发布时间：
PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。下面是我整理的关于pcr技术论文，希望你能从中得到感悟!
技术的研究进展
摘要 PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。因其高强的特异性和灵敏度以及检测速度快、准确性好等优点，已被广泛地应用于水产、微生物检测等许多领域。该文从PCR技术的原理及应用方面进行了综述，并对其发展做出了展望。
关键词 PCR技术;研究进展;应用
中图分类号 Q819 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2012)10-0047-02
PCR(polymerase chain reaction，PCR)即聚合酶链式反应，它是一种体外酶促合成，扩增特定DNA片段的方法。1985年，美国Karray等学者首创了PCR技术，并由美国Cetus公司开发研制[1]。随着科学技术的发展和突破，PCR技术已在多个领域得到广泛地应用，如微生物检测、兽医学、水产养殖等方面。由于该技术具有较强的灵敏度、准确度和特异性，又能快速进行检测，因而其应用领域也在不断延伸[2-3]。随着PCR技术的不断发展，在常规PCR技术的基础上又衍生出了许多技术，如多重PCR(mutiplex PCR)技术[4]、实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR，FQ-PCR)技术[5]、单分子PCR技术[6]。
1 PCR技术原理
PCR技术是根据待扩增的已知DNA片段序列、人工合成与该DNA 2条链末端互补的2段寡核苷酸引物，在体外将待检DNA序列(模板)在酶促作用下进行扩增。PCR的整个技术过程经若干个循环组成，一个循环包括连续的3个步骤：第1步是高温条件下的DNA模板变性，即模板DNA在93~94 ℃的条件下变性解链;第2步是退火，即人工合成的2个寡核苷酸引物与模板DNA链3’端经降温至55 ℃退火;第3步是延伸，即在4种dNTP底物同时存在的情况下，借助TaqDNA聚合酶的作用，引物链将沿着5’-3’方向延伸与模板互补的新链[7]。经过这个循环后，合成了新链，可将其作为DNA模板继续反应，由此循环进行。循环进程中，扩增产物的量以指数级方式增加，一般单一拷贝的基因循环25~30次，DNA可扩增l00万~200万倍[1]。PCR反应的步骤很简单，但是具体的操作是复杂的，如退火温度的确定、延伸时间的长短以及循环数等。因此，不同的反应体系应该确定适当的反应条件，以避免假阴性或假阳性等情况的产生。
2 PCR技术的分类
在传统PCR技术的基础上，根据人们的需要以及各个领域的应用要求，又衍生出很多种类的PCR技术。新技术在各领域广泛应用并逐渐改进，为进一步的研究提供了基础。
实时荧光定量PCR技术
1996年，学者经过研究，在传统PCR技术的基础上，首创了实时荧光定量PCR技术，新技术已经应用至医学领域、分子生物学和其他基础研究领域。实时荧光定量PCR技术基于传统技术的优势，还具有实时性、准确性、无污染，实现了自动化操作和多重反应，是PCR技术研究史上从定性到定量的飞跃[8]。
荧光定量PCR技术最大的特点是能将荧光基团加入到PCR反应体系中，借助于荧光信号，累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析[9]。实时监测这一特点是常规PCR技术所不具有的，因为其对扩增反应不能进行随时的检测。常规PCR技术的扩增终产物需要在凝胶电泳等条件下才能进行，无法对起始模板进行准确的定量，而荧光定量PCR技术的反应进程可以根据荧光信号的变化做出准确的判断[10-11]。一个PCR循环反应结束之后，定量PCR仪可以收集1个荧光强度信号，荧光信号强度的变化可以反映产物量的变化情况，这样就可以得到1条荧光扩增曲线[12]。荧光信号在指数扩增阶段，PCR产物荧光信号的对数值与起始模板量之间存在线性对应关系，然后进行定量分析[13]。
多重PCR技术
多重PCR(mutiplex PCR)技术是PCR技术的一种，为同一管中加入多对特异性引物，与PCR管内的多个模板反应，在一个PCR管中同时检测多个目标DNA分子。多重PCR技术可以扩增一个物种的一个片段，也可以同时扩增多个物种的不同片段[14]。
在同一反应体系中，多重PCR技术进行多个位点的特异性扩增时，引物间的配对、引物间的竞争性扩增等会对扩增效果产生重要影响。一方面，如果能选择适宜的反应体系和反应条件，可极大地提高多重PCR的扩增效果[15]。主要包括退火温度、退火及延伸时间、PCR缓冲液成分、dNTP的用量、引物及模板的量等。另一方面，DNA的抽提质量也影响多重PCR扩增效率，如DNA抽提不干净或降解都将影响PCR扩增效果[16]。
单分子PCR技术(SM-PCR)
单分子PCR技术是在传统PCR技术的基础上发展的，基本循环过程相同，但在反应条件、模板数量、DNA 聚合酶选择、引物设计方面具有不同点。该技术是以少量或单个DNA分子为模板进行的PCR[17]。
单分子PCR技术反应中，DNA 模板浓度极低，这就要求模板有较高的质量。因为这是试验成败的决定性因素。在设计引物时，应该严格控制GC的含量和Tm值，同时尽量避免引物间存在可配对序列。在反应混合物模板数极低的情况下，若引物之间存在少量配对序列，扩增时极易形成二聚体，使反应无法进行，得不到所需要的产物[18]。由于单分子PCR技术反应的变性温度(96~98 ℃)大多比常规PCR技术(94 ℃)略高，因而对DNA 聚合酶热稳定性的要求也更加严格，需要有较好的热稳定性，以防止温度过高而使其失活。其变性时间(5~15 s)、退火时间及延伸时间也短于常规PCR技术[17]。
3 PCR技术的应用
PCR技术在水产上的应用
基因表达是检测某个基因在不同发育期或不同组织中的表达量变化，或受到某种试验处理过程中的影响而出现表达量变化的情况。有学者应用real-time PCR技术研究碳水化合物含量对翘嘴红鲴糖代谢酶G6Pase、GK以及PEPCK表达量的影响[19-21]，研究结果可为翘嘴红鲴饲料配方中的最合适糖含量提供理论依据。孙淑娜等[22]研究叶酸拮抗剂对斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2表达的影响，表明叶酸拮抗剂对早期胚胎的心脏发育影响较大，可导致斑马鱼心脏发育延迟及心脏形态异常，并下调斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2的表达，这可能是叶酸生物学活性受抑后导致心脏发育异常的机制之一。Sawyer et al[23]以斑马鱼的未受精卵、胚胎、仔鱼和成鱼为研究材料，采用实时荧光定量PCR技术，检测了P450aromA和P450aromB在不同组织的表达量，表明在各组织中均有2种基因的表达，但表达量显著不同，呈现组织特异性。
PCR技术在微生物检测上的应用
1990年，Bej et al[24]在利用多重PCR的方法检测了Leg-ionella类菌种和大肠类细菌，其结果是通过点对点方法固定的多聚dT尾捕捉探针和生物素标记的扩增DNA进行杂交来检测的。张志东等检测口蹄疫病毒(FMDV)持续性感染的带毒动物，表明实时荧光定量PCR技术具有快速检测、准确、客观等优势，较优于传统的检测方法[25-26]。Metzger-Boddien et al[27]对PCR-ELISA的方法进行了评价，结果显示，样品中沙门氏菌的检出率可以达到98%。
4 展望
传统PCR技术以及衍生出来的新型PCR技术自面世以来，已被广泛应用到生命科学的各个领域。随着技术方法的不断改进与完善，荧光定量PCR技术将会逐渐完善并广泛应用。多重PCR技术在食品病原微生物、非致病微生物及环境微生物检测中具有重要作用;未来的研究主要集中在去除食品抑制因子干扰、改进样品前处理技术等方面，其次是整合应用多重PCR与其他技术，必将在未来食品微生物检测中有非常好的应用前景。
5 参考文献
[1] 常世敏.PCR在食品微生物检测中的应用[J].邯郸农业高等专科学校学报，2004，21(4)：23-25.
[2] 唐永凯，俞菊华，徐跑，等.实时荧光定量PCR技术及其在水产上的应用[J].中国农学通报，2010(21)：422-426.
[3] 吴学贵.LPS刺激点带石斑鱼免疫相关基因的克隆与组织表达差异性分析[D].海口：海南大学，2011.
[4] 侯立华，黄新，朱水芳，等.双色荧光多重PCR技术及在禽流感病毒检测中的应用[J].生物技术通报，2010(1)：168-172.
[5] 查锡良.生物化学[M].7版.北京：人民卫生出版社，2009：483-485.
[6] 张杰道.生物化学实验技术PCR技术及应用[M].北京：科学出版社，2005：12-18.
[7] 谢海燕.黑线仓鼠LHR部分序列克隆及组织器官的表达差异[D].曲阜：曲阜师范大学，2011.
[8] KUBISTA M，ANDRADE J M，BENGTSSON M，et real-time pol-ymerase chain reaction[J].MoLecular Aspects of Medicine，2006，27(2-3)：95-125.
[9] AGINDOTAN B O，SHIEL P J，BERGER P detection of potato viruses，PLRV，PVA，PVX and PVY from dormant potato tubers by TaqMan real-timeRT-PCR[J].J Virol Methods，2007，142(1-2)：l-9.
[10] 李丽平.小麦慢锈品种叶片受条锈菌侵入后的木质素合成及调控研究[D].雅安：四川农业大学，2009.
[11] 薛霜，独军政，高闪电，等.实时荧光定量PCR技术研究进展及其在兽医学中的应用[J].中国农学通报，2010(7)：11-15.
[12] SCHUBERT J，FOMITCHEVA V，SZTANGRET-WISNIEWSKA J. Dif-ferentiation of Potato virus Y strains using improvedsets of diagnostic-PCR-primers [J].J Virol Methods，2007，140(1-2)：66-74.
[13] 袁继红.实时荧光定量PCR技术的实验研究[J].现代农业科技，2010(13)：20-22.
[14] 朱善元.生物检测技术PCR及其在兽医微生物检测中的应用[J].黑龙江畜牧兽医，1999(11)：21-22.
[15] 黄银花，胡晓湘，李宁，等.影响多重PCR扩增效果的因素[J].遗传，2003，25(1)：65-68.
[16] 陈诺，唐善虎，岑璐伽，等.多重PCR技术在食品微生物检测中的应用进展[J].生物技术，2010，37(10)：72-75.
[17] 刘连生.常规PCR技术与单分子PCR技术[J].医学信息，2010，23(11)：4379-4380.
[18] 顾超颖.汗孔角化病的临床分析，SSH1、ARPC3基因突变检测和表达谱分析[D].上海：复旦大学，2008.
[19] 唐永凯，俞菊华，刘波，等.翘嘴红鲌肝脏G6Pase催化亚基的克隆以及摄食和饲料中碳水化合物对其表达的影响[J].水产学报，2007，31(1)：45-53.
[20] 刘波，谢骏，苏永腾，等.高碳水化合物日粮对翘嘴红鲌生长、GK及GK mRNA表达的影响[J].水生生物学报，2008，32(1)：47-53.
[21] 俞菊华，戈贤平，唐永凯，等.碳水化合物、脂肪对翘嘴红鲌PEPCK基因表达的影响[J].水产学报，2007，31(3)：369-373.
[22] 孙淑娜，桂永浩，宋后燕，等.叶酸拮抗剂甲氨喋呤导致斑马鱼心脏发育异常及BMP2bHAS2表达下调[J].中国当代儿科杂志，2007，9(2)：159-163.
[23] SAWYER S J，GERSTNER K A，CALLARD PCR analysis of cytochrome P450 aromatase expression in zebrafish：gene specific tissue disyribution，sex differences，developmental programming，and estrogen regulation[J].General and comparative endocrinology，2006，147(2)：108-117.
[24] BEJ A K，MAHBUBANI M H，MILLER R，et PCR amplif-ication and immobilized capture probes for detection of bacterial patho-gens and indicators in water[J].Mol Cell Probes，1990，4(5)：353-365.
[25] ZHANG Z D，ALEXANDERSEN of carrier cattle and sheep persistently infected with foot-and-mouth disease virus by a rapid real-time RT-PCR assay[J].Journal of Virological Methods，2003，111(2)：95-100.
[26] ZHANG Z D，BASHIRUDDIN J analysis of foot-and-mouth disease virus RNA duration in tissues of experimentally infected pigs[J].TheVeterinary Journal，2009，180(1)：130-132.
[27] METZGER-BODDIEN C，BOSTEL A，KEHLE for analysis of food samples[J].J Food Prot，2004，67(8)：1585-1590.
点击下页还有更多>>>关于pcr技术论文
1. 你说的应该是sandwich elisa吧，这是双抗体夹心ELISA，是ELISA的其中一种，具体实验过程试剂盒上有明确的说明，按着说明做就可以，一般2~3小时吧。2. 要根据你要检测的目的蛋白的量选择试剂盒，不同的试剂盒的灵敏度是不同的，你要选择适合你用的，买试剂和的时候问问就可以。3. ELISA是非常成熟的检测方法了，你蛋白含量很低的话对试剂盒要求就比较高，最好用进口试剂盒，而且试剂盒的灵敏度一定要高，你预计你要检测蛋白的量要在试剂盒检测范围内，如果蛋白量太低，容易检测不出来，太高要稀释后再检测。祝实验顺利吧
一、做ELISA试剂盒标准曲线样品检测时有几个问题需要注意1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的，所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线，尽量要使实验样品的浓度在中间坡度最陡段，即曲线几乎成直线的范围内。3、最好采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度，ELISA试剂盒这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。4、检测标准样品时，应按浓度递增顺序进行，以减少高浓度对低浓度的影响，提高准确性。5、标准曲线的样品数一般为7个点，但至少要保证有5个点。6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动，但一般来说，相关系数R至少要大于，对于有些实验，至少要甚至是.二、选择什么方程去拟合在S曲线的低浓度部门可以用乘幂方程很好的拟合，中低浓度部门可以用直线方程，中间部门可用对数方程，而中后段可用四参数。免疫检测时尺度点（可以是倍比稀释的，也可以不是）浓度假如和相应的吸光度（OD）值假如能够呈现直线关系当然是最理想的了，这时可以通过EXELL等利便的获得拟合曲线，进而推算出样品的浓度值。 关于尺度曲线的拟合方式，直线、二次曲线、三次曲线、指数、对数等虽都可用于ELISA及其它生物学反应中的曲线拟合，但都只合用于曲线的一部门，有的合用于前半段，有的合用于后半段，有的合用于中间一段，而Logistic曲线则对曲线的全部都有较好的合用性。在一个长的区间内，Logistic应该都能拟合得较为理想。假如用来定量，S形曲线的中间段（较陡处）是比较好的，而两真个平坦部门计算误差会大，有时甚至会很大。用于免疫检测的所谓“尺度曲线"实在称为拟合曲线比较合适。目前国际上最流行的免疫检测拟合方式是“四参数逻辑拟合"，用这种拟合方式往往能够比较精确的反映浓度和吸光度的曲线关系，从而进一步比较准确的获得样品中待测物质的浓度值。但我们做免疫检测很少有时候能够有这么理想的情况，标品浓度和相应OD值往往是"S"型的曲线关系，这时就不能用直线拟合的方式了，而对拟合方法进行选择就是必要的了。枢纽在于你的尺度曲线做到了S形的哪一部门，你想检测的样品浓度在曲线的哪一部门。当然，假如用于定量，仍是在中间一段较好。但建模型是一回事，ELISA试剂盒而用它来定量是另一回事。这些方法固然没有一种方法可以通用，但也都可以用。但并不是说它就是万能的。事实上不仅是ELISA，其它良多生物学反应都是S形曲线，也都可以用Logistic曲线拟合。
学术论坛和医学社区。一些专门的学术论坛和医学社区会有关于羊布病的讨论板，可以访问一些针对兽医学、畜牧业或微生物学等领域的学术论坛，例如ResearchGate、医学知网等，搜索与羊布病相关的话题或论坛。阅读科学文献和研究论文，是由专家撰写的综述文章，以深入了解羊布病的病因、症状、诊断和治疗方法。
1983年毕业于四川农学院畜牧兽医系，一直从事动物传染病和人畜共患病防治工作。曾任四川省动物防疫监督总站副站长、高级兽医师，四川省动物疫病预防控制中心党总支书记、主任(正县职)等职务。先后主持完成了“牦牛布病疫区应用猪二号菌苗免疫示范推广及效力试验研究”等4项省级科研推广项目，荣获四川省人民政府科技进步二等奖、三等奖各1项，星火科技二等奖1项和国家级星火科技四等奖1项，农业部科技进步二等奖1项。撰写的《牦牛和羊布鲁氏菌病综合防治》一文被收入《亚洲动物布鲁氏菌病诊断与控制策略专家研讨会论文集》，并被指定在这次会上作论文宣读。
布鲁氏菌病(以下简称布病)，是由布鲁氏菌引起的一种广泛分布于世界各地的人畜共患的传染病，人类感染布病后，病程长，反复发作，长期不愈，家畜感染则出现流产和不育，严重危害畜牧业生产和人类健康。现就该病的发生历史及疫情分布情况、病原学、流行病学、临床症状、病理变化及发病机理、诊断、防治等方面进行论述。布鲁氏菌是革兰氏阴性球杆菌或短杆状、边缘稍凸或直，末端钝圆。初次分离时多呈球状、球杆状或卵圆形，传代培养后渐呈短小杆状，菌体无鞭毛，不形成芽胞，毒力菌株可有菲薄的荚膜羊种致病力最强。多种生物型的产生可能与病原菌为适应不同宿主而发生遗传变异有关布鲁氏菌在自然环境中生活力较强，在污染的土壤、水以及病畜的分泌物、排泻物及死畜的脏器中能生存1～4个月，在食品中约生存2个月。60℃加热30min、70℃加热5min或日光下曝晒4h可杀死本菌，对常用化学消毒剂较敏感。本病的易感动物范围很广，目前已知有60多种家畜、家禽，野生动物是布鲁氏菌的宿主。但主要是羊、牛及猪。本病的主要传染源是病畜及带菌动物，染疫动物首先在同种动物间传播，造成带菌或发病，随后波及人类。病畜的分泌物、排泄物、流产物及乳类含有大量病菌，各型布鲁氏菌主要感染本种动物，但在其他动物间有转移现象，即羊种菌可能转移到牛、猪或相反。羊、牛、猪是饲养量较大的动物，与人类接触密切，从而增加了人类感染的机会。
布病可以经过皮肤和黏膜的接触传播，如果在牛群里面有带有伤口的牛，当缺乏防护时，细菌就会通过受损的皮肤或黏膜进入体内，导致感染。在我国羊是布病的主要传染源，其次是牛、猪、犬，它的传播途径是牧民接生羔羊。防治时必须要将患病动物进行隔离或宰杀，污染地区仔细消毒。
一、牛和牛之间布病是怎样传染的
1、布病可以通过皮肤和黏膜进行接触传播，所以当牛群里面有受伤的牛时，如果再加上缺乏保护，细菌就会通过受损的皮肤或黏膜进入牛体内，导致感染。布病也可以通过消化道进行传播，这一般是食用了含有细菌的水和食物而被感染。如果细菌飘浮在空气里面，它也可以通过吸入牛的呼吸道进行传播，昆虫作为媒介也能造成传播，比如苍蝇、蜱虫叮咬等。
2、在我国羊是布病的主要传染源，其次是牛、猪、犬。它的主要传播途径是牧民接生羔羊，兽医为病畜接生进行感染，除此之外，剥牛、羊皮，剪、打羊毛，挤奶，切病毒肉，屠宰病畜，儿童玩羊等都可以感染，病菌会从接触处的破损皮肤进入人体。
3、防治时一定要将患病动物进行隔离或宰杀，而且污染地区要仔细进行消毒，奶和奶制品也要使用巴氏消毒法进行消毒。在流行地区的工作人员，必须施行菌苗的预防接种，牛群里面可以接种减毒活菌苗或19-B菌苗。对于家畜要进行定期检疫，发现病畜后要将其进行隔离治疗，病畜产物和死畜一定要深埋。
二、布病的周期多久
1、布病的的周期一般是1-3周左右，平均为2周，少数病例可达数月或1年，这主要跟患者的免疫力有关。布病也被称为波状热，是由布鲁菌引起的急性或慢性传染病，属于自然疫源性疾病。它在临床上的主要表现为发热、多汗、关节痛等，目前有很多病例出现发病缓慢，少数起病急骤，类似感冒。
2、对于牛、羊、猪等患病动物，可以使用四环素与链霉素一起治疗，慢性感染可以使用四环素和链霉素混合使用。一定要注意水、电解质及营养的补充，给其提供足量维生素B族和C，以及易于消化的饮食。
3、被病畜污染的环境一定要用20%漂白粉或10%石灰乳进行消毒，皮毛可以使用过氧乙烷熏蒸进行消毒，并放置3个月以上再运出疫区。病畜用过的牧场一定要经3个月自然净化后再使用，不能食用病畜肉以及乳品。与牲畜或畜产品接触密切者，要做好个人防护，比如戴口罩、眼罩、手套，穿防护衣，皮肤有伤口者，要暂时避免接触家畜。
传染性和反复性强不强
这个听说过，只有内蒙的的人才能得这病，因为他们养羊多
当牛群里面出现布氏杆菌病后一定要马上把呈阳性反应牛隔离，养殖月后，再对所有的牛左两次血清平板凝集试验。如果多次检疫同时隔离阳性反应牛后，牛群里面还是有少数牛出现阳性反应，这时可以给所有阴性牛注射m5号菌苗。被阳性牛污染的畜舍、饲槽及各种饲养用具等，可以使用苏儿溶液、10%-20%石灰乳、2%氢氧化钠溶液消毒。
一、布病的牛怎么处理
1、当牛群中检验发现有布氏杆菌病后一定要马上将阳性反应牛隔离进行饲养，月后，再对全群牛进行两次血清平板凝集试验。如果每次检疫除已知阳性反应牛仍保持阳性反应外，其余牛均为阴性，就可以将阳性牛按其经济效益情况进行屠宰或转移到远离健康牛群的地方单独隔离饲养。
2、如果经多次裣疫并不断剔除阳性反应牛后，牛群里面还是有少数牛表现为阳性反应，这时可以给全群阴性反应牛进行一次m5号菌苗预防注射。当隔离饲养的阳性牛数量较多时，则可以组建阳性隔离牛群，指定专人进行管理，加强兽医卫生和消毒工作。在兽医监督下边使用边淘汰，并逐步从阳性牛群中选出健康牛群。
3、对阳性牛所污染的畜舍、饲槽以及各种饲养用具等，使用来苏儿溶液、10%-20%石灰乳、2%氢氧化钠溶液等进行消毒。流产的胎儿、羊水及产道分泌物等一定要进行妥善消毒和处理，病牛皮要用3%-5%的来苏儿浸泡后方才能利用，乳汁要煮沸消毒，粪便要进行发酵处理。
二、布病有什么症状
1、布病在临床上的表现主要是轻重不一的发热、多汗、关节痛等，一般母羊如果感染上布病，第1胎在妊娠后2-3个月就会流产，胎盘及羊水会出现灰白色或灰黄色。流产1次后母羊基本上就不会再流产，但是会终身带菌。母牛的主要的症状也是流产，流产一般发生在妊娠期后5-8个月左右，流产胎儿可能是死胎或者弱犊。流产之后就会出现胎衣滞留，不断从阴道排出污灰色或者棕褐色的分泌物等现象。
2、对于牛、羊、猪等患病动物，可以使用四环素与链霉素一起治疗，慢性感染可以使用四环素和链霉素混合使用。一定要注意水、电解质及营养的补充，给其提供足量维生素B族和C，以及易于消化的饮食。
3、被病畜污染的环境一定要用20%漂白粉或10%石灰乳进行消毒，皮毛可以使用过氧乙烷熏蒸进行消毒，并放置3个月以上再运出疫区。病畜用过的牧场一定要经3个月自然净化后再使用，不能食用病畜肉以及乳品。与牲畜或畜产品接触密切者，要做好个人防护，比如戴口罩、眼罩、手套，穿防护衣，皮肤有伤口者，要暂时避免接触家畜。
布氏杆菌病又称传染性流产病。在群体饲养牛群中，传染极快，并传染给人。是由布氏杆菌引起的一种接触性慢性传染病。牛患了此病后的症状是：母牛大多在怀孕后的5～7个月发生流产，而且多发生在第一胎，流产前数天，一般都有分娩的预兆，流产后多数伴有胎衣不下，阴道内长时间排出褐色分泌物。有的流产以后引起慢性子宫内膜炎，因而造成不孕症。流产前一般体温不高，主要表现在阴唇和阴道黏膜红肿。流产的胎儿多为死胎。
公牛患了此病，可发生睾丸炎和附睾炎，引起睾丸肿胀，食欲减退，逐渐消瘦，性欲降低，并且失去配种能力。有的病牛患此病时发生关节炎、滑液囊炎、淋巴结脓肿。
种公牛无治疗价值。母牛患此病后，可采取如下方法治疗：
（1）1%高锰酸钾适量，冲洗阴道和子宫，每天1～2次。
（2）对流产后继发子宫内膜炎的病牛，或胎衣不下经剥离的病牛，可用呋喃西林溶液冲洗子宫和阴道，每天1～2次，直到阴道内无分泌物流出为止。
（3）对牛治疗多采用土霉素作肌肉注射，每天5克，用50毫升生理盐水稀释，并加入普鲁卡因5毫升，一次注射。4～5天为一个疗程，连续两个疗程。但总剂量不要超过40～50克。
（4）益母草60克，黄芩35克，川芎、白术、双花、当归、连翘、白芍、熟地各30克，共研细末，开水冲，候温灌服。
（5）秦艽、丹皮、巴戟天、川楝子、延胡索各18克，双花、连翘各20克，防己、黄柏、知母各23克，共研细末，开水冲调，一次灌服。可治睾丸炎。
（6）当归、川芎、白芍各32克，白术、党参、艾叶各30克，阿胶、熟地各32克，砂仁、枳壳各16克，黄芪、香附、荆芥穗各33克，甘草17克，共研为末，鲜生姜35克为引，开水冲调，一次灌服。
牛布氏杆菌病是人畜共患的慢性传染病。主要侵害生殖系统，以母牛发生流产和不孕，公牛发生睾丸炎和不育为特征，故又称传染性流产。本病病原体是牛布氏杆菌。
该病临床症状主要表现为妊娠母牛流产。流产后多数伴发胎衣不下或子宫内膜炎。
公牛发生睾丸炎和副睾炎，失去配种能力。
对牛布氏杆菌病的诊断可采取3种实验室检查方法。
（1）细菌学检查。取母牛阴道分泌物、胎衣、胎儿胃内容物涂片，将涂片在酒精灯上加温固定后，滴加2%沙黄水溶液，在火焰上方微微加热～1分钟至出现蒸气，水洗后用1%孔雀绿复染1～2分钟，水洗吸干、镜检。若看到红色的球杆菌便可确诊。其他杂菌成绿色。
（2）全乳环状反应。取刚挤出的全乳1毫升放于反应管内，加入抗原（染成蓝色或红色）毫升，充分振荡混合，静置于37℃温箱中，1小时后取出立即判定。用蓝色抗原时，若在乳脂层出现比乳柱深的蓝色环状带即判为阳性。
（3）平板凝集反应。此法比较简单实用。
采取被检牛血液，待凝固后，分离血清作被检材料。先用蜡笔在玻璃板上划成2厘米×2厘米的方格，每一方格中放置一份被检血清毫升，用毫升吸管吸取充分搅匀的抗原，分别在每一血清样品旁加入毫升抗原，每格各用一根火柴棒或牙签搅拌血清和抗原，使其均匀混合，若室内温度偏低，可将玻板在酒精灯上方微微加温，于4分钟内出现凝集现象者为阳性。
本病公牛无治疗价值。母牛流产后继发予宫内膜炎或胎衣不下时可用呋喃西林，高锰酸钾液或生理盐水冲洗子宫，排除冲洗液后向子宫内灌入抗生素药物。胎衣不下时可采取手术剥离或肌内注射垂体后叶素50～100单位，以加速胎衣排除。本病防疫主要是加强检疫，不到疫区引种。必须买牛时一定隔离30天以上，并作二次检疫，确认健康才能入群。
对同群牛坚持每年定期预防注射布氏杆菌菌苗，被污染的场所及用具有3%～5%来苏儿消毒。
应该去医院做检测化验一下血，这都有可能的，因为你高烧不退，还是全面的检测一下找出病原体。这样才可以解决问题。
病是一种由布鲁菌引起的急性或慢性传染病，布病刚开始发病没有什么明显特征表现，但是对人体的危害是不可忽视的，那布病到底是一种什么病?有哪些症状?该怎么治疗呢?发病以春夏季为多，牧区发病率高。症状在细菌感染后5天到数月出现，通常为2周。(1)发热。为急性期最常见症状，热型为波浪热或弛张热，伴有多汗：慢性期发热不叫显。(2)关节、肌肉疼痛。急、慢性期病人均可有关节肌肉痛症状，多为游走性大关节疼痛。急性期，常为多关节疼痛，较剧烈，可为针刺样或为顽固性钝痛。慢性期。疼痛一般局限于1～2个关节，呈持续性钝病或酸痛，长期反复发作可因肌腱变硬和挛缩，而使关节强直、畸形，(3)生殖系统症状。男性病人可发生睾丸炎、附睾炎，常为单侧。女性病人可出现月经不调、闭经、性欲减退、早产、流产、死胎等。(4)神经系统症状。由于神经干和神经根损伤，导致神经痛，多见于急性期，以腰骶神经、肋间神经、坐骨神经为主，可出现腰痛腿痛。(5)淋巴结与肝脾大。一般发生在急性期，淋巴结肿大主要见于颈部及腋下。(6)没有并发症的布氏杆菌病患者通常2～3周后恢复。并发症较罕见，但可感染心脏、脑和脑膜，以及引起神经、睾丸、胆囊、肝脏和骨的炎症。患者应卧床休息，注意水、电解质及营养的补充，给予足量维生素B族和C，以及易于消化的饮食。 高热者可同时应用解热镇痛剂。肾上腺皮质激素(激素)有助改善血症症状，但必须与抗生素合用，疗程3～4天。 有认为感染累及中枢神经系统及长期有睾丸肿痛者，均有应用激素的指征。
目前来说，得了布病的羊基本没有治疗价值，需立即上报相关部门，处理好病羊和传染源，尽可能减少养殖户的损失。因为，羊布病即便是治愈了，治愈后的能羊也难以恢复正常使用，建议进行淘汰处理。布病是个慢性传染病，平日里不太容易观察出，只有在羊群发生大面积流产的时候才会引起饲养员的高度重视。有专业的资料显示，布鲁氏菌在土壤中可存活40天，冷藏的乳汁中能存活数周，皮肤上可生存～2个月，但是直射阳光下只能活4小时。从这点来看，布鲁氏菌怕高温，病羊和传染源只要经过焚烧处理，基本上都会灭绝病源。
这个传染病到底能不能治好真的没有定论，羊得此病损失的只是金钱，人得此病损失的可是健康甚至生命，因此为了我们养羊人的自身健康，一定要加强布氏杆菌病的预防
此病的关键在于预防，羊群若一旦感染，基本没有治疗价值。预防措施有3点：1.必须要加强引种检疫，严格防止传染源流入自家健康羊群。我们在引入新品种时最好进行隔离检验，直到确定健康、无传染病才能放入大群羊里面。2.坚持自繁自养和人工授精配种技术。自繁自养的羊群得布病的概率大大减少，而人工授精配种技术又避免了公母羊直接接触，也可以减少布病的传播途径。3.定期给羊和人注射布病疫苗。但是这种布病疫苗目前来看还不是很成熟，国外都不提倡接种。还有很重要的一点要提醒广大所有的养羊户：我们给母羊接生时，为了防止布病传染给饲养员，饲养员必须要戴好橡胶手套(平日里多准备几双，就是那种薄薄的橡胶手套，
这是来给大家提个醒的了…