行学习。但是一些文科类的学生基本从未接触过化学和生物，学习基础薄弱；同时，一些学生认为基础医学概论的学习对其日后发展无用，导致对该科目的厌弃。

4将组织学纳入基础医学概论教学研究的意义

非医学专业的组织教学在教学过程中被学生普遍反映为内容较难，主要原因是：①很多学生是非医学专业的文科生，对于从来没有接触过的基础医学理解存在困难。另外，还有一些学生对基础医学概论中组织学的内容重视不足，认为基础医学概论中的组织学内容不重要；②教师在教学中对教学内容的深浅把握不当，给学生的学习带来了负担；③组织学中涉及的一些内容需要学生深入了解显微、超微结构，并进行实验课学习，才能理解组织学，但是学校往往不具备实验的设施。基于以上几点组织学教学中的问题，将其纳入基础医学概论教学研究显得更加必要，通过基础医学概论的学习能够更好地辅助组织学的学习。

5组织学在基础医学概论教学中的整合策略探索

实现对教学方案的重组，对教学内容进行适当的删减

教学大纲对医学专业和非医学专业学生学习内容的层次要求不同，组织学在基础医学概论课程内容的选择应该以培养具有一定医学知识为目标，同时还要利于促进非医学专业学生所学专业发展。教师在教学中还要注意学生的接受能力，实现重点突出、由浅入深的讲解。另外，组织学在基础医学概论教学中的课时安排较少，因此就需要教师在丰富教学经验的基础上总体把握教学内容，要对和教学重点关联不大的课程进行适当的删减。要在课前实现组织学和其他学科的交流，实现对教学内容的合理、统一规划，在课时和课时安排的衔接上恰当准确，从而保证教学内容的系统性和完整性。基础医学概论教学中，组织学的四大基本组织内容是教学的重点，因为课时安排得较少，教师不用再对器官进行统一讲解，而是适当地对内容进行删减，从中选择具有代表性的器官进行授课，引导学生在明确组织和器官关系的基础上，加强对人体结构的整体性认识。

实现多种教学手段的教学，提升学生的学习兴趣

首先，应用多媒体电子投影教学能够简化观察的对象，根据教学需求，对图片进行具有代表性的科学选取，能够实现从不同角度、不同层次对人体各个器官部位组织结构的展示。通过图文并茂、声音和动画具备的多媒体信息的集成，制作成具有动态效果的多媒体课件，实现声、光、电等技术在教学中的应用，充分调动学生的各种感官，加强学生对组织结构的认识。其次，在组织教学中要从功能入手，逐渐引入结构，改变传统的结构为先的讲授顺序。比如在空腔器官的教学，教师可以先以大家熟知的人体消化和吸收器官的常识入手，引导学生从功能继而联系到结构，逐渐实现对小肠消化以及小肠吸收面积等方面知识的分析，像绒毛、微绒毛等，再通过多媒体课件展示镜下小肠管壁的组织结构，加强学生对组织学的感性认识；并通过板书设计将管壁的四层分解结构进行展示，加深学生对知识的认识；最后以小肠吸收消化制作的动画效果收尾。通过由静态到动态的教学展示，将枯燥无味的课堂变得生动形象，不断激发学生的学习积极性。

及时调整教学方式，向学生明确教学的重点、难点

为了让学生更好地吸收组织学知识，教师要在课前让学生进行有针对性的预习，在课程进行时要及时归纳教学内容的重点和难点，加强学生对所学知识的前后联系能力，在课程讲解之后要利用表格、大括号、图片等形式对内容进行总结，加强学生对知识点的梳理。比如在神经元结构特点教学时，教师要及时用简短的字数总结出神经元结构特点；在讲解肺导气部时，教师要将肺导气部里涉及的名词进行简化处理，并用简练的语言总结出肺导气部结构变化的特点，比如“三减二增”即指环状细胞、腺体和软骨块的减少以及平滑肌和粘膜皱壁的增多。通过简化口诀的提出，能够帮助学生更好地记忆组织学知识，加强学生的学习兴趣。

选取灵活的考核方式，培养学生的分析能力

基础医学概论是针对非医学专业学生开设的一门帮助其了解基础医学的课程，课程开设的目标是让他们了解医学，而不是让他们都从事医疗工作。因此，基础医学中的组织学考核形式要尽可能实现多样化，也可适当地选择开卷的考核形式，并在考核中以综合体可应用题的考核为主，减少一些生硬理论的考核。可以让学生通过查阅有关资料解答问题，从而逐渐培养学生的综合分析能力，而不是将学生变成缺乏理论实践，只会死记硬背书本的书呆子。比如可以让学生根据基础医学概论，并结合组织学和胚胎学的知识来分析尿液的形成和排出；结合组织学和生理学知识分析神经冲动在神经肌接头上的传递等。

通过形象的举例，培养学生的动态空间思维能力

组织学是形态学科的一种，其中，对机体微细结构的灵活运用是组织学教学的最终目标。而现阶段的组织学教学无论是在图片选择还是观察实验，都是采用平面的二维图像，没有实现对组织结构的真实再现，无法培养和提升学生的动态空间思维能力。这就要求在组织学教学中要通过形象的举例，实现其从二维图形向三维图形构像的发展，从而在真正意义上帮助学生掌握机体的微细结构。

与时俱进，不断丰富组织学教学内容

组织学作为一门动态学科，其发展和研究处于不断变化之中，因此，组织学的教学要实现与时俱进，在不断丰富组织学的教学内容。教师要在查阅大量组织学教学资料的基础上，通过网络获取最新的和组织学有关的临床应用知识，并采取适合的方式将获取的信息传送给学生，实现对原本枯燥教学的灵活化处理，不断激发学生的学习兴趣。比如在对胰腺组织结构和功能结构进行教学时，教师要对最新的I型糖尿病根治办法向学生讲授，从而激发学生对胰腺组织结构的好奇，鼓励其对组织学的学习。

6总结

组织学作为基础医学概论教学中的一门基础性课程，其教学成果的优劣对学生日后医学的其他方面学习具有重要的意义。因此，有关人员要积极改进组织学教学方法，仔细研读组织学教材，把握好组织学和其他医学学科的联系，形成自我的组织学知识体系，不断激发学生的学习兴趣，提高学生的学习效果。另外，在教学中，要实现对知识的讲解和学生的思考的有效结合，关注学生的课堂表现，采用启发式的多样教学方法，引导学生解决问题。基于基础医学概论的发展，教师也要在有限的学时内将组织学的知识简化，有效将组织学内容整合到基础医学概论课程中，实现非医学专业学生对组织学知识的真正理解。

绪论一、组织学与胚胎学的研究内容及其意义二、组织学与胚胎学研究技术（一）光学显微镜技术（二）电子显微镜技术（三）组织化学技术（四）组织培养技术（五）细胞融合技术三、组织学与胚胎学学习方法（一）注意理论与实际的关系（二）注意平面与立体的关系（三）注意结构与功能的关系第一章组织的基本构成一、细胞（一）细胞的概况（二）细胞的结构（三）细胞增殖与细胞凋亡二、细胞连接与细胞粘连三、细胞外基质（一）糖胺多糖和蛋白聚糖（二）胶原与弹性蛋白（三）粘着糖蛋白第二章上皮组织一、被覆上皮（一）被覆上皮的类型和结构（二）上皮细胞的特殊结构二、腺上皮与腺（一）外分泌腺的分类（二）外分泌腺的结构第三章结缔组织一、固有结缔组织（一）疏松结缔组织（二）致密结缔组织（三）脂肪组织（四）网状组织二、软骨（一）透明软骨（二）弹性软骨（三）纤维软骨三、骨（一）骨组织的结构（二）长骨的结构（三）骨的发生、血液（一）红细胞（二）白细胞（三）血小板（四）骨髓的结构和血细胞发生第四章肌组织一、骨骼肌（一）骨骼肌纤维的光镜结构（二）骨骼肌纤维的超微结构二、心肌（一）心肌纤维的光镜结构（二）心肌纤维的超微结构三、平滑肌（一）平滑肌纤维的光镜结构（二）平滑肌纤维的超微结构第五章神经组织第六章循环系统第七章免疫系统第八章内分泌系统第九章消化系统第十章呼吸系统第十一章泌尿系统第十二章感觉器官第十三章男性生殖系统第十四章女性生殖系统第十五章人体早期发育第十六章先天性畸形参考文献中英索引

植物组织培养及其应用研究概况在世界各国科学家的不断努力下，近几十年来，植物组织培养技术迅速发展。利用组织培养，不仅可以大量生产优良无性系，获得人类需要的多种代谢物质，还可获得单倍体、三倍体、多倍体及非整倍体。通过细胞融合可以打破种属间的界限，克服远缘杂交不亲合性，在植物新品种的培育和种性的改良中发挥了巨大作用。组织培养的植物细胞是在细胞水平上分析研究的理想材料，从植物快繁、花药培养发展到细胞器培养、原生质融合以及DNA重组技术等，植物组织培养技术广泛应用于植物科学的各个领域及农业、林业、工业、医药等多种行业，已经成为当代生物科学中最有生命力的一门学科。1 植物组织培养的基本概念、原理和试验步骤1．1概念植物组织培养是在无菌条件下，将离体的植物器官(根尖、茎尖等)、组织(形成层、花药组织等)、细胞(体细胞、生殖细胞等)、胚胎(成熟或未成熟的胚)、原生质体等在人工配制的培养基上培养，给予适宜的培养条件，诱发其产生愈伤组织或潜伏芽或长成完整的植株的技术。1．2原理 植物组织培养的依据是植物细胞的“全能性”及植物的“再生作用”。1902年，德国著名植物学家 G．Haberlandt根据细胞学理论提出了一个观点，“高等植物的器官和组织可以不断分割，直至单个细胞，即植物体细胞，体细胞在适当的条件下具有不断分裂、繁殖并发育成完整植株的潜力”。1943年，美国人White在烟草愈伤组织中偶然发现形成一个芽，证实了G．Haberlandt的论点。 不同植物所需要的生长条件不同，所用的培养基也有所不同。较常用的基础培养基有MT、MS、 SH、N6、White等。在组织培养中，愈伤组织和胚状体能否形成是培育出新植株的关键。通过在基础培养基里添加一定浓度的外源激素，可以诱导出愈伤组织、胚状体、不定芽、根等器官，最终获得再生植株或次生物质。 用于植物组织培养的材料称为外植体，其主要形式有器官、胚胎、单细胞、原生质体等。根据外植体的不同，所需要的培养基种类、培养条件、外源激素的种类及比例等均不同。植物组织培养中，影响培养力的因素是多方面的，诱导愈伤组织成败的关键在于培养条件，植物激素是诱导愈伤组织和绿苗分化的关键因素。最常用的诱导愈伤组织的生长素是IAA、NAA和2，4一D，所需浓度为O．01～10 mg／L。最常用的细胞分裂素是KT和ABA，使用浓度为O．1～10 mg／L。KT的主要作用是促进细胞分裂和愈伤组织分化。ABA对植物体细胞胚的发生与发育具有重要作用。各类植物激素的生理作用虽有相对专一性，但是植物的各种生理效应是不同种类激素之间相互作用的综合表现。1．3试验步骤1．3．1选择和配制培养基 培养基是植物组织培养中的“血液”，血液的成分及其供应状况直接关系到培养物的生长与分化，因此了解培养基的成分、特点及其配制至关重要。1．3．2灭茵灭菌是组织培养中的重要工作之一，通常采用物理的或化学的灭菌方法。培养基用常压或高压蒸煮等湿热灭菌、器械采用灼烧灭菌、玻璃器皿及耐热用具采用干热灭菌、不耐热的物质采用过滤灭菌、植物材料表面用消毒剂灭菌、物体表面用药剂喷雾灭菌、接种室等空间采用紫外线或熏蒸灭菌。1．3．3接种将已消毒好的根、茎、叶等离体器官，经切割或剪裁成小段或小块放入培养基，整个接种过程要在无菌条件下进行。 ．4培养把培养材料放在有一定光照和温度等条件的培养室里，使之生长、分裂和分化，形成愈伤组织或进一步分化成再生植株。1．3．5试管苗驯化移栽 试管苗是在特殊环境条件下生长的幼苗，与自然生长的幼苗有很大差异，只有通过驯化，使之适应自然环境后才能移栽。2 植物组织培养的应用2．1植物快速繁殖和无病毒种苗生产植物快速繁殖技术始于20世纪60年代，法国的Morel用茎尖培养的方法大量繁殖兰花获得成功，从此揭开了植物快速繁殖技术研究和应用的序幕。目前，通过离体培养获得小植株并且具有快速繁殖潜力的植物已有100多科1 000种以上，有的已经发展成为工业化生产的商品。世界上80％～85％的兰花是通过组织培养进行脱毒和快速繁殖的。培养的植物种类也由观赏植物逐渐发展到园艺植物、大田作物、经济植物和药用植物等。在我国，同类的研究始于20世纪70年代。马铃薯无毒种薯和甘蔗种苗已在生产上大面积种植，30余种植物已进行规模化生产或中间试验。利用组织培养进行植物快速繁殖及无病毒种苗生产，不仅能够挽救珍惜濒危物种，而且能够解决植物野生资源缺乏的问题。2．2植物花药培养和单倍体育种 将植物花药培养成单倍体植株，再经过染色体加倍，能很快得到纯合的二倍体，这样将大大缩短育种年限。到目前为止，世界上通过花粉和花药培养已获得了几百种植物的单倍体植株。印度科学家应用这种方法培育的水稻品系，比对照产量提高15％～49％。韩国先后育成了5个优质、抗病、抗倒伏的水稻品种。我国自20世纪70年代开始该领域的研究，已经培育了40余种由花粉或花药发育成的单倍体植株，其中有10余种为我国首创。玉米获得了100多个纯合的自交系；橡胶获得了二倍体和三倍体植株。仅“九五”期间就育成高产、优质、抗逆、抗病的农作物新品种44个，种植面积超过660万 hm2。2．3植物胚胎培养杂交育种中，杂种胚常常败育，因此将早期生长的胚取出，应用组织培养方法，就有可能培育出杂交植物。已经有100篇以上幼胚培养成为植株的报道。国内外科学家应用植物胚胎培养技术获得了多种远缘杂交的重组体、栽培种和杂交品种。2．4植物愈伤组织或细胞悬浮培养利用植物愈伤组织或细胞悬浮培养可以生产用于预防和治疗疾病的植物次生代谢产物。近年来，这一领域的发展极为迅速，已经研究了400多种植物，从培养细胞中分离到600多种次级代谢产物，其中60多种在含量上超过或等于原植物，20种以上干重超过原植物的1 9，6。例如，从薯芋愈伤组织和悬浮细胞生产的diosgenin用于合成甾体药物。最近抗癌药物紫杉醇一红豆杉细胞培养物，可用75t发酵罐培养，已达到商业化生产水平。另外，达到商品化水平的还有紫草、人参、黄连、老鹳草等；长春花、毛地黄、烟草等已实现工业化生产；牙签草、红花等20多种植物正在向商品化过渡。2．5细胞融合与原生质体培养自1960年英国学者Cocking首次利用纤维素酶从番茄幼苗的根分离原生质体获得成功以来，到1990年已有100种以上植物的原生质体能再生植株。我国获得了30余个品种的原生质体再生植株，其中包括难度较大的重要粮食作物和经济作物，如大豆、水稻、玉米、小麦、谷子、高梁、棉花等。在木本植物、药用植物、蔬菜和真菌原生质体培养方面的进展也十分迅速。国外已先后获得了种内及种间的体细胞杂种植株。植物原生质体培养还可应用于外源基因转移、无性系变异及突变体筛选等研究，因而越来越受到人们的重视。2．6植物细胞突变体筛选植物细胞突变体的筛选最早始于1959年，G． Melchers在金鱼草悬浮细胞培养中获得了温度突变体。1970年，P．S．Carlson，H．Binding和Y．M． Heimer等分别分离出烟草营养缺陷型细胞、矮牵牛抗链霉素细胞系及烟草抗苏氨酸细胞系。迄今为止，已经在不少于15个科45个种的植物细胞培养中筛选出100个以上的植物细胞突变体或变异体。其中包括抗病细胞突变体，如玉米抗小斑病突变体和小麦抗赤霉病、根腐病突变体；抗氨基酸及其类似物细胞突变体，如甘蓝型油菜抗HYP突变体[263；抗逆境胁迫细胞突变体，如水稻耐盐突变体和小麦抗盐突变体；抗除草剂细胞突变体及营养缺陷型细胞突变体，如玉米抗除草剂变异体；株高突变体的筛选，如水稻矮秆变异体。2．7植物体细胞胚胎和人工种子1958年，Reinert在胡萝卜的组织培养中最先发现了体细胞胚胎(胚状体)。据不完全统计，能大量产生胚状体的植物有43科92属100多种。一些重要作物如水稻、小麦、玉米、珍珠谷等，也能通过离体培养产生胚状体。这些胚状体用褐藻酸钠等包埋，再加上人工种皮，就形成了人工种子。人工种子的优点是：繁殖快速，成苗率极高；不受气候影响，四季皆可工厂化生产。上世纪80年代初，美、日、法等国家相继开展了人工种子的研究，我国也于“七五”期间开展了此项研究，并于1987年列入了国家“863”高技术研究发展计划。2．8 植物组织细胞培养物的超低温保存与种质库建立植物细胞全能性的发现和证实，为植物种质资源的长期保存开辟了一条新途径。采用液氮超低温保存技术，能保持很高的存活率，并且能再生出新植株和保持原来的遗传特性。如建立茎尖分生组织培养物的超低温保存种质库，不仅可以防止种质的遗传变异和退化，而且可以长期保存无病毒的原种。2．9 植物组织培养与转基因技术的应用 我国第一个T—DNA插入突变体库的构建和研究为我国水稻功能基因组学研究奠定了良好的技术和材料基础，为确保我国拥有一批有自主知识产权的基因资源做出了积极贡献。由中国水稻研究所农业部水稻生物学重点开放实验室和中科院上海植物生理研究所合作，通过建立大规模、高效的农杆菌介导的转基因技术体系，将玉米转座子Ac—Ds等外源基因导入水稻未成熟胚和种子诱导的愈伤组织，获得了1．2万个独立的T—DNA插入株系，并构建了水稻突变体的数据库。 3 展望植物组织培养研究与应用是20世纪科技进步的重大成果之一，为研究植物生长发育、抗性生理、激素及器官发生与胚胎发生等提供了许多良好的实验材料和有效途径。植物组织培养方法不断提高的同时，也相应拓宽了其应用范围。由于组织培养在人工控制的条件下进行，容易掌握花芽分化和开花成因；通过胚胎培养，能够得到杂种或自交种；通过分离单倍体细胞，能培育纯合的二倍体优良品系；提高育种多样性的同时缩短了育种时间；通过突变体筛选，提高植物的品质，增强抗逆境胁迫能力，扩大植物的生长范围；将体细胞冷藏在低温下，建立基因库，达到保存物种的目的；获得药用价值高和工业生产所需要的次生产物，加快药物生产的时间并且减少了单纯依靠天然植物的被动性。植物组织培养技术已经渗透到科研、生产和生活各个领域，必将日臻完善。黑龙江农业科学2006，(3)