计算P1噬菌体的效价,即每毫升噬菌体原液中P1噬菌体的数目(表3-1)。(三)转导1、第三天傍晚,接种受体菌株(CSH1)于5mlLB液体培养基中,30℃培养过夜。2、第四天,将过夜培养的受体菌用LB培养液按1:5稀释,37℃培养2-3小时...
P1噬菌体转导基因敲除操作步骤实验室常用大肠杆菌基因敲除方法为P1噬菌体转导敲除。大肠杆菌利用噬菌体为媒介,将供体细胞DNA转移给受体细胞,从而使受体细胞的基因型和表现型发生改变,这一过程称为转导。P1噬菌体的DNA分子量为5...
此外,噬菌体通过基因转导衍生大量HGT,在这种情况下,细菌DNA在噬菌体复制过程中被意外获取,然后传递到邻近细胞中(图2)。这一现象在1952年由NortonZinder和JoshuaLederberg发现,JoshuaLederberg因“发现关于遗传重组和细菌遗传物质组织”而获得1958年诺贝尔生理学或医学奖。
原P1的滴度是3.6*10e10,裂解液的滴度是6.3*10e9。我做的转导成功的话应该是在Cm抗性板上有菌落出现,但是做了几次一直没出现抗性转导子。后来考虑转导时的菌量不够,就扩大了10倍菌,P1量不变,也没有结果。请各位前辈,做过P1转导的同学帮帮
Cre-loxp系统由源自P1噬菌体的两个成分组成:Cre重组酶和loxP识别位点。Cre重组酶最初命名是因为它“引起重组(causesrecombination)”,后来也称之为“环化重组酶(cyclizationrecombinase)”),它是一个38kDa的蛋白质,在loxP识别位点负责分子内和分子间的重组。
为进一步研究噬菌体重组酶同源重组系统的有效性,本论文设计两端具有20-30bp同源序列且引入无义突变的核苷酸片段,通过多轮转化定向改造底盘菌尿嘧啶磷酸核糖基转移酶upp基因,经抗性筛选和基因测序验证,成功获得upp基因定向改造工程菌。
链霉菌噬菌体φBT1整合酶介导位点特异性重组系统的催化机理及其在生物学中的应用.张霖.【摘要】:噬菌体通过其编码的整合酶识别宿主基因组中的attB(attachmentsiteofbacterial)位点,与自身的attP(attachmentsiteofphage)位点形成联会复合体从而发生链交换,将噬...
转导子数.×100%=.转导子数.×100%.侵染受体的P1颗粒数.噬菌斑数+转导子数.(2)特异性转导又称局限性转导(restrictedtransduction),是由J.Lederberg和他的学生所开拓的。.他们设计了一个实验,目的是想了解λ噬菌体是否像P22那样将供体的基因传递给...
遗传学作业。.关于噬菌体转导.用P1进行普遍性转导,供体菌是pur+nad-pdx+,受体菌是pur-nad+pdx-。.转导后选择具有pur+的转导子,然后在1000个pur+转导子中检定其它供体菌基因是否也转导过来。.所得结果如下表:基因...用P1进行普遍性转导,供体菌是pur+nad-pdx+...
第三个模块包括两个实验内容,8个学时:P1噬菌体以及噬菌体效价测定;P1噬菌体的普遍性转导。学生通过携带有抗性基因的P1噬菌体,然后利用其进行抗性基因转导实验,最终获得具有抗性的大肠杆菌。这个模块属于新加的实验内容,弥补
计算P1噬菌体的效价,即每毫升噬菌体原液中P1噬菌体的数目(表3-1)。(三)转导1、第三天傍晚,接种受体菌株(CSH1)于5mlLB液体培养基中,30℃培养过夜。2、第四天,将过夜培养的受体菌用LB培养液按1:5稀释,37℃培养2-3小时...
P1噬菌体转导基因敲除操作步骤实验室常用大肠杆菌基因敲除方法为P1噬菌体转导敲除。大肠杆菌利用噬菌体为媒介,将供体细胞DNA转移给受体细胞,从而使受体细胞的基因型和表现型发生改变,这一过程称为转导。P1噬菌体的DNA分子量为5...
此外,噬菌体通过基因转导衍生大量HGT,在这种情况下,细菌DNA在噬菌体复制过程中被意外获取,然后传递到邻近细胞中(图2)。这一现象在1952年由NortonZinder和JoshuaLederberg发现,JoshuaLederberg因“发现关于遗传重组和细菌遗传物质组织”而获得1958年诺贝尔生理学或医学奖。
原P1的滴度是3.6*10e10,裂解液的滴度是6.3*10e9。我做的转导成功的话应该是在Cm抗性板上有菌落出现,但是做了几次一直没出现抗性转导子。后来考虑转导时的菌量不够,就扩大了10倍菌,P1量不变,也没有结果。请各位前辈,做过P1转导的同学帮帮
Cre-loxp系统由源自P1噬菌体的两个成分组成:Cre重组酶和loxP识别位点。Cre重组酶最初命名是因为它“引起重组(causesrecombination)”,后来也称之为“环化重组酶(cyclizationrecombinase)”),它是一个38kDa的蛋白质,在loxP识别位点负责分子内和分子间的重组。
为进一步研究噬菌体重组酶同源重组系统的有效性,本论文设计两端具有20-30bp同源序列且引入无义突变的核苷酸片段,通过多轮转化定向改造底盘菌尿嘧啶磷酸核糖基转移酶upp基因,经抗性筛选和基因测序验证,成功获得upp基因定向改造工程菌。
链霉菌噬菌体φBT1整合酶介导位点特异性重组系统的催化机理及其在生物学中的应用.张霖.【摘要】:噬菌体通过其编码的整合酶识别宿主基因组中的attB(attachmentsiteofbacterial)位点,与自身的attP(attachmentsiteofphage)位点形成联会复合体从而发生链交换,将噬...
转导子数.×100%=.转导子数.×100%.侵染受体的P1颗粒数.噬菌斑数+转导子数.(2)特异性转导又称局限性转导(restrictedtransduction),是由J.Lederberg和他的学生所开拓的。.他们设计了一个实验,目的是想了解λ噬菌体是否像P22那样将供体的基因传递给...
遗传学作业。.关于噬菌体转导.用P1进行普遍性转导,供体菌是pur+nad-pdx+,受体菌是pur-nad+pdx-。.转导后选择具有pur+的转导子,然后在1000个pur+转导子中检定其它供体菌基因是否也转导过来。.所得结果如下表:基因...用P1进行普遍性转导,供体菌是pur+nad-pdx+...
第三个模块包括两个实验内容,8个学时:P1噬菌体以及噬菌体效价测定;P1噬菌体的普遍性转导。学生通过携带有抗性基因的P1噬菌体,然后利用其进行抗性基因转导实验,最终获得具有抗性的大肠杆菌。这个模块属于新加的实验内容,弥补