药物中杂志限量的控制方法有两种:一种为限量检查法,另一种是对杂质进行含量测定。
限量检查法不需要进行准确定量,只需检查杂质是否超过限量。
进行限量检查,多采用对照法,灵敏度法,比较法。
1 对照法:取一定量的被检杂质标准溶液和一定量供试品溶液,在相同条件下处理,比较反应结果,已确定杂质含量是否超过限量。
2灵敏度法:在供试品溶液中加入一定量的试剂,在一定反应条件下,不得有正反应出现。该法不需要杂质对照品溶液。如乳酸中枸橼酸,草酸,磷酸或酒石酸的检查。
3比较法:取供试品一定量依法检查,测定特定待检杂质的参数(如吸光度)与规定的限量进行比较,不得更大。
关于残留溶剂,常使用GC。
定量测定主要使用色谱法,包括TLC(盐酸环丙沙星中氟喹啉酸检查)
HPLC(红霉素中红霉素BC检查)
薄层色谱法(The layer chromatography,TLC)是将固定相均匀的涂布在具有光洁表面的玻璃、塑料或金属板上形成薄层,在此薄层上进行色谱分离的方法,它属于平板色谱,是一种常用的色谱分离方法。
TLC法被许多国家药典用于药物中杂质的检查、药物分析等方面,且是目前药典中收载最多的鉴别与有关物质检查方法之一,具有设备简单、操作简便、分离速度快,灵敏度和分辨率较高等优点。
而薄层色谱在药物分析中,则常用薄层色谱扫描法,其主要用于以下几个方面:
1、中药材与中成药的鉴别与成分分析
2、 合成药物及其制剂分析
3、药物代谢研究
4、抗菌素分析
5、中药的TLC指纹图谱鉴别
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。
是20世纪70年代迅速发展起来的一种高效、快速、高选择性、高灵敏度的新型分离分析技术,是经典液相色谱的发展。
高效液相色谱法在药物分析中的应用主要是鉴别相关物质、检查药物中有关物质的含量限度,测定有效成分或主要成分含量。
1、在药物鉴别中的应用
在HPLC法中,保留时间与组分的结构和性质有关,是定性的参数,可用于药物的鉴别,在中国药典中就有大量的药物采用此法进行鉴别。
2、在杂质检查中的应用
历年来各国药典中收载了多种药物采用HPLC法进行杂质检查的方法,并且可采用HPLC法进行杂质检查的药物种类在逐年颁布的药典中有所增加。
3、在含量测定中的应用
用高效液相色谱法测定合成药及其制剂的含量,可以消除药物中的杂质,制剂中的附加剂及共存药物的干扰。