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google文献搜索个就行了
本科还是研究生毕业论文?建议你先跟导师沟通下，看看他能不能给你。
原因如下所述：这个有可能是当时有一篇文章的学者在另一篇文章里面也是写者,还有就是当时的环境没有现在方便有可能造成同时发论文相似的概率,这种比较低
1、如果我们要将上方的文字进行引用第二篇文献，就要使用交叉引用。2、定位光标引用的位置，然后点击上方的引用选项卡。3、在弹出的下拉菜单中找到交叉引用的按钮，点击一下。4、弹出对话框，将引用类型选择尾注。5、引用内容选择尾注编号带格式的，一定要注意带格式的，选择下方的文献，点击下方的插入。6、这个时候在上方就会插入一个文献序号，与之前引用的序号是不会发生变化的。
一，检测内容不一致通常学校进行统一的论文查重时，一般都是要求我们上传论文整个文档进行检测的，这样在查重的时候我们论文中的所有内容包括封面，序言，目录以及致谢等内容都会被算在里面。当然有一些内容是不会进行查重的比如目录，参考文献等部分，我们可以放心。但如果我们自己在查重时只是查重了论文的正文内容，那么我们就会由于查重的论文内容论文字数不同，查重的结果也就可能会有很大改变了。二，查重系统的数据库发生了更新要知道现在无论是哪一个查重系统，它们的数据库都在不断更新扩展新内容的，因此如果两次查重的时间间隔比较长的话，那么检测结果不同也是很正常的事了。我们能做的就是再查重后，无论论文的重复率是否达到学校要求，都应要及时的去修改被标记出来的重复内容，尽可能的将论文重复率降到最低，这样能够通过学校查重的机会就会更大。三，使用的论文查重系统不同不同的论文查重系统，它们收录的对比数据以及算法都是不一样的。因此，如果我们自己在进行查重时选择的检测系统和学校不同，那么查重的结果自然也就不一样了。
论文查重次数没有限制的，除非学校规定不准提前用知网查重，因为知网查重会提示最近一次的“时间”和“比例”。这样多次查重学校会发现。除了知网其他查重系统都没事的。
首先每所高校在要毕业的时候，那么都是会给我们留足时间去写毕业论文。通常情况下完成一篇论文最少也要一周的时间，有部分毕业生就会留一年时间准备，主要是要完成优秀的硕士毕业论文。一篇论文写的时间比较长的话，内容就要保存逻辑思维，在写论文的时候，还要去不断的学习新内容然后再将这部分写到文章里面。千万不要觉得自己写的原创内容就不会重复，只有经过论文查重系统才可以做到论文内容查重率，确保自己论文没有抄袭的现象。还有要注意的是论文查重系统数据库都是实时进行更新的，比如一些知名的论文查重系统对最新的文献会进行收录，假如首次对论文进行查重后得出的查重率是百分之二十五，但隔个几个月再次查重，得出的查重率且是百分之四十。中间隔的时间太久就会导致查重结果很大的变化，因此论文查重时不哭按照首次查重结果而是要按照论文定稿后的查重结果为准。根据调查显示本科论文检测次数大概为5-10次，具体还是根据实际情况而定。由于部分论文检测网站收费较高，论文检测次数较多，因此，选择检测费用较低的论文检测网站还是很有必要的，比如papertime首次注册还能送免费字数 ，超出免费字数后的价格还是比较实惠。最后要说的是论文查重次数多的情况下，并不能说明我们不能写完毕业论文，专业的论文查重系统能帮助我们，能根据查重报告对论文有问题的部分进行修改以及询问导师，想必论文也能很快的完成。
都没过要分情况，是你的相似率不合格还是思想内容不合格导致没过的。如果是相似率没过这个好办。只有认真的把论文检测内容抄袭部分修改一遍，至少，改完之后，再检测一下，看看比例合格了吗，如果没有合格那要继续修改，再检测，直至合格为止。如果是思想内容不合格，那么要好好组织一下内容，定方向，定主题。如果连续2次不合格了，估计会影响毕业。这种情况你要问问学校还有一次机会吗？一般学校是2次几次机会。所有查2113重系统的查重步骤大同小异，以5261PaperPP查重网站为例，主要分为：上4102传论文→输入论文题目→输入作者姓名1653→支付费用→提交检测。提交检测后系统自动对论文进行分段分句与系统中的文献资料进行比对，我们只需要等待5~30分钟就能生成论文检测报告，将报告下载到本地后，认真阅读检测报告，通过检测报告，可以很直观的看到论文中重复的部分。报告中飘红处就是涉嫌抄袭的内容，这部分内容同学们需要认真进行修改。 降低重复率技巧一：替换词这方法大家耳朵都听出茧子了吧。很多地方都说可以把句子里关键词删掉，就不会被查出来了。这是脑子进水了么，句子的关键词就是句子的灵魂，直接决定着句意，把关键词删掉了告诉我不会影响句子质量，还能更扯淡么。所以我们要做的是，尽量不动“专业词汇”，也就是句子中最重要的词，而把其他无关紧要的词语替换掉。降低重复率技巧二：删如果文章字数足够，将检测出来的重合文字进行一定的删减，将不重要的，不影响核心论述的重合文字删掉。降低重复率技巧三：颠倒句子把“句子反着看”，用另一种方式来表达。通常被称为“变换主被动语态”“使用反义词”等，也即不管你用什么方式来表达这个意思，你都要尽可能和原文不一样（重复的字尽量少），但千万要注意是在保持原意的情况下，度把握得不好经常会改得不伦不类。降低重复率技巧四：举个例子用自己的话举个例子讲道理，字数有了，查重也过了。降低重复率技巧五：巧引用选择多篇文献引用，适当引用书籍的内容。
论文查重的目的就是为了检测出相似内容，然后以通过论文降重进行修改，达到合格比例。常用论文降重方法如下：
人工降重方法:
1、变换表达。先理解原句的意思，用自己的话复述一遍。
2、词语替换，在变换表达方式的基础上结合同义词替换，效果更好。
3、变换句式，通过拆分合并语句的方式进行修改，把长句变短句，短句变长句。
4、图片法，针对专业性太强不好修改的语句或段落（比如计算机代码，法律条款，原理理论等），可以适当把文字写在图片上展现，但是这种方法不宜用的太多。知网查重系统不太合适，可以识别图片，公式，表格，其他查重系统可以适当使用。
5、翻译法，用百度翻译或谷歌翻译，中文翻译成英文，英文翻译成日语或其他语种，再从日语翻译成中文，这种看似不错，还得需要人工润色，感觉效果还是鸡肋，适当用用也无妨。
机器降重方法：
论文降重软件只是辅助手段，最后还得人工润色一下，完全降重有效的没有。
PaperBye论文查重系统里有自动降重功能，可以作为你查重后修改参考的一种辅助手段。
关于效果，针对专业不同效果也不一样，比如理工科或专业术语比较多的，改的效果不太好。如果一些文课类文章，改好后语句还是蛮通顺的，效果没有人工修改好，但是可以给一些修改建议提示，也是不错的，主要看怎么使用。看看下面修改的例句，降重效果还算满意。
最后提醒一句，软件论文降重，只是辅助，即使改好了，也需要人工去复核修改一遍，因为毕竟是软件，有的表达上会欠缺妥当，需要人工润色。同时也不要过度依赖软件降重，目前还是没有人工一字一句修改的效果好，只能作为一种改重的辅助手段，不要期望过高。
1.不要直接把标注的红色字母全部去掉。
论文上的红字直接去掉了，但是发现检测重复率提高了。这有很多原因。一方面直接去掉原文，改变论文的结构。新的论文结构还引用了别人的论文，所以重复率很可能被检测到更高。另一方面，去掉红色标注的单词后，论文的总字数会减少。重复的重新检测可能会增加重复率，因为总字数减少了。
2.简单的单词替换是不够的。改变论文结构和句子结构。
很多同学会简单的替换论文查重中的单词和关键词，但这是不可取的。如果保持原有的句子结构和整体结构不变，重复率会很高。因为你不知道红色的字重复了多少次。
所以最好的办法就是把原来的句子结构和句子的意思整体改变一下。比如可以把原来的被动句改成主动句。调整原文的段落顺序，加上大量自己的观点，这样可以快速降低论文重复率。
3.多做参考，避免过多引用某篇文章论文。
许多同学在写毕业论文的时候，会进行大篇幅的参考，参考他人的论文内容。如果要降低重复率，我们就需要参考大量的文献以及不同的论文内容，可以看看有的参考文献是怎样的，可以找那些引用较少的来进行参考。
网页链接
进行论文降重就可以了哦
学校要求重复率20%以下，但是知网论文查重后重复率为30%，根据学术堂的了解，现在就需要对论文重复部分进行修改，达到学校规定的范围为止！下面给大家分享几个修改技巧（特别实用！）方法一：外文文献翻译法查阅研究领域外文文献，特别是高水平期刊的文献，比如Science，Nature，WaterRes等，将其中的理论讲解翻译成中文，放在自己的论文中。优点：1、每个人语言习惯不同，翻译成的汉语必然不同。因此即使是同一段文字，不同人翻译了之后，也不会出现抄袭的情况。2、外文文献的阅读，可以提升自身英语水平，拓展专业领域视野。缺点：英文不好特别是专业英文不好的同学实施起来比较费劲。方法二：减头去尾，中间换语序将别人论文里的文字，头尾换掉中间留下，留下的部分改成被动句，句式和结构就会发生改变，再自行修改下语病后，即可顺利躲过查重。优点：方便快捷，可以一大段一大段的修改。缺点：中文没学好的，会很费劲，要想半天。方法三：转换图片法将别人论文里的文字，截成图片，放在自己的论文里。因为知网查重系统目前只能查文字，而不能查图片和表格，因此可以躲过查重。优点：比改句序更加方便快捷。缺点：用顺手了容易出现整页都是图片的情况，会影响整个论文的字数统计。
那就发呗还能怎么办啊硕士生到底应不应该发小论文才让毕业这一话题也是有过讨论的，但是我在此就我自己了解的一些情况和大家讨论下。本校当然是要求每位硕士生发表一篇核心期刊的小论文才让申请答辩，我是一个工科专业，所以大家很多时候是在实验室做着实验，想能尽快的把自己的小论文写出来，到时候可以按时毕业。也有同学在抱怨为什么要发表小论文才让毕业，很多学校就没这个要求，那些硕士生都在外面做家教做兼职，而且有的学校博士毕业只要求发表一篇SCI就可以了，为什么我们课题组老板要求发三篇呢？三篇按学校要求都可以博士毕业啦。上面从一方面反映了我们目前很多人苦恼的一个问题，硕士生要不要非发表核心期刊的论文才让毕业？就我个人了解，我认识的一位文科专业的同学，从选题到最后论文修改完毕，只花了16天就完成了，而且发表到了核心期刊，我们都被他的速度给惊呆了！我们光做实验就得一年时间，等结果出来才能写论文，文科专业的白天去做兼职，晚上回来打游戏，可是就那么一晃悠功夫，论文就发表了。我们每天起早贪黑的做实验，有时做慢了还会遭到老板的责备，很多时候我们对双休已经完全没概念了，我们都这么点时间，花一年多来做实验，等到写论文时已经研三了，那时候大家都要找工作，写大论文。所以我们早做完一天，研三就可以多出一天去找工作。有些人由于没做完，研三还在哪儿做实验写论文，把出去找工作的机会也耽搁了，当然他们明白，先毕业才是关键。通过上面的讲述，现在我们可以分为两部分，第一是理工科和文科；第二部分是要求发论文才毕业和不用发论文也可以毕业两类人群。文科和理工科的区别是：大多数文科专业不用花很长时间去做实验，当然有的文科专业也是要做一些实验之类的。所以一旦没有导师的安排指导，而单纯的只要求发表论文，那么剩下的很多时间只有出去做兼职或者找一些活动打发时间，来挥霍曾经因为自己的无知而进入考研队伍的冲动。理工科会花很多时间来做实验，有的寒暑假都没有，就只希望能按时毕业。这种文科很闲，理工科忙得要死的现状就这样存在着。文科生羡慕理工科生很充实，理工科生羡慕文科生可以出去兼职赚点小资之外还有大把时间来看电影打游戏，这种围城一样的相互羡慕让人觉得自己总是缺点什么来平衡目前的不幸。下面我们来重点说第二部分人群，要求发论文和不要求发论文。要求发论文，其质量如何呢？这是很多人都曾经争论过的，很多名校决定不要求发表论文也是在这样的前提下做出的，但是如果不要求发论文，那么大把的时间用来做什么呢？没有论文要求，到时候拿不出大论文怎么办？如何毕业呢？每年都会提到我国的教育质量问题，我国的科研水平问题，这些情况是在逐步好转呢？还是每况愈下呢？本研倒挂说明了一个问题，金字塔模式被打破之后，大家不免对硕士生的质量问题打上一个大大的问号。很多刚进校有读博意向的人最后也打消了这个念头，他们很多人觉得，读博那是在浪费青春，在浪费父母的钱，也是在浪费国家的钱。读博又怎样？还不是要出去找工作，这反映了不少同学的心声。再说目前本硕生的就业率低于博士和专科也是让硕士生很尴尬的场面。前段时间听一位硕士毕业两年的校友讲，那些不用强制发表论文的学生，他们有自己充足的时间去为自己的求职准备，去培养自己缺乏的能力，即便没发表论文，在日后的工作中也是可以胜任，有的还极其出色，由于那段时间培养的一些技能。相反，那些要求发表论文的学生由于常年在实验室呆着，没有很多时间去培养工作中必须具备的素质而在工作中列显逊色。这也说明目前教育的一个尴尬场景，学校培养的方向能不能用到工作中去，缺失的链条在哪里？因此，我个人认为，一个学校单纯笼统的要不要发表论文去决定让不让学生毕业，这是有点不合理的，要根据不同的专业去要求，去培养，或许这样会合理一些。硕士生的质量问题是看在校科研能力还是看日后工作能力我觉得也是目前也要评价的一个标准。
不需要，研究生毕业条件原则上和大学英语六级没有关系，英语六级只是对学生本科阶段英语能力的要求；而研究生阶段英语能力有相对应考核要求；研究生毕业条件主要是科研成果和学术论文。参考如下。根据各学科不同的要求，硕士研究生毕业申请学位对科研成果的基本要求如下： 硕士学位： 基础研究 ：申请人在国内外核心刊物上至少发表一篇与学位论文有关的学术论文（第一作者，导师排名不计）。 一、 应用研究 ：申请人应满足下列条件之一： 1、在国内检索期刊上至少发表一篇与学位论文有关的学术论文（第一作者），或在全国学术会议论文集上至少发表一篇与学位论文有关的学术论文（第一作者）。 2、在国内外核心刊物上至少发表一篇与学位论文有关的学术论文（第一作者，导师排名不计）或至少有一项申请专利的证明或至少有一项经过鉴定、验收的科研成果。 二、管 理 ： 申请人至少在国内学术刊物上发表一篇与学位论文有关的学术论文（第一作者）。 三、说明： 1、申请学位者必须以第一署名单位发表论文。2、申请硕士学位的论文要以大学学报编写的《投稿指南》为准。 3、在统计国内核心刊物时，在SCI、EI索引源刊物上发表一篇论文（排序二、三名），可视为一篇国内核心刊物（第一作者）。4、为鼓励学科间的交叉、渗透，在非本专业类的核心期刊上发表的与学位论文有关的学术论文，与在本专业类的核心期刊上发表论文同等看待。 5、硕士研究生的科研成果要求由所在学位评定分委员会负责审核。
根据规定，学术型研究生需要至少发表1篇学术论文（或申请专利1件）作为毕业的基本要求（导师第一作者，学生为第二作者的情况也算有效成果）。所以，从一定程度来说，研究生需要发表论文。
需要分析当前主题，包括两方面的问题，一个是硕士毕业论文的写作，另一个是要让写出来的论文成为优秀硕士毕业论文。我本人呢，经历了本科、硕士、博士的学历阶段，每一个阶段的结束都要完成毕业设计，都要写一篇毕业论文来给阶段性的学业画上一个圆满的句号。本人的硕士毕业论文是全国百篇优秀毕业论文之一，博士论文是省级优秀毕业论文。要完成一篇优秀的毕业论文，我总结为“三板斧”策略：这里要注意的是，在所有这一切开始之前，一定要先跟导师做具体、细致的沟通，我认为这一点是最最最重要的。第一板斧，收集资料、确定课题研究方向、确定论文题目。收集资料，这一个过程最简单，我们学校有云端图书馆，校内校外都能用，随便注册一个账号就可以任意下载论文。 编写论文提纲、导师审核论文提纲、完成论文初稿。论文提纲是整篇论文的结构框架，完成了论文提纲就相当于把架构搭建好了，然后再进行论文初稿的编写，就有如水到渠成，只要顺水推舟就行了。不过这一个过程也很重要，要加强跟导师的沟通，获得导师的认可很重要。第三板件，导师审核论文初稿、反复修改论文、最终定稿。完成了论文的初稿之后，导师就要介入审核论文内容了，根据导师提出的修改意见，反复研读、反复琢磨、反复推敲，进而反复修改，这个过程是最为煎熬的一个过程，一定要做到精益求精，定稿是这一整个过程完成后的成功结果。完成毕业论文之后，再根据论文内容准备毕业答辩材料，这个过程同样是要跟导师深入沟通，争取获得推优的资格。具备了推优资格也就确定了毕业论文是一篇优秀毕业论文，在各种评比中才有资格、才会脱颖而出。
可以分别在论文当中引用观点。如果在论文当中有两个参考文献，可以分别在论文当中引用观点，或者说，引用论文内容的部分写上数字的符号，同时做好上标，然后在参考文献里面将详细的文献来源信息罗列出来即可。参考文献是在学术研究过程中，对某一著作或论文的整体的参考或借鉴。
文献下下来之后，文献的做上角或者右上角有页码。
有的文献第一页没有页码，但是后面一页就有了。比如第一页没有，第二页是70，终止页是80，那么文献的起止页是69-80。
一本书或一篇文章的指定的开始页到结束页。起止指开始与结束。页码为书籍每一页面上标明次第的数目字。用以统计书籍的面数，便于读者检索。起止页码即为指定的开始页到结束页。
扩展资料：
文后参考文献原则上要求用文献本身的文字著录。著录数字时，须保持文献上原有的形式。但对表示版次、期号、册次、页数、出版年等数字用阿拉伯数字表示。版本用序数词缩写形式表示。
特别需要注意的是注意无意间的空格，尤其是在书写英文的参考文献当中。参考文献要按照论文引用文献顺序依次书写，这样论文的整体比较严谨，也不会混乱。
参考资料来源：百度百科——参考文献
是要毕业还是要咋地？两页A4这个量太少了符合的不多Amperometric phenol biosensor based onsol–gel silicate/Nafion composite filmMin Ah Kim, Won-Yong Lee∗自己搜下这篇文献。这里附上一部分翻译，两页足够了。基于溶胶-凝胶硅酸盐/全氟磺酸复合膜的安培型苯酚 生物传感器 Min Ah Kim, Won-Yong Lee 韩国首尔120-749延世大学化学系 收稿日期：；修回日期：；发表日期：摘要 基于由硅酸盐/全氟磺酸复合膜固定的酪氨酸酶安培型生物传感器已经被用来测定各种酚类化合物。复合膜中的全氟磺酸聚合物，不仅可以克服纯溶胶-凝胶源性硅酸盐膜的脆性，而且还增强了生物传感器的长期稳定性。酪氨酸酶是通过硅酸盐/全氟磺酸复合薄膜固定在玻碳电极上的。酚类化合物的含量随着游离的具有生物催化活性的醌类物质含量的减少而定，该实验在 200mV的电位下进行，以Ag/AgCl（3MNaCl）作为参比电极。由此法制备的酶电极的工艺参数和各种实验变量，如pH值和工作电位，已经被选定为适合该酶电极操作的最佳优化值。在15s之内，该生物传感器的电流值可以达到稳态电流值的95%。该生物传感器对邻苯二酚和苯酚的灵敏度分别是200 mA∕M和46mA∕M。在信噪比为3的情况下，邻苯二酚的检出限为。在pH值为7，浓度为50mM的磷酸盐缓冲溶液储存下，两周之后，酶电极仍保留74 ％的初始活性。 © 2002 Elsevier Science科技有限公司保留所有权。 关键词：溶胶-凝胶技术；硅酸盐/全氟磺酸复合膜；酪氨酸酶；酚类化合物；安培型生物传感器1引言因其在环境中的毒性和持久性，我们对于酚类化合物的含量测定是十分必要的。由于酚类化合物会对人类健康产生不利影响，我们需要对这类化合物进行一个严格的定性和定量分析。天然水中或土壤中的酚类化合物的浓度在一定程度上可能会有所不同，但总的来说，它们目前都是在ppb级。许多方法都可用于测定酚类化合物，包括气相色谱和分光光度分析法。然而，这些方法都需要进行复杂的样品预处理，并且具有不易控制的实验条件。为了解决这个问题，我们做了大量的努力来寻求一种简单有效的测定酚类化合物的方法。基于酪氨酸酶的安培型苯酚传感器已被证实有望达到这一目标，而各种模型如碳糊，环氧石墨等复合材料也被用来掺入到酪氨酸酶电极表面。 近来，溶胶-凝胶化学为化学传感器和生物传感器的领域提供了一个新的电化学平台。由于其固有的低温进程，溶胶-凝胶技术为那些热敏感生物体（酶，蛋白质和抗体）的固定提供了一种切实可行的方法。这一类的溶胶-凝胶硅酸盐模型具有化学稳定性，物理刚性，生物相容性，孔隙度可调性，高度的对光和对热稳定性和光透性等特点。正是由于这些显著的特点，人们在光学和电化学生物传感器方向上展开了更加深入的研究。如苯酚传感器，Tan和同事们发布了关于由硅溶胶-凝胶固定的安培型苯酚生物传感器的报道。此外，Al2O3溶胶-凝胶也被认为是一个能改进酪氨酸酶固定稳定性的合适的模型。然而，尽管溶胶-凝胶模型有众多优势，但随着时间的流逝，溶胶-凝胶模型的开裂现象仍然是个潜在的问题。为了防止裂缝，将一些聚合物，如聚（环氧乙烷），聚（乙二醇），聚羟基，天然高分子壳聚糖，以及聚（乙烯基吡啶）和聚（乙烯醇）的接枝共聚物等，与溶胶-凝胶源性硅酸盐模型混合，从而形成有机-无机杂化材料，而每种有机-无机杂化材料都有其自身独特的特点。例如，基于壳聚糖的有机-无机杂化材料，具有生物降解性和无毒性，这是因为壳聚糖是一种天然高分子产品。此外，壳聚糖含有氨基，因而提供了一种能与生物大分子相容的亲水环境。基于聚（乙烯基吡啶）和聚（乙烯醇）的接枝共聚物的有机-无机杂化材料，能够防止石英玻璃在溶胶-凝胶过程中的开裂现象，同时也能消除共聚物水凝胶的膨胀性。 在本文中，我们首次对由溶胶-凝胶源性硅酸盐/全氟磺酸（磺酸盐离子交联聚合物）复合膜固定的酪氨酸酶安培型生物传感器进行报道。这种类型的复合膜材料可以克服纯溶胶-凝胶源性硅酸盐模型的脆性，还可以延缓硅酸盐的缩水性。该复合膜的另一个优点是全氟磺酸与酪氨酸酶具有生物相容性，从而为苯酚传感器的长期稳定性能提供了很大的改进。另外，生物传感器的选择性，可通过在制备复合膜过程中，恰当选择硅酸盐与全氟磺酸的比率来确定。这是因为全氟磺酸薄膜中含有带负电荷的磺酸基团，从而能够阻止带负电荷的待测物质迁移而沉积到电极表面。下面，我们将进一步讨论溶胶-凝胶源性硅酸盐/全氟磺酸复合膜的优化条件和影响该生物传感器电化学响应的实验参数，比如工作电位和pH值。此外，对于传感器性能，我们将在响应时间，灵敏度，检出限和长期稳定性方面进行探讨研究。 2实验试剂四甲氧基硅酸盐(TMOS, 99%)是从AcrosChemical公司 （比利时）购买的。酪氨酸酶（从蘑菇中提取，， 4400单位/毫克）是从Sigma（圣路易斯，密苏里州，美国）购买 。邻苯二酚，苯酚，甲酚， 4-氯苯酚， 4-乙酸氨基酚 ，从Aldrich（密尔沃基，威斯康星，美国）购买 。工作溶液每次均用pH值为，浓度为磷酸盐缓冲溶液稀释至所需浓度。全氟磺酸（磺酸盐离子交换树脂，由其5％（W/ V ）溶解于配比为90 ％脂肪醇/10 ％水（体积比）的混合溶液而成）是从Aldrich购买。本实验中所有稀释用的水均用Milli- Q水净化系统(Millipore, Bedford, MA, USA)来净化。本实验所有化学试剂均达到试剂要求，若没有特别说明，使用时无需再进一步纯化。 仪器本文所有安培和循环伏安实验均在EG&G 273A电化学工作站上进行（橡树岭，田纳西州，美国）。所有实验都是用的传统的三电极系统。其中玻碳电极作为工作电极（ ，表面被酶层覆盖），铂丝作为对电极，Ag/AgCl（ 3MNaCl ）作为参比电极（本文提到的所有电位值都是相对此而言的）。一个10mL的小烧杯和磁力搅拌器。 苯酚生物传感器的制备将的TMOS，200μl的去离子水和10μl的浓度为的 HCl混合于一个小烧杯中，此溶液在室温下强力分散10分钟，至分散均匀，然后将该溶液在室温下静置12个小时，即可得到溶胶-凝胶储备液。将该储备液与全氟磺酸溶液混合（溶胶-凝胶悬浮液/全氟磺酸= 1/2（体积比）），从而形成溶胶-凝胶硅酸盐/全氟磺酸复合液。同时，用pH为 ，浓度为的磷酸盐缓冲溶液将酪氨酸酶稀释至浓度为15mg/ml。然后，取上述30μl的硅酸盐/全氟磺酸复合液与30μl的络氨酸酶溶液混合，即可得到悬浮液。取此溶液μl，覆盖在玻碳电极的表面。其中玻碳电极在每次实验前，都需要用μm的α-氧化铝进行抛光，然后用蒸馏水彻底清洗干净。悬浮溶液需要在室温下干燥2分钟成膜。最后，酶电极在首次使用之前，需要用pH为，浓度为的磷酸盐缓冲溶液于4℃下浸泡一夜，这是为了洗掉电极表面上游离的酪氨酸酶，并同时完善溶胶-凝胶的聚合。该电极在不使用时，需储存在pH为 ，浓度为的磷酸盐缓冲溶液中，放置于冰箱，温度为4℃。 实验条件在对待测液进行安培检测时，此待测液以10ml的pH值为，浓度为的磷酸盐缓冲溶液为介质，并处于不断搅拌的环境中。磁力搅拌器及搅拌子为安培检测提供了电子迁移动力。相对于Ag/AgCl（ 3M NaCl）的参比电极来说，工作电极保持的恒电位，在酚类化合物标准溶液的等分试样添加到电化学测试液之前，使背景电流衰减到一个稳定值。 3结果和讨论溶胶-凝胶硅酸盐/全氟磺酸的影响 组成的影响众所周知，溶胶-凝胶的制备条件，对溶胶-凝胶源性生物传感器的电化学响应有着重大的影响。特别是，由于酸催化水解效应，在溶胶-凝胶储备液中，醇与水的比率强烈地影响溶胶-凝胶源性生物传感器的穿透性。例如，由葡萄糖氧化酶固定的碳复合电极，由辣根过氧化物酶和尿酸固定的碳糊电极。基于先前的结果，我们用相对较高的TMOS与水的比率为5的溶液来配制硅酸盐凝胶，以形成尺寸较小的相对密集的溶胶-凝胶模型，从而导致更多的酶载入和较大规模的生物反应。据报道，适度的疏水性对保持最佳的酪氨酸酶活性是十分必要的。全氟磺酸具有疏水性的氟碳骨架和亲水性的阳离子交换场所，从而具有适度的疏水性。因此，全氟磺酸与溶胶-凝胶硅酸盐混合，形成有机-无机杂化材料。通过测定不同比例的全氟磺酸/溶胶-凝胶硅酸盐溶液（体积比）或纯的溶胶-凝胶硅酸盐膜时的电流响应数据，然后进行校准拟合，即可得到标准曲线，图1表明了典型的邻苯二酚校准曲线，同时将其实验特征总结在表1中。据此观察到，当上述两者之比为2时，该生物传感器的电流响应最大。这一结果表明，当全氟磺酸与溶胶-凝胶硅酸盐复合液的比率小于2时，随着全氟磺酸含量的增加，酪氨酸酶的稳定性增强，同时灵敏度也增加。然而，进一步提高全氟磺酸在复合膜中的比率，将会增加复合膜的疏水性，从而会导致酪氨酸酶变性，继而降低其灵敏度。此外，由于全氟磺酸的稳定性是由乙醇作为介质的，提高全氟磺酸在复合膜中的比率，可能会导致由乙醇引起的更多的酪氨酸酶的失活。基于纯溶胶-凝胶硅酸盐膜的生物传感器非常不稳定，很容易破碎，显示出短期的动态范围和低灵敏度。 当邻苯二酚的浓度达到μM时，开始有响应（响应时间少于22s），且在全氟磺酸与溶胶-凝胶硅酸盐溶胶以任何比率混合下，电流响应都随着邻苯二酚浓度的增加而增强。然而，响应时间与全氟磺酸/溶胶-凝胶硅酸盐复合膜的比率有关，但其响应时间比基于纯溶胶-凝胶硅酸盐膜的酪氨酸酶电极（50s）要短得多。由于纯溶胶-凝胶硅酸盐膜和硅酸盐/全氟磺酸复合膜的厚度差不多（小于10μm ） ，相应的，快速响应时间主要取决于溶胶-凝胶硅酸盐复合膜增加的孔径，这同时也导致了底物和产物进出此膜过程中的快速扩散。这种行为同样也发生在由溶胶-凝胶硅酸盐/聚乙烯聚合膜固定的酪氨酸酶电极上。在 Ru(bpy)32+电发光实验中，与纯硅酸盐膜相比，溶胶-凝胶硅酸盐/全氟磺酸复合膜会产生更加开阔的结构，从而使其发光信号增强。故在后续实验中，全氟磺酸与溶胶-凝胶硅酸盐溶胶的最优比率选定为2。另外，关于酶掺杂硅酸盐/全氟磺酸复合膜的微观结构和生物传感特征之间的关系也在进一步的研究当中。