植物保护的问题及对策论文
摘 要 ：生态社会构建过程中，植物保护是基础性工作。我国生态环境较为复杂，地形特点多种多样，决定我国植物种类的多样性，而这却给植物保护工作带来较为复杂的工作形式和工作内容。农业科学技术不断发展，我国植物保护工作在复杂性的基础上又面临新问题。基于此，针对这些问题进行研究，以期找出相应的解决对策。
关键词：
关键词： 植物保护; 生态环境; 物种类别
社会经济快速发展，人们生活水平不断提高，但生活环境却遭到严重破坏。在我国多样化生态环境中，植物保护工作较为复杂。现对我国在植物保护工作方面的现状进行分析，找出解决问题的对策，进而达到保护我国生态环境的目的。
1 植物保护的重要性
植被植物可以减少地表水流量、减缓水流速、防风固沙。社会经济不断发展，人们对生活环境的质量要求越来越高，植物开始在原有防风固沙的基础上，上升到具有美化、绿化环境，遮阳、降热、防尘、净化空气等功能。但植物本身会受到病虫害、自然灾害等，当遇到这些问题时，如果没有及时进行保护，会使得植物丧失一定的功能，且会给人的生存环境带来一定的影响。
2 植物保护中遇到的`问题
2.1 重视不足 相关部门重视度不足是导致植物保护工程出现问题的关键原因。因重视度不足，会直接导致植物保护资金投入不足，人员投入不足，自然而然植物保护工作就做不到位。此外，对植物保护知识的宣传力度不足，广大市民意识不到植物保护的重要性。当前，我国的植物绿化工作多采用承包管理形式，各个承包者独立进行绿地的维护及养护工作。当遇到植物病虫害发生时，无法做到统一防治，缺少防治技术指导，防治效果不理想。
2.2 粮食要增产致使病虫害发生 在人均耕地面积较少的前提下，为提高粮食产量，选择优良品种、先进种植技术。为粮食增产，大量使用封闭农药，除草剂，而这些产品有时候并没有经过国家有关部门安全监测，致使药物残留。另外，开荒地是近几年农村地区的发展趋势，这都在一定程度上增加植物病虫害的发生，植物保护工作越来越困难。
2.3 气候异常导致病虫害发病更加复杂 近年来，全球经济变暖，很多地方均出现一些极端的气候条件，这些地区植物病虫害发生较为严重，病虫害因气候的变化也发生相应的变异。如，小麦的赤霉病及水稻的稻瘟病发生较为频繁，且愈发严重。一些高原地区的小麦也发生条锈病等危害。这些问题的出现都在一定程度上加大了我国农作物保护的难度。此外，科学技术不断发展，农作物的耕种技术发生较大变化，这一耕种方式改变了病虫害发生的规律，可能使之前危害较小的病虫害严重化，这些都大大增加病虫害监测防控的难度。
2.4 农产品的质量隐患 现如今，食品安全问题层出不穷，越来越多的人开始关注食品安全。并且，因农产品竞争激励，许多国家纷纷提高农产品进口的门槛，对农药残留的标准进行新的制定，这对我国农产品的出口带来较大阻力。今后要更加科学地对农作物进行保护，加强对农产品质量安全的监管。同时，为确保农产品的质量安全，也对植物保护工作提出更高的要求。
3 植物保护的对策
3.1 提高重视，加强宣传 首先，相关部门应当给予植物保护足够的重视，明确各个部门的职能归属，加强统一管理。加强各个部门之间的协同合作，通过制定相应地法律、法规，建立健全病虫害的防护机制。此外，加强宣传，定期组织植物保护的宣传讲座，让更多的人意识到植物保护的重要性。
3.2 加强植物保护科研工作 植物保护过程中，需要结合病虫害的发生规律进行分析，还需要结合天气、土壤、植物等生长情况预测病虫害的发生。此外，加强植物保护研究实验室的建设，对较为常见的病虫害进行试验研究，提高防治技术和策略。
3.3 生态治理有害生物 在我国，植物病虫害的防治普遍以化学农药防治为主，但是这一传统的防治方法在防治某一病虫害的同时，也会毒死有害生物的天敌，且对环境易造成污染。另外，化学药物防治会使得植物病虫害产生抗药性，不仅影响防治效果，且对农产品质量安全、环境安全等一系列问题都造成影响。
3.4 倡导绿色植保防治技术 为保障食品安全方面的要求，在农业生产过程中，应切实推进植物保护工作的深度改革，把生产绿色健康食品作为农业生产的重要目的。围绕生产绿色健康食品开展各项农业生产活动，保证植物绿色保护技术广泛开展。这样，不仅从根本上保障食品安全，保证植物生产过程中对环境的不利因素被有效控制。
参考文献
[1] 南中益. 植物保护存在的问题与应对策略. 科学之友，2012(4).
[2] 高俊峰. 我国植物保护的问题与展望. 生物技术世界，2012，5(11).
绿化植物具有调节气候、保持水土、防风固沙、保护农田的作用，还具有净化空气、净化污水和降低噪声等功能。
净化空气 植物净化空气的功能是多方面的：
① 保持大气层中氧和二氧化碳(CO2)平衡。随着工业的发展和人口的增加,大气层中CO2浓度有逐渐增加的趋势。绿色植物是氧气的主要制造者和CO2的消耗者,对保持氧和CO2的平衡有重要作用。据计算,每公顷植物一年释放的氧：农作物为3～10吨，落叶林为16吨,针叶林为30吨,常绿阔叶林为20～25吨。一株树龄百年的山毛榉(Fagus sуlvatica),其叶片总面积约为1600平方米,进行光合作用时，每小时可吸收CO2约2352克,释放氧1712克。据计算，大约150平方米的叶面积,可以满足一个人的需氧量。
② 降低大气中有害气体的浓度。植物能吸收氟化氢、二氧化硫、氯、二氧化氮、氨、臭氧、汞蒸汽、铅蒸汽以及过氧乙酰硝酸酯、乙烯、苯、醛、酮等气体。如氟化氢通过40米宽的刺槐(Robinia pseudoacacia)林带比通过同距离的空旷地后的浓度可降低近50％。二氧化硫通过一条高 15米、宽15米的法国梧桐 (Platanus acerifolia)林带浓度可降低 25～75％。绿化植物能阻挡、过滤和吸收有害气体，起到净化空气的作用。
③ 减少空气中的放射性物质。绿化植物不但能够阻隔放射性物质及其辐射，而且能够过滤和吸收放射性物质。如一些地区树林背风面叶片上的放射性物质颗粒只有迎风面的1／4。树林背风面的农作物中放射性物质的总放射性强度一般为迎风面的1／20至1/5。又如每立方厘米空气中含有1毫居里的放射性131碘时,在中等风速的情况下,1公斤叶子在1小时内可吸滞1居里的放射性碘，其中2/3吸附在叶子表面，1/3进入叶组织。不同的植物净化放射性污染物的能力也不相同，如常绿阔叶林的净化能力要比针叶林高得多。
④ 减少空气中的灰尘。绿化植物能够阻挡、过滤和吸附空气中的灰尘。据测定，一个位于绿化良好地区的城镇，其降尘量只有缺乏树木的城镇的1/9至1/8。草地也有显著的减尘作用,它不仅能吸附空气中的灰尘,还能固定地面尘土。如有草皮的足球场比无草皮的足球场上空的含尘量少2/3至5/6。
⑤ 减少空气中的细菌。一方面由于树木可以减少灰尘,从而减少了附着在灰尘上的细菌;另一方面由于一些植物能分泌挥发性物质，具有杀菌或抑菌的能力。如在一个城市绿化差的街道上每立方米空气中所含的细菌数目，比同一城市绿化好的街道上高1～2倍以上，比同一城市树木茂盛的植物园中高40～50倍。松、柏、樟等树木能够分泌挥发性抑菌物质，在这类树林中，空气中细菌含量比植物园还少。 净化污水 森林有净化水源的作用。据测定，从每平方公里无林山坡流下来的水中溶解物质的含量为16.9吨,而从有林山坡流下来的水中含量则为6.4吨。如果水流过30～40米宽的林带,其中氨含量可降低到原来的1/2至2/3。森林还可以减少水中细菌的数量。水流通过30～40米宽的林带后，每升水中所含细菌数量比不经过林带的减少1／2。水流通过 50米宽的生长 30年的杨、桦混交林后，所含细菌数量能减少9/10以上。此外，各种水生和沼生植物也能净化污水。如在试验水池中种植芦苇(Phragmites communis)后，水中悬浮物减少30％,氯化物减少90％，有机氯减少60％，磷酸盐减少20％，氨减少66％，总硬度减少33％。又如在含有十几种有机化合物的污水中栽植水葱(Scirpus validus),经过一定时间，有机化合物全部被水葱吸收。
降低噪声 声波传至树冠后，能被浓密的枝叶不定向反射或吸收。因此可以利用林带、绿篱、树丛来阻挡噪声（见绿化降噪）。
调节气候 大面积的森林、绿地以及宽阔的防护林带和浓密的城市行道树，对温度、湿度和风速都有一定的调节作用。例如中国南京市有行道树遮荫的马路在夏季的最高气温比无行道树的马路低3℃左右,而且相对温度高10～20％。林带和绿地还能促进城市中的空气对流，白天使热空气上升，夜间使冷空气下降，从而使市内受污染的空气及时得到更新。
保持水土 树木和草地有显著的保持水土功能。例如降雨时，雨水首先冲击树冠,然后穿过枝叶落地,不直接冲刷地表，从而减少表土的流失；同时，树冠本身还能积蓄一定数量的雨水。据测定，树龄61年的云杉树冠一般可阻留降雨量的24～70.8％。此外，树木和草本植物的根系能够固定土壤，而林下往往又有大量落叶、枯枝、苔藓等覆盖物，既能吸收数倍于本身的水分，也有防止水土流失和减少地表径流的作用。如果树林和草地遭到破坏，就会造成严重的水土流失，在有石山地还能形成泥石流。
保护农田 绿化植物能减轻风、旱、涝等对农作物和蔬菜的危害。例如一条防护林带可使20～25倍树高距离内的风速降低10～50％，结构良好的林带能把有害的6级风变成对农田无害的3级风。风速降低，土壤水分的蒸发也随之减少，相对湿度和绝对湿度都会增加。防护林还可以阻止沙土飞扬，防止尘害。
绿化植物在环境保护中具有维护生态平衡、美化环境和保护人体健康的作用。但是，如果污染超过了绿化植物所能忍受和缓冲的限度，它们的生长和繁殖就会受到影响。所以要在减少污染的基础上发挥绿化植物的有效功能
沈小杰 请采纳 环境保护是我国的一项基本国策。植物的作用主要为对污染物的治理及其预防和监测。但由于各环境要素存在差异，植物在各环境要素保护中的作用不尽相同。本文从各个环境要素出发，概括了植物在各环境要素保护中的作用，包括在大气环境中的作用，在水环境保护中的作用和在土壤保护中的作用等等。 关键词：环境保护 植物 环境要素 净化作用 监测作用 随着生产力的发展和工农业的现代化，排放到环境的污染物日益增加，大大超过了生态系统自然净化的能力，造成了环境污染。为了减少环境污染，措施很多，其中一条就是利用植物以防止环境污染，因为植物有净化环境的能力，对各种污染物都有吸收、积累、分解和代谢作用，能降低大气中有毒气体的浓度，而且能保持大气层中氧和二氧化碳的平衡，减少空气中放射性物质的浓度，减弱躁声，杀菌除尘，净化环境污染。同时，由于不同植物对不同污染物的敏感性不同，又可用来监测预报环境污染。本文将主要从大气、水、土壤三个环境要素主要阐述植物在环境保护中的作用。 植物在大气环境保护中的作用 1.1净化作用 植物对于大气的净化，主要有三方面的作用，即去除环境中微生物，对粉尘等的物理吸附作用和对化学物质的吸收转化作用。 绿色植物具有抑制或杀死细菌的功能。利用这一功能栽植适当的绿化植物，可使大气中细菌数量下降。一方面绿化地区空气中灰尘减少，细菌失去滋生的场所，从而使细菌数量下降；另一方面植物的分泌物本身具有杀菌作用。目前，已经发现许多植物能分泌出具有杀死细菌、真菌和原生动物能力的挥发物质，例如洋葱的碎糊能杀死葡萄球菌、链球菌及其他细菌；地榆的水浸液能在1分钟内杀死伤寒、副伤寒A和B的病原菌和痢疾杆菌的各菌系；柠檬桉分泌的杀菌素可杀死肺炎球菌、痢疾杆菌、结核病和流感病毒等病菌；柑桔、迷迭香和吊兰，可使空气中的细菌和微生物大为减少。。 植物一般具有吸附灰尘的作用，植物的叶面有皱纹、粗糙或分泌油脂，可吸附或粘着粉尘，从而降低植物中灰尘等颗粒物的含量，净化环境作用。蒙尘的植物，一经雨水冲洗，又能迅速恢复吸附的能力；此外，草坪也有显著的减尘作用。常春藤、无花果、蓬莱蕉和普通芦荟，都可以吸纳灰尘。 植物对环境中的化学物质，能够通过吸收、转化等方式去除一部分的化学物质。植物可以吸收环境中的二氧化碳、二氧化硫、甲醛等物质，并将这些物质转化为自身物质，降低环境中的化学物质浓度。如酚进入植物体后，大部分参加糖代谢，和糖结合成酚糖苷，对植物无毒，贮存于细胞内；另一小部分呈游离酚，则会被多酚氧化酶和过氧化物酶氧化分解，变成CO2、水和其他无毒化合物，解除其毒性。氰化物在植物体内能分解转变为营养物质。地衣、垂柳、臭椿、山楂、板栗、夹竹桃、丁香等吸收SO2能力较强，积累较多硫化物；垂柳、拐枣、油茶具有较大的吸收氟化物的能力。芦荟、吊兰和虎尾兰等可吸收甲醛。紫苑属、黄耆、含烟草和鸡冠花，这类植物能吸收大量的铀等放射性核素。常青藤、月季、蔷薇、芦荟和万年青，可有效清除室内的三氯乙烯、硫比氢、苯、苯酚、氟化氢和乙醚等。天门冬可清除重金属微粒。龟背竹、虎尾兰和一叶兰，可吸收室内80%以上的有害气体。月季，能较多地吸收硫化氢、苯、苯酚、氯化氢、乙醚等有害气体。 1.2调节作用 植物能够进行光合作用。光合作用是指绿色植物通过叶绿体，利用光能，把二氧化碳和水转化成储存着能量的有机物，并且释放出氧的过程。光合作用除了能转化太阳能，制造有机物之外，还能调节大气中氧和二氧化碳的含量，使大气中的氧和二氧化碳的含量相对稳定。据估计，全世界所有生物通过呼吸作用消耗的氧和燃烧各种燃料所消耗的氧，平均为10000 t／s(吨每秒)。以这样的消耗氧的速度计算，大气中的氧大约只需二千年就会用完。然而，这种情况并没有发生。这是因为绿色植物广泛地分布在地球上，不断地通过光合作用吸收二氧化碳和释放氧，从而使大气中的氧和二氧化碳的含量保持着相对的稳定。 1.3监测作用 植物对大气污染还有监测和指示作用。植物监测是利用植物对某些大气污染物的反映，监测空气中有害气体的种类和含量或大气污染程度，以了解大气环境质量状况。在植物受到有害物质的侵害时，一般有害气体都是从叶片上的气孔钻入的，因此叶片上往往出现肉眼看得见的各种伤斑。不同气体引起的伤斑也会有所不同。因而可以通过调查叶片受害症状，测量植物生长量、解析年轮等症状判断空气中的环境质量。如果伤斑是二氧化硫引起的，则多出现在叶脉间，呈点状或块状，严重时出现鲱骨效应；而由氟引起的伤斑大多集中在叶子的尖端和叶片边缘，呈环状或带状。比如，苔藓枯死；雪松呈暗竭色伤斑，棉花叶片发白；各种植物出现“烟斑病”。这是SO2污染的迹象。菖蒲等植物出现浅褐色或红色的明显条斑，是氮氧化物中毒的显示。假如丁香、垂柳萎靡不振，出现“白斑病”，说明空气中有臭氧污染。要是秋海棠、向日葵突然发出花叶，则是氯化物污染引起的。其他的指示植物还有：紫花苜蓿、胡萝卜、菠菜可以监测SO2污染；菖兰、郁金香可以监测氟污染；苹果、玉米可以监测氯污染等等。 2.植物在水环境保护中的作用 利用水生植物净化污水是一种成本低廉，节约能源、效益较高的简便易行方法，目前，国内外有关部门正广泛应用生物处理措施净化污水。 曾有人做过这样一个实验：在一个实验水池中栽培了芦苇后，从水中排除的悬浮物减少了30%，氯化物减少90%，有机氮减少60%，磷酸盐减少20%，氨减少66%，总硬度减少了33%。水池中的水经芦苇的净化，明显清洁多了。 植物对水域的净化，主要有以下途径：首先是植物能分解和转化某些有毒物质。在低浓度的情况下，植物能吸收某些有毒物质，并在体内将有毒物质分解和转化为无毒成分。例如，植物从水中吸收丁酚，丁酚进入植物体后，就能与其他物质形成复杂的化合物，而失去毒性。其中最常见的为酚糖苷，它可以贮藏在液泡内变成对植物无毒的结合态物质，在以后的生长发育过程中，可以被分解和利用，参加细胞正常的代谢过程。其他苯、氰等也都有相似的情况；其次是植物的富集作用。水生植物能吸收和富集水中的有毒物质，其富集能力依植物种类不同而异，但一般可高于水中有毒物质浓度的几十倍、几百倍甚至几千倍以上。 经试验证明，多种高等水生植物对氮、磷和各种金属以及酚、氰、农药等有机物都有吸收、积累、分解和转化的能力。其中，水葫芦、水花生、水葱、浮萍、紫萍、水浮莲等都能有效地吸收、积累、分解废水中的营养盐类和多种有机污染物在最适宜的生长条件下，一公顷水葫芦能将800人排放的氮、磷元素当天吸收掉。通过试验进一步证明，在自然界中的多种水生植物，对水中的重金属元素也有去除作用。如水葫芦、水花生能从污水中除去镉、铅、汞、铊、银、钴、锶等重金属元素。除此之外，浮萍在夏秋也能大量吸收、积累电厂洗煤废水中的重金属元素。另外，水生植物还能净化废水中的多种有机污染物。 水生植物在净化污水方面各显神通：水葱、田蓟、水生薄荷等植物可以有效杀死水中的细菌；凤眼莲、浮萍、菹草、金鱼藻等植物有较高的吸收水中重金属的能力。 我国水生植物资源十分丰富，对进一步研究、开发利用新的种类净化污水，还有很大潜力。 3.植物在土壤环境保护中的作用 土壤污染可以由大气污染和水质污染而引起。工厂排出的含有重金属的废气、烟尘和其他有害气体、工业废水、废渣，以及农业上施用化学农药、某些毒性除莠剂及污水灌溉等都会污染土壤。其他放射性物质也会对土壤污染。土壤污染后，能引起土壤酸化或碱化，以及影响有些作物的正常生长发育，因此，利用某些植物对土壤中污染物质的吸收，就能达到消除和净化的目的，降低土壤污染。 植物除能吸收有害物质外，还具有防风固沙，涵养水源的作用。对于一些已经遭受污染或本身环境不好的土壤，植物也能够对此进行调节和改善，保护土地资源。这类具有改良土壤能力的植物，称为“绿肥”。人们常常请它们当开路先锋，到十分艰苦的旱、涝、盐、碱、酸、瘠的盐碱荒地或红壤荒地去“落户”。它们不仅能在这些地区扎根生长，而且还积极地替庄稼创造美好的生活环境。此外，绿肥植物多有强大的根系，能够充分吸收利用深层的水分和养分。因此，在它们死亡腐烂后，土壤表层就留下了丰富的养分。据计算，每亩如果收1500公斤苕子，土壤里就相当于增加了57公斤氮肥、12公斤磷肥、13 公斤钾肥！像紫云英、苜蓿等一些豆科绿肥，自身就是一个小小的化肥厂——它们利用根瘤中的固氮菌，将空气的氮气合成为氮肥，每亩可产氮肥50公斤左右。这些植物大大的改善了土壤环境，有利于土壤资源的保护和永续利用。 4.结论： 植物以其特有的生理特性，在环境保护中起着非常重要的作用。不仅能够净化大气、水、土壤等环境，还能指示监测环境污染，改善环境条件，在保护和预防环境中起着非常重要的作用。此外，植物在环境保护中的作用远不只此。植物能够降低噪声，减弱噪声污染。绿色的环境还能创造舒适环境，改善心情。另外，环境保护重在人人参与，发挥群众的作用。而植树造林，可以让大家见到环境保护的成果，改善环境，增强大家的环保信心与动力，更好地保护环境。由此可见，植物在环境保护中的作用是非常巨大的，用植物改善环境的发展前景也是相当巨大的。
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植物保护专业本科毕业论文（设计）开题报告
紧张又充实的大学生活即将结束，大学生们马上就要开始最难熬的毕业设计阶段，而我们做毕业设计之前要先写好开题报告，快来参考开题报告是怎么写的吧！以下是我整理的植物保护专业本科毕业论文（设计）开题报告，欢迎大家借鉴与参考，希望对大家有所帮助。
毕业论文题目：
菌寄生真菌纤细齿梗孢蛋白酶基因的克隆与表达
姓名： xx 学号： xxxx
年级： xxx 专业： 植物保护
指导教师：姓名 xxx 职称 教授
学科 植物病理
山东农业大学教务处
20XX年x月x日
一、选题依据（拟开展研究项目的研究目的、意义）
菌寄生(Mycoparasitism)是发生在菌寄生真菌与寄主真菌之间的一种寄生方式，是自然界普遍存在的一种真菌与真菌之间的相互作用。一直以来，生物间相互作用及信号传导的分子机制，是当今生命科学研究的热门。利用菌寄生真菌与寄主真菌作为研究的模式系统来揭示生物相互之间的相互作用机制有重要理论和实践意义。李多川(Li,1996)先生发现纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)和串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)的菌寄生关系以来，我们实验室试图通过研究纤细齿梗孢和串珠镰刀菌，来建立菌寄生真菌与寄主真菌相互作用机制研究的模式系统，从而揭示菌寄生真菌与寄主真菌之间相互作用的分子机制。纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)是串珠镰刀菌的一种重寄生真菌，该菌是一种接触性活体重寄生菌，离体试验发现其分生孢子只有在串珠镰刀菌细胞壁提取物刺激下才能萌发。这说明两者之间的重寄生关系是建立在二者识别与互作的分子机制上的(Li,2004)。在纤细齿梗孢和串珠镰刀菌相互作用过程中，几丁质酶、蛋白酶等细胞壁裂解酶可能起到重要作用。其中，蛋白酶在木霉属菌寄生真菌中的功能已经得到初步证明，而纤细齿梗孢的蛋白酶的研究还未见报道。因此，克隆纤细齿梗孢蛋白酶编码基因对于从分子水平上研究重寄生真菌和寄主识别和互作机制有着重要的意义。
二、文献综述内容(在充分收集研究主题相关资料的基础上，分析国内外研究现状，提出问题，找到研究主题的切入点，附主要参考文献)
纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)是李多川教授分离得到的一种活体营养接触型菌寄生真菌[1~3]，其寄主包括Fusarium moniliformeAlternaria alternata等。近年来，我们实验室一直在努力以其为基础研究菌寄生真菌与寄主真菌之间的相互作用的分子机制。经过多年的研究，人们渐渐认识到真菌细胞壁蛋白在细胞与外界的相互作用过程中扮演着重要的角色。细胞壁蛋白研究已经成为生物间相互识别机制研究的热点。鉴于以上原因，我们实验室成功分离纯化了纤细齿梗孢的寄主之一Alternaria alternata菌丝细胞壁上的一种特异性糖蛋白——凝集素，并初步证明其在A.alternaria和O.tenellum孢子吸附过程中起到识别因子的作用[4]。近年来，菌寄生真菌细胞壁裂解蛋白酶在菌寄生过程中的作用被人们逐渐重视起来。克隆和表达菌寄生真菌的蛋白酶编码基因变得很有意义。本研究试图以菌寄生真菌纤细齿梗孢(Olpitrichumtenellum)作为研究材料克隆了其蛋白酶基因。根据氨基酸的保守序列设计兼并引物，然后采用RT-PCR和RACE是一个较为快速、简单和高效的方法。本实验根据同源保守序列设计兼并引物，通过RT-PCR及RACE-PCR的方法，克隆了O.tenellum蛋白酶的编码基因的全长cDNA序列，并对该基因进行了序列分析，为后续试验打下了基础。
由于Olpitrichum tenellum在离开寄主的人工培养基中很难生长，纯化其蛋白酶变得非常困难。因此，我们需要使用外源蛋白表达系统得到蛋白，进一步研究其性质，从而搞清楚其在重寄生过程中的作用。在过去的几十年间，随着DNA重组技术的不断发展，通过构建遗传工程菌株，人们可以较容易地使各种各样的天然酶的基因在微生物系统中高效表达，从而在很大程度上摆脱对天然酶源的依赖。
基因工程的表达系统有原核表达系统和真核表达系统两大类。在原核表达系统中，大肠杆菌表达系统是目前了解最深入，实际应用最为广泛的表达系统。与其他表达系统相比，大肠杆菌表达系统具有遗传背景清楚、目标基因表达水平高、培养周期短、抗污染能力强等特点。在基因表达技术中占有重要的地位，是分子生物学研究和生物技术产业化发展进程中的重要工具[5]。
Pichia pastoris基因表达系统经过十几年发展，已基本成为较完善的外源基因表达系统，具有易于高密度发酵，表达基因在宿主基因组中稳定整合，能使产物有效分泌并适当糖基化，培养方便经济等特点。利用强效可调控启动子AOX1，已高效表达了HBsAg、TNF、EGF、破伤风毒素C片段、基因工程抗体等多种外源基因[6]，证实该系统是高效、实用、简便，能提高表达量并保持产物生物学活性的外源基因表达系统。P.pastoris表达系统在生物工程领域将发挥越来越重要的作用，促进更多外源基因在该系统的高效表达，提供更为广泛的基因工程产品[7]。
我们已经分离到O.tenellum蛋白酶的编码基因，本研究中将该基因的去掉信号肽序列的正确阅读框融合于原核表达载体pET-22b(+)和毕赤酵母表达载体pPIC9K上，分别转化E.coli BL21及Pichia pastoris GSxx5，以期在这些菌株中有效表达该基因的编码产物，从而为以后功能研究打下基础。
1 李多川.1998.菌寄生真菌分子生物学研究进展.吉林农业大学学报,20：37~65.
2 21.李多川.1998.菌寄生真菌分子生物学研究进展.微生物学通报，25：345~347.
3 .李多川，沈崇尧.1997.菌寄生菌物与寄主菌物相互作用的研究进展.西北农业学报，6：94~98.
4 张成省，李多川，孔凡玉.2005.Alternaria alternata菌丝细胞壁凝集素的纯化与特性研究.植物病理学报，35(2)：141~147.
5 .xx.何诚，朱运松.1998.甲醇营养型酵母表达系统的研究进展.生物工程进展,18：7~xx.
6 彭毅，杨希才，康良仪.2000.影响甲醇酵母外源蛋白表达的因素.生物技术通报，4：33~36.
7 韩雪清，刘湘涛，尹双.2003.毕赤酵母表达系统.微生物学杂志，3：35~40.
三、研究方案(主要研究内容、目标，研究方法、进度)：
1、研究内容：
本课题选择纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)做为研究对象，通过RT-PCR及RACE技术分离克隆了其丝氨酸蛋白酶基因，并进行原核及真核表达，并对其的性质进行了研究，为进一步的研究工作打下基础。
2、研究的目标：
克隆了纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)的丝氨酸蛋白酶基因，进行原核及真核表达，并对其的性质进行了研究。
3、研究方法：
将纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)接种到LB培养基上，培养14个小时后，收集菌丝，然后采用总Trizol法提取RNA。再从GenBank数据库中搜索到大量的蛋白酶氨基酸序列，并根据同源性进行分类，分别设计兼并引物。再通过RT-PCR、3’-RACE、5’-RACE获得全长cDNA、DNA克隆，并将其连接到载体上，然后采用电击法将将重组质粒转入到全长cDNA、DNA克隆中，通过透析纯化蛋白酶，最后研究其特性。
四、研究进度：
20xx年5月23日~20xx年5月29日 整理收集资料，并跟着研究生学习基本实验技术。
20xx年5月30日~20xx年6月18日 提取RNA，设计引物、全长cDNA、DNA克隆 。
20xx年6月19日~20xx年7月15日 转化大肠杆菌、毕赤酵母表达，获得纯纯产物，并研究其特性。
20xx年3月~20xx年6月 对实验结果不理想的实验重做，整理实验数据，完成毕业论文，并准备毕业答辩。
五、技术路线：
收集菌丝
总RNA提取
同源序列 设计引物
特性研究
RT-PCR、
3’-RACE、5’-RACE
纯化表达产物
全长cDNA、DNA克隆 转化大肠杆菌、毕赤酵母
四、进程计划(各研究环节的时间安排、实施进度、完成程度)
20xx年5月23日~20xx年5月29日 整理收集资料，并跟着研究生学习基本实验技术。完成实验的1%。
20xx年5月30日~20xx年6月18日 提取RNA，设计引物、全长cDNA、DNA克隆。完成实验的50%。
20xx年6月19日~20xx年7月15日 转化大肠杆菌、毕赤酵母表达，获得纯纯产物，并研究其特性。完成实验的95%。
20xx年3月~20xx年6月 对实验结果不理想的实验重做，整理实验数据，完成毕业论文，并准备毕业答辩。完成100%。
五、导师对文献综述的评语
签字：
20xx年xx月xx日
六、专业意见
专业主任签字：
20xx 年 月 日
七、学院意见
学院(章)： 负责人签字：
20xx年xx月xx日
摘要：
针对目前浙江农林大学植物保护研究法实验教学方法、内容及手段等方面存在的一系列问题，提出了相关改革对策：优化实验课程内容，整合实验模块，学生自行设计实验方案等教学方法和手段的改革，以及课程考核方式和时间安排的调整，旨在培养学生的科研兴趣及创新能力。
关键词：
植物保护论文
目前，国内外很多农业院校的植物保护专业均开设了昆虫研究法和植病研究法课程。为优化本科培养方案，浙江农林大学通过调整教学大纲，将植病研究法、昆虫研究法和农药研究法合并成一门植物保护研究法课程。植物保护研究法是植物保护专业重要的专业限选课程之一，是植物保护研究的重要组成部分，也是培养和提高学生专业实验技能和学习兴趣的重要课程，是一门专业性、实践性很强的实验学科。通过这门课程的教学，能使学生掌握植物保护研究的基本方法及基本原理，培养植物保护研究常规操作能力，以及查阅资料、设计实验方案和实际操作能力，提高学生的逻辑思维、整理资料、总结归纳和论文撰写的能力。笔者分析了浙江农林大学植物保护研究法实验教学中存在的问题，提出教学改革内容，并总结了改革成效。
1.实验教学存在的问题
1.1传统实验教学的弊端传统实验教学的主要特征是“灌输式”“填鸭式”，学生在2个小时的实验过程中就是简单地按照实验指导书和实验大纲中的实验方法和步骤依葫芦画瓢，实验完成后，又按照统一的模式填写实验报告。在整个实验过程中，学生无需独立思考和分析，更谈不上发挥创新能力了。因此，很难让学生对实验产生兴趣，培养学生的创造性思维就更无从谈起了。虽然这种传统实验模式简明、清晰，有利于学生对相关结论的认可、理解和记忆，也有利于教师对整个教学过程的控制，教师和学生很轻松愉快地就能完成实验教学任务。学生走上工作岗位后，传统实验教学的弊端立即显现。学生缺乏设计实验的能力，在实验过程中缺乏发现问题、分析问题和解决问题的能力，实验后缺乏正确分析实验结果的能力。因此，传统的实验教学模式急需改革。
1.2实验教学内容系统性不强植物保护研究法是植物保护专业本科学生的一门专业课程，其涉及的内容有昆虫研究法、植病研究法和农药研究法。在以往的实验课程中，只是简单地把这3门课的实验合在一起上，并没有把内容紧密联系在一起，如昆虫实验时，指导教师一般是教授昆虫学科的教师;而在进行植病实验时，则由讲授植病学科的教师指导。这样的实验模式难以使植物病虫害系统联系起来，学生学习专业知识不够系统和深入，容易造成理解上的片面性和孤立性，不利于掌握该专业的系统知识和技能。
1.3实验考核不科学以往实验课程成绩评定的主要依据是实验报告，而每次实验课结束后，学生递交的实验报告只是把实验大纲(包括实验口的、原理、仪器与试剂、内容及方法)原文不动地抄一遍，实验结果更是千篇一律，这样实验就变成了预演过程，学生在实验中缺乏思考，不利于培养发现问题、提出问题、分析问题和解决问题的能力，背离了实验课教学的初衷。同时，还会导致每位学生的实验成绩差异微乎其微，不具有良好的区分度。
2.教学改革内容
2.1重视教学环节在以往的实验课程中，实验教学所需要的实验用具和材料大多数都是实验教辅人员提前准备，导致他们的工作量非常大。让学生参与实验材料的准备和管理，一方面提高了教辅人员的工作效率;另一方面可以让学生对实验过程有全面了解，获得整个科研实践过程的训练，从而养成好的实验习惯，在未来的科研工作中做到计划周密、有条不紊地安排和实施实验计划。同时，在实验教学过程中，必须教育学生认真操作、仔细观察、实事求是地记录实验结果，并对实验进行科学分析。一日_发现弄虚作假的学生，一定要严厉批评，同时帮助他们分析失败的原因，找出解决的方法，有条件的情况下，让其重新做实验，让学生充分意识到科学研究允许失败，但是不能有半l从虚假。2.2提高学生的实践能力实践教学是培养和训练学生实践操作能力，独立分析问题、解决问题能力的重要手段，尤其对于学生创新能力的培养，具有其独特的地位和作用。该项口分别以某种农作物病虫害为主轴展开一系列的实践性实验教学，要求学生自主设计实验和执行各项实验内容，指导教师负责答疑和提供技术帮助。学生通过自己分组、调查、取样、鉴定、查阅资料、讨论制订实验方案和动手实验等一系列步骤，不仅可以很好地将课堂上所学的理论知识与实践相结合，而且还有助于提高自学能力、实践能力和团队协作能力，进一步培养科学思维和创新能力。2.3优化实验教学内容结构将整个实验课程设置成一个综合性的大实验：分别以某个农作物上的病虫害发生规律及防治措施贯穿整个课程。将口前昆虫研究法的昆虫标本的采集与制作、昆虫人工饲养技术、昆虫生态学研究方法、昆虫生理生化研究方法、昆虫分子生物学研究方法和害虫综合治理研究方法5个实验和植病研究法的植物病害调查、植物病原菌分离与鉴定技术、植物病原菌分子生物学鉴定技术、植物病原真菌遗传转化技术和植物病害综合治理技术5个实验合并成1个综合性大实验，将植物病虫害研究以故事的形式紧密地整合在一起，让学生将课堂知识与田间实际应用有机地联系在一起，加深对理论知识的理解，提高学习兴趣。整个实验就是以具体的作物病虫害发生为时间轴，具有很强的连贯性和系统性，学生只有认真完成每一个实验，才能很好地保证后续实验的顺利进行，有助于增强学生的责任感和团队合作精神，同时也改变了学生实验报告千篇一律的`现象。2.4改革成绩评定方式实验课成绩一方面是对学生实验完成好坏的肯定，另一方面也对学生起到了一定的督促作用。为了做到对学生的全面评价，实验成绩除实验报告和考勤成绩外，应将实验过程中学生的学习主动性、动手操作能力、实验结果记录规范性量化纳入成绩考核。在实验过程中，教师应主动观察并记录每个学生的实际动手、操作能力，量化后按一定比例记入总成绩，对那些既有独立操作能力，又有创新意识的学生，适当给予创新学分。实验过程中，学生是否遵守实验室规则、是否具有团队合作精神，实验结束后，学生是否打扫卫生、是否清洗实验器材等，这些看似小问题，但也体现着一个人的品质和素养，做得好的学生也可以适当加分。
3.改革成效
3.1提高学生的专业技能及其对专业知识重要性的认识学生能在同一时间完成植病研究法、昆虫研究法和农药研究法3门实验课程，体现了实验课程很强的连贯性和系统性。学生在实践过程中将这3门课程的相关内容紧密、有机地联系起来，对植物病虫害防治有了更深入的认识，同时也提高了学生的专业技能及其对专业知识重要性的认识。在实验的过程中，强调把学生的动手能力放在首位，让学生更多地参与到实验中，切身体会到所学专业的意义。
3.2培养学生发现、提出、分析和解决问题的能力植物保护研究法实验教学模式具有系统化和整体化特点，同时涉及昆虫研究法、植病研究法、农药研究法等相关学科课程。在实验过程中，学生在对病虫害的认知及其防治等问题的处理上始终处于主体地位，在独立思考、查找资料、咨询专业教师、综合分析之后，拟定出具体的处理方案，能够融会贯通地掌握植物保护学科的理论知识和基本实践技能。
3.3提高指导教师的业务水平新的实验教学模式综合运用了3门相关课程的理论知识，加强了课程的综合实践环节，因此指导教师自身的知识面、操作技术、实践应用和协调能力都需要提升。所以，这种实验教学模式促使教师在教学过程中同学生一起不断学习，丰富专业理论知识，完善专业实践体系，提高发现、提出、分析和解决问题的能力，了解和掌握学科及相关学科的发展动态、研究的新进展、出现的新技术，从而提高了指导教师的业务水平。
4.结语
植物保护研究法在植物保护专业2013级和2014级本科生实验课程教学中进行了实践，通过问卷调查，95%的学生认为在实验过程中有较多的动手机会，激发了自己对实验的兴趣，提高了自己分析和解决问题的能力。因此，认为该教学方法可以发挥学生的主观能动性、拓展学生的科研思路、激发学生的创新创造力和提高学生的独立应用实践能力，具有良好的教学效果。
