since发表论文

从简单地剪切致病基因，到开发出不再传播疾病的工程动物，基因编辑技术已经释放出巨大的潜力。随着研究的深入，科学界还发现，除了编辑具有遗传讯息的DNA片段，编辑RNA可以在不改变基因组的情况下，帮助调整基因表达方式，此外，RNA的寿命是相对短暂的，这也意味着它的变化是可以逆转的，从而避免基因工程中的巨大风险。

2017年10月，来自Broad研究所的张锋研究团队在《自然》期刊上发表了题为“RNA targeting with CRISPR-Cas13”的文章，首次将CRISPR-Cas13系统公之于众，证实了CRISPR-Cas13可以靶向哺乳动物细胞中的RNA。仅仅时隔三周，又一篇名为“RNA editing with CRISPR-Cas13”的力作发表于《科学》期刊。在该研究中，张锋研究团队再次展示了这一RNA编辑系统，能有效地对RNA中的腺嘌呤进行编辑。

在CRISPR出现之前，RNAi是调节基因表达的理想方法。但是Cas13a酶一大优势在于更强的特异性，而且这种本身来自细菌的系统对哺乳动物细胞来说，并不是内源性的，因此不太可能干扰细胞中天然的转录。相反，RNAi利用内源性机制进行基因敲除，对本身的影响较大。但CRISPR-Cas13系统还有一个重要的问题，Cas13a酶本质上是一种相对较大的蛋白质，因此很难被包装到靶组织中，这也可能成为RNA编辑技术临床应用的一大障碍。

2018年3月16日，一项发表在《细胞》期刊的重磅成果为RNA编辑技术带来一大步飞跃，来自美国Salk研究所的科学家利用全新的CRISPR家族酶扩展了RNA编辑能力，并将这个新系统命名为“CasRx”。

CasRx（品红色）在人类细胞核中靶向RNA（灰色），Salk研究所

“生物工程师就像自然界的侦探一样，在DNA模式中寻找线索来帮助解决遗传疾病。CRISPR彻底改变了基因工程，我们希望将编辑工具从DNA扩展到RNA。”研究领导者Patrick Hsu博士表示，“RNA信息是许多生物过程的关键介质。在许多疾病中，这些RNA信息失去了平衡，因此直接靶向RNA的技术将成为DNA编辑的重要补充。”

除了高效性且无明显脱靶效应，新系统的一个关键特征是其依赖于一种比以前研究中物理尺寸更小的酶。 这对RNA编辑技术至关重要，这使得该编辑工具能够更容易被包装到病毒载体，并进入细胞进行RNA编辑。来自东京大学的科学家Hiroshi Nishimasu并未参与这项研究，他表示：“在这项研究中，研究人员发现了一种较Cas13d更加‘紧凑’的酶CasRx。从基础研究到治疗应用，我认为CasRx将成为非常有用的工具。”

此外，在这项研究中，研究人员还展示了利用这种新型RNA编辑系统来纠正RNA过程的能力。他们将CasRx包装到病毒载体中，并将其递送到利用额颞叶痴呆（FTD）患者干细胞中培养的神经细胞，最终使tau蛋白水平恢复到健康水平上，有效率达到80%。

Patrick Hsu博士最后说道：“基因编辑技术通过对DNA的切割带来基因序列的改变。在经过基因编辑的细胞中，其效果是永久的。虽然基因编辑技术能够很好地将基因完全关闭，但对调节基因的表达上并不那么优秀。展望未来，这一最新工具将在RNA生物学研究中发挥重要作用，并有望在未来凭借该技术对RNA相关疾病进行治疗。”

该研究探索了Cas13d家族蛋白CasRx敲低目的基因的最佳sgRNA组合，通过尾静脉注射质粒的方式，将CasRx系统和靶向Pten基因的sgRNA导入到小鼠肝脏细胞中，成功在小鼠肝脏中实现了Pten的高效沉默。

3月18日，《蛋白质与细胞》期刊在线发表了《Cas13d介导的肝脏基因表达下调对代谢功能的调控》的研究论文，该研究由中科院脑科学与智能技术卓越创新中心（神经科学研究所）、上海脑科学与类脑研究中心、神经科学国家重点实验室杨辉研究组和上海科技大学生命科学与技术学院黄鹏羽研究组合作完成。该研究探索了Cas13d家族蛋白CasRx敲低目的基因的最佳sgRNA组合，通过尾静脉注射质粒的方式，将CasRx系统和靶向Pten基因的sgRNA导入到小鼠肝脏细胞中，成功在小鼠肝脏中实现了Pten的高效沉默，证实了CasRx系统在成体动物体内也具有靶向沉默RNA的活性，通过增强下游蛋白AKT的磷酸化，影响了糖脂代谢相关基因的表达。同时，利用AAV递送CasRx和靶向Pscsk9的sgRNA到小鼠肝脏，有效降低了肝脏中PCSK9的蛋白表达，以及小鼠血液中的胆固醇水平。这为治疗后天性的代谢疾病提供了新方案。

同时，杨辉研究组与上海交通大学医学院附属上海第一人民医院孙晓东研究组合作，也探究了CasRx预防严重的眼部疾病——年龄相关性黄斑变性（AMD）的可能性，研究人员发现在体内使用CasRx敲低Vegfa的mRNA可以显著减少AMD小鼠模型中脉络膜新血管形成（CNV）的面积，验证了将RNA靶向的CRISPR系统用于治疗应用的潜力。相关研究论文《CasRx介导的RNA靶向策略可防止年龄相关的黄斑变性的小鼠模型中的脉络膜新生血管形成》3月3日在《国家科学评论》在线发表。

近年来，CRISPR/Cas9技术因其强大且便捷的DNA编辑能力而受到广泛关注。2016年，张锋实验室发现了一种新的Cas蛋白Cas13a，可以靶向RNA进行切割。之后人们又陆续发现了靶向RNA的Cas13b, Cas13c。由于Cas13家族蛋白靶向RNA的特点，理论上在一些特定疾病的检测和治疗上具有独特优势，因而成为近年来的研究热点。2018年，加州大学伯克利分校Patrick Hsu实验室发现了Cas13d家族。他们发现与RNA干扰技术相比，Cas13d介导的基因沉默具有更高的特异性（与数百个shRNA脱靶相比，Cas13d没有脱靶）和敲除效率（Cas13d达到96％，shRNA达到65％）。而与Cas9介导的基因敲除技术相比，Cas13d介导的基因沉默不会改变基因组DNA，因此这种基因沉默是可逆的，从而对一些后天性疾病（如因不良生活习惯导致的高血脂等后天代谢性疾病）的治疗更有优势。其中Cas13d家族的CasRx蛋白由于体积小，效率高，被认为是在未来应用中最具有优势的Cas13蛋白。

此前的工作都在细胞水平证明了CasRx的高效性和特异性，杨辉研究组的这两篇文章则更进一步在动物体内证明了CasRx的活性，为临床提供了可能性。为证明CasRx在动物体内的活性，研究人员分别针对目的基因进行了sgRNA的体外筛选，然后采用尾静脉注射敲低Pten的质粒、尾静脉注射敲低Pcsk9的AAV8病毒、眼部注射敲低Vegfa的AAV病毒。对注射后的小鼠进行相应分析，分别得到Pten基因下调及其下游蛋白AKT的磷酸化上调，Pcsk9下调造成血清胆固醇下调；Vegfa下调显著减少AMD小鼠模型中脉络膜新血管形成（CNV）的面积。

2020年3月18日，《蛋白质与细胞》期刊在线发表了《Cas13d介导的肝脏基因表达下调对代谢功能的调控》的研究论文，该研究由中科院脑科学与智能技术卓越创新中心（神经科学研究所）、上海脑科学与类脑研究中心、神经科学国家重点实验室杨辉研究组和上海科技大学生命科学与技术学院黄鹏羽研究组合作完成。该研究探索了Cas13d家族蛋白CasRx敲低目的基因的最佳sgRNA组合，通过尾静脉注射质粒的方式，将CasRx系统和靶向 Pten 基因的sgRNA导入到小鼠肝脏细胞中，成功在小鼠肝脏中实现了 Pten 的高效沉默， 证实了CasRx系统在成体动物体内也具有靶向沉默RNA的活性， 通过增强下游蛋白AKT的磷酸化，影响了糖脂代谢相关基因的表达。同时，利用AAV递送CasRx和靶向 Pscsk9 的sgRNA到小鼠肝脏， 有效降低了肝脏中PCSK9的蛋白表达，以及小鼠血液中的胆固醇水平 。这为治疗后天性的代谢疾病提供了新方案。

同时，杨辉研究组与上海交通大学医学院附属上海第一人民医院孙晓东研究组合作，也 探究了CasRx预防严重的眼部疾病——年龄相关性黄斑变性（AMD）的可能性，研究人员发现在体内使用CasRx敲低 Vegfa的mRNA可以显著减少AMD小鼠模型中脉络膜新血管形成（CNV）的面积**，验证了将RNA靶向的CRISPR系统用于治疗应用的潜力。相关研究论文《CasRx介导的RNA靶向策略可防止年龄相关的黄斑变性的小鼠模型中的脉络膜新生血管形成》3月3日在《国家科学评论》在线发表。

近年来，CRISPR/Cas9技术因其强大且便捷的DNA编辑能力而受到广泛关注。2016年，张锋实验室发现了一种新的Cas蛋白Cas13a，可以靶向RNA进行切割。之后人们又陆续发现了靶向RNA的Cas13b, Cas13c。由于Cas13家族蛋白靶向RNA的特点，理论上在一些特定疾病的检测和治疗上具有独特优势，因而成为近年来的研究热点。2018年，加州大学伯克利分校Patrick Hsu实验室发现了Cas13d家族。他们发现与RNA干扰技术相比，Cas13d介导的基因沉默具有更高的特异性（与数百个shRNA脱靶相比， Cas13d没有脱靶）和敲除效率（Cas13d达到96％ ，shRNA达到65％）。而与Cas9介导的基因敲除技术相比， Cas13d介导的基因沉默不会改变基因组DNA，因此这种基因沉默是可逆的 ，从而对一些后天性疾病（如因不良生活习惯导致的高血脂等后天代谢性疾病）的治疗更有优势。其中Cas13d家族的CasRx蛋白由于体积小，效率高，被认为是在未来应用中最具有优势的Cas13蛋白。

此前的工作都在细胞水平证明了CasRx的高效性和特异性，杨辉研究组的这两篇文章则更进一步在动物体内证明了CasRx的活性，为临床提供了可能性 。为证明CasRx在动物体内的活性，研究人员分别针对目的基因进行了sgRNA的体外筛选，然后采用尾静脉注射敲低 Pten 的质粒、尾静脉注射敲低 Pcsk9 的AAV8病毒、眼部注射敲低 Vegfa 的AAV病毒。对注射后的小鼠进行相应分析，分别得到 Pten 基因下调及其下游蛋白AKT的磷酸化上调， Pcsk9 下调造成血清胆固醇下调； Vegfa 下调显著减少AMD小鼠模型中脉络膜新血管形成（CNV）的面积。

图1 CasRx介导的 Pten 体内体外的下调（ Protein & Cell ）

A.质粒示意图；B.N2a细胞中 Pten 的下调；C.Western检测PTEN及AKT的表达； D.CasRx与shRNA脱靶比较；E.尾静脉注射质粒示意图；F.G.H.免疫荧光，qPCR，western分别检测 Pten 及p-AKT的表达

图2 血清胆固醇的调节以及 Pcsk9 的可逆调控（ Protein & Cell ）

A.针对 Pcsk9 的AAV8病毒注射示意图；B.肝组织中 Pcsk9 的表达量；C.血清 PCSK9 的表达量；D.血清胆固醇水平；E.F.血清ALT和AST的测定；G.可逆调节注射示意图； H. Pcsk9 的动态调控。

图3 AAV介导CasRx减少了AMD小鼠模型中CNV的面积（National Science Review）

A.小鼠和人序列比较以及sgRNA示意图；B.C.在293T和N2a细胞中敲低 Vegfa ；D.VEGFA蛋白的表达；E.AAV病毒质粒示意图；F.实验流程图；G.CasRx的mRNA表达水平；H.I.激光烧伤之前或之后7天的 Vegfa mRNA水平；J.CNV诱导3天后的VEGFA蛋白水平；K.激光烧伤7天后，用PBS或AAV-CasRx- Vegfa 注射的代表性CNV图像；L.M.CNV面积统计。

2020 年 4 月 8 日， Cell 期刊在线发表了题为 《Glia-to-Neuron Conversion by CRISPR-CasRx Alleviates Symptoms of Neurological Disease in Mice》 的研究论文，该研究由中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心（神经科学研究所）、上海脑科学与类脑研究中心、神经科学国家重点实验室 杨辉 研究组完成。

该项研究通过运用最新开发的 RNA 靶向 CRISPR 系统 CasRx 特异性地在视网膜穆勒胶质细胞中敲低 Ptbp1 基因的表达，首次在成体中实现了视神经节细胞的再生，并且恢复了永久性视力损伤模型小鼠的视力。同时，该研究还证明了这项技术可以非常高效且特异地将纹状体内的星形胶质细胞转分化成多巴胺神经元，并且基本消除了帕金森疾病的症状。该研究将为未来众多神经退行性疾病的治疗提供一个新的途径。

人类的神经系统包含成百上千种不同类型的神经元细胞。在成熟的神经系统中，神经元一般不会再生，一旦死亡，就是永久性的。神经元的死亡会导致不同的神经退行性疾病，常见的有阿尔兹海默症和帕金森症。此类疾病的病因尚不明确且没有根治的方法，因此对人类的健康造成巨大威胁。据统计，目前全球大约有 1 亿多的人患有神经退行性疾病，而且随着老龄化的加剧，神经退行性疾病患者数量也将逐渐增多。

在常见的神经性疾病中，视神经节细胞死亡导致的永久性失明和多巴胺神经元死亡导致的帕金森疾病是尤为特殊的两类，它们都是由于特殊类型的神经元死亡导致。我们之所以能看到外界绚烂多彩的世界，是因为我们的眼睛和大脑中存在一套完整的视觉通路，而连接眼睛和大脑的神经元就是视神经节细胞。

作为眼睛和大脑的唯一一座桥梁，视神经节细胞对外界的不良刺激非常敏感。研究发现很多眼疾都可以导致视神经节细胞的死亡，急性的如缺血性视网膜病，慢性的如青光眼。视神经节细胞一旦死亡就会导致永久性失明。据统计，仅青光眼致盲的人数在全球就超过一千万人。

帕金森疾病是一种常见的老年神经退行性疾病。它的发生是由于脑内黑质区域中一种叫做多巴胺神经元的死亡，从而导致黑质多巴胺神经元不能通过黑质-纹状体通路将多巴胺运输到大脑的另一个区域纹状体。目前，全球有将近一千万人患有此病，我国尤为严重，占了大约一半的病人。 如何在成体中再生出以上两种特异类型的神经元，一直是全世界众多科学家努力的方向。

该研究中，研究人员首先在体外细胞系中筛选了高效抑制 Ptbp1 表达的 gRNA，设计了特异性标记穆勒胶质细胞和在穆勒胶质细胞中表达 CasRx 的系统。所有元件以双质粒系统的形式被包装在 AAV 中并且通过视网膜下注射，特异性地在成年小鼠的穆勒胶质细胞中下调 Ptbp1 基因的表达。

大约一个月后，研究人员在视网膜视神经节细胞层发现了由穆勒胶质细胞转分化而来的视神经节细胞，并且转分化而来的视神经节细胞可以像正常的细胞那样对光刺激产生相应的电信号。

研究人员进一步发现，转分化而来的视神经节细胞可以通过视神经和大脑中正确的脑区建立功能性的联系，并且将视觉信号传输到大脑。在视神经节细胞损伤的小鼠模型中，研究人员发现转分化的视神经细胞可以让永久性视力损伤的小鼠重新建立对光的敏感性。

为进一步发掘 Ptbp1 介导的胶质细胞向神经元转分化的治疗潜能，研究人员证明了该策略还能特异性地将纹状体中的星形胶质细胞非常高效的转分化为多巴胺神经元，并且证明了转分化而来的多巴胺神经元能够展现出和黑质中多巴胺神经元相似的特性。

在行为学测试中，研究人员发现这些转分化而来的多巴胺神经元可以弥补黑质中缺失的多巴胺神经元的功能，从而将帕金森模型小鼠的运动障碍逆转到接近正常小鼠的水平。

需要指出的是，虽然科学家们在实验室里取得了重要进展，但是要将研究成果真正应用于人类疾病的治疗，还有很多工作要做：人类的视神经节细胞能否再生？帕金森患者是否能通过该方法被治愈？这些问题有待全世界的科研工作者共同努力去寻找答案。

（上）CasRx 通过靶向的降解 Ptbp1 mRNA 从而实现 Ptbp1 基因表达的下调。

（中）视网膜下注射 AAV-GFAP-CasRx-Ptbp1 可以特异性的将视网膜穆勒胶质细胞转分化为视神经节细胞，转分化而来视神经节细胞可以和正确的脑区建立功能性的联系，并且提高永久性视力损伤模型小鼠的视力。

（下）在纹状体中注射 AAV-GFAP-CasRx-Ptbp1 可以特异性的将星形胶质细胞转分化为多巴胺神经元，从而基本消除了帕金森疾病模型小鼠的运动症状。

RNA-editing Cas13 enzymes have taken the CRISPR world by storm. Like RNA interference, these enzymes can knock down RNA without altering the genome , but Cas13s have higher on-target specificity. New work from Konermann et al. and Yan et al. describes new Cas13d enzymes that average only 2.8 kb in size and are easy to package in low-capacity vectors! These small, but mighty type VI-D enzymes are the latest tools in the transcriptome engineering toolbox.

Microbial CRISPR diversity is impressive, and researchers are just beginning to tap the wealth of CRISPR possibilities. To identify Cas13d, both groups used very general bioinformatic screens that looked for a CRISPR repeat array near a putative effector nuclease. The Cas13d proteins they identified have little sequence similarity to previously identified Cas13a-c orthologs, but they do include HEPN nuclease domains characteristic of the Cas13 superfamily. Yan et al. proceeded to study orthologs from Eubacterium siraeum (EsCas13d) and Ruminococcus sp. (RspCas13d), while Konermann et al. characterized orthologs from “Anaerobic digester metagenome” (AdmCas13d) and Ruminococcus flavefaciens (nicknamed CasRx), as well as EsCas13d.

Like other Cas13 enzymes, the Cas13d orthologs described in these papers can independently process their own CRISPR arrays into guide RNAs. crRNA cleavage is retained in dCas13d and is thus HEPN-independent. These enzymes also do not require a protospacer flanking sequence, so you can target virtually any RNA sequence ! In bacteria, Cas13d-mediated cleavage promotes collateral cleavage of other RNAs. As with other Cas13s, this collateral cleavage does not occur when Cas13d is expressed in a mammalian system.

Since Cas13d is functionally similar to previously discovered Cas13 enzymes - what makes these orthologs so special? The first property is size - Cas13d enzymes have a median length of ~930aa - making them 17-26% smaller than other Cas13s and a whopping 33% smaller than Cas9! Their small size makes then easy to package in low-capacity vectors like AAV, a popular vector due to its low immunogenicity. But these studies also identified other advantages, including Cas13d-specific regulatory proteins and high targeting efficiency, both of which are described below.

The majority of Type VI-D loci contain accessory proteins with WYL domains (named for the three conserved amino acids in the domain). Yan et al. from Arbor Biotechnologies found that RspCas13d accessory protein RspWYL1 increases both targeted and collateral RNA degradation by RspCas13d. RspWYL1 also increased EsCas13d activity, indicating that WYL domain-containing proteins may be broader regulators of Cas13d activity. This property makes WYL proteins an intriguing counterpart to anti-CRISPR proteins that negatively modulate the activity of Cas enzymes, some of which are also functional in multiple species (read Arbor Biotechnologies' press release about their Cas13d deposit here ).

Not all Cas13d proteins are functional in mammalian cells, but Konermann et al. saw great results with CasRx and AdmCas13d fused to a nuclear localization signal (NLS). In a HEK293 mCherry reporter assay, CasRx and AdmCas13d produced 92% and 87% mCherry protein knockdown measured by flow cytometry, respectively. Cas13d CRISPR array processing is robust, with CasRx and either an unprocessed or processed gRNA array (22 nt spacer with 30 nt direct repeat) mediating potent knockdown. Multiplexing from the CRISPR array yielded >90% knockdown by CasRx for each of four targets, including two mRNAs and two nuclear long non-coding RNAs.

One interesting twist to Cas13d enzymes is their cleavage pattern: EsCas13d produced very similar cleavage products even when guides were tiled across a target RNA, indicating that this enzyme does not cleave at a predictable distance from the targeted region. Konermann et al. show that EsCas13d favors cleavage at uracils, but a more detailed exploration of this cleavage pattern is necessary.

Konermann et al. compared CasRx to multiple RNA regulating methods: small hairpin RNA interference, dCas9-mediated transcriptional inhibition (CRISPRi), and Cas13a/Cas13b RNA knockdown. CasRx was the clear winner with median knockdown of 96% compared to 65% for shRNA, 53% for CRISPRi, and 66-80% for other Cas13a and Cas13b effectors. Like previously characterized Cas13 enzymes, CasRx also displays very high on-target efficiency; where shRNA treatment produced 500-900 significant off-targets, CasRx displayed zero. Unlike Cas9, for which efficiency varies widely across guide RNAs, each guide tested with CasRx yielded >80% knockdown. It seems that CasRx may make it possible to target essentially any RNA in a cell.

Since catalytically dead dCasRx maintains its RNA-binding properties, Konermann et al. tested its ability to manipulate RNA species through exon skipping. Previous CRISPR exon-skipping approaches used two guide RNAs to remove a given exon from the genome, and showed success in models of muscular dystrophy . In this case, Konermann et al. targeted MAPT , the gene encoding dementia-associated tau, delivering dCasRx and a 3-spacer array targeting the MAPT exon 10 splice acceptor and two putative splice enhancers. After AAV-mediated delivery to iPS-derived cortical neurons, dCasRx-mediated exon skipping improved the ratio of pathogenic to non-pathogenic tau by nearly 50%, showing proof-of-concept for pre-clinical and clinical applications of dCasRx.

The identification of Type VI Cas13d enzymes is another win for bioinformatic data mining. As we continue to harness the natural diversity of CRISPR systems, only time will tell how large the genome and transcriptome engineering toolbox will be. It is, however, certain that the impact of CRISPR scientific sharing will continue to grow, and we at Addgene appreciate our depositors for making their tools available to the broader community.

References

Konermann, Silvana, et al. “Transcriptome Engineering with RNA-Targeting Type VI-D CRISPR Effectors.” Cell (2018) pii: S0092-8674(18)30207-1. PubMed PMID: 29551272

Yan, Winston X., et al. “Cas13d Is a Compact RNA-Targeting Type VI CRISPR Effector Positively Modulated by a WYL-Domain-Containing Accessory Protein.” Mol Cell. (2018) pii: S1097-2765(18)30173-4. PubMed PMID: 29551514

\1. Transcriptome Engineering with RNA-Targeting Type VI-D CRISPR Effectors

\2. CRISPR genetic editing takes another big step forward, targeting RNA

\3. How Editing RNA—Not DNA—Could Cure Disease in the Future

[ https://www.obiosh.com/kyfw/zl/aav/209.html](

由于1.due to2.on account of3.because of4.thanks to由于……1.owing to因为，由于1.on account of2.because of

英语论文开头怎么写

英语论文开头怎么写,大家都知道万事开头难，写论文的时候也是一样，写一个好的开头就意味着你可以顺利的写下去了，对于不少人而言英文论文的难度比中文论文的难度更大，下面我带大家简单了解一下英语论文开头怎么写。

一篇

文章的第一段左右通常是整个文章的最重要的部分得到“just right”。它不仅是一个机会，抓住读者的注意力，同时也有机会来设置文章的其余议程，语气和内容的条款。严格地说，没有单一的“right”的方式开始了一篇文章，只是因为它有可能写了无数主题的文章，所以也有可能开始在很多方面的文章。然而，大多数好的开端，以散文分享一定的素质，如果考虑进去，可以大大提高可另外缺乏的文章前奏。请参见下面的步骤1开始！

为你的文章铺设路线图

1、启动带有引人注目的一句话。 当你的文章可能（或者，诚然，可以不）是有趣的你，作家，它不一定有趣的读者。读者，总的来说，是关于他们所读内容有点挑剔，他们做了什么没有。如果一件作品不会立刻吸引他们的注意力在第一段，有一个很好的机会，他们不会懒得看它的其余部分。正因为如此，它往往是开始的作文与从一开始就命令读者注意一个句子一个好主意。只要这第一句话就是逻辑连接到文章的其他部分，有一个在成为引人注目的右出了大门没有羞耻。

您可能要开始一个迷人，鲜为人知的事实和统计抓住读者的注意力。举例来说，如果你在儿童肥胖的危险与日俱增全世界写一篇文章，你可能会这样开始："Contrary to the popular idea that childhood obesity is only a problem for rich, pampered Westerners, the WHO reports that in 2012, over 30% of preschool-age children in developing countries were overweight or obese、"在另一方面，如果它适合你的文章更具逻辑性，你可能要启动一个特别扣人心弦的图像或描述。关于暑假的文章，你可能会这样开始： "When I felt the Costa Rican sun filtering through the jungle canopy and heard the sound of howler monkeys far off in the distance, I knew that I had found someplace very special、"

2、让你的读者进入你的文章的“meat” 。一个伟大的第一句话可以吸引读者的注意力，但是如果你不把读者拉进你的文章里，她还是会很容易失去兴趣。按照你的第一句话，一个句子或两个逻辑连接的注意抓住“钩”在第一句中的其余部分作为一个整体。通常，这些句子将在第一个句子的狭窄范围内扩展，将特定的快照放在一些更大的上下文中。

例如，在你的肥胖文章中，你可能会遵循如下第一句话：“In fact, childhood obesity is a growing problem that is increasingly affecting rich and poor countries alike、”这句话解释了第一句中所描述的问题的'紧迫性，并给出了更广泛的内容。

为你的假期的文章，你可能会跟你这样的第一句话是： "I was deep in the jungles of Tortuguero National Park, and I was lost in more ways than one、" 这句话告诉读者在第一句的意象从哪里来，带领读者走进其余的文章嘲笑它最终将被揭示的旁白是“lost”。

3、告诉读者你的文章是什么 。大多数时候，文章不是纯粹的描述-他们不存在完全告诉你什么是基本的，事实上。通常情况下，他们有一个特定的目的以外的。这几乎可以是任何东西。这篇文章可能是为了改变读者对某个主题的想法，说服读者采取行动，为某个不被很好理解的事情，或者简单地讲述一个令人深思的故事。在任何情况下，第一段的基本目的是要告诉读者什么是文章的目的是。这样，读者就可以快速选择是否继续到其余的文章或不。

在你的肥胖文章中，你可能会总结出这样的事情：“The purpose of this essay is to analyze current trends in childhood obesity rates worldwide and recommend specific policy initiatives to combat this growing problem，”这清楚地告诉什么文章的目的是。这里没有混乱。

为你的假期的文章，你可以试着这样的话： "This is the story of my summer in Costa Rica, a summer that neither spider bites, nor rotten plantains, nor Giardia could keep from being life-changing、" 这告诉读者，他们会在戏弄的具体细节在文章体店就是阅读一个人的旅行到外国帐户。

4、或者，你的文章结构概要 。有时，它是适当的走一步的介绍来描述你的文章的计划来实现其目的。如果你的文章能够很容易地被分解成不同的，特定的部分，这将是有用的，将使主题更容易掌握的读者。如果你是一个学生，你知道如何做到这一点也很有用，因为一些老师会要求你这么做的。然而，具体地概述了不同的文章在介绍中的文章并不总是一个好主意。在某些情况下，特别是对轻心的文章，这可能是有点机械读，可以通过提出太多的信息，对读者的威胁。

你可能会继续这样说：“这篇文章涉及三个主要的全球健康问题：高热量食品的供应，减少体育锻炼，以及日益普及的久坐不动的休闲活动。”对于一个简单的研究论文，概述了主要议题的讨论是一个好主意，因为它允许读者立即理解文章的理由解释在过去的句子的目的。

另一方面，对于你的假期文章，你可能不会以这种方式勾勒出你的文章。既然你已经建立了你的文章是轻松俏皮，这听起来有些奇怪的继续，例如：“通过体验城市生活在圣若泽和农村生活的资本在托土盖罗的丛林里，我像变了一个人在我的旅途中，“这不是一个可怕的句子，但它不流从前面的人因为它奠定了一个严格的刚性结构，不需要。

5、如果有必要，包括一篇论文 。在论文写作中，一个句子是一个句子，这是一个简单的句子，尽可能清晰、简洁地描述文章的“要点”。一些文章，特别是五段为学术作业或是标准化考试的一部分而写的论文，或多或少都要求你将论文陈述部分作为开篇的一部分。即使不需要这篇文章的文章也能从一个大胆的命题陈述的简洁的目的性中受益。一般情况下，在第一段的结尾处或附近包含论文陈述，虽然没有硬性规定，具体地说，论文陈述必须是。

对于你的肥胖文章，因为你在一个临床，简单的方式处理一个严肃的话题和写作，你可能会直接与你的论文声明：“通过分析现有的调查数据，本文旨在找出具体的政策措施，如可能的路径到全球肥胖减少。”这篇论文告诉读者在相对较少的话的确切目的的文章。

你可能不包括一个单一的论文发表声明的度假文章。因为你更感兴趣的是设置一个情绪，讲述一个故事，并说明个人主题，一个直接的，临床的声明，如“这篇文章将描述我的暑假到哥斯达黎加”，将声音奇怪的强迫和不必要的。

6、为你的文章定一个合适的基调。 除了你的空间，讨论你将要谈论什么，你的第一段，也是一个空间，以确定你将如何谈论它。你写的你写的声音是什么鼓励部分（或阻碍）你的读者阅读你的文章。如果在你的文章开始的基调是明确的，愉快的，和适合的主题，你的读者会比如果它的混乱更容易阅读，变化很大，从句子的，或是不在手边的话题。

看一看上面的句子。注意，虽然肥胖作文和假期作文有非常不同的声音，这两者都是清楚地写，并为主题的适当。肥胖作文是一个严肃的、分析性的写作，是一种处理公共健康问题的文章，所以对这些句子有一定的临床和观点是合理的。另一方面，这篇文章是关于一个有趣的，令人兴奋的经历，对作者有重大影响，所以这是合理的句子是一个有趣的小游戏，包含令人兴奋的细节和传达作者的奇迹感。

7、砍去追逐！ 介绍的最重要的规则之一是，更短的几乎总是更好的。如果你能把所有的信息都传达给你，你需要五个句子，而不是六个。如果你可以用一个简单的，每天的话，在一个更不起眼的字（例如，“start”与“initiate”），做它。如果你能把你的信息传达给十个单词而不是十二个，那就去做吧。在任何地方，你可以在不牺牲质量和清晰度的情况下，把你的介绍性通道缩短，这样做。记住，你的文章开始是让读者进入文章的肉，但它的嘶嘶声并不是文章本身的肉，所以保持简短。

如上所述，而你应该力求简洁，你不应该缩短你介绍这么多，它变得不清楚或不合理。例如，在你的肥胖文章中，你不应该缩短这句话：“In fact, childhood obesity is a global problem that is increasingly affecting rich and poor countries alike”。……这句话：“In fact, obesity is actually a big problem、”这句话并不能告诉整个故事，这篇文章是关于全球儿童肥胖的发病率上升，而不是肥胖对你来说是不好的。

我们随机抽取了学术语料库中航空航天学科子库里的50篇期刊文章，摘取了其中的文章首句，做一个简单的文本分析。

经过观察，我们发现，抽取的样本按照其表达的功能，基本可以分为四类，即“声称中心地位”、“评述以往研究”、“概括研究话题”和“提出存在的问题”(Swales 1990)。

1、 声称中心地位，20例(40%)

这一类例句主要强调研究话题在研究领域中的中心地位，或其重要性、优点或必要性，指出将要报道的研究是有意义的、重要的或者已被认为是研究领域内的主要话题。主要例子有：

[1] Structural damage detection and health monitoring is very important in many applications、

[2] Combustion noise can make a significant contribution to overall turbofan engine noise at low-power settings, , which are typical of approach flight、

[3] Research on flow control has been one of the major topics in fluid mechanics in the past couple of decades、

[4] Surface flow visualization is useful for understanding flow in many applications and can be used to complement and validate computational studies of complex flow、

可用的序列有，xxx be important, xxx play an important/a significant role in, xxx be of particular interest等、

2、 评述以往同类研究，15例(30%)

这类例子大多回顾某一研究话题或领域的已有研究或多年来的研究进展。例如：

[5] Over the last number of decades, a multitude of research efforts have been directed toward understanding the physical mechanisms, or at least the surrounding factors, behind the appearance of symptoms typically associated with nonlinear axial combustion instability in solid-propellant rocket motors (SRMs)、

[6] The effects of applying an electric field on a flame have been studied since the early 1800s(1) when Brande noticed an effect on the heat and mass transfer of a diffusion flame between electrodes, which was then later verified in 1931 by Lewis (2)、

此外，这一分类里的大部分例子都使用现在完成时。供参考的短语序列有，xxx has/have been studied, previous/recent studies show/have shown, it has been shown等。

3、 概括研究话题，14例(28%)

在收集的样本中，“概括研究话题”主要指概括或陈述某一研究领域/话题的特征或客观事实。这一类例句中，文章作者大多根据具体的研究话题组织句子，因而并没有典型的句式。

[7] Many flows of technological interest occur at high Reynolds number and are often characterized、

[8] The Hill–Clohessy–Wiltshire (HCW) equations describe the relative motion of a chaser with respect to a target while both vehicles orbit a central gravitational source、

4、 提出当前研究中存在的问题，1例(2%)

只有一例在文章第一句便指出某一技术所存在的问题，见[9]：

[9] Airborne propagation of directed energy suffers consequences including reduced range, precision, and overall effectiveness, due to the interaction with varying refractive indices within the fluid medium through which it is propagated (1–3)、

简单总结一下，在我们所收集的50篇文章中，有40%的文章在开篇第一句强调研究话题/领域的重要性、优点或说明已成为研究焦点;30%的文章首句旨在回顾或评述以往同类研究;28%的文章在第一句中客观概括或陈述研究话题的特性;仅有2%，即1篇文章在首句中指出某一技术存在的问题。

这一数据也说明，我们可以根据自己的研究话题，运用多种形式，灵活组织文章首句的句式和内容。鉴于样本数量有限，以上内容只是抛砖引玉，仅供参考。我们还建议各位小伙伴在阅读文献的过程中注意积累和总结，看一看自己专业领域内的期刊文章，是以何种形式撰写文章首句。如此一来，可以在自己写论文时进行模仿。毕竟，好的开始是成功的一半嘛。

在服务的众多客户案例中有很多客户在自己写作过程中容易用差小词，其实这也不能怪作者的粗心，很多时候不是专业的母语专家，真的很难区分和拿捏小词的运用，正因为如此很多客户由最初的论文协助润色服务变成了论文翻译服务。鉴于大家都存在这样的问题，我整理了网上一些实用的避错技巧，大家可以借鉴一下。 用词要准确 每个科学术语都有其特定的含义, 使用要准确.比如微生物学中经常使用Medium, Broth 和 Culture三个词，但它们之间存在差别. Medium是培养基, 可以是液体也可以是固体;Broth是培养液, 只是液体; 而 Culture 是指细菌和培养液的混合物. 如果要从发酵罐中取样, 那取的样应该是Culture, 而不能用Medium或Broth. 化学中的量和浓度有明确定义, Mole和Molar就大不一样.Molar和Normal对有些是一样的, 对另些化合物则是不同的.物理学中的温度、距离、时间等均有自己的严格定义.科研人员对自己专业的词一般都能较好的掌握, 但对一些普通词汇的使用常掌握不准. 举几个简单例子: 比如, Promote 一般指职位的提升, 不能当Increase来使用. Production was promoted by 16% in the new procedure. 宜改为:Production was increased by 16% in the new procedure. 再比如, Perform表示一个行动，而不指某个具体事物. 浓度不能Perform, 但测浓度可以用Perform. The zinc concentration was performed. 宜改为: The zinc concentration was measured.或Measurement of the zinc concentration was performed. 推理用语的使用 从实验观察和数据到结论的推理过程中，在事实和理论的关系上可能有从“同…一致”,“表示”， “证明”等不同的强弱关系，在选择用词上要合理. 英语中经常使用的词是is compatible with, imply, suggest, indicate, show, prove. 这基本上是一个从弱到强的顺序. is compatible with, is consistent with, in line with表示是个合理的解释, 不矛盾, 但可能还有其他的解释. imply, suggest表示支持现在的结论， 这个结论比其它的更合理, 但不能 证明就是这个结论. ndicate, show, demonstrate就更确定, 表示几乎就是这个结论了. 其他的可能性不大,但还不是百分之百的证明. prove表示完全肯定， 没有任何其他可能性了. 科研中很少有这种情况. 用 prove 要特别注意. 用词要保持一致 论文从头到尾用字要保持一致.比如时间单位的分钟即可以全拼成minutes,也可以简写成min,二者都可以，但只能用一种写法.Figure或 Fig只用一种写法.数字的写法上，如果一个写成fifteen,另一个写成 12 也是不一致。修改论文稿件时应特别注意用词的一致性. 尽量少用简写 作者自己熟悉的简写，读者不一定知道，所以应尽量少用简写. 必需时, 宜于第一次出现全名时在其后用括号标出简写.比如Heat Shock Protein (HSP)、Multi Body Dynamics(MBD). 至于广泛使用的简写, 如ml, AIDS 等可不用写出全名. 不要用缩约语 正式地写作中, 不要使用如didn't, don't, can't, haven't….缩约语. 应该写完整形式, did not, do not, cannot (一个字),have not …. . 避免使用俚语 虽然非英语国家的作者不是很好区分什么是俚语，但还是要注意不要使用像 a lot, sort of, pretty good…的口头用语. 经常使用， 但容易出现问题的小词 在写作中，不同单词可以表达同一种意思，但不同的词语用在不同场景，这就是词语的准确性，比如, Promote 一般指职位的提升, 不能当Increase来使用。而小词，是区别主谓宾等名词外的介词，副词，形容词等虚词，尤其是介词和冠词，诸如And，The，That，Which... Above 经常用来指前面提到过的，表示“ 如前所述 , as discussed above” “ 前面的方法 , the above method” 等 . 但 above 不确定，用起来容易，读起来不易明白 , 容易造成表达不清 . 这时应把所指的事情明确地写出来 . 类似不明确的字还有former, latter. 应避免使用 Adapt, adept, adopt Adapt 是动词，适应 . Adept 是形容词，熟练的 . Adopt 是动词，采用. Affect, Effect, Impact Affect 是动词，影响 (influence) 的意思 . 如 “ 温度对细胞生长的影响, “Temperature affectedthe growth of cells”. Effect 是名词，是结果 (result), 影响的意思 . 有时也可以作动词 , 招致 (bring about) 的意思 . 科技论文中很少使用 effect 的动词形式. Impact 当冲击，碰撞讲 . 如 “ Western popular culture has a huge impact on Asian society ”. 自然科学不同参数的相互影响一般不用 impact 来描写 , 用 affect 或 influence 更合适. Agree to, agree with Agree to 是同意 , giving consent. “I agree to a biopsy test”. Agree with 是一致, in accord. “The results agreewith our previous observation”. Alternate, Alternative Alternate 是交替的，轮流的 . Alternative 是另外的，选择的. And And 是一个非常有用的字 . 它是一个最被经常用到的连接词, 可以连接类似的词 , 词组或句子 . 用 and 连接的词 , 词组或句子是相关联但又各自独立的 . 当排列三个以上的词时，最后的一个词之前加 and . 其它的词后都加逗号. Pollution in the river affected thepopulation of different animals, such as fishes, birds, and turtles. And 之前也可以不加逗号. Pollution in the river affected thepopulation of different animals, such as fishes, birds and turtles. 一般认为 and 之前加逗号是美国写法，不加逗号是英国写法. 用 and 连接句子时，若两个句子都很简单，中间可以不加逗号. One liter of water was added and thesolution was left at 4 o C overnight. 但中间加个逗号也正确. One liter of water was added, and thesolution was left at 4 o C overnight. 两个比较复杂的句子中间一定要加逗号，以便于阅读和理解. The assay was carried out by heating thesample in boiling water for two hours, and the volume of the assay solution waskept constant by adding water. 用 and 来开始一个句子也是可以的 . and 起到对一些相关和并列的描述来连接的作用. AIDS drugs are effective to control thereplication of HIV, but they cannot cure AIDS. And a vaccine for AIDS is stillelusive. Therefore, education and prevention are the most effective weaponsagainst AIDS for now. 用 and 连接两个独立的句子时 , 可以在 and 之前加逗号，也可以不加逗号 . 但连接一个不完整的句子时 , 不能用逗号分开. The sample was added to the testingsolution, and allowed to react in a water bath at37℃for 10 min. 宜改为：Thesample was added to the testing solution and allowed to react in a water bath at 37℃ for 10 min. But 的用法同 and 很类似 ， 只是它连接的句子是对照和相反的 . Apparently (apparent) 有 “ 明显的， obvious , clear ” 和 “ 貌似的， seeming ” 两种用法 . 具体是哪种讲法 , 句子的前后内容可能会有提示 . 在不能确定的情况下 , 应避免使用 , 选用 obvious 或 seeming 更好。 Apparently也是一样，选用 obviously 或seeemingly . Appear Appear 有 ” 出现 , to come into view ” 和 ” 好象 , seem” 两种讲法 , 一般在科技论 文中 , 当 “ 好象 , seem” 的讲法用的要多些 . After cooling down to room temperature,yellowish crystals appeared . It appears that deformation of frogs in theHuiRiveris caused by pesticides. As As 有很多不同的讲法，它有表示因果关系的用途，类似 because 和 since . 但 as 表示的因果关系最弱， since 在中间， because 的因果关系最明确 . 所以不要用 as 来表示因果关系 . 用 because 或since . As 用来表示 “ 同样地 ”, “ 像 … 一样”. The genetically engineered apple tastes asgood as the natural one. As soon as the body temperature reached 39o C, the child has to be sent to the emergency room. 也当 “ 在 … 的时候， when ” 讲. As the snow started to melt, the team wentback into the forest to collect samples. Average, mean, median Average 和 mean 都是平均的意思 , mean是个数学用语 . Median 是一个系列中的中间的那个值. 2, 4, 8, 16, 32 average 和 mean 是 12.4, median 是8. Because, because of 用 because 来表示因果关系是最明确的 . Because 后面写句子， Because of 后面用名词. The tiger population deceased dramaticallybecause their habitat was destroyed. The tiger population decreased dramaticallybecause of loss of habitat. For 和 since 表示的因果关系要弱些 , 用 since 时往往强调的是当时的情况 ， 时间，地点等 . 有中文的 “ 既然 ” 的意思 . As 表示的因果关系最弱. Since the weather is hot and humid, wedecided to take a break. Below 同 above 一样，所指含糊，应避免使用. Beside, besides Beside 是 “ 在 … 旁边 ” ， besides 是 “ 除了… ”. Between, among Between 是两个人或事之间 , among 是两个以上人或事之间. But 同 and 一样 , but 是一个被经常使用的连接词 . 它连接的句子有对照和相反的意思. 在连接比较简单的两个句子，并不影响句子的流畅的时候， but 之前可以不加逗号. He felt better but did not fully recoverafter taking the medicine. 连接两个比较长的句子时候，but 前应加逗号，把两个句子分开. Scientists spent months to figure out whythe satellite did not reach its orbit, but they never find the truth. But 也可以放在句子的开头. For a long time people realize there has tobe a natural ligand for the cannabinoid receptor. But its identity was only elucidatedrecently. 用逗号把 but 隔开是不对的. But , its identity was only elucidatedrecently. Cannot Cannot 是一个字， can not 应写成cannot. Case Case 只是起到填充空间 ( filler) 的作用，没有实质意义 . 应避免使用类似 “ in the case of ” 的词组. Compare with, compare to Compare with 是比较的意思，而 compare to 是比作的意思. It is often to compare the human brain witha computer. The human brain is often compared to ablack box. Compose,consist , comprise Compose 当 “ 组成，构成 ” 讲，是及物动词 . 一般用 “xxx is composed of xxx” 的形式 . 如: An atom is composed of a nucleus and a defined number ofelectrons. Consist 当 ” 有 … 组成 ” 讲，是不及物动词 . 一般用 “xxx consists of xxx” 的形式 . 如: An atom consists of a nucleus and a defined number of electrons. Comprise 当 ” 包括 ” 讲，也有 “ 有 … 组成 ” 的意思 . 到底是什么用法，很容易弄不明白，所以干脆不要用这个字. Continual, continuous Continual 是经常发生的， continuous 是连续和不间断的. Correlated with, correlated to Correlate with 是正确用法， correlate to 是不对的 . Related to 是正确. Different from, different than 事物之间不同用different from ，人物之间不同用 different than. Different from 不能写成different than. Due to Due to 是 ” 应归于 …” 或 ” 有 … 引起 ” 的意思 (caused by) . 后面要跟名词，同 because of 不同 . 但 due to 表达的也有因果关系的意思 . 如果你不是很确定 , 应避免使用 due to ，用 because of 或caused by . Equipment 单数和复数都是equipment ，没有 equipments 的写法. Few, a few Few 是很少 , 强调没有多少 , 有否定的意思 . A few 也是很少 , 但强调有一些 , 虽然不多，有肯定的意思 . Few 形容可数名词， little 形容不可数名词 . Little , a little 的用法同 few, a few 类似. Flammable, inflammable,nonflammable Flammable, inflammable 都是易燃的意思 . nonflammable 才是他们的反义词. Following Following 是形容词，表示 “ 接着的，下述的”. The behavior of the mouse was carefullymonitored in the following days. 它也可以是动词 follow 的名词形式. Following the flood, many wild lives foundnew habitant. Minimal,trivial Minimal 是最小的 , trivial 是轻微的，不重要的。 Percent,percentage , percentile Percent 跟在数字后面，以代替 % , 57 percent (57%). Percentage 是百分率 , percentage 不能同数字一起用 . 可以说 small percentage or large percentage . Percentile 是一个统计学用语 , 表示在 100 个分组中事物出现的机率。 Proven Proven 是形容词， proved 是过去式。 Provided that 连接词，假如 . Providing 是现在分词. Remainder,remaining 都可以当 ” 剩余 ” 讲. Since 有 “ 自从 …” 表示时间的意思，也可以用来表示因果关系，见because . Subsequently, consequently Subsequently 表示时间顺序， consequently 表示逻辑推理结果。 Such as 一般用逗号从主句分开，当such as 后面排列的名词只有 1-2 个时，不影响句子的流畅，可以不用逗号分开 . 排列的事物和概念要相等。 Heavy metals such as lead are especiallytoxic to children. The river is heavily polluted with heavymetals, such as lead, mercury, and cadmium. Than 用 than 来比较的两个对象要一致. Acid A has a lower pKa than Acid B. The water content in sample A is higherthan that in sample B. 有些词代表最终状态，不能进行比较 . 一些这样的词有 full, absolute, complete, unique, extinct, permanent, universal, 等。 That, which That/which 经常用来引导修饰从句 . 如果修饰从句可以省略掉而不影响句子的完整性，也就是非限制性从句 , 用 which, 并用逗号把修饰从句从主句分开. The recovered dogs, which were treated withantibiotics, are released. 如果修饰从句不可以省略掉 ,也就是限制性从句 , 那就用 that ，并不用逗号分开. Dogs that were treated with antibioticsrecovered. 限制性从句和非限制性从句在句子中的作用有很大区别 . 第一句话中，就是指 “ recovered dogs ”, 没有别的狗 . 第二句表示除了 “ Dogs that were treated with antibiotics ” ，还有其他的狗。 Toward,towards Toward, towards 的用法是一样的。美国用 toward , 英国用towards。 Use,using, utilize, employ 我们写作时经常会使用using 这个字，但用 using 时经常会导致同主句的主语名词不一致，应避免使用 . 可用 with 或 by 取代。 Using the reductive reaction, reducingpower of VC was examined. 宜改为: Thereducing power of VC was examined with the reductive reaction. Utilize 是利用 , 有效使用的意思 , 同 use 不同 . 不能相互替代. Employ 雇用人 , 使从事于…. While While 既可以用来做表示时间的连接词， “ 当 … 的时候 ”. 也可以用来表示转折和逻辑的连接词 , 当 ” 然而，虽然，尽管 ” 讲 . 为避免含义不清，用 when 或 although 取代更好。 以上是我从网络摘选过来的内容，质量还是相当高的，对于初写着来说帮助还是很大的，只要认真的避免这些用词上的错误，相信写出来的英文文章肯定会让审稿编辑更满意的，在文章结尾，我也不得不举荐一下专业的论文发表协助公司了《曜文编译》，想要快速顺利分发表SCI论文与一家实力强劲的服务机构合作也是一种明智的选择。