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大概是本世纪初在国内引介兴起的，04年的时候李克东发表在电化教育研究上的一篇文章算是比较早介绍的。这两年已经不新鲜了，你可以到知网上查一下，从论文数量上就能看出这种趋势。应用的例子很多：课上讲了些内容，课后让学生到专题学习网站阅读讨论等就是一种混合了。
参考1 邓小荣．高中数学的体验教学法〔J〕．广西师范学院学报，2003（8）2 黄红．浅谈高中数学概念的教学方法〔J〕．广西右江民族师专学报，2003（6）3 胡中双．浅谈高中数学教学中创造性思维能力的培养〔J〕．湖南教育学院学报，2001（7）4 竺仕芳．激发兴趣，走出误区———综合高中数学教学探索〔J〕．宁波教育学院学报，2003（4）5 杨培谊，于鸿．高中数学解题方法与技巧〔M〕．北京：北京学院出版社，19931、《计算机教育应用与教育革新——’97全球华人计算机教育应用大会论 文集》李克东 何克抗 主编 北京师范大学出版社 1997 2、《教育中的计算机》 全国中小学计算机教育研究中心（北京部）1998 3、林建详编：《CAI的理论与实践——迎接21世纪的挑战》 全国CBE 学会第六次学术会议论文集 1993 北京 北京大学出版社。 [1] 参见D. A. Drennen, ed., A Modern Introduction to Metaphysics, New York: Free Press of Glencoe, 1962。 此书是一本从巴门尼德到怀特海的著作选集，按形而上学中的问题分类。 [2] 参见R. G. Collingwood, An Essay on Metaphysics, Oxford: Clarendon Press, 1940。此书正文的第一句话是：“要讨论形而上学，唯一正派的、当然也是聪明的方式就是从亚里士多德开始。” [3] 《形而上学》，982b14-28。 [4] 引自《古希腊悲剧经典》，罗念生译，北京：作家出版社，1998年，49页。 [5] 亚里士多德：《形而上学》，985b-986a，昊寿彭译，北京：商务印书馆，1981年，12-13页。 [6] 参见若-弗·马泰伊：《毕达哥拉斯和毕达哥拉斯学派》，管震湖译，北京：商务印书馆，1997年，90页以下；《古希腊哲学》，苗力田主编，中国人民大学出版社，1989年，78页；汪子嵩等：《希腊哲学史》第1卷，人民出版社，1997年，290页以下。 [7] 《古希腊哲学》，78页。 [8] 《毕达哥拉斯和毕达哥拉斯学派》，115页以下。 [9] 同上书，125页。译文稍有改动。 [10] 《希腊哲学史》第1卷，290页。 [11] 亚里士多德：《论天》，引自〈希腊哲学史〉第1卷，283页。 [12] 《毕达哥拉斯与毕达哥拉斯学派》，107页以下。 [13] 巴门尼德的话可以简略地表述为：“是是，它不能不是”，因为“存在”与“是”在古希腊和大多数西方语言中从根子上是一个词，如英文之“being”与“be”。 相关性：毕业论文,免费毕业论文,大学毕业论文,毕业论文模板
教育学一级学科简介 经过长期建设，教育学一级学科已形成了稳定的研究方向，方向设置及结构合理，各方向都具有较鲜明的特色和一定的优势，各方向之间具有较强的内在关联性与互动性。整个队伍团结向上、生机勃勃，学术水平提高较快，发展潜力巨大。近8年来，学科建设和队伍建设取得重大进展，形成了一支年龄结构合理、学历层次较高的学术梯队。学术带头人扈中平、李克东、黄甫全、冯增俊等多位教授长期潜心于科学研究，治学严谨、成果显著，具有较大的学术影响。该学科科研项目多、科研经费充足、科研成果丰厚、工作条件良好。研究生课程设置及教学内容具有前沿性和先进性，人才培养质量较高，毕业研究生受到用人单位普遍好评。 一、学科队伍 教育学一级学科现有教育学原理、教育技术学、课程与教学论、比较教育学、教育史、学前教育学、成人教育学、高等教育学、职业技术教育学、特殊教育学等10个博士点。教育学一级学科范围内现有高中级专业技术人员共109人，其中有正教授38名、副教授47名，讲师24人；有博士生导师13名，具有博士学位的教师30名，另有29名教师在职攻读博士学位。学科成员除了来自国内外十余所大学之外，还有美国、德国、英国、日本等国留学的博士，学缘结构优化。长期以来，本学科始终保持着一支相对稳定、团结协作和充满活力的学术队伍，具有持续不断进行高水平教学与科研工作的能力，在学科领域的若干方向涌现出多位年富力强、研究成果比较突出的学术带头人。 二、学术研究 本学科通过长期的建设与发展，在教育学10个二级学科之下形成了6个稳定的研究方向：教育基本理论研究，现代教育技术研究，中小学课程与学科教学论研究，教育现代化国际比较研究，中外教育史研究，高等教育研究等。 教育技术学是国家级重点学科，国家211工程重点建设学科；教育学原理是省级重点学科，校211工程重点建设学科。近5年来共获各级各类科研项目322项，其中国家及国务院各部门项目67项，获各种科研经费2176万元，出版专著116部、译著19部、教材31部，发表论文2728篇。在国外学术刊物和国际会议上发表论文62篇，其中被国际权威科学索引sci收录1篇，国际权威工程索引ei收录1篇，国际权威科学会议索引istp收录2篇，国际权威人文社会科学索引ssci收录4篇，国际教育科学权威索引eric收录4篇。有2篇论文被《新华文摘》全文转摘。获各级科研成果奖183项，其中国家级奖6项、省部级奖49项、全国高校人文社科奖3项。 本学科在教育基本理论研究，现代教育技术研究，中小学课程与学科教学论研究，教育现代化国际比较研究二级学科方面，也逐步形成了一定的研究特色： 1、在教育基本理论研究方面，本方向现为全校8个省级重点学科之一、校211工程建设学科。同时在全国具有较强的学术竞争力和较大的学术影响力，从八五开始共获得13项全国教育科学规划科研项目，8项教育部科研项目，21项省级科研项目，多项成果获得国家和省级奖励，其中，《教育目的论》获第三届中国高校人文社会科学研究优秀成果二等奖、全国第二届教育科学优秀成果二等奖，《知识发生过程和人的思维发展》获全国首届教育科学优秀成果一等奖，《数学思维教育》获全国第二届教育科学优秀成果二等奖，所主持的素质教育工程实验项目获全国首届师范院校基础教育实验研究成果一等奖，《挑战与应答——20世纪的教育目的观》所属丛书获第十届中国图书奖，《自主权。竞争。特色化——高等教育未来发展的选择》获广东省第六次哲学社会科学优秀成果二等奖，《马克思主义教育思想论纲》、《主体性教育论》和《中国教育两难问题》分获广东省中青年优秀社会科学成果专著类一、二等奖，《教育学原理》被列为国家八五重点图书，《现代教育理论》获2002年全国普通高等学校优秀教材二等奖。本方向学术带头人扈中平教授现为全国教育基本理论专业委员会主任委员、全国教育学研究会副理事长、中国教育学会常务理事、广东省教育学会副会长，享受国务院政府特殊津贴。 2、在现代教育技术研究方面，本方向自1986年以来一直是广东省重点学科，1996年经原国家教委批准建立我国高校第一个多媒体教学软件制作与培训基地，1997年被列为国家211工程重点建设学科，2002年成为国家级重点学科。科研和教学整体水平在全国处于先进行列，某些领域处于领先水平。5年来承担了多项国家级和省部级重大科研项目，获多项国家级和省部级奖项。具有一流的教育技术实验室，经费充足；国际学术交流活跃，承办过多次大型国际学术会议，与联合国儿童基金会、联合国教科文组织亚太地区办事处、新加坡教育部科技署、美国犹他大学以及港澳台地区高校开展了广泛的国际合作项目研究。学科带头人李克东教授是我国教育技术学领域的权威专家之一，具有深厚的学术造诣和广泛的学术影响，享受国务院政府特殊津贴。 3、在中小学课程与学科教学论研究方面，课程与教学的基本理论研究在国内有较大影响，在台、港、澳亦有一定声誉；英语语料库语言学理论研究在国内处于前沿水平；数学课程与教学轮研究、思想政治课程与教学轮研究、科学教育课程与教学轮研究以及艺术教育课程与教学轮研究等方面，在全国也达到了较高水平。本方向多项成果获重要奖项，如《大课程论初探——兼论课程（论）与教学（论）的关系》等2项成果2002年获第三届中国高校人文社会科学研究优秀成果三等奖，《中学生科学素质研究》1998年获全国师范院校基础教育改革实验研究项目优秀成果奖。本方向近5年有5篇论文收入国际权威索引sci，4篇论文被收入国际人文与社科权威联机检索网络ssci，4篇论文被收入国际教育科研联机检索网络eric.在国际科学教育权威刊物《research in science education》、《science education》、《british journal of educational psychology》和《international journal of science education》上发表论文5篇。博士生导师黄甫全教授现为中国教育学会课程专业委员会常务副主任，博士生导师高凌飚教授被聘为教育部基础教育课程改革组核心成员。 4、教育现代化国际比较研究方面，早在80年代，朱勃先生等老一辈学者就为本研究方向打下了良好的基础，在全国享有较高的学术声誉。近些年来，在一批年轻学者的努力开拓下，学科水平又有了较大的发展，并形成了较明显的特色和优势，尤其在东南亚教育、港澳台教育和珠江三角洲教育的比较研究方面，在全国具有较高的学术地位。近5年来，本研究方向承担了5项全国教育科学规划课题、2项教育部课题和18项省级和厅级课题，出版专著25部、教材4部，发表论文500余篇；获各项科研奖励14项，如《教育人类学》获1998年获第一届中国高校人文社会科学研究优秀成果三等奖，《当代西方学校道德教育》1998年获广东省第六次哲学社会科学优秀成果二等奖，1999年又获全国第二届教育科学优秀成果二等奖，《初论德国的非国立高等教育》获广东省第六次哲学社会科学优秀成果三等奖。学科带头人冯增俊教授现为全国比较教育研究会常务理事、南京师范大学比较教育专业特聘博士生导师，享受国务院政府特殊津贴。 三、教学与人才培养 本学科在教学与人才培养方面师资队伍整齐，课程门类齐全，具有比较丰富的培养博士生、硕士生的经验。导师组成员严谨治学，严格要求学生，注重培养质量，取得了良好的教学和人才培养效果。比如以99级博士生为例，近两年来，99级博士生共发表学术论文23篇，被istp收录的有2篇，获国家级优秀教学成果一等奖1项。 四、支撑学科 在学科门类（即教育学）中，华南师范大学现有心理学一级学科博士点和体育人文社会学二级学科博士点。发展与教育心理学是国家级重点学科、应用心理研究中心是教育部省属高校人文社会科学重点研究基地，有教育心理学省重点实验室。此外，与教育学有较密切关系的博士点还有马克思主义与思想政治教育。
摘要： 1一 绪论 21.1问题的提出 2二 系统概述 42.1 本系统主要完成的功能 42.2 系统预览图 4三 系统需求分析 5四 系统设计和架构 64.1 系统设计思想 64.2 系统结构设计 64.3 系统功能模块细分 74.4 数据库的设计、生成与配置 74.5 公用模块的编写 124.6 个人用户界面设计 274.7 企业用户界面设计 43五 总结 45六 致谢 45七 参考文献 46摘要：随着网上信息的发展，网上在人们生活中的应用越来越广泛。 招聘网站为应聘者提供了方便、快捷的应聘途径。对招聘单位来说，招聘网站也为他们提供了查询、检索应聘者信息库的条件，使招聘工作中的人员初选工作变得轻松易行。此系统的开发为应聘者及招聘公司带来了很大的方便和经济，使他们足不出户就可以轻轻松松地完成求职和招聘工作。本系统开发的核心内容就是实现招聘时企业和人才的交互选择，这个交互可以理解为企业本身的信息，企业的招聘信息、人才本身的信息及人才的求职信息4个方面，同时，为了更好地实现这些交互，还需要提供一些附属的栏目，如站点新闻、政策法规等，以便于信息的传递。关键字:人才,求职Abstract:With the on-line information on the development of the Internet in people's lives more and more applications. To recruit candidates for the site provides a convenient, fast way to the candidates. On the recruitment unit, the recruitment Web site also provided them with information, retrieve information base of candidates, so that the recruitment of staff in primary easily become easier. This system for recruiting candidates and bring a lot of convenience and economy, leaving home so that they can easily complete the job search and recruitment.Development of the system is the core of the realization of corporate recruitment and talent of interactive options, this interaction can be understood as its own business information, business recruitment, personnel information and its own personnel seeking information 4, at the same time, in order to better To achieve these interactions, but also need to provide some of the subsidiary's columns, such as news sites, such as policies and regulations in order to facilitate the transfer of information.Keywords: human resources, job-seekers人才的招聘是企业认识管理中的重要环节，涉及到企业工作人员的整体素质水平，而以往人才的选择往往是十分繁琐的，不计其数的简历的审阅将耗费大量人力，网上招聘方式与传统招聘方式的不同主要体现在：第一，节约成本，应聘者无需奔波于招聘现场，印制并投放多份简历，企业在审阅简历时直接从计算机上调用对比，大大降低人力成本；第二，便于建立简历电子人才库，以备不时之需。网上招聘求职方式已经成为了招聘求职的一大重要手段，其招聘求职规模和招聘求职成功率已直逼传统招聘会，有的甚至超过了传统招聘会。通过它应聘者和招聘公司/单位可以在网上上通过Internet，突破时间和空间的限制而实现工作求职和公司/单位的人才的招聘。网上招聘的崛起对传统人才招聘流通体系产生了强烈的冲击，网上招聘较之传统招聘具有招聘范围广，信息量大，可挑选余地大，应聘人员素质高，招聘效果好，费用低，获得了越来越多的公司的认可优势，同时它有着经营成本低、库存是虚拟的、用户检索方便、地域限制少等特点。本系统开发的核心内容就是实现招聘时企业和人才的交互选择，这个交互可以理解为企业本身的信息，企业的招聘信息、人才本身的信息及人才的求职信息4个方面，同时，为了更好地实现这些交互，还需要提供一些附属的栏目，如站点新闻、政策法规等，以便于信息的传递。一 绪论1.1问题的提出在当前的市场环境中。随着社会的进步和技术的发展，知识正在发挥着很大的作用，市场的竞争在很大程度上体现为人才的竞争。从而。找到合适的人才,成为企业提高竞争力的一项关键任务。同时。当今的市场环境又是一个快速变化的环境，市场需求在变，对人才的需求也相应处于变化之中。如何能快速适应这一变化，提高人才招聘流程的工作效率，进行快速定位，也就成为人才招聘公司/单位需考虑的重要因素。无论是对于企业的人力资源部门的招聘服务，还是职业中介的跨地域供需信息沟通，或是对外的劳务输出等等。作为一种服务类型，其服务对象均包含需方驱动特点。其所达到的招聘人员的效率和效果是其存在的价值和理由。对于中介服务的另一个服务对象。即供方，寻求合适工作的各地人士。也同样关注是否能快速获得职位需求信息和条件要求等等。所有这些，都产生着对信息系统的需求。而且也只能通过信息系统才能实现基于对人才招聘市场的理解和需求研究。为了满足市场对于人才招聘解决方案的需求，推出了网上人才招聘解决方案。作为一种专业化的业务流程改进工具，有效地解决了人才招聘工作效率和效果改进提升中所面临的问题。本毕业设计，就是为了适应现代求职/招聘方式而做出的一种尝试。本系统采用ASP这种服务器端的开发环境以及Windows XP的操作系统为工作平台，同时借助Microsoft Access2000这一强大的数据库管理系统来实现本毕业设计。1.2本文研究路线网上招聘系统是利用网上构建的网上招聘系统，它涉及了网上应用这一学科。一个网站的建设，首先应该从功能出发。功能是网站的目的所在，为了“个性”而牺牲功能上的需求，那就舍本求末了。通常功能上的需求无非有：(1)能够明确的表达一个网站的主题。(2)能够容纳多种形式的内容。要开发一个优秀的网站，通常应该遵循以下工作流程：首先定义开发网站的目的；接下来对网站的外观进行设计；其次进行实际页面的制作；然后对所制作的网站进行测试，以确保它符合最初设定的目标；最后是将网站发布。在将网站发布后还需要有维护工作，以便及时更新网站内容。所以要做出一个出色的网上招聘系统要做到以下要求。首先，对人才市场网上招聘的定义、特征和优势的了解是必不可少的。其次，系统网站的规化、网站构建的目标和市场需求调查分析、网站设计与管理的可行性分析以及网站设计与管理的解决方案的深入分析也是不可少的。再次，网上招聘系统网站运行平台的构建、服务器选择、ASP软件和数据库的知识更是实现网上招聘的基础。上述的网站运行环境及其软硬件平台的实现，是概括的和基础性的，也是构建网上招聘系统的基本思路。通过网上求职/招聘这一示范主题，将网站的互动性、美观性与实用性完整地呈现出来。1.3主要内容及意义主要针对人们对网上招聘系统的需要，采用ASP技术使人们轻松自在的实现在网上用户注册、简历的投放和查找、查看录用状态、查看用人单位、留言等。本论文分为6部分，分别为：绪论、系统概述、需求分析、系统设计和架构、数据库的设计与生成极其配置、功用模块的编写、个人用户界面设计、企业用户界面设计、总结部分。绪论部分，主要介绍了问题的提出，以及开发该系统的必要性和该系统研究路线。系统概述部分，主要介绍系统功能与应用背景、系统预览图。系统需求分析部分，主要介绍系统功能需求描述、管理流程和数据流程图。系统设计和架构是具体工作实现部分，其内容是系统实现的具体指导，分为系统设计思想、系统结构设计、系统功能模块细分三部分。系统的安装、测试与调试部分，重点是介绍IIS5.0的安装及调试和网上系统怎样在IIS5.0下的浏览及系统的调试和测试。总结部分，主要是总结系统过程中的经验，完成了那些功能，有那些地方不同于别人或运用了那些先进技术以及系统还存在那些缺点和不足。二 系统概述2.1 本系统主要完成的功能如下: 企业招聘 人才求职 用户注册(企业用户与个人用户) 用户登陆(企业用户与个人用户) 人才新闻 人才测评 人才培训 政策法规 收费标准 给我留言 友情链接 站内搜索(可根据职位,人才,区域,关键字等来查询)2.2 系统预览图三 系统需求分析① 功能需求：为了满足市场对于人才招聘解决方案的需求，尽可能减低成本，为更多的人创造更好的就业条件，也为企业招聘带来便利。② 性能需求：1、硬件需求：cpu :inter pentuimII 或等效处理器、300MHZ或更高内存：96MB 可用内存 硬盘：275MB以上可用磁盘空间显示器：可达800×600像素的256色显示器或更高2、软件需求：操作系统windows 98/2000/NT(或更高版本)浏览器：netscape navigator4.0或microsoft internet explover4.0或更高本四 系统设计和架构4.1 系统设计思想①页面模块化本系统把页面中一些常用的部分集成为模块，例如页面的头和尾部分这样在设计新页面时如有重复出现的部分，只需要拿现成的模块来组装。②流程人性化程序的流程完全遵守人才市场招聘的流程。首先注册，在注册完成后写个人基本信息，而后在填写职业经历和个人业务水平等信息，同时企业注册完成后填写、企业基本信息，而后在填写所需职位的名称、需求、报酬等，最后填写联系方式。这样的流程便于使用者快速熟悉整个系统的流程，完成求职或者招聘。③功能全面化程序在设计时不仅考虑到基本功能——人才招聘的实现，同时作为一个网站程序，还集成了新闻发布管理、法律法规发布管理等模块。完善了站点的功能。4.2 系统结构设计根据面向对象和三层结构的设计思想，可得出如下所示的系统结构设计图：4.3 系统功能模块细分根据本系统的系统功能分析，可以画出系统的功能模块图如下：4.4 数据库的设计、生成与配置数据库在一个信息管理小吨度年个中占有非常重要的地位，数据库结构设计的好坏将直接对应用系统的效率以及实现的效果产生影响。合理的数据库结构设计可以提高数据存储的效率，保证数据的完整性和一致性。设计数据库系统时应该充分了解用户各个方面的需求，包括现有的以及将来可能增加的需求。数据库设计有如下几个步骤： 数据库需求分析 数据库概念结构设计 数据库逻辑结构设计下面分别对几个步骤进行说明：① 数据库需求分析在招聘求职系统中，数据库应当解决如下需求： 保存应聘者信息，包括应聘者联系资料等。 保存应聘者简历，包括应聘者职业经历和业务水平。 保存招聘单位信息，包括招聘单位介绍信息。 保存招聘信息，包括所招聘职位信息和对应聘者的要求等。 保存其他信息，如新闻、政策法规信息等。① 数据库概念结构设计拥有以上的数据项和数据结构以后，就可以设计出能够满足用户需求的各种实体以及它们之间的关系，为后面的逻辑结构设计打下基础。这些实体包含各种具体信息，通过相互之间的作用形成数据的流动。分析本系统的需求，可以得到如下实体间关系图：② 数据库逻辑结构设计数据库的概念结构设计完毕后，可以将上面的数据库概念转化成某种数据库系统所支持的实际数据模型，也就是数据库的逻辑结构。下表为站内信件表，其中个人和企业的站内信笺分别放在cmailbox表和pmailbox表中，但是表的结构是一样的：Field Type Null Key Default Extra CommentId Int Not Null PRI Null IDENTITY(1,1) 主键，递增Reid Varchar Null NullSenduid Varchar Not Null Null 发送者idSendname Varchar Not Null Null 消息标题Title Varchar Not Null 发送者用户名Mailtext Text Not Null 消息内容Newmail Int Not Null 是否阅读Sdate Datetime Not Null 发送时间下表为jobnwes网站新闻表，存放网站首页显示的新闻信息：Field Type Null Key Default Extra CommentId Int Null PRI Null IDENTITY(1,1) 主键，递增Title Varchar Not Null Null 新闻标题Text Text Not Null Null 新闻内容Isate Datetime Not Null Null 添加时间Click Int Not Null 点击数目Zuo Varchar Not Null 作者Chu Varchar Not Null 出处下表为system网站系统表，存放网站运行所需常用信息：Field Type Null Key Default Extra CommentTitle Varchar Not Null Null 网站标题Homename Varchar Not Null Null 网站名称Homeeurl Text Not Null Null 网站地址Notice Datetime Not Null Null 备注信息Copyen Int Not Null 英文版权信息Tel Varchar Not Null 电话Top Varchar Not Null 首页导航链接Link11 链接一文字Link1 链接一地址Ymail 业务信箱Smail 技术信箱Link22 链接二文字Link2 链接二地址Copycn 中文版权Link3 链接三文字Link33 链接三地址Link4 链接四文字Link44 链接四地址Link5 链接五文字Link55 链接五地址Link6 链接六文字Link66 链接六地址Address 公司办公地址下表为perscn个人用户表，存放个人用户的联系信息及简历信息：Field Type Null Key Default Extra CommentId Varchar Not Null PRI Null IDENTITY(1,1) 主键，递增Uname Varchar Not Null Null 用户名Ped Varchar Not Null Null 密码Email Varchar Not Null Null 电子邮件Idate Datetime Not Null Null 注册日期Guoji Varchar Not Null Null 国籍Shengao Varchar Not Null Null 身高Nianling Varchar Not Null Null 年龄Tizhong Varchar Not Null Null 体重Iname Varchar Not Null Null 真实姓名Sex Varchar Not Null Null 性别下表为copmany企业用户表，存放企业用户的联系信息及企业信息：Field Type Null Key Default Extra CommentId Varchar Not Null PRI Null IDENTITY(1,1) 主键，递增Uname Varchar Not Null Null 用户名Ped Varchar Not Null Null 密码Email Varchar Not Null Null 电子邮件Idate Datetime Not Null Null 注册日期Cname Varchar Not Null Null 企业名称Trade Varchar Not Null Null 所属行业Rstel Varchar Not Null Null 电话Renshi Varchar Not Null Null 人事主管Address Varchar Not Null Null 企业地址下表为zp招聘职位表，存放企业所招聘的职位信息：Field Type Null Key Default Extra CommentId Varchar Not Null PRI Null IDENTITY(1,1) 主键，递增Usid Varchar Not Null Null 用户编号Uname Varchar Not Null Null 用户名Job Varchar Not Null Null 职位名称Zptext Datetime Not Null Null 职位信息Click Int Not Null 0 点击数Idate Datetime Not Null Null 发布日期Zpnum Text Not Null Null 招聘人数Nianlings Varchar Null Null 年龄要求Edus Varchar Null Null 学历要求Languages Varchar Null Null 语言要求Jobtypes Varchar Null Null 工作类型Computers Varchar Null Null 计算机水平Sexs Varchar Null Null 性别要求Youxiaos Varchar Null Null 有效时间Marrys Varchar Null Null 婚姻状况要求Zyes Varchar Null NullMoneys Varchar Null Null 工作待遇Gzdd Varchar Null NullCname Varchar Null NullAddtime Datetime Null NullCypic Varchar Null Null4.5 公用模块的编写① 数据库连接文件数据库连接文件dbconn.inc中定义了数据库连接对象，并开启数据连接备用，同时打开一个记录集，取出一些系统所需常数并保存在本地变量中，dbconn.inc文件的内容如下所示：数据库连接文件dbconn.inc<%Set conn = Server.CreateObject("ADODB.Connection")conn.Open "Driver=; DBQ=" & Server.MapPath("database/jy.mdb")set rs=createobject("adodb.recordset")sql="select * from system"rs.open sql,Connif not rs.eof thentitle=rs("title")homename=rs("homename")homeurl=rs("homeurl")copyen=rs("copyen")notice=rs("notice")tel=rs("tel")top=rs("top")link1=rs("link1")link11=rs("link11")link2=rs("link2")link22=rs("link22")link3=rs("link3")link33=rs("link33")link4=rs("link4")link44=rs("link44")link5=rs("link5")link55=rs("link55")link6=rs("link6")link66=rs("link66")ymail=rs("ymail")
1.Conversion of Bioactive Borosilicate Glass to Multilayered Hydroxyapatite in Dilute Phosphate Solution,Y.D. Li, M. N. Rahaman, B. S. Bal, Q. Fu, A. Yao, and D. E. Day,J. Am. Ceram. Soc.,2007, 90 [12]:3804.2.Early Stages of Calcium Phosphate Formation on Bioactive Borosilicate Glass in Aqueous Phosphate Solution,Y.D .Li, M. N. Rahaman, B. S. Bal, D. E. Day, and Q. Fu,J. Am. Ceram. Soc.,2008, 91 [5]:1528.3.The dependence of luminescence on reduction of Sm ions doped in lithium barium borate glasses,Y.D .Li, Y.L.Huang, C.F.Jiang, K.W. Jang,Appl Phys A,2009, 97: 663.4.Temperature- Dependent D0 – F0 Luminescence of Sm Ions Doped in Alkaline Earth Borophosphate Glass，Y.D. Li, J.Y.Wang, Yanlin Huang, Hyo Jin Seo,J. Am. Ceram. Soc.,2010, 93 [3]:722.5.Mechanisms of converting silicate, borate, and borosilicate glasses to hydroxyapatite in dilute phosphate solutions.Huang W, Rahaman MN, Day DE,Li Y., PhysChemGlasses Part B2006;47:647-58.6.Functionally graded bioactive glass coatings on magnesia partially stabilized zirconia for enhanced biocompatibility. Rahaman MN,Li Y, Bal BS, Huang W., J MaterSciMater Med2008;19:2325-33.7.Conversion of borate glass to hydroxyapatite and its effect on proliferation of MC3T3-E1 cells.Brown RF, Rahaman MN,DwilewiczAB, Huang W, Day DE,Li Y, Bal BS., J Biomed Mater Res Part A2009; 88A:392-400.8.In vitro testing of Al2O3-Nb composite for femoral head applications in total hiparthroplasty.ActaBiomater. Rahaman MN, Huang T,BalBS,Li Y.,2010;6:708-14.9.SiCnanoparticle - reinforced Al2O3-Nb composite as a potential femoral head material in total hiparthroplasty. Rahaman MN, Huang T, Yao A, Bal BS,Li Y., MaterSciEngC2010; 30:197-210.10.Mineralization of a bioactive Si-Ca-P system wet gel in aqueous K2HPO4 solution. Zhiqiang Feng , Jiazhe Guo ,Yadong Liand Yanlin Huang., Advanced Materials Research Vols.2011;236-238: 1910-191311.Luminescence properties of Eu2+ and Eu3+ doped calcium-deficienthydroxyapatite prepared in air. Zhiqiang Feng,Yadong Li, Yanlin Huang, Hyo Jin Seo., Journal of Alloys and Compounds;2011; 509: 7087–709212.Effects of Cd and Cd-Cu doping on the microstructure and electrical properties of NiMnCoO NTC ceramics. Na Guo,Yadong Li., Advanced Materials Research;2011; Vols. 236-238:1632-163513.The luminescence and stabilities of Sm2+ ions doped in LiBaB9O15. Jiayu Wang,Yadong Li, Yanlin Huang, Liang Shi, Hyo Jin Seo., Materials Chemistry and Physics;2010;120: 598– 602
这里研究生毕业是好找工作的。中科院苏州医工所是一家比较新的中科院院所，中科院苏州医工所由由长春光机所直接援建，因为毕业证学位证不写学院，只有学校和专业，所以双证长得和本部同专业一模一样，找工作也是和中科大本部同待遇，是很好找工作的。中科院苏州医工所是中科院系统内的，所以研究生在所内所发表的论文通讯地址都有中国科技大学，比较好发文。同时医工所内每月含有3000元的津贴，还免学费住宿费。同时单人单间木质地板，宿舍的环境也是非常好的。
目前，企业为了适应市场经济需要，都在加强成本管理，提高经济效益，大都建立和规范了成本核算管理制度。下面我给大家分享一些财务成本管理论文题目，大家快来跟我一起欣赏吧。
1、关于构建我国绿色税收体系的探讨
2、我国增值税改革问题研究
3、试论当前个人所得税征管存在的问题及对策
4、企业营运资金管理研究
5、企业的增长管理问题研究
6、我国上市公司中小投资者利益保护机制研究
7、ⅹⅹ公司的税收筹划
8、ⅹⅹ企业所得税的税收筹划
9、ⅹⅹ企业增值税的税收筹划
10、ⅹⅹ企业营业税的税收筹划
11、中小企业筹资方式的选择研究
12、ⅹⅹ企业应收账款的管理
13、企业财务管理目标的现实选择
14、企业集团的财务控制研究
15、资本结构对企业价值的影响
16、企业的财务风险管理研究
17、XX企业财务风险指标体系的构建与预警
18、我国企业最优资本结构研究
19、我国上市公司资本成本的特点及对企业的影响
20、企业可持续增长的财务约束研究
21、实物期权在风险投资决策中的运用
22、实物期权在R&D决策中的运用
23、完善上市公司股权结构的对策分析
24、经理股票期权激励制度在我国企业的应用研究
25、财务失败与预警机制问题的探讨
26、关于经营者业绩评价及激励问题的研究
27、我国监事会在公司治理中的地位与完善
28、企业理财中税收筹划问题的研究
29、浅析融资租赁的风险及其防范
30、试论企业生命周期与资本结构
31、我国上市公司股利政策问题的探讨
32、我国上市公司股权再融资偏好研究
33、我国高科技企业融资模式研究
34、上市公司股票回购的动因及问题分析
35、股权分置改革后上市公司股权结构优化问题的分析
36、企业财务风险的监测与预警
37、企业并购中融资方式选择分析
38、上市公司资产重组存在问题及对策研究
39、企业的社会责任问题研究
40、现金流量分析在企业经营管理中的运用
41、企业财务管理面临的挑战及对策
42、完善我国上市公司独立董事制度研究
43、企业收益质量的评价体系研究
44、完善公司治理中内部控制思考
45、论杜邦财务分析体系的应用
46、企业财务预警系统构建研究
47、公司治理结构与财务管理目标
48、公司财务危机原因探析
49、基于企业生命周期理论的收益分配政策选择
50、 规范民营企业集团财务管理体制初探
51、风险与报酬的关系研究
52、高新技术中小企业的筹资渠道与方式研究
53、全面预算管理研究
54、应收账款的风险防范研究
55、企业的存货管理研究
56、民营企业投资决策模式研究
57、金融危机影响下的企业财务管理对策
58、基于债权人的财务评价体系研究
59、论房地产企业营业税的税收筹划
60、基于投资人的财务评价体系研究
61、论责任会计企业管理中的应用
62、论财务管理目标与资本结构优化
63、虚假财务报告成因及监管的研究
63、解决我国中小企业筹资难的对策研究
65、质量成本在企业管理中的应用研究 66、企业价值评估研究
67、论企业可持续发展观下的财务管理目标
68、以财务报告为目的的资产评估研究
69、 国有控股企业财务管理中存在的问题及对策
70、 集团公司加强对子公司财务管理的思考
71、ⅹⅹ 企业财务管理存在的问题及对策
72、现代企业收入分配制度改革研究 73、某中小企业融资问题探索
74、某企业财务报表综合评价
75、某企业内部控制制度研究
76、某企业建立内部管理控制系统框架研究
77、基于平衡计分卡的企业管理业绩评价体系。
78、某企业财务风险评价体系
79、某企业财务危机预警体系的建立及运行机制研究
财务成本管理机制探讨
摘 要：在市场经济条件下，成本管理对一个企业来说至关重要，企业做好成本管理，才有可能在激烈的市场竞争中取胜。本文就当前企业成本管理现状进行分析，提出了注重成本管理的相应措施，以此提高市场经济环境下的企业财务管理水平。
关键词：财务 成本管理 成本核算
随着全球经济的迅猛发展，企业之间的竞争显得愈发激烈，企业追求利润最大化也就成为必然。但是，目前有相当一部分企业财务核算水平没有跟上经济发展的步伐，尤其是在成本核算方面存在的问题尤为突出。因此，如何加强企业的成本核算就显得尤为十分重要。
1.企业成本核算中存在的问题
1.1企业管理者不重视成本核算
目前，企业为了适应市场经济需要，都在加强成本管理，提高经济效益，大都建立和规范了成本核算管理制度。但仍有相当一部分企业管理者在实践中没有真正把成本核算作为企业管理工作的重中之重。从企业实际情况来看，多数企业领导更为关注的是企业的经济效益，而往往忽视了成本核算，更有甚者不懂成本核算，因而忽略了对企业成本核算来说相当重要的生产车间、仓库、物流等方面的成本核算。
1.2成本核算方法不科学
目前我国绝大多数企业采用分步法和品种法，只有极少数企业采用分批法。而分步法、品种法只适用于大量、重复、单一品种生产类型，致使不能真实反映企业成本耗费的全貌，已不适应新经济形态中产品生产成本分配的要求，更不适应现代企业发展的需要。另外，部分企业采用综合成本法结转产品成本，使得年末库存商品的余额较小，本期完工产品成本通过估算得出，理由并不充分。
1.3企业财务人员素质参差不齐
企业财务人员素质高低是影响财务管理水平的重要因素。然而，我国目前的企业财务人员的知识结构和综合素质参差不齐，缺乏主动意识和创新精神，不遵守会计职业道德，不真实反映企业的经营情况，不能按照新《会计法》对成本核算的具体要求，更没有提出有利于企业可持续发展的财务合理化建议，这些都与目前快速发展的社会经济极为不协调。
1.4管理手段较为混乱
首先，成本核算账册设置不全。我国目前很多企业只设置总账，不设置明细账，成本核算账册设置不全，成本核算较为混乱。其次，成本核算的指导思想有偏差。在成本管理实践中，企业往往只注重生产成本的管理，而对供应与销售环节则考虑不多。 但在现代市场经济环境下，企业的生产经营过程是由产前、产中、产后所构成，每一个环节都相互联系且不可或缺。我国许多企业的成本核算仍滞留于传统的生产方式，其成本核算不能提供真实、准确的成本信息。
2.建立健全成本核算管理机制的策略
2.1企业管理者应该强化成本意识
成本核算是一项系统工程，它涉及企业的每项业务、每个部门和每位员工。因此，企业成本核算的关键仍在于提高经营者的管理水平和增强全体员工的成本费用控制意识，调动了全体人员管理成本的自觉性，使其有效地参与到成本费用的节约管理工作中，从而不断降低成本，获取更大的利润，并达到全员参与、全员控制的目的。
2.2正确选择成本核算的方法
成本核算是指对生产经营管理费用的发生和产品成本的形成所进行的分配，由于企业的情况千差万别，成本的具体计算方式也不可能有一个统一的模式。 因此，成本核算方法应和一定的经济环境相适应，同时，要正确进行成本核算，必须根据企业不同的生产类型并结合管理上的具体要求，采用适当的成本计算方法。
2.3提高财务人员素质
提高财务人员素质是防止会计信息失真的客观要求。由于财务管理的优劣直接影响企业的生存和发展，而财务人员是企业财务管理主体中的主体，是整个企业财务管理创新的关键因素。因此，会计人员要不断更新专业知识，不断深入研究财务新理论、新业务、新规则和新方法。同时，还要转变观念，不要认为财务工作只是简单的记账、算账、报账工作，努力改变过去按图索骥的旧习，时时、事事、处处都要遵守相关法律法规。
2.4不断强化成本核算管理手段
首先，强化成本核算信息化建设。信息化已经成为当今社会发展的主体特征之一，信息技术已经成为社会生产、生活不可或缺的组成部分。因此，在现代企业成本核算工作中，成本管理手段信息化是提高现代化成本管理水平的重要条件。由于信息化可以将企业的生产过程、物料移动、产成品生产、物流状况、现金流动等业务过程实现数字化，并通过各种信息系统生成成本核算有用的信息，可以及时、全面、正确地提供企业成本信息，并在有关部门和人员之间进行沟通，不但增强成本管理人员的业务处理能力，而且还可以实现成本管理手段的现代化，以做出有利于生产要素组合优化的决策。
其次，建立以责任成本为中心的成本核算体系。我们要按照《企业会计准则》和相关会计制度的规定，着力解决企业成本核算存在的问题，建立以责任成本为中心的成本核算体系。从而把成本核算过程中涉及到的相关责任落实到各个部门和具体的执行人，并且根据企业生产技术组织特点，将成本管理与经济责任密切挂钩，做到了改革经营管理模式，有效地控制成本，达到提高企业经济效益的目的。
3.结束语
经过人们的长期实践认为，成本核算是企业管理和财务决策中最重要的一个环节，是现代企业管理的核心，是企业逐步扩大市场份额的重要途径，更是提高企业经济效益的基础。 因此，在市场经济条件下，企业要想在竞争中取胜 ，必须降低生产成本，做好成本核算，才能增强企业的竞争力 ，从而迎接各方的挑战。
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李姓是世界上人口最多的姓氏。李姓在《百家姓》中排第4位。是2007年中国大陆人口第二多的姓氏。但根据户籍管理部门的“全国公民身份信息系统”，李姓则为第三大姓。在朝鲜和越南，李姓也是常见姓氏，在朝鲜李姓为第二大姓。
结论：
1、姓的来源渠道很多，才致使李姓今天的发扬光大。
2、李姓人口很多，排在世界第一。
3、李姓人口分布很广，在世界各地都可以看到李姓人的踪影。
4、据统计，李姓人口总数超过1亿，占中国总人口的7.19％多。河南省是中国李姓的第一大省。
人口分布
李姓分布很广，但不均衡。李姓在西南、华北是最常见的姓氏。李姓在人群中分布频率示意图表明：在云南、四川南部、豫冀鲁晋大部、甘肃中部、吉黑大部，李姓一般占当地人口的比例在8.8%以上，覆盖面积约占了国图面积的18%，大约30%的李姓人口居住于此。
陕甘宁蒙大部、川东、重庆、黔湘鄂、桂粤大部、苏皖北部、山东东部、辽宁等地，李姓一般占当地人口的比例在6.6%—8.8%，约占了国图面积的36%，大约51%的李姓人口居住于此。
赣浙闽台、苏皖大部、桂南、海南、粤东、新疆西北、甘西等地，李姓一般占当地人口的比例在2.2%—6.6%，约占了国土面积的21.6%，大约19%的李姓人口居住于此。
韩月玲 本科学历 中教高级 泰安市优秀教师、教学能手 山东省教科研成果二等奖 国家级录像课一等奖 多次执教国家级公开课 李萍 本科学历 中教高级 山东省优秀教师 泰山区优质课一等奖 李东方 本科学历 中教高级 泰安市优质课一等奖 泰山区“板书、板画、板图”三板比赛一等奖 孟凯 在读研究生 中教一级 泰安市优秀教师 泰安市教育教学先进个人 宋其中 本科学历 中教一级 泰山区优秀班主任 泰山区骨干教师 泰安市优质课一等奖 杨超 年级组长 在读研究生 中教二级 泰山区优质课一等奖 全国论文大赛一等奖 多篇文章在省级以上刊物发表 施圣君 校长助理 本科学历 中教高级 泰安市优秀教师 泰安市政治骨干教师、学科带头人 思想政治教学能手 赵红霞 校长助理 团委书记 本科学历 中教二级 泰安市优质课一等奖 区体育先进工作者 全国少年科学院优秀科技辅导员 孔祥河 教务处主任 本科学历 中教高级 泰安市优秀教师、教学能手 多次获国家级论文一等奖 省作家协会会员 中国徐特立研究学会”特约研究员 “全国和谐教学”实验课题优秀负责人 仇道路 德工处主任 初三年级组长 本科学历 中教高级山东省青物会理事，市教学能手，区教研先进个人 山东省优质课一等奖 全国初中物理应用知识竞赛优秀指导教师 田立伦 办公室主任 本科学历 中教高级 全国“十佳语文教师” 山东省课堂效率讲课比赛一等奖 山东省优质课一等奖 贾梅勤 本科学历 中教高级 泰山区优质课一等奖 多次获国家级英语竞赛优秀辅导员奖 封香 本科学历 中教高级 2004年泰山区中考数学第一名 全国数学奥赛金牌教练 宋宇 总务处主任 本科学历 中教高级 全国物理奥赛优秀辅导员 市创新大赛一等奖 崔建华 本科学历 中教高级 市教学能手 泰山区优质课一等奖 刘敏 本科学历 中教高级泰安市优质课一等奖 泰安市论文评选一等奖 胡秀爱 本科学历 中教高级 泰安市优质课一等奖 泰山区论文评选一等奖 全国英语竞赛优秀辅导员 程雪芳 本科学历 中教高级 泰安市优质课一等奖 全国“希望杯”数学竞赛优秀辅导员 韩英 本科学历 中教高级 泰安市论文评选一等奖 泰安市优质课一等奖 多次获国家级英语竞赛优秀辅导奖 董军 本科学历 中教高级市级骨干教师 多篇论文在国家级刊物上发表，“希望杯”数学竞赛优秀辅导员 全国数学联赛优秀指导教师 张弘弢 本科学历 中教高级 泰安市优质课一等奖 山东省物理创新大赛一等奖 全国物理奥赛金牌教练 李瑞梅 本科学历 中教高级 市教学能手 省级论文一等奖 宁尚雨 本科学历 理学学士 中教一级 泰安市优质课一等奖 山东省课件制作二等奖 景英 在读研究生 中教一级 市教学能手 山东省优质课二等奖 叶金梅 研究生学历 中教一级 宁阳县优质课一等奖 市教学能手 潘虹 本科学历 中教一级 新泰市教学能手 泰安市优质课一等奖 祝静遐 在读研究生 中教一级 山东省优质课一等奖 山东省教学能手 全国化学奥赛优秀辅导员 范丽芹 本科学历 中教一级 泰安市优秀教师 泰安市优质课一等奖 侯晓燕 在读研究生 中教一级 市级优秀教师、优秀班主任 王仁涛 本科学历 中教一级 新泰市优秀班主任 泰安市优质课一等奖 山东省优质课一等奖 潘殿元 研究生学历 中教一级 宁阳县优秀班主任 泰安市优质课一等奖 朱成鹏 初二级部年级组长 在读研究生 中教二级 泰山区优质课一等奖 泰山区优秀教案一等奖 山东省物理课件一等奖 国兆亮 研究生学历 中教二级 泰山区优质课一等奖 全国首届英语听力大赛优秀辅导员 殷海永 在读研究生 中教二级 泰安市优质课一等奖 全国计算机等级考试三级 刘华 研究生学历 中教二级 文学学士 泰安市论文一等奖 宁阳县优质课一等奖 严飞 本科学历 中教二级 泰安市“十优”歌手 泰山区教师基本功比赛一等奖 刘敏红 本科学历 中教二级 泰山区优质课一等奖 张丛丛 本科学历 国家一级运动员、运动按摩师 社会一级指导教师，国家二级田径裁判、足球裁判、体操裁判 安东升 本科学历 优秀美术辅导教师 杨红 本科学历 英语专业四级 全国计算机等级考试二级 全国英语竞赛优秀辅导教师 侯婷婷 本科学历 大学英语四级 全国计算机等级考试三级 信息技术优秀辅导教师 以上是我所能查到的全部教师了。求采纳
该杂志2w份以上算好。据查询论文发表网可知：因为杂志单价低所以只能冲销量，该杂志2w份以上算好。现在的流量明星杂志都是几万份起步，并且还流行秒切，就是几秒内就把销量库存切完。一般来讲，全国优秀畅销书排行榜的组织者以月销售2000册为一个底线，也就是年销量在2万-4万册。往上再分主要有三个档次：第一档是超级畅销书，一年内累计销量达到50万册以上；第二档是比较畅销书，一年内累计销量达到20万册以上；第三档是一般畅销书，一年内累计销量达到5万册以上。
你是想问压裂后返排液有油气味是怎么回事吗？这个气味是由于压裂液和污染物质混合了。根据发表学术论文网资料显示，压裂返排液主要来源于压裂作业过程中从井筒回流至地面的压裂液以及开采初期的采出液。其中的主要成分包括注入地下的压裂液和地层中原有污染物质，所以会有油的气味。压裂返排液中不仅含有各种添加剂，还夹带大量甲醛、石油类、氯离子等物质。其污染物成分众多，若不经处理直接排放到外界环境中，很难自然降解，对环境造成严重污染，液体对环境影响主要体现在对水体和土壤影响两方面。
徐桦的论文《文化创意类企业办公空间室内设计研究》发表于2014年。该论文共分为八个部分，包括绪论、文化创意产业的现状与发展趋势、文化创意类企业办公空间的特点与设计原则、文化创意类企业办公空间设计的实践案例、文化创意类企业办公空间设计中的问题与对策、文化创意类企业办公空间的未来发展趋势、总结与展望等。总字数为1.2万字左右。该论文主要研究文化创意类企业办公空间的室内设计，分析其特点与设计原则，并以实践案例为基础，探讨了文化创意类企业办公空间设计中存在的问题以及应对策略，同时预测了未来文化创意类企业办公空间的发展趋势。
《文化创意类企业办公空间室内设计研究》是由徐桦发表的论文。该论文指出，文化创意类企业的有效运营必需满足特定的空间要求，需要室内设计来激发工作者的创新能力。该论文将从文化创意类企业室内设计的历史、起源、发展及特征等方面对文化创意类企业室内设计进行综合探讨，找出文化创意类企业室内设计模式和创新措施。该论文发布于2017年6月， 即徐桦在清华大学完成毕业设计报告的时间。该论文以实际案例研究的方法来深入研究室内设计对文化创意类企业的影响，探讨如何结合文化创意类企业需求，实施良好的室内设计。
关于克隆的资料 克隆是英文clone的音译，简单讲就是一种人工诱导的无性繁殖方式。但克隆与无性繁殖是不同的。无性繁殖是指不经过雌雄两性生殖细胞的结合、只由一个生物体产生后代的生殖方式，常见的有孢子生殖、出芽生殖和分裂生殖。由植物的根、茎、叶等经过压条或嫁接等方式产生新个体也叫无性繁殖。绵羊、猴子和牛等动物没有人工操作是不能进行无性繁殖的。科学家把人工遗传操作动物繁殖的过程叫克隆，这门生物技术叫克隆技术。 克隆的基本过程是先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中，利用微电流刺激等使两者融合为一体，然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎，当胚胎发育到一定程度后，再被植入动物子宫中使动物怀孕，便可产下与提供细胞者基因相同的动物。这一过程中如果对供体细胞进行基因改造，那么无性繁殖的动物后代基因就会发生相同的变化。 克隆技术不需要雌雄交配，不需要精子和卵子的结合，只需从动物身上提取一个单细胞，用人工的方法将其培养成胚胎，再将胚胎植入雌性动物体内，就可孕育出新的个体。这种以单细胞培养出来的克隆动物，具有与单细胞供体完全相同的特征，是单细胞供体的“复制品”。英国英格兰科学家和美国俄勒冈科学家先后培养出了“克隆羊”和“克隆猴”。克隆技术的成功，被人们称为“历史性的事件，科学的创举”。有人甚至认为，克隆技术可以同当年原子弹的问世相提并论。 克隆技术可以用来生产“克隆人”，可以用来“复制”人，因而引起了全世界的广泛关注。对人类来说，克隆技术是悲是喜，是祸是福？唯物辩证法认为，世界上的任何事物都是矛盾的统一体，都是一分为二的。克隆技术也是这样。如果克隆技术被用于“复制”像希特勒之类的战争狂人，那会给人类社会带来什么呢？即使是用于“复制”普通的人，也会带来一系列的伦理道德问题。如果把克隆技术应用于畜牧业生产，将会使优良牲畜品种的培育与繁殖发生根本性的变革。若将克隆技术用于基因治疗的研究，就极有可能攻克那些危及人类生命健康的癌症、艾滋病等顽疾。克隆技术犹如原子能技术，是一把双刃剑，剑柄掌握在人类手中。人类应该采取联合行动，避免“克隆人”的出现，使克隆技术造福于人类社会。 克隆技术研究现状 一、克隆的早期研究 克隆一词是英文单词clone的音译，作为名词，c1one通常被意译为无性繁殖系。同一克隆内所有成员的遗传构成是完全相同的，例外仅见于有突变发生时。自然界早已存在天然植物、动物和微生物的克隆，例如：同卵双胞胎实际上就是一种克隆。然而，天然的哺乳动物克隆的发生率极低，成员数目太少（一般为两个），且缺乏目的性，所以很少能够被用来为人类造福，因此，人们开始探索用人工的方法来生产高等动物克隆。这样，克隆一词就开始被用作动词，指人工培育克隆动物这一动作。 目前，生产哺乳动物克隆的方法主要有胚胎分割和细胞核移植两种。克隆羊“多莉”，以及其后各国科学家培育的各种克隆动物，采用的都是细胞核移植技术。所谓细胞核移植，是指将不同发育时期的胚胎或成体动物的细胞核，经显微手术和细胞融合方法移植到去核卵母细胞中，重新组成胚胎并使之发育成熟的过程。与胚胎分割技术不同，细胞核移植技术，特别是细胞核连续移植技术可以产生无限个遗传相同的个体。由于细胞核移植是产生克隆动物的有效方法，故人们往往把它称为动物克隆技术。 采用细胞核移植技术克隆动物的设想，最初由汉斯·施佩曼在1938年提出，他称之为“奇异的实验”，即从发育到后期的胚胎（成熟或未成熟的胚胎均可）中取出细胞核，将其移植到一个卵子中。这一设想是现在克隆动物的基本途径。 从1952年起，科学家们首先采用青蛙开展细胞核移植克隆实验，先后获得了蝌蚪和成体蛙。1963年，我国童第周教授领导的科研组，首先以金鱼等为材料，研究了鱼类胚胎细胞核移植技术，获得成功。 哺乳动物胚胎细胞核移植研究的最初成果在1981年取得——卡尔·伊尔门泽和彼得·霍佩用鼠胚胎细胞培育出发育正常的小鼠。1984年，施特恩·维拉德森用取自羊的未成熟胚胎细胞克隆出一只活产羊，其他人后来利用牛、猪、山羊、兔和猕猴等各种动物对他采用的实验方法进行了重复实验。1989年，维拉德森获得连续移核二代的克隆牛。1994年，尼尔·菲尔斯特用发育到至少有120个细胞的晚期胚胎克隆牛。到1995年，在主要的哺乳动物中，胚胎细胞核移植都获得成功，包括冷冻和体外生产的胚胎；对胚胎干细胞或成体干细胞的核移植实验，也都做了尝试。但到1995年为止，成体动物已分化细胞核移植一直未能取得成功。 二、克隆羊“多莉”的意义和引起的反响 以上事实说明，在1997年2月英国罗斯林研究所维尔穆特博士科研组公布体细胞克隆羊“多莉”培育成功之前，胚胎细胞核移植技术已经有了很大的发展。实际上，“多莉”的克隆在核移植技术上沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程，但这并不能减低“多莉”的重大意义，因为它是世界上第一例经体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研究的巨大突破。这一巨大进展意味着：在理论上证明了，同植物细胞一样，分化了的动物细胞核也具有全能性，在分化过程中细胞核中的遗传物质没有不可逆变化；在实践上证明了，利用体细胞进行动物克隆的技术是可行的，将有无数相同的细胞可用来作为供体进行核移植，并且在与卵细胞相融合前可对这些供体细胞进行一系列复杂的遗传操作，从而为大规模复制动物优良品种和生产转基因动物提供了有效方法。 在理论上，利用同样方法，人可以复制“克隆人”，这意味着以往科幻小说中的独裁狂人克隆自己的想法是完全可以实现的。因此，“多莉”的诞生在世界各国科学界、政界乃至宗教界都引起了强烈反响，并引发了一场由克隆人所衍生的道德问题的讨论。各国政府有关人士、民间纷纷作出反应：克隆人类有悖于伦理道德。尽管如此，克隆技术的巨大理论意义和实用价值促使科学家们加快了研究的步伐，从而使动物克隆技术的研究与开发进入一个高潮。 三、近3年来克隆研究的重要成果 克隆羊“多莉”的诞生在全世界掀起了克隆研究热潮，随后，有关克隆动物的报道接连不断。1997年3月，即“多莉”诞生后1个月，美国、中国台湾和澳大利亚科学家分别发表了他们成功克隆猴子、猪和牛的消息。不过，他们都是采用胚胎细胞进行克隆，其意义不能与“多莉”相比。同年7月，罗斯林研究所和PPL公司宣布用基因改造过的胎儿成纤维细胞克隆出世界上第一头带有人类基因的转基因绵羊“波莉”（Polly）。这一成果显示了克隆技术在培育转基因动物方面的巨大应用价值。 1998年7月，美国夏威夷大学Wakayama等报道，由小鼠卵丘细胞克隆了27只成活小鼠，其中7只是由克隆小鼠再次克隆的后代，这是继“多莉”以后的第二批哺乳动物体细胞核移植后代。此外，Wakayama等人采用了与“多莉”不同的、新的、相对简单的且成功率较高的克隆技术，这一技术以该大学所在地而命名为“檀香山技术”。 此后，美国、法国、荷兰和韩国等国科学家也相继报道了体细胞克隆牛成功的消息；日本科学家的研究热情尤为惊人，1998年7月至1999年4月，东京农业大学、近畿大学、家畜改良事业团、地方（石川县、大分县和鹿儿岛县等）家畜试验场以及民间企业（如日本最大的奶商品公司雪印乳业等）纷纷报道了，他们采用牛耳部、臀部肌肉、卵丘细胞以及初乳中提取的乳腺细胞克隆牛的成果。至1999年底，全世界已有6种类型细胞——胎儿成纤维细胞、乳腺细胞、卵丘细胞、输卵管／子宫上皮细胞、肌肉细胞和耳部皮肤细胞的体细胞克隆后代成功诞生。 2000年6月，中国西北农林科技大学利用成年山羊体细胞克隆出两只“克隆羊”，但其中一只因呼吸系统发育不良而早夭。据介绍，所采用的克隆技术为该研究组自己研究所得，与克隆“多莉”的技术完全不同，这表明我国科学家也掌握了体细胞克隆的尖端技术。 在不同种间进行细胞核移植实验也取得了一些可喜成果，1998年1月，美国威斯康星一麦迪逊大学的科学家们以牛的卵子为受体，成功克隆出猪、牛、羊、鼠和猕猴五种哺乳动物的胚胎，这一研究结果表明，某个物种的未受精卵可以同取自多种动物的成熟细胞核相结合。虽然这些胚胎都流产了，但它对异种克隆的可能性作了有益的尝试。1999年，美国科学家用牛卵子克隆出珍稀动物盘羊的胚胎；我国科学家也用兔卵子克隆了大熊猫的早期胚胎，这些成果说明克隆技术有可能成为保护和拯救濒危动物的一条新途径。 四、克隆技术的应用前景 克隆技术已展示出广阔的应用前景，概括起来大致有以下四个方面：（1）培育优良畜种和生产实验动物；（2）生产转基因动物；（3）生产人胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法；（4）复制濒危的动物物种，保存和传播动物物种资源。以下就生产转基因动物和胚胎干细胞作简要说明。 转基因动物研究是动物生物工程领域中最诱人和最有发展前景的课题之一，转基因动物可作为医用器官移植的供体、作为生物反应器，以及用于家畜遗传改良、创建疾病实验模型等。但目前转基因动物的实际应用并不多，除单一基因修饰的转基因小鼠医学模型较早得到应用外，转基因动物乳腺生物反应器生产药物蛋白的研究时间较长，已进行了10多年，但目前在全世界范围内仅有2例药品进入3期临床试验，5～6个药品进入2期临床试验；而其农艺性状发生改良、可资畜牧生产应用的转基因家畜品系至今没有诞生。转基因动物制作效率低、定点整合困难所导致的成本过高和调控失灵，以及转基因动物有性繁殖后代遗传性状出现分离、难以保持始祖的优良胜状，是制约当今转基因动物实用化进程的主要原因。 体细胞克隆的成功为转基因动物生产掀起一场新的革命，动物体细胞克隆技术为迅速放大转基因动物所产生的种质创新效果提供了技术可能。采用简便的体细胞转染技术实施目标基因的转移，可以避免家畜生殖细胞来源困难和低效率。同时，采用转基因体细胞系，可以在实验室条件下进行转基因整合预检和性别预选。在核移植前，先把目的外源基因和标记基因（如LagZ基因和新霉素抗生基因）的融合基因导入培养的体细胞中，再通过标记基因的表现来筛选转基因阳性细胞及其克隆，然后把此阳性细胞的核移植到去核卵母细胞中，最后生产出的动物在理论上应是100％的阳性转基因动物。采用此法，Schnieke等（Bio Report，1997）已成功获得6只转基因绵羊，其中3只带有人凝血因子IX基因和标记基因（新霉素抗性基因），3只带有标记基因，目的外源基因整合率高达50％。Cibelli（Science，1997）同样利用核移植法获得3头转基因牛，证实了该法的有效性。由此可以看出，当今动物克隆技术最重要的应用方向之一，就是高附加值转基因克隆动物的研究开发。 胚胎干细胞（ES）是具有形成所有成年细胞类型潜力的全能干细胞。科学家们一直试图诱导各种干细胞定向分化为特定的组织类型，来替代那些受损的体内组织，比如把产生胰岛素的细胞植入糖尿病患者体内。科学家们已经能够使猪ES细胞转变为跳动的心肌细胞，使人ES细胞生成神经细胞和间充质细胞和使小鼠ES细胞分化为内胚层细胞。这些结果为细胞和组织替代疗法开辟了道路。目前，科学家已成功分离到人ES细胞（Thomson等1998，Science），而体细胞克隆技术为生产患者自身的ES细胞提供了可能。把患者体细胞移植到去核卵母细胞中形成重组胚，把重组胚体外培养到囊胚，然后从囊胚内分离出ES细胞，获得的ES细胞使之定向分化为所需的特定细胞类型(如神经细胞，肌肉细胞和血细胞），用于替代疗法。这种核移植法的最终目的是用于干细胞治疗，而非得到克隆个体，科学家们称之为“治疗克隆”。 克隆技术在基础研究中的应用也是很有意义的，它为研究配子和胚胎发生，细胞和组织分化，基因表达调控，核质互作等机理提供了工具。 五、克隆技术存在的问题 尽管克隆技术有着广泛的应用前景，但离产业化尚有很大距离。因为作为一个新兴的研究领域，克隆技术在理论和技术上都还很不成熟，在理论上，分化的体细胞克隆对遗传物质重编（细胞核内所有或大部分基因关闭，细胞重新恢复全能性的过程）的机理还不清楚；克隆动物是否会记住供体细胞的年龄，克隆动物的连续后代是否会累积突变基因，以及在克隆过程中胞质线粒体所起的遗传作用等问题还没有解决。 在实践中，克隆动物的成功率还很低，维尔穆特研究组在培育“多莉“的实验中，融合了277枚移植核的卵细胞，仅获得了“多莉”这一只成活羔羊，成功率只有0.36％，同时进行的胎儿成纤维细胞和胚胎细胞的克隆实验的成功率也分别只有1.7％和1.1％，即使是使用“檀香山”技术，以分化程度较低的卵丘细胞为核供体，其成功率也只有百分之几。 此外，生出的部分个体表现出生理或免疫缺限。以克隆牛为例，日本、法国等国培育的许多克隆牛在降生后两个月内死去；到2000年2月，日本全国已共有121头体细胞克隆牛诞生，但存活的只有64头。观察结果表明，部分犊牛胎盘功能不完善，其血液中含氧量及生长因子的浓度都低于正常水平；有些牛犊的胸腺、脾和淋巴腺未得到正常发育；克隆动物胎儿普遍存在比一般动物发育快的倾向，这些都可能是死亡的原因。 即使是正常发育的“多莉”，也被发现有早衰迹象。染色体的未端被称为端粒，它决定着细胞能够分裂的次数：每一次分裂端粒都会缩短，而当端粒耗尽后细胞就失去了分裂能力。1998年，科学家发现“多莉”的细胞端粒比正常的要短，即其细胞处于更衰老的状态。当时认为，这可能是用成年绵羊的细胞克隆“多莉”造成的，使其细胞具有成年细胞的印记，但这一解释目前受到了挑战，美国马萨诸塞州的医生罗伯特·兰扎等用培养的衰老细胞克隆牛，得到6头小牛，出生5～10个月后发现这些克隆牛的端粒比普通同龄小牛要长，有的甚至比普通新生小牛的端粒还长。现在还不清楚这一现象的原因，也不清楚为何与“多莉“的情况有巨大差别。但这一实验说明，在一些情况下克隆过程能改变成熟细胞的分子钟，使其“恢复青春”，关于这种变化对克隆动物寿命的影响，还有待于进一步观察。 除了以上的理论和技术障碍外，克隆技术（尤其是在人胚胎方面的应用）对伦理道德的冲击和公众对此的强烈反应也限制了克隆技术的应用。但几年来克隆技术的发展表明，世界各科技大国都不甘落后，谁也没有放弃克隆技术研究。这一点上英国政府的态度非常具有代表性，在1997年2月底宣布中止对“多莉”研究小组投资后不到1个月，英国科技委员会就对克隆技术发表专题报告，表明英国政府将重新考虑这一决定，认为盲目禁止这方面的研究并不是明智之举，关键在于建立一定的规范利用它为人类造福。 回答者：督☆督 - 试用期 一级 3-7 20:59一、克隆的概念 众所周知，生物的繁衍是通过生殖完成的。生物的繁殖有两种方式：一种叫有性生殖，一种叫无性生殖。 有性生殖是通过两性生殖细胞 ( 精子和卵子 ) 的融合，并发育形成后代的生殖方式。无性生殖则不经过两性生殖细胞的结合，而是由生物体自身的分裂生殖或其体细胞生长发育形成个体。无性生殖多见于植物与某些动物 ( 如单细胞动物与低等动物 ) 。 克隆是英文“ clone ”的音译，来自希腊文 klon ， 原意为苗或嫩枝，指以无性生殖或营养生殖的一些植物。随着时间的推移和科学的发展，它的含义增加了许多内容，如一个细胞在体外培养下产生的一群细胞；由“亲本”序列产生的 DNA 序列等等。概言之， 克隆是指由一个细胞或个体，通过无性繁殖手段，获得遗传上相同的细胞群或个体群。 我国古典名著《西游记》里的孙悟空，只要拔撮毫毛吹口仙气，就能“变”出许多孙悟空。因为拔一撮毫毛必须带下一群细胞，这一群细胞就能培养出一群相同的孙大圣。这也归属于无性生殖。只不过孙大圣本领高强，能在瞬间“克隆”出千百个自己而已。简而言之，克隆就是无性生殖，就是“复制”、“翻版”。 二、植物的克隆 无性生殖 ( 克隆 ) 本来是一种低级的生殖方式。生物进化的层次越低，越有可能采取这种生殖方式，进化层次越高，则越不可能采取这种生殖方式。由于低级生物，如微生物，采取自行分裂的方法繁殖，分裂后子代与亲代的遗传物质完全一样，因此在这个意义上微生物没有“个体”，它们也没有死亡。虽然在严格的意义上，微生物的亲代与子代仍然会有若干差异，因为它们的外界营养环境仍然会有差异，但从高等动物的角度看，这种差异似乎太微不足道了。在这种差异可以不计的条件下，人们可以说，对微生物来说，它们是不死的。死亡是生物进化到较高阶段的产物。现在生物医学研究中用克隆技术在体外培养的正常细胞或癌细胞，也称为“永生细胞株”，意思也是说这些细胞是“不死的”。 生物医学研究进入微观层次，运用克隆技术来培养正常或异常细胞的永生细胞株，虽然是一件难度很大的工作，但已经在各国的科学界和医学界越来越得到重视。在农业上，人们早已用插枝、压条等方法，来繁殖适合于人类需要的植物。在畜牧业上，各国都在进行用克隆技术产生更多良种动物的研究。但从高等生物成体的体细胞中发育出一个成体，这是克隆技术的一个重大发展。 早在许多年前，美国康奈尔大学研究人员将成熟的胡萝卜高速搅拌，获得单个胡萝卜细胞，然后将这些单个细胞置于生长培养基中，培养出遗传上完全一样的胡萝卜。这个试验证实了植物细胞全能性学说。所谓植物细胞全能性学说是指植物体的每一个细胞，包括体细胞，都具有发育成完整个体的潜能。 植物细胞全能性学说在植物界已经得到广泛的证明。现在我们可以植物体的任何一种活的细胞、组织、器官，经过体外人工培养获得它的完整植株，并产生许多植物。这种技术被称为组织培养。它已用于工厂化生产花卉、作物 ( 如甘蔗 ) 的试管苗。 三、动物克隆的历程 关于动物的无性生殖研究，一直是科学家探索的课题。因为人类通过有性生殖的方法，选育家畜品种已有上千年的历史，结果是产生了一些优良的个体或群体。它们比一般的个体更能满足人们的需要和愿望。譬如，一头产奶量特别高的奶牛，一群毛产量多的绵羊，一匹得奖的赛马或一只优秀的警犬。可是，有性生殖的后代，其性能不一定都同亲代一样，有的甚至不如亲代。究其原因，因为卵子或精子只携带构成亲代的、任意一半的等位基因，而等位基因几乎可以有无限的组合，因而会产生不同的后代。兄弟、姊妹、兄妹、姊弟之间都有很大的差异，便是因为极难有完全相同的基因型。 所以通过有性生殖保持一种表现型是非常困难的。如果获得一种理想的表现型如产奶量高的奶牛，再通过无性生殖保持、扩大和繁殖这种表现型，即生产许多遗传上相同的个体，从经济角度讲显然是很有价值的。 ⒈卵细胞培养成成体 1951 ～ 1959 年，我国著名细胞生物学家朱冼等，用直径 10 ～ 13um 的玻璃针刺激去卵膜的蟾蜍卵细胞，在世界上首次培养出 25 只蟾蜍成体，即没有父亲的癞蛤蟆。它们最长的可活 8 个月。 在上述试验中用的是生殖细胞。体细胞能否通过培养获得动物体呢？即植物细胞具有的全能性，动物细胞是否也具有？每个动物细胞，包括体细胞都具有该物种的全套基因是不容怀疑的，但从体细胞直接培养成动物成体至今尚未成功。为了证明动物细胞也具有全能性，生物学家进行了大量的细胞核移植试验。 ⒉细胞核移植试验 1939 年，科学家首次在变形虫中进行核移植试验。他们将核移到同种去核变形虫中，结果重组的变形虫可生长，并繁殖后代。 1963 年起，我国著名生物学家童第周等进行了大量的鱼类核移植试验。其中 1980 年，他们将鲤鱼囊胚期细胞核作供体核，鲫鱼的未受精去核成熟卵细胞作受体质， 2.7% 的移核卵发育到成鱼。鲤鲫移核鱼的主要性状与鲤鱼相同，但脊椎骨的数目与鲫鱼相同，而侧鳞的数目介于这两种鱼之间。这种细胞工程鱼生长速度比鲤鱼快 22% ，现已在生产上大面积推广。 1966 年，科学家用两栖类非洲爪蟾进行核移植试验。他们将蝌蚪的肠细胞的细胞核移入去核的卵细胞中，结果有 1.5% 的重组细胞发育成体。他们的试验第一次证明了动物的体细胞也具有全能性，但在哺乳动物体细胞中尚未证明。 ⒊用胚胎细胞克隆哺乳动物 1986 年，英国科学家用绵羊的 8 细胞胚胎细胞 ( 在 8 细胞胚胎之前的细胞才能表现全能性 ) 做供核细胞，羊的卵细胞做供质细胞，结果重组细胞能发育成羊成体，此后又相继用胚胎细胞克隆出牛、鼠、兔、猴等动物。应该指出的是，该试验并非复制雄性或雌性绵羊，而是复制它们的后代，因此试验还存在一定的不足或缺陷。 在我国，用胚胎细胞克隆哺乳动物， 80 年代末已克隆出免； 1991 年西北农业大学和江苏农学院克隆出羊； 1993 年中国科学院发育研究所与扬州大学农学院克隆出山羊； 1995 年华南师大和广西农业大学克隆出牛。此外，湖南医学院还克隆出鼠。但是，用胚胎细胞以外的体细胞克隆出哺乳动物，则是由英国科学家维尔穆特开创的。 四、“多莉”的诞生 “多莉”是世界上第一例用体细胞——乳腺上皮细胞，通过细胞核移植技术，在复杂的人工操作下，得到的一只小绵羊。其操作过程是这样的： ⒈从苏格兰黑脸母羊 ( 甲羊 ) 取出卵子，并把卵子的遗传物质吸去，成为只有细胞质的卵子。 ⒉从妊娠后期 3 个月的母羊 ( 乙羊 ) 取出乳腺上皮细胞， 在体外传代培养 3 — 6 代，并用药物处理控制细胞发育使之处于休止期。这是非常关键的一步。然后取休止期的细胞作为供体细胞。 ⒊将一个供体细胞导入上述卵子的透明带内腔。然后用电脉冲刺激，使供体细胞和卵子融合，形成重构卵。 ⒋把重构卵移植到黑脸母羊 ( 羊丙 ) 的输卵管里，此前将丙羊的输卵管结扎，使胚胎不能进入子宫。丙羊起到活体培养胚胎的作用，称为中间受体。 ⒌重构卵移入丙羊输卵管内 6 天后，从输卵管冲出胚胎， 挑选正常发育到桑椹期和囊胚期的胚胎。 ⒍将 1 — 3 个桑椹胚或囊胚，移植到苏格兰黑脸羊 ( 丁羊 ) 的子宫内。胚胎移植到子宫后 , 继续发育 , 最后生出“多莉”。这只母羊称为“代母”。 此项用了约 434 个卵子 , 获得 277 个重构卵 , 移植到中间受体 6 天后，冲出 247 个胚胎 , 其中发育到桑椹胚和囊胚的 29 个 (11.7%) 。把 29 个胚胎移植给 13 只代母，最后生出 1 只“多莉” , 产羔率仅为 3.4% 。若以重构卵数计算 , 产羔率低于 4 ‰。可见这一技术有待于完善。另外需要说明的是，克隆绵羊技术并没有做到完全复制，去核卵细胞的细胞质也会含有少量遗传物质，它对胚胎发育也能起重要甚至是决定性的作用。生物的遗传是细胞核和细胞质共同作用的结果。细胞质基因也是 DNA 片段 , 其载体主要是一些细胞器，如质体、线粒体等。 细胞质基因在一定程度上是独立的，一般不受核基因的干扰。与核基因相比尽管细胞核含有 99.9% 的遗传信息，但个体的性状表达仍然会受到卵细胞质的影响。因此，从理论上分析，“多莉”羊还不是完全复制品。由于“多莉”只是孤单的一个，所以有人认为，说“多莉”是一克隆动物，并不准确。虽然目前只获得 1 只“多莉”， 但它是令世人瞩目的重大科学成就。 五、克隆技术的意义及经济价值 波澜壮阔的人类历史在很大程度上是由技术推动发展的：金属制造和改良的农业使文明脱离了石器时代； 19 世纪的工业革命又导致了大机器和大城市的兴起；到了 20 世纪，物理学戴上了王冠。物理学家们劈开原子，揭示了相对论和量子理论的奇妙世界，还开发利用了小小的硅片。他们通过原子弹、晶体管、激光和微型集成电路改变了世界。现在，许多专家相信，人类已经做好了用新的科技发展浪潮迎接未来的准备。正如 1996 年诺贝尔奖获得者、美国赖斯大学的化学家罗伯特·柯尔所说：“现在是物理学和化学的世纪，但下世纪显然将是生物学的世纪。”许多科学家认为，以克隆绵羊“多莉”诞生为标志，生物学世纪已经提前到来。 克隆技术的突破，引起世人的震惊。人们担心的是人类的自我复制，而往往忽视了其他方面的应用和意义。其实，它在基础生命科学、医学、家业科学研究与生产中，具有重大的理论价值和广泛的应用前景，并存在着巨大的潜在经济效益。在未来的 5 ～ 20 年， 将逐步形成和引起一场世界范围内新的生物技术产业革命。 ⒈在基础生命科学方面，由以往进行基因功能研究主要在小鼠等少数动物身上进行到现在在多种动物身上均可得到实现，这有利于更加清晰地揭示基因功能和生命的本质；提供研究哺乳动物细胞发育全能性及核质关系最有效的手段之一；还可以克隆各种濒危动物，如国宝大熊猫、金丝猴甚至白鳍豚等。 ⒉在医学科学方面，可以为医学科学研究提供核基因型完全一致的实验动物，这有利于医学家研究目前尚未找到有效治疗方 法的疾病，并揭示发病机制；对其进行去分化机制的研究，有助于抗衰老及其机制的研究。 ⒊在农业科学方面，可快速培育和扩繁抗病力强、生产性能高的优良动物；可以研究动物的发病机理，寻求新的有效治疗药物。 六、如何迎接“克隆时代”的挑战 克隆技术的成功，标志着“复制”哺乳动物的最后技术障碍已被突破。随之而来，在理论上复制人类已成为可能。所以，克隆技术不仅给我们带来了益处，也向人类提出了严峻的挑战。这一技术一旦应用于人类，将会对人类社会产生极其严重的后果。 ⒈人类从有性生殖回到了无性生殖，
11月26日，意大利著名的胚胎学专家安蒂诺里抛出了一条震惊世界的消息：世界上第一个“克隆人”将于2003年1月的第一个星期诞生！一时间全球哗然，但这位行为另类、被称为“克隆疯子”、“巫医”的科学家坚决拒绝透露孕妇的情况和分娩地点。 怀有克隆胚胎的妇女已怀孕33周，B超显示胎儿为男性，目前重约2.7公斤 目前安蒂诺里只向外界公布怀有克隆胚胎的妇女已怀孕33周，B超显示胎儿为男性，目前重约2.7公斤，发育良好。早在2001年8月，安蒂诺里就在美国华盛顿举行的美国国家科学院大会上宣布了他克隆人的计划。当时安蒂诺里想采用类似克隆羊“多利”的技术：从丈夫的细胞中取出细胞核，放进妻子一个卵细胞内，这个卵细胞已经被取出细胞核，然后把受精卵植入妻子的子宫，十个月后，婴儿就可以出世了。今年四五月间，安蒂诺里又抛出了“克隆人已在孕育”的爆炸性新闻，他宣称，有三名妇女体内的克隆胚胎已经在孕育，其中一个妇女在阿拉伯国家，另两个在前苏联某国，受孕时间已分别为9周、7周和6周。 这次公布的这名妇女是否就是上面提到的三名妇女中的一位？安蒂诺里拒绝透露。 韩国一家公司从10名志愿者妇女中挑选了三人，在5月给其中一名女性植入了克隆胚胎。 全世界医学界并非只有安蒂诺里一人打算勇闯“克隆人”禁区。今年7月23日，韩国一家公司宣布，他们已经在两个月前将克隆人胚胎植入了一名韩国女性的体内，这名韩国妇女已经怀孕，将在6个月以后生下世界上第一个克隆婴儿。这家韩国公司其实是由因进行克隆人实验而著称的美国“克隆援助”公司在韩国注册的。该公司发言人郭纪和说，他们从10名志愿者妇女中挑选了三人，在5月给其中一名女性植入了胚胎。现在就等着“克隆宝宝”出世了。 克隆蝌蚪引发了关于克隆的第一轮辩论 克隆技术可以一直追溯到64年前。1938年，德国胚胎学家汉斯·斯皮曼建议用成年的细胞核植入卵子的办法进行哺乳动物克隆。1962年，美国的发育生物学家约翰·格登宣布他用一个成年细胞克隆出一只蝌蚪，从而引发了关于克隆的第一轮辩论。后来世界知名的“克隆之父”英国科学家威尔穆特1996年培育出了克隆羊——多利。2000年的时候，一只名叫“泰特拉”的猴子出世，他是由美国科学家用无性繁殖技术成功克隆繁殖的，这意味着，克隆人本身已没有技术障碍。 克隆老鼠4%以上的基因都出现表达异常 对于安蒂诺里培育的“克隆宝宝”，世界上不少专家对此表示质疑。意大利科学家指出，克隆动物胚胎必须做大量的实验，而成功率仅为几百分之一。克隆人类胚胎的难度则会更大，安蒂诺里根本不具备克隆人的能力。安蒂诺里以前的合作伙伴、美国科学家扎沃斯也对他的话表示质疑。 美国麻省理工大学的生物学家杰恩里切的科研小组对克隆鼠进行了分子学上的分析。结果发现克隆老鼠4%以上的基因都出现表达异常：要么是正常水平的两倍，要么只有正常水平的一半。试验证明，克隆动物存在大量缺陷，包括肥胖、肺炎、肝脏衰弱和夭折等，甚至大多数克隆性卵细胞不能导致顺利怀孕。科学家们表示，这些症状只是“冰山的一角”，还有更多的缺陷没被发现。他们认为，仅仅通过外表和某项克隆的成功个例就判断“克隆可行”是错误的，应该从分子水平上进行更详细地分析。所以用克隆来制造婴儿是“不安全和不人道的”。 宾夕法尼亚大学兽医学院的分子生物学家汉斯·切勒表示：“我反对生殖性的人体克隆。现在克隆技术的成功率还很低，在成功孕育出多利之前，很多只苏格兰羊死于试验之中。很多克隆出来的动物出生不久就会死亡，那是很残忍的。如果用人做这样的实验就更加残忍了。我们无权制造生命，无权干预自然的进化过程。” 意大利一项法案规定，对试图进行人体克隆的人可判处最多20年的徒刑。 由于克隆人会涉及到社会伦理和秩序，政府部门对此也格外在意。意大利众议院不久前表决通过了一项关于人工生殖方面的法案。法案规定，对试图进行人体克隆的人可判处最多20年的徒刑，而且禁止冷冻胚胎。这是迄今为止意大利在这方面的首部法案，但该法案能否通过参议院的审议还是个未知数。 韩国政府对于在本国发生克隆人的事件也非常不满。韩国保健福祉部发言人李斗利说，韩国政府已经成立了一个四人调查小组，已经开始就克隆人事件进行调查。 调查我国公众对克隆人的看法 2001年11月3日下午6点05分，一头名叫“康康”的克隆小公牛在我国山东莱阳农学院动物胚胎工程中心诞生。11月6日中午12时08分，另一头名叫“双双”的克隆小母牛也在这里诞生。我国的克隆技术并不落后于世界。但迄今为止，我国没有任何科学家打算克隆“人”。 当年人工授精、试管婴儿最初遭到人们排斥，但后来慢慢地被普遍接受，现在还有单身女性想通过人工手段怀孕，那么如果“克隆人”的技术得到完善解决，也能被社会接受吗？ 韩海燕(在意大利工作了4年)：安蒂诺里要克隆人的事情在意大利遭到普遍反对，因为意大利是一个天主教国家，连流产都不被人接受，教皇曾表示，如果真的克隆人，就要借助司法手段进行干预。我认为，毕竟克隆人不是一个正常出生的宝宝，一定会备受关注，那他今后该怎么生活呢？能过正常人的日子吗？而且他肯定得接受各种各样的试验，得抽血、取细胞，这样太残忍了。再者，万一在成长过程中发现有缺陷，那又怎么办呢？毕竟是一个人，不能随便处死他吧！ 李娟(一直在国家机关工作)：这样做违反了自然生长规律，虽然是科技的发展，但毕竟人的现实生活不仅要有物质方面的发展，还要有精神方面的发展。现在社会的承受能力还没有跟上来，还没有得到大部分人的认可。 张先生(在北京某著名律师事务所工作)：正常生育其实也是细胞的繁殖，人类的生育从心理角度讲是对自我的一种延续，克隆也可以完成这种延续。而且必须承认这是科学技术的一大进步，对人类疾病的治疗一定会有很大的好处，但是一定要考虑是不是会影响社会秩序、法律秩序等等。 康乐(中国科学院生物局局长)：虽然从技术本身看这件事有一定意义，但是要坚决反对克隆人，慎重对待克隆技术，对克隆人要尽快采取措施尤其是通过立法予以禁止。我们要储备克隆技术，但在应用方面要高度小心，科学探索要在严格的实验条件和法律条件下进行。 李凌松(北京大学从事干细胞研究的教授)：中国科学家在反对克隆人上是有共识的，因为它是不负责任的行为，会带来许多无法预料的问题。人是社会人，克隆人出来，人的继承权、婚姻关系、血缘关系都会出现问题。 陈大元(克隆大熊猫的权威专家、中科院教授)：中国科学家曾在多次会议上就专门对克隆问题进行讨论，绝大多数科学家和科学界人士对于克隆人问题已达成一致共识，明确表示反对进行有关克隆人的实验。
克隆是英文clone的音译，简单讲就是一种人工诱导的无性繁殖方式。但克隆与无性繁殖是不同的。无性繁殖是指不经过雌雄两性生殖细胞的结合、只由一个生物体产生后代的生殖方式，常见的有孢子生殖、出芽生殖和分裂生殖。由植物的根、茎、叶等经过压条或嫁接等方式产生新个体也叫无性繁殖。绵羊、猴子和牛等动物没有人工操作是不能进行无性繁殖的。科学家把人工遗传操作动物繁殖的过程叫克隆，这门生物技术叫克隆技术。 克隆的基本过程是先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中，利用微电流刺激等使两者融合为一体，然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎，当胚胎发育到一定程度后，再被植入动物子宫中使动物怀孕，便可产下与提供细胞者基因相同的动物。这一过程中如果对供体细胞进行基因改造，那么无性繁殖的动物后代基因就会发生相同的变化。 1997年2月22日，英国罗斯林研究所的科学家维尔穆特等人宣布用体细胞克隆绵羊获得成功，在世界上引起巨大震动。一时间，克隆绵羊“多利”成为动物界最耀眼的“明星”，其“咩咩”的叫声迅速响遍全球。 “克隆”是英文单词“Clone”的音译，其本身的含义是无性繁殖，即由同一个祖先细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系，该细胞系中每个细胞的基因彼此相同。 克隆技术在现代生物学中被称为“生物放大技术”，它已经历了三个发展时期：第一个时期是微生物克隆，即用一个细菌很快复制出成千上万个和它一模一样的细菌，而变成一个细菌群；第二个时期是生物技术克隆，比如用遗传基因――DNA克隆；第三个时期是动物克隆，即由一个细胞克隆成一个动物。克隆绵羊“多利”由一头母羊的体细胞克隆而来，使用的便是动物克隆技术。 在自然界，有不少植物具有先天的克隆本能，如番薯、马铃薯、玫瑰等的插枝繁殖的植物。而动物的克隆技术，则经历了由胚胎细胞到体细胞的发展过程。 早在20世纪50年代，美国的科学家以两栖动物和鱼类作研究对象，首创了细胞核移植技术。1986年，英国科学家魏拉德森用胚胎细胞克隆出一只羊，以后又有人相继克隆出牛、鼠、兔、猴等动物。这些克隆动物的诞生，均是利用胚胎细胞作为供体细胞进行细胞核移植而获得成功的。 而克隆绵羊“多利”是用乳腺上皮细胞（体细胞）作为供体细胞进行细胞核移植的，它翻开了生物克隆史上崭新的一页，突破了利用胚胎细胞进行核移植的传统方式，使克隆技术有了长足的进展。 克隆绵羊“多利”没有父亲，却有三位母亲。整个克隆过程如下： 首先，科学家从一只产自芬兰的6岁成年多塞特母绵羊A（“多利”的亲生母亲）的乳腺中取出一个本身并没有繁殖能力的普通细胞，将这个细胞的基因分离出来备用。 然后，科学家在取出另一只母绵羊B（“多利”的借卵母亲）的未受精的卵细胞，将这个卵细胞中的基因取出，换上母绵羊B的乳腺细胞的基因，形成一个含有新遗传物质的卵细胞，再将这个基因已被“调包”的卵细胞放电激活，促使它分裂发育成胚胎。 最后，当胚胎生长到一定程度时，将它植入第三只母绵羊C（“多利”的代孕母亲）的子宫中，经过正常的妊娠产下“多利”。 多利完全继承了其亲生母亲――多塞特母绵羊的全部DNA基因特征，是多塞特母绵羊百分之百的“复制品”。 无性繁殖现象在低等植物中是存在的，而按照哺乳动物界的规律，动物的繁衍要由两性生殖细胞来完成，由于父体和母体的遗传物质在后代体内各占一半，因此后代绝对不是父母的复制品。而克隆绵羊的诞生，意味着人类可以利用哺乳动物的一个细胞大量生产出完全相同的生命体，完全打破了亘古不变的自然规律。这是生物工程技术发展史中的一个里程碑，也是人类历史上的一项重大科学突破。 克隆技术被誉为“一座挖掘不尽的金矿”，它在生产实践上具有重要的意义，潜在的经济价值十分巨大。首先，在动物杂种优势利用方面，较常规方法而言，哺乳动物克隆技术费时少、选育的种畜性状稳定；其次，克隆技术在抢救濒危珍稀物种、保护生物多样性方面可发挥重要作用，即使在自然交配成功率很低的情况下，科研人员也可以从濒危珍稀动物个体身上选择适当的体细胞进行无性繁殖，达到有效保护这些物种的目的。 动物克隆技术的重大突破，也带来了广泛的争议。克隆技术对人类来说，是一把“双刃剑”。一方面，它能给人类带来许多益处――诸如保持优良品种、挽救濒危动物、利用克隆动物相同的基因背景进行生物医学研究等；另一方面，它将对生物多样性提出挑战――生物多样性是自然进化的结果，也是进化的动力，有性繁殖是形成生物多样性的重要基础，而“克隆动物”则会导致生物品系减少，个体生存能力下降。 更让人不寒而栗的是，克隆技术一旦被滥用于克隆人类自身，将不可避免地失去控制，带来空前的生态混乱，并引发一系列严重的伦理道德冲突。世界各国政府和科学界已对此高度关注，采取立法等措施明令禁止用克隆技术制造“克隆人”，以保证克隆只用于造福人类，而绝非复制人类. “多莉”的诞生，意味着人类可以利用动物的一个组织细胞，像翻录磁带或复印文件一样，大量生产出相同的生命体，这无疑是基因工程研究领域的一大突破。 ，人们剪下植物枝条，扦插到土里，不久就会发芽，长出新的植株，这些植株是遗传物质组成完全相同的植株，这就是“克隆”。还有将马铃薯等植物的块茎切成许多小块进行繁殖，由此而长出的后代也是“克隆”。所有这些都是植物的无性繁殖，或称为“克隆”，它非常普遍，几乎每个人都曾见过。 在动物界也有无性繁殖，不过多见于非脊椎动物，如原生动物的分裂繁殖、尾索类动物的出芽生殖等。但对于高级动物，在自然条件下，一般只 能进行有性繁殖，所以要使其进行无性繁殖，科学家必须经过一系列复杂的操作程序。在本世纪50年代，科学家成功地无性繁殖出一种两栖动物—非洲爪蟾，揭开了细胞生物学的新篇章。 英国和我国等国在80年代后期先后利用胚胎细胞作为供体，“克隆”出了哺乳动物。到90年代中期，我国已用此种方法“克隆”了老鼠、兔子、山羊、牛、猪5种哺乳动物。 19隆”出一只基因结构与供体完全相同的小羊“多莉”（Dolly），世界舆论为之哗然。“多莉”的特别之处在于它的生命的诞生没有精子的参与。研究人员先将一个绵羊卵细胞中的遗传物质吸出去，使其变成空壳，然后从一只6岁的母羊身上取出一个乳腺细胞，将其中的遗传物质注入卵细胞空壳中。这样就得到了一个含有新的遗传物质但却没有受过精的卵细胞。这一经过改造的卵细胞分裂、增殖形成胚胎，再被植入另一只母羊子宫内，随着母羊的成功分娩，“多莉”来到了世界。 但为什么其它克隆动物并未在世界上产生这样大的影响呢？这是因为其他克隆动物的遗传基因来自胚胎，且都是用胚胎细胞进行的核移植，不能严格地说是“无性繁殖”。另一原因，胚胎细胞本身是通过有性繁殖的，其细胞核中的基因组一半来自父本，一半来自母本。而“多莉”的基因组，全都来自单亲，这才是真正的无性繁殖。因此，从严格的意义上说，“多莉”是世界上第一个真正克隆出来的哺乳动物。其特点就在于它与为它提供遗传物质的供97年2月23日，英国苏格兰罗斯林研究所的科学家宣布，他们的研究小组利用山羊的体细胞成功地“克克隆技术是科学发展的结果，它有着极其广泛的应用前景。在园艺业和畜牧业中，克隆技术是选育遗传性质稳定的品种的理想手段，通过它可以培育出优质的果树和良种家畜。在医学领域，目前美国、瑞士等国家已能利用“克隆”技术培植人体皮肤进行植皮手术。这一新成就避免了异体植可能出现的排异反应，给病人带来了福音。据中国新华社1997年4月4日报道，上海市第九人员医院整形外科专家曹谊林在世界上首次采用体外细胞繁殖的方法，成功地在白鼠上复制出人耳，为人体缺失器官的修复和重建带来希望。克隆技术还可用来大量繁殖许多有价值的基因，如治疗糖尿病的胰岛素、有希望使侏儒症患者重新长高的生长激素和能抗多种疾病感染的干扰素等等。 克隆是人类在生物科学领域取得的一项重大技术突破，反映了细胞核分化技术、细胞培养和控制技术的进步。 原是英文clone的音译，意为生物体通过细胞进行的无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群，简称为“无性繁殖”。 “克隆”一词于1903年被引入园艺学，以后逐渐应用于植物学、动物学和医学等方面。广泛意义上的“克隆”其实是我们的日常生活中经常遇到，只是没叫它“克隆”而已。 春天里体—那头6岁母羊具有完全相同的基因，可谓是它母亲的复制品。值得注意的是，克隆技术在带给人类巨大利益的同时，也会给人类带来灾难和问题，但我们不能因为这项技术可能带来严重后果而阻止其发展，它的产生归根结底是利大于弊，它将被广泛应用在有利于人类的方面。 “多莉”的诞生，意味着人类可以利用动物的一个组织细胞，像翻录磁带或复印文件一样，大量生产出相同的生命体，这无疑是基因工程研究领域的一大突破。 ，人们剪下植物枝条，扦插到土里，不久就会发芽，长出新的植株，这些植株是遗传物质组成完全相同的植株，这就是“克隆”。还有将马铃薯等植物的块茎切成许多小块进行繁殖，由此而长出的后代也是“克隆”。所有这些都是植物的无性繁殖，或称为“克隆”，它非常普遍，几乎每个人都曾见过。 在动物界也有无性繁殖，不过多见于非脊椎动物，如原生动物的分裂繁殖、尾索类动物的出芽生殖等。但对于高级动物，在自然条件下，一般只 能进行有性繁殖，所以要使其进行无性繁殖，科学家必须经过一系列复杂的操作程序。在本世纪50年代，科学家成功地无性繁殖出一种两栖动物—非洲爪蟾，揭开了细胞生物学的新篇章。 英国和我国等国在80年代后期先后利用胚胎细胞作为供体，“克隆”出了哺乳动物。到90年代中期，我国已用此种方法“克隆”了老鼠、兔子、山羊、牛、猪5种哺乳动物。 19隆”出一只基因结构与供体完全相同的小羊“多莉”（Dolly），世界舆论为之哗然。“多莉”的特别之处在于它的生命的诞生没有精子的参与。研究人员先将一个绵羊卵细胞中的遗传物质吸出去，使其变成空壳，然后从一只6岁的母羊身上取出一个乳腺细胞，将其中的遗传物质注入卵细胞空壳中。这样就得到了一个含有新的遗传物质但却没有受过精的卵细胞。这一经过改造的卵细胞分裂、增殖形成胚胎，再被植入另一只母羊子宫内，随着母羊的成功分娩，“多莉”来到了世界。 但为什么其它克隆动物并未在世界上产生这样大的影响呢？这是因为其他克隆动物的遗传基因来自胚胎，且都是用胚胎细胞进行的核移植，不能严格地说是“无性繁殖”。另一原因，胚胎细胞本身是通过有性繁殖的，其细胞核中的基因组一半来自父本，一半来自母本。而“多莉”的基因组，全都来自单亲，这才是真正的无性繁殖。因此，从严格的意义上说，“多莉”是世界上第一个真正克隆出来的哺乳动物。其特点就在于它与为它提供遗传物质的供97年2月23日，英国苏格兰罗斯林研究所的科学家宣布，他们的研究小组利用山羊的体细胞成功地“克克隆技术是科学发展的结果，它有着极其广泛的应用前景。在园艺业和畜牧业中，克隆技术是选育遗传性质稳定的品种的理想手段，通过它可以培育出优质的果树和良种家畜。在医学领域，目前美国、瑞士等国家已能利用“克隆”技术培植人体皮肤进行植皮手术。这一新成就避免了异体植可能出现的排异反应，给病人带来了福音。据中国新华社1997年4月4日报道，上海市第九人员医院整形外科专家曹谊林在世界上首次采用体外细胞繁殖的方法，成功地在白鼠上复制出人耳，为人体缺失器官的修复和重建带来希望。克隆技术还可用来大量繁殖许多有价值的基因，如治疗糖尿病的胰岛素、有希望使侏儒症患者重新长高的生长激素和能抗多种疾病感染的干扰素等等。 克隆是人类在生物科学领域取得的一项重大技术突破，反映了细胞核分化技术、细胞培养和控制技术的进步。 原是英文clone的音译，意为生物体通过细胞进行的无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群，简称为“无性繁殖”。 “克隆”一词于1903年被引入园艺学，以后逐渐应用于植物学、动物学和医学等方面。广泛意义上的“克隆”其实是我们的日常生活中经常遇到，只是没叫它“克隆”而已。 春天里体—那头6岁母羊具有完全相同的基因，可谓是它母亲的复制品。值得注意的是，克隆技术在带给人类巨大利益的同时，也会给人类带来灾难和问题，但我们不能因为这项技术可能带来严重后果而阻止其发展，它的产生归根结底是利大于弊，它将被广泛应用在有利于人类的方面。 克隆一词是由clone音译而来，在音译名出现以前曾有一个意译名--无性繁殖系，指由单一细胞或共同祖先经有丝分裂得到的细胞群体或有机群体。我们通过细胞培养可以得到一个细胞克隆。 克隆技术简史（小资料） 1938年，第一位现代胚胎学家、德国的汉斯•斯皮曼博士建议用成熟的细胞核植入卵子的办法进行哺乳动物克隆。 1952年，运用斯皮曼的构想，出现世界上第一只克隆青蛙。 1962年，约翰•格登宣布他用一个成熟细胞克隆出一只蝌蚪，从而引发了关于克隆的第一轮辩论。 1984年，斯蒂恩•威拉德森用胚胎细胞克隆出一只羊。这是第一例得到证实的克隆哺乳动物。 1995年10月，美国麻省麻醉学家维坎蒂博士利用改良组织工程，令老鼠背上长出人耳，从而使人类能在实验室培育出可向人类移植的皮肤和软骨。 1996年7月，英国苏格兰罗斯林研究所成功地用羊乳腺细胞克隆出小绵羊"多利"。 1997年10月，英国专家研制出一个无头的青蛙胚胎，令其有关技术可以制造人类器官以便作为医学移植用途。 1999年7月，日本科学家克隆出多头牛，并将其肉类推向市场出售。 2000年4月，美国先进细胞工程公司克隆出6头比它们本身实际年龄年轻的小牛。 2000年，美国科学家用无性繁殖技术成功克隆出一只猴子"泰特拉"，这意味着克隆人本身已没有技术障碍。 2001年11月25日，美国马萨诸塞州的生物技术公司成功克隆出人类胚胎，在克隆技术上迈出了重要一步。不过该公司表示其目的不是为了克隆人，而是为了获得能够用于治疗帕金森综合征和青少年糖尿病等各种疾病的干细胞。 克隆是什么？ 克隆一词是由clone音译而来，在音译名出现以前曾有一个意译名--无性繁殖系，指由单一细胞或共同祖先经有丝分裂得到的细胞群体或有机群体。我们通过细胞培养可以得到一个细胞克隆。在微生物实验时，通过倒平皿，我们可以得到一个个的菌落，这些菌落其实就是细菌的克隆。可见克隆原来是个名词，指一群细胞或一群个体。随着分子生物学的发展，出现了核移植与基因工程之类的操作。核移植操作可以得到重建细胞，重建细胞可以繁殖成一个无性系；基因工程操作可以将某一被选定的基因拼接到质粒的复制子上，随着复制子的复制也能得到DNA分子的无性系。于是，有人就把这类操作称作克隆，即将clone一词由名词转化成动词，并将核移植称为 nuclear cloning（核克隆），通过基因工程得到DNA分子的无性系称为molecular cloning（分子克隆）。在这里克隆是一种实现无性繁殖（asexual reproduction）的操作，是一种显微操作或分子生物学操作，而不是一般意义上的无性繁殖（或无性繁殖操作）。这也许正是克隆一词能够存在而不被无性繁殖替代的原因。 克隆羊 多利羊又称克隆羊，其实是用核克隆技术产生的羊。有人说，只有多利羊才是真正的克隆羊，其他报导，如克隆猪、克隆牛等，由于它们是由胚胎细胞发育而成的，而胚胎细胞是有性繁殖产生的，所以，不是真正意义上的克隆。这是一种误解，是由于对有性过程在时间上把握不准所造成的。有性过程到受精卵、即合子形成时即告结束，合子分裂一旦开始即与有性过程无关了。如果说分裂后的胚胎细胞是有性繁殖产生的，那么，体细胞追究下去也是有性繁殖产生的。但事实上它们都是由合子经有丝分裂逐渐产生的。这就是说，有性繁殖实际上是经过一次有性过程和许多次无性过程，最后产生一个成活的后代而实现的。从胚胎中取出一个细胞使之发育成一个个体，这显然应属于无性繁殖。所以，从这个意义上讲，杜里舒是克隆技术（细胞克隆技术）的创始人，他的将两分裂球时期的细胞分开，使之发育成两个海胆的实验，是最早的克隆实验。而人类的同卵双生双胞胎，就是经天然细胞克隆化产生的。而克隆猪、克隆牛，如果是经核移植育成的，则不管供核细胞是来自早期胚胎细胞，还是已分化细胞，均属于真正意义上的克隆技术，而且是比杜里舒的水平高得多的克隆技术。 走近"基因药物 人们为了实现某种目的，将克隆的外源目的基因(一般是人的DNA )，整合到动物受精卵的染色体内，使之在动物体内得到表达并能稳定地遗传给后代，这种含有外源基因的动物就叫做转基因动物。从事这项研究的科学家们说，一头转基因动物就是一座天然基因药物制造厂，不仅可以大大降低成本，而且还能够扩大生产，获得更多的基因药物。 利用转基因动物来生产基因药物是一种全新的生产模式，与传统的制药技术相比具有无可比拟的优越性。以美国为例，凝血因子Ⅷ的年需要量约为120 克。过去，这120克凝血因子Ⅷ需要120万升血浆提取，以每人献血200 毫升计，需600 名献血员提供血浆才能满足。而用转基因牛来生产，一头牛每年的奶产量是1万公斤，如每公斤乳汁中可制造10毫克凝血因子Ⅷ的话，那就只需1.2头这种牛即可满足需要。再以白蛋白为例，美国的年需要量为10万克，过去需从200 万升血浆中提取，而用转基因牛来生产，以每公斤乳汁制造2 克的蛋白计算，就只需5000头牛即可解决。此外，从人血中提取血清蛋白质可能产生的肝炎、艾滋病等传染性疾病，也可因此而得以避免。 生物技术是当今最为活跃的一门技术。1971年，诺贝尔奖获得者保罗•伯格首次成功地把两种不同的基因拼接在一起，使生物技术发展到基因重组与移植的新阶段。 此后，基因重组技术取得了一个个丰硕成果。1978年合成了人工胰岛素，1979年实现了生长激素基因在大肠杆菌中的表达，1982年研制成功了人工干扰素，基因制药从此走上了产业化道路。但是，目前的基因药物是通过基因重组技术培育大肠杆菌和动物细胞来制造的，而大肠杆菌这类低等生物是不可能生产出结构复杂的药物，动物细胞培养的成本又太高。所以，利用基因重组与移植技术来培育转基因动物生产药物便应运而生了在利用转基因动物提取药物方面，英国科学家首开先河。1997年年底，英国PPL治疗学公司率先利用克隆"多利"所采用的"细胞核转变"法，培育出200头携带人体基因的绵羊，并成功地从奶汁中提取了α－1抗胰蛋白酶。这是科学家首次从遗传工程培育的绵羊的奶中，提取可用于治疗人类疾病的药物成分，为建立"动物药厂" 打下了基础。随后，芬兰科学家将人体的促红细胞生长素基因，植入乳牛的受精卵中，创造了一种能生产出促红细胞生长素的乳牛。从理论上说，这种乳牛一年可提取60－80千克促红生长素，比目前全世界的使用量还多。 假如你是足球迷，你肯定希望世上再多一个罗纳尔多；假如你是音乐爱好者，你当然愿意再拥有一个贝多芬；再有一个爱迪生、爱因斯坦也是许多人所梦想的。古希腊有位哲学家曾经说过"世上不可能有两片完全相同的叶子"，换句话，以上的梦想都只能是空想，没有实现的可能。但是，现在情况却有了变化，有一种新兴生物技术"克隆"，或许可以做到这一点。那么克隆是什么呢?它奇妙在哪里呢?今天，就让我们一起走近——"奇妙的克隆"。 我们身边哪些动、植物先天具有克隆的本领？具有克隆能力的动植物有：土豆、蚯蚓、桑树，丝瓜藤,吊兰.水母，海参、仙人掌。水母在遭到伤害后，伤口会自动补好。章鱼的触手可以再生。龙虾的大钳子掉了 ，还会再长出来。还有秋海棠、富贵竹，它们插枝即活。壁虎。它遇到危险时，就将自己的尾巴断掉，然后再长出来。 能不能找出这些天生具有克隆本领的动植物的共同点，用自己的话说说克隆是什么?不由生殖细胞结合产生的后代。 克隆技术可以造福于人类：能使不具备繁殖能力的动物诸如骡扩大繁殖，还能挽救濒危动物。 假如你也掌握了克隆技术，你想克隆什么呢？为什么要克隆它？要求：1、想法要奇妙；2、想法要有益于人类；3、表达要有条理，语气、语调适当。 如果让我克隆，我会克隆无数对明澈的眼睛。许多人认为有一双好眼睛是理所当然的事，而我并不这么认为。当你看到那毫无光芒的双眼，听到期盼光明的心灵的呼唤，难道你的心灵没有震动吗？上天对他们不公，就让科学来为他们创造光明，就让社会让他们体会真爱。我坚信"科技以人为本"并不是空话。所以我要克隆眼睛，让更多的人重见光明. 我想克隆恐龙。因为我喜欢恐龙，想再现恐龙时代的盛景。而且具备克隆恐龙的条件，因为恐龙时代的南极有可能处在温带地区，当恐龙死后尸体藏在南极中，而此时的南极很可能已在冰天雪地中，由于寒冷可防止身体的腐化，所以可以提取恐龙的DNA，从而克隆恐龙，这样也可以使后代开阔眼界。 我不主张象他那样去克隆一些史前生物，如恐龙、猛蚂等。因为任何生物的生存与灭绝都不是人类所能控制的，人类应该严格遵守"自然法则"，让生物的发展顺其自然。如果再回到从前，就可能破坏生态平衡。 我想克隆水，目前世界上的淡水资源严重缺乏，已无法维持人类生存，而人类仍在无限制地浪费水，所以我想克隆水。 我要克隆粮食，拯救非洲正在挨苦受饿的人们，使他们过上温饱的日子。 我们都知道，热带雨林是地球之肺。而亚马逊平原是世界上最大的热带雨林，占地球上热带雨林总面积的50%，达650万平方公里。这里自然资源丰富，物种繁多，被称为"生物学家的天堂"。然而，亚马逊却没有因为它的富有得到人们的厚爱。70年代以来，人们的滥砍滥伐使其三分之一的面容消失在我们眼前，这将意味着维持人类生存的氧气将减少五分之一。所以，我想克隆亚马逊热带雨林，将其安放在撒哈拉沙漠上，使之净化环境。 我反对刚才三位同学的说法。他们的想法很好，表达了他们忧国忧民之心，表达了他们的美好愿望。可是水、热带雨林、粮食没有细胞，如何克隆？（众笑）（有人小声插话）：水可以的，有水分子。 如果我有克隆的技术，我会克隆孙悟空，因为他无所不能，可以实现我们很多改变社会的理想。（众大笑） 师：感谢这些同学给大家带来的大胆的、新奇的"克隆理想"，不管它们符不符和科学原理，但都表现了大家的美好愿望，希望科技能来社会的进步，使人类的生活更幸福！围绕"克隆技术造福人类?!"的辩题展开讨论。) 师：辩论要求：(1)语言清晰、流畅，声音洪亮；（2）观点鲜明，论据充足；(3)驳斥对方观点时既要有"理"，又要有"礼"。 （以"克隆技术能造福人类"为正方，"克隆技术不能造福人类"为反方展开辩论） 正方：我认为"克隆技术能造福人类"，课文的第四章节不是非常详细地介绍了克隆对人类的作用吗？如能使不具备繁殖能力的动物扩大繁殖，据有关报道，公驴和母马所生出来的杂种动物——骡，如何繁殖这些优良品种呢？只能用克隆。还能挽救如熊猫这类繁殖能力低的濒危动物。 反方：我觉得克隆无益于人类。你别不相信，请听我慢慢道来。（停顿，由于太激动，又重复了一遍，众笑）首先克隆正如正方辩友所说，的确可以挽救濒危动物，但你可曾想到，这样的克隆会破坏动物种群的正常发展，使动物走向衰弱，就算可以救一时，难道可以救一世吗？我想不可能。有人说克隆可以使动植物再生，有没有想过，只要人类不刻意破坏，这样的生态平衡已维持了千万年，你这样无限制的克隆，是否破坏了它的食物链，又是另一种生态平衡的破坏呢？ 正方：我听说在亚马逊的热带雨林中每天都要消失近百种植物，所以克隆能挽救一部分植物，虽然不是全部，但仍能部分保存。现在的克隆技术虽然不是十分发达，但我相信今后克隆水平会更好，这时克隆就有它的用武之地了，总不能等到地球全部荒芜才研究克隆吧？ 反方（冷笑）：对方辩友真是对未来充满希望啊！可是这也证明了这只是你的美好想象，寄希望于克隆技术的提高，而事实上呢，经过了247次失败后，才得到了"多利"克隆小绵羊。在这个过程中需要伤害多少动物啊，这与我们克隆的初衷不是背道而驰吗？ 正方：失败乃成功之母嘛！（众笑）现在的克隆技术或许不发达，但在今后我相信人类的克隆水平会越来越好，克隆出来的动植物会越来越优异，象失败247次这样的事将不再发生，它最终会造福于人类。而且克隆对于研究有些疾病和研究人的寿命有不可低估的作用。当某一天我们自身的某个器官出了问题，就可以从先前克隆的胚胎中取出这个器官进行培养，然后替换自己病变的器官。我们就再也不必害怕疾病了。所以克隆对人类还是有益的。 反方：你还嫌世界上的人口不多吗？如果一有严重的疾病就换器官，人不是都可以长生不老？如果这样，地球人口增长率岂不达到极点，地球不就要出现危机了吗？ 正方：或许那时人们可以到其他星球中生活了！（众笑） 反方：我想说说克隆人有哪些危害。（反方同学鼓掌）比如，如果克隆的供体细胞发生变异，或者培养胚胎的培养基因与科学家开了小小的玩笑，克隆出一个废品，我们能象对待阿狗阿猫那样处置他
(1)克隆介绍“克隆”是从英文“clone”音译而来，在生物学领域有3个不同层次的含义。 1．在分子水平，克隆一般指DNA克隆(也叫分子克隆)。含义是将某一特定DNA片断通过重组DNA技术插入到一个载体(如质粒和病毒等)中，然后在宿主细胞中进行自我复制所得到的大量完全相同的该DNA片断的“群体”。 2．在细胞水平，克隆实质由一个单一的共同祖先细胞分裂所形成的一个细胞群体。其中每个细胞的基因都相同。比如，使一个细胞在体外的培养液中分裂若干代所形成的一个遗传背景完全相同的细胞集体即为一个细胞克隆。又如，在脊椎动物体内，当有外源物(如细菌或病毒)侵入时，会通过免疫反应产生特异的识别抗体。产生某一特定抗体的所有浆细胞都是由一个B细胞分裂而成，这样的一个浆细胞群体也是一个细胞克隆。细胞克隆是一种低级的生殖方式－无性繁殖，即不经过两性结合，子代和亲代具有相同的遗传性。生物进化的层次越低，越有可能采取这种繁殖方式。 3．在个体水平，克隆是指基因型完全相同的两个或更多的个体组成的一个群体。比如，两个同卵双胞胎即为一个克隆！因为他（她）们来自同一个卵细胞，所以遗传背景完全一样。按此定义，“多利”并不能说成是一个克隆！因为“多利”只是孤单的一个。只有当那些英国胚胎学家能将两个以上完全相同的细胞核移植到两个以上完全相同的去核卵细胞中，得到两个以上遗传背景完全相同的“多利”时才能用克隆这个词来描述。所以在那篇发表于1997年2月出版在《Nature》杂志上的轰动性论文中，作者并没有把“多利”说成是一个克隆。 另外，克隆也可以做动词用，意思是指获得以上所言DNA、细胞或个体群体的过程。 二、克隆技术 1．DNA克隆 现在进行DNA克隆的方法多种多样，其基本过程如下图所示(未按比例) 可见，这样得到的DNA可以应用于生物学研究的很多方面，包括对特异DNA的碱基顺序的分析和处理，以及生物技术工业中有价值蛋白质的大量生产等等。 2．生物个体的克隆 (1)植物个体的克隆 在20世纪50年代，植物学家用胡萝卜为模型材料，研究了分化的植物细胞中遗传物质是否丢失问题，他们惊奇地发现，从一个单一已经高度分化的胡萝卜细胞 可以发育形成一棵完整的植株!由此，他们认为植物细胞具有全能性。从一棵胡萝卜中的两个以上的体细胞发育而成的胡萝卜群体的遗传背景完全一样，故为一个克隆。如此的植物的克隆过程是一个完全的无性繁殖过程! (2)动物个体的克隆 ① “多利”的诞生 1997年2月27日英国爱丁堡罗斯林(Roslin)研究所的伊恩·维尔莫特科学研究小组向世界宣布，世界上第一头克隆绵羊“多利”(Dolly)诞生，这一消息立刻轰动了全世界。 “多莉”的产生与三只母羊有关。一只是怀孕三个月的芬兰多塞特母绵羊，两只是苏格兰黑面母绵羊。芬兰多塞特母绵羊提供了全套遗传信息，即提供了细胞核（称之为供体）；一只苏格兰黑面母绵羊提供无细胞核的卵细胞；另一只苏格兰黑面母绵羊提供羊胚胎的发育环境——子宫，是“多莉”羊的“生”母。其整个克隆过程简述如下： 从芬兰多塞特母绵羊的乳腺中取出乳腺细胞，将其放入低浓度的营养培养液中，细胞逐渐停止了分裂，此细胞称之为供体细胞；给一头苏格兰黑面母绵羊注射促性腺素，促使它排卵，取出未受精的卵细胞，并立即将其细胞核除去，留下一个无核的卵细胞，此细胞称之为受体细胞；利用电脉冲的方法，使供体细胞和受体细胞发生融合，最后形成了融合细胞，由于电脉冲还可以产生类似于自然受精过程中的一系列反应，使融合细胞也能象受精卵一样进行细胞分裂、分化，从而形成胚胎细胞；将胚胎细胞转移到另一只苏格兰黑面母绵羊的子宫内，胚胎细胞进一步分化和发育，最后形成一只小绵羊。出生的“多莉”小绵羊与多塞特母绵羊具有完全相同的外貌。 一年以后，另一组科学家报道了将小鼠卵丘细胞(围绕在卵母细胞外周的高度分化细胞)的细胞核移植到去除了细胞核的卵母细胞中得到20多只发育完全的小鼠。如呆“多利”因为只有一只，还不够叫做克隆羊的话，这些小鼠 就是名副其实的克隆鼠了。 ② 通过细胞核移植克隆小鼠的基本过程 在本实验中，卵丘细胞是经如下过程得到的：通过连续几次注射绒毛膜促性腺激素，使雌鼠诱导成高产卵量状态。然后从雌鼠输卵管中收集卵丘细胞与卵母细胞的复合体。经透明质酸处理使卵丘细胞散开。选择直径为10－12微米的卵丘细胞用作细胞核供体（前期实验表明，若用直径更小或更大的卵丘细胞的细胞核，经过细胞核移植的卵母细胞很少发育到8细胞期）。所选择的卵丘细胞保持在一定的溶液环境中，在3小时内进行细胞核移植（与此不同的是，在获得“多利”时用作细胞核供体的乳腺细胞先在培养液中传代了3－6次） 卵母细胞（一般处于减数分裂中期 II ）通过与上面描述类似的方法，从不同种的雌鼠中收集。在显微镜下小心地用直径大约7微米的细管取出卵母细胞的细胞核，尽量不取出细胞质。同样小心取出卵丘细胞的细胞核，也尽量去除所带的细胞质（通过使取出的细胞核在玻璃管中往复运动数次，以去除所带的少量的细胞质）。在细胞核被取出后5分钟之内，直接注射到已经去除了细胞核的卵母细胞中。进行了细胞核移植的卵母细胞先放在一种特制的溶液中1－6小时，然后加入二价的锶离子（Sr2+）和细胞分裂抑素B。前者使卵母细胞激活，后者抑制极体的形成和染色体的排除。再取出处理过的卵母细胞，放在没有锶和细胞分裂抑素B的特制的溶液中使细胞分裂形成胚胎。 不同阶段的胚胎（从2细胞期到胚泡期）被分别植入几天前与已经结扎雄鼠交配过的假孕母鼠的输卵管或子宫中发育。发育完全的胎儿鼠在大约19天后通过手术取出。 目前胚胎细胞核移植克隆的动物有小鼠、兔、山羊、绵羊、猪、牛和猴子等。在中国，除猴子以外，其他克隆动物都有，也能连续核移植克隆山羊，该技术比胚胎分割技术更进一步，将克隆出更多的动物。因胚胎分割次数越多，每份细胞越少，发育成的个体的能力越差。体细胞核移植克隆的动物只有一个，就是“多利”羊。 三、克隆技术的福音 1． 克隆技术与遗传育种 在农业方面，人们利用“克隆”技术培育出大量具有抗旱、抗倒伏、抗病虫害的优质高产品种，大大提高了粮食产量。在这方面我国已迈入世界最先进的前列。 2． 克隆技术与濒危生物保护 克隆技术对保护物种特别是珍稀、濒危物种来讲是一个福音，具有很大的应用前景。从生物学的角度看，这也是克隆技术最有价值的地方之一。 3． 克隆技术与医学 在当代，医生几乎能在所有人类器官和组织上施行移植手术。但就科学技术而言，器官移植中的排斥反应仍是最为头痛的事。排斥反应的原因是组织不配型导致相容性差。如果把“克隆人”的器官提供给“原版人”，作器官移植之用，则绝对没有排斥反应之虑，因为二者基因相配，组织也相配。问题是，利用“克隆人”作为器官供体合不合乎人道？是否合法？经济是否合算？ 克隆技术还可用来大量繁殖有价值的基因，例如，在医学方面，人们正是通过“克隆”技术生产出治疗糖尿病的胰岛素、使侏儒症患者重新长高的生长激素和能抗多种病毒感染的干挠素，等等。(2)克隆具体事例1995年7月，苏格兰科学家成功地用一只母羊的胚胎细胞克隆了两头绵羊。 1997年2月，苏格兰科学家用从一只6岁母羊的乳房上取下的组织克隆了绵羊“多利”。这是人类历史上首次成功地克隆哺乳动物。 1997年7月，使用在实验室内培养产生并植入了一个人类基因的绵羊体细胞，苏格兰科学家克隆了绵羊“波莉”。 1998年7月，美国夏威夷大学的研究人员用一只实验鼠的细胞克隆了3代共50只实验鼠。1999年4月，美国马萨诸塞州塔夫茨大学的遗传学家克隆了3头山羊，改变了它们的基因性状，使它们的乳液内含有一种对心脏病具有疗效的蛋白质。 2000年，美国科学家用无性繁殖技术成功地克隆出一只猴子“泰特拉”，这意味着克隆人本身已没有技术障碍。 2001年，美、意科学家联手展开克隆人的工作。2001年11月美科学家宣布首次克隆成功了处于早期阶段的人类胚胎，称其目标是为病人“定制”出不会诱发排异反应的人体细胞用于移植。 差不多这么多啦!够吗?