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干货分享：WesternBlot结果条带全面分析.原因：比较多，如果单纯一张没有任何显色的X光片，最可能是一抗加成其他抗体，或者二抗种属加错了，比如兔的加成鼠的。.解决办法：仔细检查抗体是否加错，确认转膜没有问题。.经验：上面的图片展示的是一点信号...
当把所有需要的WB条带都用PS调整并保存为PSD格式之后，下面开始用AI来排版。.1.打开AI，文件→新建，名称可以命名为Fig＊，宽高可以设置为170nm「无限制，因为之后可以改变宽高数值」，点击确定会出现一张画布。.2.在画布上先把必要的说明性文字...
westernblot条带分析.近几天回答了蛋白版几个有关压片和显影的帖子，发现在这一块还没有比较系统的论述。.特贡献了western显影常见问题及解决方案，是我的经验总结，以供大家参考。.其中绝大部分问题是我所遇到过的，其他个别我没遇到过的是参照pierce...
将条带加入1:1ECLAB液，孵育3min，然后到暗室压片显影，放到显影液中2min才能出现条带，但是这儿时候片子已经全黑了。膜也没有明显的目的条带的荧光，但类似是全部膜条带上都有荧光。二抗是1:5000.菜鸟新手，求助
如果免疫反应好，加荧光剂后在暗室里，可以看到很亮的条带。有时候，条带发光可以有半个小时之久。所以在加荧光剂后，反应大概一到四分钟。小心把膜放到暗盒里，放好后再也不要移动膜，否则荧光会消失。膜上覆盖一张保鲜膜，小心，铺展。
小弟显影也遇到一个问题，β-actin单抗，1：1000，二抗平时用1：1000，加400ul混合发光剂才显出很浓的条带。于是改进，一抗还是1：1000，二抗用1：4000，结果发现加400ul发光剂后，淬灭的更快，有的还显不完全，不知道怎么回事？请高手执教
westernblot显影是多条带,什么原因,怎么处理-——可能有多种原因:1.抗体浓度过高,建议降低抗体浓度;2.sds造成非特异性结合,建议转膜结束后清洗膜,免疫反应过程中避免使用sds;3.二抗试剂的非特异结合,建议更换二抗;4.一抗特异性差,采用单抗或亲和纯化的抗体...
wb实验中显影时膜上有黑黑的是什么原因-——楼主所说的我能想到两个可能的情况:1.楼主使用的胶片有发黑的背景,这同胶片过期或保管不当有关,即是说胶片本身有轻微曝光.这个过程不可逆,解决办法只有换胶片.2.楼主的膜在胶片上形成了与膜的形状相对应的
图解.实验方法原理.Western免疫印迹，是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。.对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。.与Southern或Northern杂交方法类似，但WesternBlot采用的是聚丙烯...
显是用ECL试剂，曝光1min，显影4-5min，定影8min，结果在暗室里就能看到整张膜发亮，定影后膜的位置一片黑色，都不知道有没有条带，这是为什么呢？怎么办？Western荧光检测取决于抗原含量—一抗敏感度—二抗敏感度—底物敏感度—显影和定影
干货分享：WesternBlot结果条带全面分析.原因：比较多，如果单纯一张没有任何显色的X光片，最可能是一抗加成其他抗体，或者二抗种属加错了，比如兔的加成鼠的。.解决办法：仔细检查抗体是否加错，确认转膜没有问题。.经验：上面的图片展示的是一点信号...
当把所有需要的WB条带都用PS调整并保存为PSD格式之后，下面开始用AI来排版。.1.打开AI，文件→新建，名称可以命名为Fig＊，宽高可以设置为170nm「无限制，因为之后可以改变宽高数值」，点击确定会出现一张画布。.2.在画布上先把必要的说明性文字...
westernblot条带分析.近几天回答了蛋白版几个有关压片和显影的帖子，发现在这一块还没有比较系统的论述。.特贡献了western显影常见问题及解决方案，是我的经验总结，以供大家参考。.其中绝大部分问题是我所遇到过的，其他个别我没遇到过的是参照pierce...
将条带加入1:1ECLAB液，孵育3min，然后到暗室压片显影，放到显影液中2min才能出现条带，但是这儿时候片子已经全黑了。膜也没有明显的目的条带的荧光，但类似是全部膜条带上都有荧光。二抗是1:5000.菜鸟新手，求助
如果免疫反应好，加荧光剂后在暗室里，可以看到很亮的条带。有时候，条带发光可以有半个小时之久。所以在加荧光剂后，反应大概一到四分钟。小心把膜放到暗盒里，放好后再也不要移动膜，否则荧光会消失。膜上覆盖一张保鲜膜，小心，铺展。
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wb实验中显影时膜上有黑黑的是什么原因-——楼主所说的我能想到两个可能的情况:1.楼主使用的胶片有发黑的背景,这同胶片过期或保管不当有关,即是说胶片本身有轻微曝光.这个过程不可逆,解决办法只有换胶片.2.楼主的膜在胶片上形成了与膜的形状相对应的
图解.实验方法原理.Western免疫印迹，是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。.对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。.与Southern或Northern杂交方法类似，但WesternBlot采用的是聚丙烯...
显是用ECL试剂，曝光1min，显影4-5min，定影8min，结果在暗室里就能看到整张膜发亮，定影后膜的位置一片黑色，都不知道有没有条带，这是为什么呢？怎么办？Western荧光检测取决于抗原含量—一抗敏感度—二抗敏感度—底物敏感度—显影和定影
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