细胞生物学论文发表笔记

激光扫描共聚焦显微镜系统及其在细胞生物学中的应用》 摘要激光扫描共聚焦显微镜是近十年发展起来的医学图象分析仪器，现已广泛应用于荧光定量测量、共焦图象分析、三维图象重建、活细胞动力学参数监测和胞间通讯研究等方面。其性能为普遍光学显微镜质的飞跃，是电子显微镜的一个补充。本文以美国Meridian公司的ACASULTIMA312为例简要介绍了激光扫描共聚显微镜系统的结构，功能和生物学应用前景。 关键词; 激光；共聚焦显微镜；粘附细胞分析与筛选（ACAS） TheLaserScanningConfocalMicroscopySystemanditsBiologicalApplications ChenYaowen,LinJielong,LaiXiaoying,MeiPinchao (ShantouUni.Med.College,CentralLab,ShantouGuangdong515031) AhstractTheLaserScanningConfocalMicroscopyisanewmedicalimageanalysisinstrument,whichisdevelopedinthelastdecade.Nowitiswidelyappliedinsuchfieldsasfluorescentquantitativemeasurement,conpocalimageandlyusis,3-Dreconstruction,Kineticsignalmonitioringoflivingcell,cellcellcommunicationresearches,etc.Inthispaper,ACSAULTIMA312(MeridianCo,USA)istakenasanexampletointroducetheprincipleofconfocalmicroscopy,itsfunetionsandbiologicalapplications. KeywordsLaserConfocalMicroscopyAdherentCellAnalysisandsorting(ACSA) 激光扫描共聚焦显微镜（LaserscanningConfocalMicroscopy，简称LSCM）是近代生物医学图象仪器的最重要发展之一，它是在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置，使用紫外光或可见光激发荧光探针，利用计算机进行图象处理，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图象，以及在亚细胞水平上观察诸如Ca2+、pH值、膜电位等生理信号及细胞形态的变化。已广泛应用于细胞生物学、生理学、病理学、解剖学、胚胎学、免疫学和神经生物学等领域[1、2、3]，对生物样品进行定性、定量、定时和定位研究具有很大的优越性，为这些领域新一代强有力的研究工具。 创建于1983年的美国Meridian公司，在90年代推出的“激光扫描共聚焦显微镜”这一项具有划时代的义意的高科技产品，曾获得美国“政府新产品奖”和两次“高科技领先技术奖”，它能达到每秒120幅画面的高速扫描激光共聚焦观察，可提供实时，真彩色的激光共聚焦原色图象。我院最近引起的ACASuLTIMA312是Meridian公司最新的高科技产品，为同类仪器中档次最高、功能最全的精密仪器。现以该仪器为例介绍激光扫描共聚焦显微镜系统及其在细胞生物学中的应用。 1、激光扫描共聚焦显微镜成像原理及组成 有关共聚焦显微镜的某些技术原理，早在1957年就已提出，二十年后由Brandengoff在高数值孔径透镜装置上改装成功具有高清晰度的共聚焦显微镜[5]，1985年WijnaendtsVanResandt发表了第一篇有关激光扫描共聚焦显微镜在生物学中应用的文章，到了1987年，才发展成现在通常意义上的第一代激光扫描共聚焦显微镜。 激光扫描共聚焦显微镜成像原理如图1所示，激光器发出的激光束经过扩束透镜和光束整形镜，变成一束直径较大的平行光束，长通分色反射镜使光束偏转90度，经过物镜会聚在物镜的焦点上，样品中的荧光物质在激光的激发下发射沿各个方向的荧光，一部分荧光经过物镜、长通分色反射镜、聚焦透镜、会聚在聚焦物镜的焦点处，再通过焦点处的针孔，由检测器接收。 从图1中可以看出，只有在物镜的焦平面上发出的荧光才够到达检测器，其它位置发出的光均不能过针孔。由于物镜和会聚透镜的焦点在同一光轴上，因而称这种方式成像的显微镜为共聚焦显微镜为共聚显微镜。在成像过程中针孔起着关键作用，针孔直径的大小不仅决定是以共聚焦扫描方式成像还是以普遍学显微镜扫描方式成像，而且对图像的对比度和分辨率有重要的影响。 ACASULTIMa312采用快速镜扫描或台阶扫描对样品逐点扫描成像，由于样品中不同的扫描点始终在物镜和会聚透镜的光轴上，因而它以相同的信噪比扫描整个样品，扫描精度达0.1μm，扫描面积最大的为10cm×8cm，当激光逐点扫描样品时，针孔后的光电倍增管也逐点获得对应光点的共聚焦图像，并将之转化为数字信号传输至计算机，最终在屏幕上聚合成清晰的整个焦平面的共聚聚焦图像。一个微动步进马达控制栽物台的升降，使焦平面依次位于标本的不同层面上，可以逐层获得标本相应的光学横断面的图像。这称为“光学切片”。再利用计算机的图像处理及三维重建软件。可以得到高清晰度来表现标本的外形剖面，十分灵活、直观地进行形态学观察。 2、激光扫描共聚焦显微镜硬件和软件系统 2.1ACASULTIMa312硬件及参数指标 激光光源：氩离子激光（50mW的紫外光、999mW的可见光），能同时/顺序/分别输出紫外光和可见光，激发波长为351-364nm；488nm；514nm。 计算机系统：80586/133MHzPCI/80MBRAM/2000MBSCSI硬盘/150MBBernoulli盘驱动器/17’’大屏幕显示器。 共聚焦系统：计算机自动控制光路准调节；计算机控制孔径校准；计算机调节孔径大小；自动Z轴调节（最小0.1μm）。 光学探测系统：3个测窗式PMT采集荧光；1个CCD系统；12位的高速A/D转换器。 图像分辨率：图像大小1535×1535；像素最小距离：0.1μm；灰度为4096级。 扫描方式：快速镜扫描DualScan台阶扫描；扫描精度0.1μm；扫描面积最大为10cm×8cm；扫描平面：XY和XZ和独特点、线、面扫描。2.2激光扫描共聚焦显微镜软件系统 ACASULTIMa312系统采用独特设计的软件将激光细胞仪与先进的计算机技术结合，产生快速、高效、灵活的操作系统，完备的数据采集、分析与管理功能。基于生物医学研究有如下的软件。 ImageAnalyze—对于单色、比色和三色标记的二维荧光图像的定量分析，可产生透射光图像重叠，同时AutoImage可多个区域的自动扫描和荧光定量，以及相同区域的时间顺序扫描。 RatioAnalysis和Kinetics—测定细胞内的离子变化，可有点扫描、线扫描及图像扫描三种测定形式，以监测各种速率的生物反应。 Cell–CellCommunicationandFRAP-相邻细胞的FRAP分析。该软件首先用可光淬灭特异的细胞荧光，然后在多个时间点扫描，此扫描可对单一区域或细胞的多个选择区域，可产生透射光图像并与其它图像重叠。 CellList—储存被选择细胞的位置，即可自动对较大样品进行扫描，又可产生较小样品特异部位的网络位置表，以进行自动的测量、筛选和重复测定。 CellSorting—ACAS具备如下四种分选方式： AblationSort:预选定义一个荧光阈值，然后对特定细胞杀伤。②CookieCutterSort在用户定义的中心点四周切割Cookies。③QuickSort：对已定义的细胞表列，用Ablation或CookieCutter作分选。④ManualSort：直接使用鼠标控制载物台位置及激光脉冲，并杀灭和分选细胞，进行细胞显微外科，染色体切割和光隐阱等操作。 ConfocalImaging—共聚焦分析，可实现Z轴定量，三维立体图像分析（包括SFP模拟荧光处理法，DP深度投影法和SP文体投影法），以及视点移动动画。 3激光扫描共聚焦显微镜在细胞生物学中的应用 3.1定量荧光测量 ACAS可进行重复性极佳的低光探测及活细胞荧光定量分析。利用这一功能既可对单个细胞或细胞群的溶酶体，线粒体、DNA、RNA和受体分子含量、成份及分布进行定性及定量测定，还可测定诸如膜电位和配体结合等生化反应程度。此外，还适用于高灵敏度快速的免疫荧光测定，这种定量可以准确监测抗原表达，细胞结合和杀伤及定量的形态学特性，以揭示诸如肿瘤相关抗原表达的准确定位及定量信息。 3.2定量共聚焦图像分析 借助于ACAS激光共焦系统，可以获得生物样品高反差、高分辨率、高灵敏度的二维图像。可得到完整活的或固定的细胞及组织的系列及光切片，从而得到各层面的信息，三维重建后可以揭示亚细胞结构的空间关系。能测定细胞光学切片的物理、生物化学特性的变化，如DNA含量、RNA含量、分子扩散、胞内离子等，亦可以对这些动态变化进行准确的定性、定量、定时及定位分析。 3.3三维重组分析生物结构 ACAS使用SFP进行三维图像重组，SFP将各光学切片的数据组合成一个真实的三维图像，并可从任意角度观察，也可以借助改变照明角度来突出其特征，产生更生动逼真的三维效果。 3.4动态荧光测定 Ca2+、pH及其它细胞内离子测定，利用ACAS能迅速对样品的点，线或二维图像扫描，测量单次、多次单色、双发射和三发射光比率，使用诸如Indo-1、BCECF、Fluo-3等多种荧光探针对各种离子作定量分析。可以直接得到大分子的扩散速率，能定量测定细胞溶液中Ca2+对肿瘤启动因子、生长因子及各种激素等刺激的反应，以及使用双荧光探针Fluo-3和CNARF进行Ca2+和pH的同时测定。 3.5荧光光漂白恢复（FRAP）--活细胞的动力学参数 荧光光漂白恢复技术借助高强度脉冲式激光照射细胞某一区域，从而造成该区域荧光分子的光淬灭，该区域周围的非淬灭荧光分子将以一定速率向受照区域扩散，可通过低强度激光扫描探测此扩散速率。通过ACAS可直接测量分子扩散率、恢复速度，并由此而揭示细胞结构及相关的机制。 3.6胞间通讯研究 动物细胞中由缝隙连接介导的胞间通讯被认为在细胞增殖和分化中起非常重要的作用。ACAS可用于测定相邻植物和动物细胞之间细胞间通讯，测量由细胞缝隙连接介导的分子转移，研究肿瘤启动因子和生长因子对缝隙连接介导的胞间通讯的抑制作用，以及胞内Ca2+,PH和cAMP水平对缝隙连接的调节作用。 3.7细胞膜流动性测定 ACAS设计了专用的软件用于对细胞膜流动性进行定量和定性分析。荧光膜探针受到极化光线激发后，其发射光极性依赖于荧光分子的旋转，而这种有序的运动自由度依赖于荧光分子周围的膜流动性，因此极性测量间接反映细胞膜流动性。这种膜流动性测定在膜的磷脂酸组成分析、药物效应和作用位点，温度反应测定和物种比较等方面有重要作用。 3.8笼锁—解笼锁测定 许多重要的生活物质都有其笼锁化合物，在处于笼锁状态时，其功能被封闭，而一旦被特异波长的瞬间光照射后，光活化解笼锁，使其恢复原有活性和功能，在细胞的增值、分化等生物代谢过程中发挥功能。利用ACAS可以人为控制这种瞬间光的照射波长和时间，从而达到人为控制多种生物活性产物和其它化合物在生物代谢中发挥功能的时间和空间作用。 3.9粘附细胞分选 ACAS是目前唯一能对粘附细胞进行分离筛选的分析细胞学仪器，它对培养皿底的粘附细胞有两种分选方法：（1）Coolie-CutterTM法，它是Meidian公司专利技术，首先将细胞贴壁培养在特制培养皿上，然后用高能量激光的欲选细胞四周切割成八角形几何形状，而非选择细胞则因在八角形之外而被去除，该分选方式特别适用于选择数量较少诸如突变细胞、转移细胞和杂交瘤细胞，即使百万分之一机率的也非常理想。（2）激光消除法，该方法亦基于细胞形态及荧光特性，用高能量激光自动杀灭不需要的细胞，留下完整活细胞亚群继续培养，此方法特别适于对数量较多细胞的选择。 3.10细胞激光显微外科及光陷阱技术 借助ACAS可将激光当作“光子刀”使用，借此来完成诸如细胞膜瞬间穿孔、切除线粒体、溶酶体等细胞器、染色体切割、神经元突起切除等一系列细胞外科手术。通过ACAS光陷阱操作来移动细胞的微小颗粒和结构，该新技术广泛用于染色体、细胞器及细胞骨架的移动。 4、结语 激光扫描共聚焦显微镜是近十年发展起来的医学图像分析仪器，与传统的光学显微镜相比，大大地提高了分辨率，能得到真正具有三维清晰度的原色图象。并可探测某些低对比度或弱荧光样品，通过目镜直接观察各种生物样品的弱自发荧光。能动态测量Ca2+、pH值，Na1+、Mg2+等影响细胞代谢的各种生理指标[9]，对细胞动力学研究有着重要的意义。同时激光扫描共聚显微镜可以处理活的标本，不会对标本造成物理化学特性的破坏，更接近细胞生活状态参数测定。可见激光扫描共聚焦显微镜是普遍显微镜上的质的飞跃，是电子显微镜的一个补充，现已广泛用于荧光定量测量，共焦图像分析，三维图像重建、活细胞动力学参数分析和胞间通讯研究等方面，在整个细胞生物学研究领域有着广阔的应用前景。

书里面有，还有多写试卷就行了！

西北农林科技大学细胞生物学考研经验?

个人信息简单介绍一下

总分362，政治72，英一73，727考了110，830考了107。最后初试第三，复试第一，总分第一成功上岸（微生物所）。自己总结了一些学习小经验，分享给大家，希望对大家的备考有一丝帮助！

目录：

一、专业课备考经验

二、英语80＋复习规划

三、政治复习建议

四、总结

详细经验分享：

一、专业课备考经验

（一）心得体会

一路走来从普通二本院校考入目标院校，很感谢自己曾经的努力让自己能圆梦西农。所有学校的考研科目大体相同，都是英语、政治、专业课一、专业课二，但是内容有所不同，尤其是专业课，针对不同院校而言，专业课所考察的内容都是不同的，所有参考书内容均以目标院校(所考学院官网)为主，前期搜集院校资料以及学院信息非常重要(主要包括:参考课本、录取人数、研究方向)，究竟如何解剖这些信息，接下来以西农为例进行分享:参考课本:主要关注第几年，第几版，谁编著的等。录取人数:主要关注近几年学院录取人数，同时关注录取人数中学生的学校出身(是否与自己有相近的)，关注推免人数(推免:各项成绩优秀，获得免统考资格的学生)和统考录取人数等。研究方向:关注老师最近几年发表的论文，以及承担的项目。

（二）专业课备考情况

1、首先是参考书目，830生化要求的是朱圣庚老师的《生物化学》（第四版）和朱玉贤老师的《现代分子生物学》（第五版），我还参考了杨sir的《生物化学原理》（第三版），郑用琏老师编写的《分子生物学》。727细胞要求的是刘组洞老师的《遗传学》（第三版）以及翟中和老师的《细胞生物学》（第三版），但是我主要使用的是第四版的，期间参考了一下第五版和第三版，个人觉得可以不用看第三版了。

推荐参考书目：

1）《细胞生物学》（第5版）

2）《细胞生物学-辅导与题解》何玉池主编

3）《生物化学》（第四版）陈钧辉、杨荣武主编

727细胞的考法比较固定，是十个名词解释每个10分（其中头两个是前沿的名词），然后是五道主观论述题每题20分。其中20%的遗传就正好占两个名词解释一个大题总共30分。而830生化的题目每年波动非常大，整体趋势是也是减少客观题的数量，增大主观题的比重。这几年已经完全没有客观题了，而21这一届更是考了15个10分的主观题，连名词解释都给删了，据我所知上次考还是十五年前，连名词解释都给删了。

2、其次就是学过的知识要有极强的概括能力。

第一点，想要对基础知识扎实掌握，你首先要能够完全理解各个知识点，生化的内容我可以负责任的说只要用心没有一个难理解的，哪怕是很多人头疼的米氏方程的推导（实际上也不难），这要求你在第一轮过视频课的时候把每一个知识点用心理解并记忆，这里千万不能听懂了就过去了，要记录下来，最好能做到脱离视频，独立写出整体的框架并且不断细化，这样你第二遍来的时候就可以节省大量的时间。而基础则包括本科老师上课讲的全部全部内容，不要觉得多，这是底线，一点都不能马虎。比如今年生化就考了个酶活的定义、His—57等。

之后就是牢固的直接记忆。有的人理解了就再也不会忘了（然而我不是，我反正很多知识点都是背了忘忘了背，因为复习范围太大，不使用的话是真的不容易长期记忆），或者说理解了哪怕遗忘了也可以慢慢推出来，但是你是准备考研，最终还是要为考试服务的，理解是为了更好的背诵，你哪怕到时候可以根据理解推导一些方程，也不如你直接背诵记住写下来快（高中化学老师让我们不要现场配平，直接记结果，生化也一样的），当时十五个主观题真的写的手都要断掉了，时间是真的紧张。因此，足够的背诵量是必不可少的，但是你们也不必太过担心背的脑阔疼，下面是我正式背书的周期，实际上好像也没背多久(其中还有不少时间用来背政治和英语作文)。

第二点，极强的概括能力。为什么会突然冒出这个呢？因为浙大的题目突出一个大，突出一个宽泛，你在做题目前还要先猜一猜老师到底想问你什么，那么多东西你要怎么给他写上去，要写多少上去，毕竟这是考试不是让你背课本（然而憨憨浙大的出题方式就是把书本上的一个标题拿下来但当题目，几乎就是背课本了）。而且你就算把课本背下来了也要来得及写上去。我这里就举几个真题的例字吧。

3、最后是遗传学，遗传学是新加进来的，算上今年总共就考了两年，所以没有什么题目可以参考，如果从考完的角度来分析，我当时的复习策略算是最高效的办法了。我当时的复习策略是，跟着复旦的mooc将里面提到的所有名词记下来，作为名词解释，然后对于里面一些重点的论述题目记下来作为大题的准备。然后就是在浙大往年本科遗传考试试卷中选一些看着可能考的题目记录下来，最后总共就写了三四张a4纸吧（不算多），里面就包含了今年考到的两个名词解释，以及大题的绝大部分。可惜当时讲母体效应基因的老师我不喜欢，没有认真听，自然也没有好好背，而背书的时候也没有坚定执行之前的计划，并没有将所有记录下来的都背了，最后只是选择性的背了几个，然后好巧不巧重点背的那个名词下面一个就正好是定位克隆（唉）。这一个一部分是因为对遗传学重视程度不高，另一个就是后期政治英语挤占了不少的时间。

二、英语80＋复习规划

（一）2022年9月-2023年1月

1、英语单词：英语单词是英语备考的关键，背单词要贯穿整个备考过程。

背单词顺序：核心词～大纲词汇～真题词

方法：A4纸背单词、anki背单词、墨墨背单词

建议大家可以睡前去读一些英语文章，可以关注公众号〔经济学人考研英语〕，睡前读一些里面的英语文章，对之后的长难句、词汇和语感会有很大的帮助和提升。

2、语法长难句：议基础差的姐妹一定要先把语法的基础打好，在早鸟备考阶段一定要先打好语法长难句的基础。

语法长难句老师：

1）田静：配套书籍《句句真研》英语整体基础差的姐妹建议听田静老师的课程，全程无废话满满干货!

2）刘晓燕：《不就是语法长难句吗》语法基础薄弱的姐妹建议听刘晓燕老师的语法课，讲课方式通俗易懂，一共是23节课，认真听完收获一定不少。

（二）2023年1月-3月

2023年3月前，英语单词至少要过完一遍，因为从3月开始，如果单词还不行，那阅读理解也达不到高质量刷题。

主攻：阅读理解

真题卷：（建议只入近10年真题即可）张剑黄皮书、考研真相、星火英语、百词斩等。

3月份就可以慢慢开始刷真题卷了，只做阅读理解，每天保持一篇。开始刷阅读真题前，一定要先看阅读方法论（阅读技巧课）！方法论老师：唐迟、颉斌斌、monkey老师等。

（三）2023年3月-9月

阅读真题过完第一轮，同时开始备考政治，英语单词贯穿备考全程不能断。

（四）2023年9月-考前

9月开始要进入大作文和小作文的学习，英语一和英语二都一样，写作部分是除了阅读理解之外分值最高的，且短时间内容易提分。

作文可以参考的老师有：大作文：潘贇九宫格；小作文：石雷鹏

小三门：翻译：唐静老师；新题型：刘琦老师；完形填空：易熙人老师。

三、政治复习建议

（一）经验：买了肖秀荣的《1000题》，再就是跟了徐涛的课程，只听了一遍，一定要讲究效率，因为时间很宝贵，认真听，学会了认真复习，没有太大的问题把知识点挑出来背诵下来，一天题我大概刷了两遍，第二遍是挑的以前的错题进行重复做题，并背诵知识点。大题的话，先不用准备，根据课程和参考书了解即可，11月份会出许多模拟卷我把徐涛的模拟卷《肖四》《肖八》都买了，把模拟题当做考试来做题选择题的知识点一定要全部背诵下来，至于大题，我背的肖四的所有大题，还有其他老师押的题，我对比着进行背诵了。这个时间很短，任务量很重，一定要讲究效率，使劲背。专业课的也不要忘，每天要进行复习背诵。

（二）时间规划：

准备阶段(年前-2月)

1、了解考试常识。比如:近几年政治国家线的分值、了解试卷的题型分值等。

2、了解学科常识。考研政治貌似是一个科目，事实上其考试内容涵盖于马克思主义基本原理概论、毛泽东思想和中国特色社会主义理论体系概论、中国近现代史纲要、思想道德修养与法律基础、形势与政策以及当代世界经济与政治这五大部分。

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基础阶段(3月-6月)

1.学习目标:对考试题型、每本书分数的设置能有个整体印象

⒉阶段重点:了解基础知识

3.复习建议:

1)同学们可以买—本考研政治的辅导书将其从头到尾扫一遍。这本辅导书，最好是比较精炼而又全面的那种，提纲挈领又不遗漏任何知识点，主要是为了对考研政治的内容有一个全面的了解。也可以直接看去年的大纲，大纲一般变化不会很大。

2）多余时间可以去翻阅以前大一、大二时期学过的教材，了解—下考研政治的基础知识。

3)这个阶段多关注时事热点，可以抽空看看央视的新闻联播和《人民日报》，上上主流网站。

4)不建议大家在这个阶段做习题集，收效甚微，习题还是留给暑假再练习吧。

5)每天30分钟到1小时足矣!

强化阶段(7月-8月)

1.学习目标:通过做题区分知识点的重要程度，攻克难点

2阶段重点:政治选择题知识点

3.复习建议:

1)开始做题，搞定难点。做试题方面，不要着急看答案和算分数。做试题的目的是让我们了解自己对于知识点掌握多少，提高巩固的作用，所以重点再看应该如何解析，掌握解题思路。

集中精力，学会分析问题思路。通过此阶段的复习，应当在充分理解知识点内涵的基础上，明确一级重要知识点。

提升阶段(9月-11月)

1.学习目标:熟记每个章节—级重要知识点

2阶段重点:了解新大纲，补充新知识点

3.复习建议:

1)在进行习题练习时，可以完整地做2~3套试题，不用规定时间。一方面体验一下试题的命题风格;另一方面深入研究一下历年命题的特点和重难点，以便及时调整自己的复习策略。

2）总结做过的选择题，尤其是出错的题。

3)开始看分析题的考点。做分析题时，要理清答题思路和框架，不建议去背答案。另外做题不能仅局限于题目是否做对，更重要的是学会解题的思路和技巧，特别是对这个题目的命题知识点的理解。

4)大纲出来之后，新增的考点一般都需要重点记忆。

冲刺阶段(11月-12月)

1.学习目标:对重点和考点知识进行强化记忆，查漏补缺

⒉阶段重点:政治分析题知识点、时政、当代

3.复习建议:

1)从11月份开始，请开始背!背!背!不管是选择题还是分析题的重点，一定要清晰地记忆。

2)开始系统复习时政和当代。

3)查漏补缺，复习以往错题集。在回顾的过程中找出之前复习时被遗漏的，理解不够深入不够全面的考点。要及时的弄清楚，想明白，争取做到，考前不落知识点，或许你落下的一个就是考点，所以同学们一定要注意在回顾知识点的时候认真梳理。

4)建议每天2h以上。

考前一周

1.学习目标:熟悉考场流程，牢记大题知识点

2.阶段重点:背诵卷分析题和时政热点，进行模拟考试

3.复习建议:

1）每天背诵卷分析题知识点和时政知识点，复习笔记。

2)这个阶段要做一套模拟试题，做完以后要系统总结，看看是哪个知识点还没掌握，注意自我分析找出弱项，最后集中力量攻克。

3）最后三天就不要模拟考了，没有太大的意义，万—考的不好还会影响状态。

四、总结

考试前的注意：其实考试前没有太多所要注意的，不要把考试太放在心上每天还是按照自己的计划和任务进行学习就行，不用加大任务量，或者是自己放假，就按部就班就好。考前会很紧张，这个时候你可能学不下去，可以做一做选择题，背一背大题，把心态放好，不要太担心，只要你认真努力了，一定会行的。还有就是考前一定要注意饮食，不要吃坏肚子，尽量不要生病，注意保暖。

考研的过程很艰辛有高兴也有失落，迷茫非常复杂的一个过程，都需要我们去经历你要知道努力结出的果实才是最甘甜的，为自己的未来拼搏一回，一切付出都是值得的，奋斗吧考研人们，祝你们一战上岸！