分子生物学技术在国内防制虫媒传染病领域的应用
【摘要】 本文综述了国内近年来,分子生物学技术在虫媒病中蚊媒传染病防制的应用情况,以期为蚊媒传
染病的防制、应对突发公共卫生事件中蚊媒传染病的发生提供参考.
【关键词】 分子生物学技术;虫媒;传染病
虫媒病是由节肢动物携带病原体传播的一组疾病.
1992年在国际虫媒病毒中心登记的已达535种,其中128
种对人有致病性[1].我国法定报告的传染病中,虫媒病占
13种,蚊虫作为媒介,除了传播病毒性疾病外,还可传播
寄生虫病.这类疾病大都属于自然疫源性疾病,有一定的
地域性和时间性,发病率低、死亡率高,主要通过媒介的
控制进行防制[2].近年来,随着分子生物学技术的研究和
发展,在医学领域的应用日趋广泛,并取得了重大进展,
作者就近年来分子生物学技术在蚊媒传染病的诊断和防制
等方面的应用综述如下.
1 常用的分子生物学技术[3]
1·1 核酸分子杂交技术
核酸的分子杂交(molecular hybridization)它是利用核
酸分子的碱基互补原则,在特定的条件下,双链解开成两
条单链,与异源的DNA或RNA (单链)复性,若异源
DNA或RNA之间的某些区域有互补的碱基序列,则在复
性时可形成杂交的核酸分子.杂交的双方是待测核酸序列
及探针.核酸探针可用放射性核素、生物素或其它活性物
质标记.根据其来源和性质可分为cDNA探针、基因组探
针、寡核苷酸探针、RNA探针等.
分类:根据被测定的对象,分为Southern杂交和
Northern杂交;根据所用的方法,分为斑点(dot)杂交、
狭槽(slot)杂交和菌落原位杂交;根据环境条件:分为液
相杂交和固相杂交.
1·2 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)
是以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板互
补的寡核苷酸片段为引物,在DNA聚合酶的作用下,按照
半保留复制的机理沿着模板链延伸直至完成新的DNA合
成.通过不断重复这一过程,可以使目的DNA片段得到扩
增,同时新合成的DNA片段也可以作为模板,使DNA的
合成量呈指数型增长.
PCR各种应用模式:兼并引物( degenerate primer)
pcr、套式引物(nested primer) pcr、复合pcr (multiplex
pcr)、反向pcr ( inverse pcr或reverse pcr)、不对称pcr
(asymmetric pcr)、标记pcr ( lp-pcr)和彩色pcr、加端
pcr、锚定pcr或固定pcr、玻片pcr、反转录pcr方法检测
rna、定量pcr.
1·3 DNA芯片
基因芯片又称DNA芯片(DNA chip)或DNA微阵列
(DNA microarray).是采用光导原位合成或显微印刷等方
法将大量特定序列的探针分子密集、有序地固定于经过相
应处理的载体上,然后加入标记的待测样品,进行多元杂
交,通过杂交信号的强弱及分布,来分析目的分子的有无、
数量及序列,从而获得受检样品的遗传信.特点:具有通
量大,并行性、微量化与自动化等优点,但在实践中其研
究成本较高;方法标准化不足;配套软件不够完善.
2 分子生物学技术在虫媒病诊断的应用
2·1 疟疾
黄炳成等[4]用pBF2 DNA片断,经标记后作探针,从
多种疟原虫DNA样本中检出恶性疟原虫.基因芯片在疟原
虫的研究内容还有疟原虫新基因发现[5]、转录因子调控网
络[6]、疟原虫适应人体宿主机制[7]、疟原虫比较基因组杂
交分析[8]、恶性疟原虫抗原变异分子机制[9]以及疟原虫攻
击红细胞机制[10]等.
2·2 丝虫病
黄志彪等[11]运用PCR技术检测血液中的班氏丝虫微
丝蚴,可检出lOOul阳性血样中的l条班氏丝虫微丝蚴;用
于检测班氏丝虫监测点540份血液样本结果均为阴性,镜
检血片结果亦为阴性.常规丝虫检测是在夜间采血,有资
料显示[12], SsP/PCR扩增系统可用于检测班氏丝虫病患
者血样中的循环DNA,能用于周期性或夜间周期性丝虫病
的日间血检工作,从根本上改变了丝虫病的诊断、监测和
工作方式.
2·3 登革热病
郑夔等[13]应用多重PCR技术快速鉴定4种血清型登
革病毒,并在同一反应管中进行多重PCR对登革病毒进行
分型鉴定,证实了2004年在广东发生的登革热疫情为I型
登革病毒;也有报道应用寡核苷酸芯片技术能同时确认流
感和登革热病毒[14].长期受这种疾病困扰的地区将有望通
过这种技术的完善,获得有效的治疗和保护.
建议搭配MATLAB、AI、Visio、Excel等画图辅助工具。
论文图表首先要规矩,符合期刊的投稿要求,然后在规矩的基础上实现图表的美观和专业。在当前贯彻科技论文规范化、标准化的同时,图表的设计也应规范化、标准化。所以,科学论文图表的制作原则主要是规矩、简单、美观和专业:
① 规范:图表要素的满足是做好图表的一个基础条件。规矩就是指论文图表符合投稿杂志的图表格式要求。文章投稿前都会有形式各异的介绍(具体可以参考投稿期刊的《作者投稿指南》或《Author Guidelines》)。绘图时满足投稿期刊的图表要求,这样会使读者至少能看懂图表,例如图表的单位、字体、坐标、图例、坐标轴标题等。
② 简洁:科学论文图表的关键在于清楚地表达自己的数据信息。 Robert A. Day 在《How to write and publish a scientific paper》书中指出,Combined or not, each graph should be as simple as possible。如果一张论文图表包含的数据信息太多,反而让读者难以理解自己所要表达的数据信息,所以,科学论文图表尽量简单和简洁,能清楚地表达数据信息。
③ 美观:图表审美的构造是做好图表的一个重要条件。审美是指论文图表要简单且具有美感,图表的配色、构图和比例等对于图表的审美尤为重要,但是对于理工科的学生来说,又是极为困难的,因为审美的能力不是那么容易培养的。
④ 专业:图表类型的选择是做好图表的关键条件。专业就是指图表要能全面地反应数据的相关信息。当你的审美达到了可以使图表美观的时候,要想让你的图表表达更加清晰和专业,这时图表类型的选择就尤为重要。
相比之下MATLAB画图就更加的清晰明了:
但是如果仅是画简单的柱状图,线形图等,建议可以直接用Excel或者Word也比较方便。word和Excel都属于office旗下的文本图标编辑软件,绘制图片很快捷,但是过于简单,复杂的图标是很难绘制清楚的。
因此,单纯的使用Word来画图有一些单调,可以配合MATLAB、AI、Visio、Excel等画图辅助。会更加合适,清晰明了。
以上内容参考:知乎-写论文用什么软件画图
可以使用Excel软件做出fold图,然后插入论文中。
Excel做fold图的步骤:
1,画柱状图首先选中要画图的区域,然后点击插入菜单,柱状图选项,会弹出选项。可以选择的第一个柱状图样例。
2,选择对应的柱状图之后生成的柱状图。但是对比的两个选项的图例并不正确,而且横轴纵轴都没有标题,整个曲线也缺少标题。这些都需要设置。
3,首先看一下怎样修改系列名,即图例名称。首先选中系列一,然后右键-》选择数据,选择要修改的系列一或者系列二,然后点击编辑按钮。弹出界面,然后再系列名称中输入你要的名称,点击确定即可。同样操作修改其他系列名称。
4,怎样给柱状图加标题点击布局按钮,看一下有一个图标标题选项,!点击下选择一个标题样式就ok了。选择的是第三个在图标上方。方框中的《图表标题》就是新插入的标题,双击修改即可。
5,同样如步骤四,选中曲线图,选择布局按钮,然后选择坐标轴标题即可添加横纵坐标的标题。至此,基本的设置就ok了。