浙 江 科 技 学 院
本 科 毕 业 设 计（论 文）
(2007届)
题 目 几种三唑类杀菌剂及其金属
络合物的毒力比较
学 院 生化学院
专 业 生物工程
班 级 B 2
学 号 203043058
学生姓名 陈 铮
指导教师 马忠华 张培志
完成日期 2007年6月7日
几种三唑类杀菌剂及其金属络合物毒力比较
学生姓名 ： 陈铮 指导教师： 张培志 马忠华
（浙江科技学院生物与化学工程学院）
摘要： 三唑类杀菌剂是目前最具开发应用潜力的杀菌剂之一。本文通过采用菌丝生长速率测定法：将供试菌在含药PDA平板培养基上进行培养,1d~5d后检查各处理菌生长情况。用十字交叉测菌落直径，并计算菌落扩展直径及抑菌率，求出并比较了三唑酮 ，腈菌唑，戊菌唑，戊唑醇这四种三唑类杀菌剂及其金属络合物对几种重要植物病原菌的毒力EC50,最后进行了盆载防效实验。结果表明：这四种三唑类杀菌剂络合金属离子后药效没有明显增强，与原药比较相对平均，整体有增强趋势。
关键词： 三唑类杀菌剂;金属络合物；毒力; EC50
Comparision of Toxicity of Several Triazole Fungicides
and their Metal Complexes
Student’ s name: Chen Zheng Advisor: Ma Zhong Hua ，Zhang Pei Zhi
（School of Biological and Chemical Engineering Zhejiang University of Science and Technology）
Abstract：Triazoles is one kind of fungicides that is the most potential application at present. This article through uses the hypha growth speed measuring method: take zhe testing-fungus on zhe potato dextrose agar plate which inclusioning medicament progress train. For about one to five days ,examine each treating fungus’ growth complexion .The average colony diameter measured in two perpendicular directions was used for calculation of colonies expand diameter and bate thalli rate ，then account out and compare with tradimefon, myclobutanil, penconazole, tebuconazole which of zhe four kinds triazoles fungicides and theirs metal-composite that to several important plant causing fungus of disease of the Virulence namely 50% effective concentration . The control effect in pot test was conducted at zhe last. The results show that zhe four kinds triazole fungicides compare with primary medicament opposite average and the control effects are in general enhanced after the formation of the triazole fungicides with metals compared with ligands.
Keywords: Triazole fungicides; Metal complex ； Toxicity；EC50
中文摘要 I
英文摘要 II
目录 III
1. 绪论 1
1.1 1.1 几种三唑类杀真菌剂简介 1
1.2 1.1.1 三唑酮 1
1.3 1.1.2 戊菌唑 1
1.4 1.1.3 戊唑醇 2
1.5 1.1.4 腈菌唑 2
1.6 1.2 杀菌剂金属配合物的缓释作用 2
1.7 1.3 杀菌剂毒力EC50和计算方法 3
1.8 1.4 杀菌剂的毒力EC50测定方法 3
1.9 1.5 关于三唑类杀菌剂研究的一些最新报告 4
1.10 2. 实验部分 5
1.11 2.1室内毒力皿测实验 5
2.1.1 实验器材与材料 5
2.1.2 实验方法 5
2.2 盆栽防效实验 7
2.2.1 实验器材与材料 7
2.2.2 实验方法 8
3 实验结果与讨论 10
3.1 室内毒力皿测实验结果 10
3．1．1三唑酮及其金属络合物的毒力比较 10
3．1．2戊菌唑及其金属络合物的毒力比较 11
3．1．3戊唑醇及其金属络合物的毒力比较 13
3．1．4腈菌唑及其金属络合物的毒力比较 14
3．2 盆栽实验结果 15
3．3 讨论与分析 16
4 结论与展望 18
致谢 19
参考文献 20
附录 21
1 绪 论
1．1 三唑类杀菌剂简介
关于杀菌剂一词的概念，国内对此术语的理解比较混乱，有时甚至是误解。实际上，大多数杀菌剂不是杀真菌的，它们应称为真菌抑制剂，这类药剂只能阻止真菌的生长和发育，而不能在土壤中真正杀死它们。因此清楚了解杀菌剂的类型，在使用中至关重要。从作用于草坪草的角度考虑，可将杀菌剂分为：接触型、渗透型、局部渗透型、三唑类型以及内吸型四大类。三唑类杀菌剂在目前是应用最广，药效显著的一类杀菌剂。其类别主要有苯醚甲环唑， 烯唑醇 ，腈苯唑 ，氟硅唑， 腈菌唑，戊菌唑， 丙环唑 ，戊唑醇 ，三唑酮 ，三环唑， 氟菌唑 。
三唑类杀菌剂的作用机理是抑制病原菌体内甾醇的脱甲基化过程，作用位点相对单一，因此存在较高的抗药性风险，为防止病原抗药性的快速产生和增长，有必要定期监测病菌对上述药剂的敏感性，开展与作用机制不同保护性杀菌剂的合理混用及轮换使用的技术研究，以提高防治类病害的有效性和延长药剂的使用寿命[1]。
自上个世纪70年代以来，该类药剂主要用于防治禾谷类作物锈病、白粉病和黑穗病和黑星病等病害。目前三唑类杀菌剂已成为最具开发应用潜力的一类杀菌剂[1]。
1.1.1 三唑酮
三唑酮英文通用名为 tradimefon，又名百理通，粉锈宁，百菌酮。化学名为 1-(4-氯苯氧基)-3,3-二甲基-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁酮。三唑酮是一种高效、低毒、低残留、持效期长、内吸性强的杀菌剂，对锈病、白粉病具有预防和治疗等作用。其对皮肤有轻度刺激作用，在试验剂量内无致癌、致畸、致突变作用，对鱼类毒性中等，对蜜蜂和鸟类无害。剂型有5%、15%、25%可湿性粉剂，25%、20%、10%乳油，20%糊剂，25%胶悬剂，0.5%、1%、10%粉剂，15%烟雾剂。主要对锈病、白粉病和黑穗病有特效，对玉米、高粱等黑穗病、玉米圆斑病，具有较好的防治效果。
1.1.2 戊菌唑
戊菌唑是汽巴一嘉基公司研究开发出的高效低毒杀菌剂，英文通用名称为Penconazole,化学名称1(2,4.二氯-丙基苯乙基)-1H-1,2,4-三氮唑,它的纯品为无色晶体，熔点60℃，可溶于醇、芳烃、二氯甲烷、丙酮等有机溶剂。它是一种具有保护、治疗和铲除作用的内吸性三唑类杀菌剂，其作用机理是抑制甾醇脱甲基化，在真菌孢子萌发和入期间起作用。戊菌唑主要防治对象是白粉菌属，黑星菌属及其他疾病的孢菌纲，担子菌纲和半知茵类的致病菌，尤其是对南瓜、葡萄、仁果、观赏植物和蔬菜上的上述病原茵具有很好的防治效果[2]。
1.1.3 戊唑醇
戊唑醇是由德国拜耳公司于1986年研发成功的
三唑类内吸性杀菌剂，英文通用名为 Tebuconazole，化学名为 (RS)-1-(4-氯苯基)-4，4-二甲基1H-1，2，4三唑-1-基甲基)戊-3-醇。剂型90%原药，25%可湿性粉剂，5%胶悬剂。从作用机理看，戊唑醇主要是抑制病原真菌的麦角甾醇生物合成，对病菌表现出较高的抑制作用。戊唑醇具有高效、低毒、杀菌谱广、持效期长等特点，对白粉菌属、柄锈菌属、喙孢属、核腔菌属和壳针孢属等真菌引起的多种作物病害均有优异防效。目前戊唑醇主要应用于控制禾谷类病害、香蕉叶斑病、油菜菌核病、苹果轮纹病、斑点落叶病和梨黑星病等病害[3]。
1.1.4 腈菌唑
腈菌唑英文通用名Myclobutanil，化学名称为2-（4-氯苯基）-2-（1H-1，2，4-三唑-1-甲基）己腈。其剂型主要有40％可湿性粉剂，12.5％、25％乳油和6％超低量喷洒剂。腈菌唑是一种三唑类杀菌剂。其作用机理是甾醇脱甲基化，具有内吸性，杀菌谱广的特点。主要用以防治梨、苹果等仁果类植物上的白粉病、黑星病、锈病，小麦白粉病、粳枯病、大麦条纹病等病害。对防治梨黑星病、小麦锈病、小麦白粉病、瓜类白粉病、黄瓜黑星病和番茄叶霉病等均有特效。
1.2 杀菌剂金属配合物的缓释作用
农药与金属元素配合作为一种缓释技术国内外已有报道，缓释剂的控制释放措施，使高毒农药低毒化，降低了原药的急性毒性，减轻了残留及不愉快的刺激气味，减少了对环境的污染和对农作物的药害，从而扩大了农药的应用范围，一些农药的金属配合物还具有双重功能的生物活性[4]。
浙科院张培志、傅群英等人分别将三唑酮与配合物铜、锌在水、醇、丙酮、氯仿及DMF、DMSO等溶剂中进行溶解度试验，结果发现配合物的溶解性能不如配体。通过成功构建三唑酮的金属配合物，讨论其在静态水中的稳定性，发现以三唑酮为配体的金属配合物具有缓释的功能[4]。
1.3 杀菌剂毒力EC50和计算方法
Ec50指的是半数有效浓度（concentration for 50% of maximum effect, EC50），即引起半数试验动物反应的药物剂量。
药剂的杀虫或杀菌毒力，常用“致死中量”表示，即杀死生物种群半数（50%）所需用的剂量（median lethal dose，毫克/千克）常简写为LD50。如果浓度表示剂量，则为“致死中浓度”，简写为LC50。杀菌剂则以ED50或EC50来表示，即抑制50%孢子萌发所需的剂量或浓度[5]。在测定药剂毒力时，一般常用一系列的剂量（或浓度）对多组生物分别测定死亡百分率，再以不同剂量与相应的死亡率画成“剂量－死亡率毒力曲线”，在纵坐标，从死亡率50%处引出一平行于横坐标的线与曲线相交，该处的剂量（或浓度）即为LD50（或为LC50）。但是由于这一曲线是S形的，不易精确地求得LD50或LC50的数值，同时用S形曲线也不易与其他曲线进行比较，因此，必须把这一呈S形曲线改成一条直线，常用统计方法是将剂量用对数值表示，将死亡率用机率值表示，就可以将S形曲线改为一根直线，这一根直线常称“剂量对数-机率值直线”。从这一直线的坡度，还可得知供试生物对该种药剂敏感性差异的程度，即坡度越大，表示供试生物个体间差异越小；坡度越小，表示差异越大[5]。
1．4 杀菌剂的毒力EC50测定方法
1）孢子萌发测定法：将不同的药液喷布于玻片表面或平板上，定量滴加孢子悬浮液，药液接触后，经一定培养时间，镜检孢子萌发的百分率。
2）抑菌圈法：将病原菌孢子或菌丝的悬浮液与琼脂培养基混匀，冷凝后，在培养基平面放上消毒的并蘸有不同浓度药液的圆形滤纸片（直径6毫米左右），经恒温培养一定时间后，由于药液的扩散作用，使病菌生长受到抑制，即形成“抑制圈”。测量抑制圈的大小，以比较杀菌剂的毒力。
3）生长速率测定法：在琼脂培养基中加入药液，冷凝后接菌的方法，经24－48小时后，观察菌落生长情况，计算生长速率，并与不含药剂的对照组生长速度相比较。
室内毒力测定时，在不施药的对照组中，常常出现少数自然死亡的个体，如果自然死亡率在5%以下，一般仅把处理组的死亡率减去自然死亡率即可得到校正死亡率。当自然死亡率达到5%-20%时，就不能用直接相减的方法，应按照下列公式计算处理组的校正死亡率，如果自然死亡率超过20%时，则该批供试生物不宜作试验或试验应重做[5]。
1．5 关于三唑类杀菌剂的一些最新研究
目前，国内外有关三唑类杀菌剂环境行为及残留研究报道还很少[10-15]，对于其毒性的残留伤害作物本身良好生长也是需要面对的问题。
近年来, 一些以三唑为母体的杂环化合物由于其广谱的生物活性(如抗炎, 杀虫, 杀菌, 抗结核以及植物生长调节等)而被合成出来。 Akira 等的研究表明 2-氯吡啶-5-甲基基团的存在可以使化合物的生物活性有明显提高[6]。
浙江大学的刘少颖和朱国念近年研究了灰霉病菌(Botryotis cinerea)对甾醇脱甲基抑制剂(DMIs)的敏感性,结果表明供试的3种DMIs类化合物抑制灰霉病菌菌丝生长的活性依次为戊唑醇＞戊菌唑＞三唑酮[7] 。
稠杂环和含硫 1,2,4-三唑化合物是两个研究较为广泛的化合物，其中有不少化合物具有广谱和高效活性，已经开发了不少商品化的品种。目前对大多数 1,2,4-三唑化合物活性研究，多数是先合成再筛选活性，在方法上，合理设计方面研究还不多，合成工作有一定随机性。由于 1,2,4-三唑化合物独特结构，在农用杀菌剂中应用日趋广泛，值得进一步深入研究[8]。
从三唑类杀真菌剂在我国的应用情况来看，它不仅是一广谱、高效的杀菌剂，对粮食作物、经济作物等中的多种真菌具有很好的防治效果，在与其他农药混配后，三唑类杀真菌剂还呈现协同增效作用，同时它还是一种甾醇抑制剂和植物生长调节剂，会影响细胞膜的功能，还可能导致细胞壁异常。在选择杀菌剂种类和剂量的同时，还应注意时节，则效果会更好[8]。
但是，虽然国内外对三唑类药物研究非常多，相对于三唑类金属络合物的研究却寥寥无几，在各大期刊上也很少有见发表。而本论文正是在这个基础上，主要比较和讨论了三唑酮等三唑类杀菌剂与其金属络合药物的毒力之间的关系，从而选择出更有效的三唑酮络合金属药物应用于杀菌剂，以求更广谱，更经济，更有效的应用于农业作物，降低作物病虫害，提高农作物产量，对农药技术开发和研究提出更高了要求。
另外，随着一类新颖三唑类药物金属配合物的合成及研究的深入，三唑类杀菌剂的应
用必将得到进一步推广[8]。
2实验部分
2．1 室内毒力实验
本实验的目的是通过在室内比较测定了4组杀真菌剂金属络合物与原药毒力，观察形成络合物的效果，试图发现比其原药更有效的杀菌药物。在实验设计上，供试菌种选择了灰霉，褐腐菌和两种丝核菌。灰霉主要是一种毒害蔬菜作物的病菌，丝核主要是毒害水稻、小麦类农作物的病菌，KAC则主要侵害纤维作物和林木。通过实验还可以了解，药物对这几大类不同领域范围的病毒造成的影响，寻找适用的范围和方向。
2．1．1 实验器材与材料
(1) 实验器材电磁锅，大烧瓶，1000ml烧杯，1000ml量筒,敏感电子秤，钥匙，超净工作台，打孔器，接菌棒，酒精灯，PDA培养基，水浴箱，一次性塑料手套，酒精灯，移液枪，生化培养箱（温度培养箱）
(2) 供试菌种 菌株JXXF2，B26（丝核菌的两个菌株类型），灰霉，褐腐菌（又称KAC）， 由浙江大学生物研究所提供，实验室内放于27℃的生化培养箱培养，用时提前1-5天用土豆培养基（又称PDA）培养皿转接出来。
(3) 供试药物 第一组：三唑酮原药（D1），三唑酮-Zn（D2） , 三唑酮-Cu（甲苯）（D3），三唑酮-Cu（乙醇）（D4）；
第二组：戊菌唑原药（W1），戊菌唑-Zn（W2），戊菌唑-Co（W3），戊菌唑-Cu（W4）， 戊菌唑-NI（W5）；
第三组：戊唑醇原药（C1），戊唑醇-Zn（C2），戊唑醇-Cu（C3）,戊唑醇-Co（C4）,戊唑醇-Mn(C5),戊唑醇-Ni（C6）；
第四组：腈菌唑原药（J1），腈菌唑-Zn（J2），腈菌唑-Cu（J3）, 腈菌唑-Co（J4）, 腈菌唑-Mn(J5), 腈菌唑-Ni（J6）；
上述供试药物均由本课题组自制。
2．1．2 实验方法
(1)药剂的配制和稀释
母液配制：用电子天平分别准确称量好各药粉0.053g，装入已标药号的小药粉瓶,再将各药粉加丙酮溶解至5 ml，用移液枪转移至5 ml的试剂管，摇晃均匀后用粘胶带封瓶，保存在冰箱里。
稀释：从母液中用移液枪吸取500 ul转移至新的5 ml的试剂管，再加入4.5 ml的丙酮，摇晃均匀后用粘胶带封瓶，保存在冰箱里。
（2）PDA培养基配制
材料：马铃薯200g，水1000g，葡萄糖20g，琼脂25g
方法：土豆去皮后，切小块并放入电磁锅煮沸30分钟，用8层湿纱布过滤后，加入琼脂溶解后再加葡萄糖完全溶解后，定量后倒入大烧瓶，包好消毒。在培养基中加入葡萄糖可以增加抑菌圈的清晰度，边缘整齐，清晰，滑虚圈现象。
(3)菌种的保藏与活化
由于供试菌种大多对人体或植物有致病性，经过多次移种又易污染或变异，做好安全和质量管理至关重要。本实验主要用土豆培养基（PDA）来培养真菌。菌种保存方法很多，这里不一一介绍。本实验所用的菌种采用培养基保存法，将真菌接入PDA培养基，放入冰箱，待到实验需用时提前若干天取出活化，即将包藏菌种转接到普通PDA培养皿，放入温度培养箱培养数天。不同菌种的生长速度，培养时间也会不同。本实验所用菌如要长满小皿，则丝核菌需放置到28℃的温度培养箱培养24小时，而灰霉和叶霉菌需放置到25℃的温度培养箱培养96小时。具体实验操作过程，需要根据实验进度来调节提前培养的日期，以达到节约实验时间，加快实验进度的目的。
(4)室内毒力测定和比较
本实验采用菌丝生长速率测定法进行测定[1]。即将供试菌种在含药PDA平板培养基上进行培养,一天-五天后检查各处理菌生长情况。用十字交叉测菌落直径，数据转化成菌落扩展直径[9]，然后将菌落扩展直径导入一个计算EC50的软件，利用软件计算出抑菌率，求出药剂的毒力回归曲线，EC50值及EC90值[1]，最后比较毒力大小。
(5)实验步骤
溶液的配制： 将各药粉配制一定浓度的各药剂，具体如下，先配制浓度为10 mg/ml的母液5 ml，然后取500 ul母液加4.5 ml丙酮稀释成1mg/ml的药剂5 ml。
菌种活化： 根据实验进度，计算接菌日期，提前取出菌种活化培养。
倒加药PDA培养皿：取六个浓度分别为：0，0.2 mg/L, 0.8 mg/L, 3.2 mg/L, 12.8 mg/L，51.2mg/L，根据具体实验要求，每次量取35 ml或70 ml的已化开的PDA培养基，倒入不同浓度梯度的含药PDA平板培养基，每个菌共需用消毒皿96个，消毒小烧瓶20个。具体操作步骤如下：先化开配制的已凝固的灭菌PDA培养基；用量筒每次量取35 ml（或70 ml）培养基，分别倒入20个烧瓶，放入水浴温热；再打开消毒过的皿，在背后用马克笔写上药名，菌名标号；最后取出一个烧瓶，用打液枪打入已算好的药液量，摇晃均匀，倒2（或4皿），CK皿用大烧瓶中剩余的量一次倒好。具体每种药加药剂量表如下(见表1(a),表1(b))
表1(a) PDA培养基加药量*
含药浓度 CK 0．2 mg/L 0．8 mg/L 3．2 mg/L 12．8mg/L 51．2 mg/L
加药量 0 7 ul 28 ul 112 ul 44.8 ul 179 ul
用药浓度 1mg/ml 10 mg/ml
*a.本加药量表用于做丝核菌B26和JXXF2菌的倒含药培养皿实验。每次量取35ml培养基倒入消毒小烧瓶, 每个烧瓶倒4个含药皿。
表1(b) PDA培养基加药量*
含药浓度 CK 0．2mg/L 0．8 mg/L 3．2 mg/L 12．8 mg/L 51．2 mg/L
加药量 0 14ul 56ul 224ul 90ul 358ul
用药浓度 1mg/ml 10mg/ml
*b.本加药剂量表用于做灰霉和KAC菌的倒含药培养皿实验。每次量取已化开PDA培养基70ml倒入消毒烧瓶, 每个烧瓶倒8个含药皿。
接菌与培养 打5ml的菌饼接菌，放入温度培养箱培养。丝核菌放置到28℃的温度培养箱培养24小时，灰霉和KAC菌放置到25℃的温度培养箱培养96小时。
测量直径 观察培养基上菌体生长情况。待到CK皿快要长满培养皿时取出，并十字交叉法测量直径，取平均值，同时计算出菌落扩展直径。（菌落扩展直径=菌落直径平均值-5CM）
计算EC50 将菌落扩展直径导入计算EC50的软件,利用软件计算EC50，比较各药剂毒力大小。
2．2 盆载防效实验
本实验的目的是通过盆载试验比较皿测实验在实际应用中的效果，看实验效果是否一致。在实验设计上，因为实验条件限制（盆载数量不够），供试药物选择了三唑酮和戊菌唑两组系列，供试菌种选择灰霉。盆载对象选择黄瓜苗，因为黄瓜苗生长周期较短。通过实验，我们可以大略清楚，药物对黄瓜灰霉病的防治效果，以及观察防效是否和皿测结果一致。
2．2．1 实验器材与材料
(1) 实验器材：1000ml烧杯，100ml量筒,吸水纸，灭菌水，直径9 cm大皿若干，95%吐温，新鲜黄瓜叶100片，移液枪。
(2)供试菌种： 菌株灰霉（由浙江大学生物研究所提供，实验室内放于27℃的生化培养箱
培养，用时提前1-5天，用PDA培养皿转接出来）。
(3) 供试药物：第一组为三唑酮原药（S1），三唑酮-Zn（S2） , 三唑酮-Cu（甲苯）（S3），三唑酮-Cu（乙醇）（S4）；
第二组为戊菌唑原药（W1），戊菌唑-Zn（W2），戊菌唑-Co（W3），戊菌唑-Cu（W4）， 戊菌唑-Ni（W5）
2．2．2 实验方法
（1） 吐温水的配制
吐温水为灭菌水/吐温=100：0.5 ，由于实验用量大约270 ml，实际配置吐温水300 ml,即300 ml灭菌水，吐温为1.5 ml。
（2） 菌种活化
根据实验进度，计算接菌日期，提前取出菌种活化培养。
（3） 黄瓜叶放置平皿
培养黄瓜幼苗70盆；待到2-3周黄瓜苗长成，摘取黄瓜苗嫩叶片100片左右；再将所有黄瓜叶片放在报纸上晾干，一共100来片；准备空的直径9cm皿（无需灭菌），在皿上标上药名号以及浓度；接着在皿上垫上一张吸水纸，用灭菌水均匀打湿。（不要太湿，太湿会影响黄瓜叶呼吸作用）；每种药每个浓度用量筒量取10 ml吐温水，倒入皿盖，加药，摇匀；最后取黄瓜叶满浸药液，正反面反复浸药液3-4次，正面朝上放入已垫洗水纸的对应浓度的皿中。（叶柄如过长就剪去一截，将叶柄埋入洗水纸内）
（4） 接菌与培养
先将器械用酒精烧红灭菌，再将已转好的灰霉打菌饼，用接菌棒将菌饼接在叶片中心位置，皿内加少量灭菌水，以保持皿内水分；然后将皿放置到25℃的温度培养箱培养96小时，在此期间，要时刻注意黄瓜叶的水分补给，已防枯死；之后测量直径，观察培养基上菌体生长情况，待到96小时后取出，并用十字交叉法测量直径，取平均值，同时计算出菌落扩展直径（菌落扩展直径=菌落直径平均值-5 cm）；最后计算EC50 ，将菌落直径导入计算EC50的软件，利用软件计算EC50，比较各药剂毒力大小。
3 实验结果与讨论
3．1 室内毒力实验结果
3．1．1 三唑酮及其金属络合物的毒力比较
将三唑酮（D1）及其三唑酮-Zn（D2），三唑酮-Cu（甲苯）（D3），三唑酮-Cu（乙醇）（D4）进行丝核菌株JXXF2，B26，灰霉，KAC的抑菌活性测定，得到了6组（每个菌分四个对照，即A，B，C，D四组）直径数据（见附表6-9）。由于这次实验没把握好两次测量时间，使得两次培养时间相差2个小时，直径数据相差很大。结果导致用软件计算EC50值不太理想（见附表24-29）。具体菌的生长形态可见下图：（图1-8）
图1 三唑酮-JXXF2的A组 图2 三唑酮-JXXF2的A组高浓皿
图3 三唑酮-B26的A组 图4 三唑酮-JXXF2的A组低浓皿
图5三唑酮-B26的A组高浓皿 图6 B26的A组低浓皿
图7 灰霉的A组 图8 KAC的A组全部皿
在得到所有菌的EC50值后，将两个丝核菌两次测得的EC50，取平均值后，得到下面四种三唑酮系列络合药物间的毒力比较表（见表2）。
表2 三唑酮系列络合药物EC50比较表（单位：mg/L）
菌种
药名 B26 JXXF2 灰霉 KAC
三唑酮（D1） 2．43 1．92 4.64 0.38
三唑酮-Zn（D2） 2．90 3．27 4.15 1.32
三唑酮-Cu（甲苯）（D3） 2．27 2．07 4.66 0.99
三唑酮-Cu（乙醇）（D4） 3．59 5．38 5.07 1.07
观察上表可知，形成三唑酮络合物后与三唑酮原药比较，毒力变化不明显。结果表明：
（1） 对B26菌来说，D3毒力略大于原药D1。前三种药D1，D2，D3毒力差不多，D4毒力相对较弱。
（2）对JXXF2来说，毒力有明显梯度，顺序为D1>D3>D2>D4。毒力是原药D1最强。
（3）对灰霉来说,前三种药D1，D2，D3毒力差不多，D4毒力相对较弱。
（4）对KAC来说，原药毒力明显高与后三种药。
3．1．2戊菌唑及其金属络合物的毒力比较
将戊菌唑原药（W1），戊菌唑-Zn（W2），戊菌唑-Co（W3），戊菌唑-Cu（W4）， 戊菌唑-NI（W5）进行丝核菌株JXXF2及B26，灰霉，KAC的抑菌活性测定，得到了4组（每个菌分四个对照，即A，B，C，D四组）直径数据（见附表10-13）。这次实验配药时出了问题,导致药物浓度降低，反映在直径上有所偏差，但EC50值相关系数较好（见附表30-33）。具体菌的生长形态可见下图：（图9-12）
图9 戊菌唑-JXXF2的B组 图 10 戊菌唑- B26的B组
图11 戊菌唑-灰霉的C组 图12 戊菌唑-KAC的B组
计算所有菌的EC50值后,得到下面5种戊菌唑系列络合物间的毒力比较表（表3）。
表3 戊菌唑系列络合药物EC50比较表（单位：mg/L）
菌种
药名 B26 JXXF2 灰霉 KAC
戊菌唑原药（W1） 0.13 0.28 1．58 0.2
戊菌唑-Zn （W2） 0.02 0.2 0.22 0.07
戊菌唑-Co （W3） 0.09 0.23 0.6 0.43
戊菌唑-Cu （W4） 0.17 0.02 0.23 0.38
戊菌唑-NI （W5） 0.04 0.12 1.49 0.16
观察上表可知，戊菌唑络合物与原药比较，毒力明显增加。结果表明：
（1） 对B26菌来说，W2,W3,W5毒力明显高于原药W1,W4毒力略低于原药W1。
（2）对JXXF2来说，W4毒力仅0.02,明显高于所有药,其次是W5。W1-W3毒力较为接近，其中原药W1毒力最弱。
（3）对灰霉来说, W5毒力和原药W1接近，W2和W4毒力接近，在整个表格中出现最弱的毒力W1达1.58，超过1。
（4）对KAC来说,药物间毒力递进关系比较明显,W2>W5>W1>W4>W3，原药毒力居中。
3．1．3戊唑醇及其金属络合物的毒力比较
将戊唑醇原药（C1），戊唑醇-Zn（C2），戊唑醇-Cu（C3）,戊唑醇-Co（C4）,戊唑醇-Mn(C5),戊唑醇-Ni（C6）进行丝核菌株JXXF2，B26，灰霉，KAC的抑菌活性测定，得到了4组（每个菌分两个对照，即A组和B组）直径数据（见附表14-17）。这次实验由于时间比较紧张,和腈菌唑部分一块做。原来应做4个对照，但时间仓促，改做2个对照。虽并不影响结果，但却会导致直径数据精确性下降。戊唑醇EC50值。（见附表34-37）具体菌的生长形态可见下图：（图13-16）
图13 戊唑醇-JXXF2的B组 图 14 戊唑醇-B26的B组
图15 戊唑醇-灰霉的B组 图16 戊唑醇-KAC的A组
计算所有菌的EC50值后,得到下面六种戊唑醇系列络合药物间的毒力比较表（见表4）。
表4 戊唑醇系列络合药物EC50比较表（单位：mg/L）
菌种
药名 B26 JXXF2 灰霉 KAC
戊唑醇原药（C1） 0.24 0．03 0.97 0.21
戊唑醇-Zn （C2） 0.12 0．03 0．87 0．05
戊唑醇-Cu（C3） 0.25 0.002 1.13 0.01
戊唑醇-Co（C4） 0.32 0.003 0.98 0.04
戊唑醇-Mn (C5) 0.14 0.01 1.11 0.01
戊唑醇-Ni（C6） 0.14 0.01 1.33 0.01
观察上表可知，形成戊唑醇络合物后与原药比较，毒力略有变化。结果表明：
（1） 对B26菌来说，C2,C5,C6毒力接近,C1,C3接近,C4毒力最小。
（2）对JXXF2来说，整体毒力普遍偏高，C
1-C6非常接近，均在0.01以下，其中C1-C4毒力几乎为0。
（3）对灰霉来说, 戊唑醇络合药物效果不明显，在四个菌中是最差的，药物间毒力相差不大，平均在1左右。
（4）对KAC来说,原药C1毒力明显弱于其余5个药，说明药物络合金属离子后药效明显增加。
3．1．4 腈菌唑及其金属络合物的毒力比较
将腈菌唑原药（J1），腈菌唑-Zn（J2），腈菌唑-Cu（J3）, 腈菌唑-Co（J4）, 腈菌唑-Mn(J5), 腈菌唑-Ni（J6）进行丝核菌株JXXF2，B26，灰霉，KAC的抑菌活性测定，得到了4组（每个菌分两个对照，即A组和B组）直径数据（见附表18-21），腈菌唑EC50值。（见附表38-42）具体菌的生长形态可见下图：（图17-20）
图17 腈菌唑-JXXF2的A组 图 18 腈菌唑-B26的B组
图19 腈菌唑-灰霉的A组 图20 腈菌唑-KAC的A组
计算所有菌的EC50值后,得到下面六种腈菌唑系列络合药物间的毒力比较表（见表5）。
表5 腈菌唑系列络合药物EC50比较表（单位：mg/L）
菌种
药名 B26 JXXF2 灰霉 KAC
腈菌唑原药（J1） 0.12 0．003 9.06 0.93
腈菌唑-Zn（J2） 0.25 0.03 13.3 0.85
腈菌唑-Cu（J3） 0.08 0.01 8.76 0.78
腈菌唑-Co（J4） 0．001 0．001 8.57 0.91
腈菌唑-Mn(J5) 0．002 0.01 17.1 1.21
腈菌唑-Ni（J6） 0.22 0.01 11.7 1.46
通过观察上表可知，形成腈菌唑络合物后与原药比较，毒力略有变化。结果表明：
（1）对B26菌来说，J4，J5明显高于其余4种药，原药J1毒力居中。
（2）对JXXF2来说，原药J1和J4毒力最高，腈菌唑络合物在4个菌中整体效果最好。
（3）对灰霉来说,腈菌唑络合药物效果不明显，在4个菌中是最差的。比较毒力大小
（4）对KAC来说,J5，J6略为偏低，J1-J4毒力比较接近，原药J1毒力居中。
3．1 盆栽实验结果
本次实验供试药物选取三唑酮和戊菌唑两组系列，供试菌种选择了灰霉菌。两组实验一起进行，但因为没有经验，培养过程中没有注意加水，导致几片黄瓜叶在实验中枯死，部分数据不可用。实验效果不太理想。这在三唑酮直径数据（见附表22）和戊菌唑直径数据（见附表23）上就可以看出来。实验分两个对照，即A组和B组。具体灰霉菌的生长形态可见下图：（图21-22）
图21 戊菌唑-灰霉B组 图22 三唑酮-灰霉A组
通过三唑酮和戊菌唑络合药物与原药比较，毒力略有变化，EC50整体偏低（见附表43-44）。结果表明：
（1）从两组药物毒力EC50数据上看，平均达到100以上，与皿测比较似乎偏高，可能由于实验性质不同的缘故。
（2）三唑酮络合药物除D2毒力略高于原药D1外,其余均明显低于原药。
（3）戊菌唑络合药物W5毒力几乎和原药W1相等，W2略高于原药W1，W3毒力明显低于原药。这与皿测结果即“W1和W5毒力接近”相符。
3．3 讨论与分析
从4组三唑类杀菌剂及其金属络合物毒力比较结果的整体上看，络合药物和原药之间的毒力相差不多。计算EC50结果表明，有些药物络合金属离子后毒力减小了，有些略有增大。在以上数据中，灰霉和KAC的相对可信，但对两种丝核菌直径数据的可信度不高，例如从三唑酮的实验上看，由于两种丝核菌两次培养时间大约超过半小时，本来数据应比较接近，结果却相差较大，第二次测量数据普遍比第一次偏高。分析原因可能有：（1）培养基的质量比上次的好 ；（2）所接菌饼含菌丝量大大高于上次（这次活化培养的菌丝长满皿边缘，且厚实）；（3）由于是REPEAT实验，时间培养上没掌握好，超过0.5-1小时 ； （4）培养期间条件发生过变化（这个因素有一定可能，温度可能在培养期间被人调过）。由于直径是两次测量所得，使得EC50要算两次取平均值。这样本身造成误差，使EC50 可信度下降。
另外，在盆载可能数据做的不够多，毒力数据结果似乎偏差很大，由于文献中也找不出合理解释，个人认为可能影响因素是多方面的，有待于进一步探讨。
推测三唑类药物络合金属离子后造成可能有3个原因：
（1） 络合药物中原先设计起到增加药物效力的金属离子结合较紧密，较难脱落，药力没有增加。而其本身又使得原药有效位点被结合，失去部分药效，从而毒力减弱。也可能脱落后使得原药部分产生变化，失去药效。反之，也可能因为络合离子后改变分子结构，产生更强的药效。
（2） 由于药物络合离子后，使得本身在同等浓度下（与原药比较）质量较小，既真正含原药浓度较原药小，从而毒力减弱。
（3）药物因络合一些重金属，由于重金属本身有杀菌效果，再加上本身药物毒力，使毒力比原药增强。
4 结论与展望
本论文通过采用菌丝生长速率测定法：将供试菌在含药PDA平板培养基上进行培养,1-5天后检查各处理菌生长情况。用十字交叉测菌落直径，并计算菌落扩展直径及抑菌率，求出药剂的毒力回归曲线，EC50值，比较各药剂毒力大小。在室内比较测定了4种三唑类络合金属离子药物与其原药毒力，希望发现三唑类药物在合成分子方面的效果是否能够影响药物本身毒力。
结果表明：形成三唑类金属络合物后，毒力不仅没有减弱，与原药比较相对平均，整体还有一定增强趋势。
国内外，对三唑类药物研究非常多，但相对于三唑类金属络合物的研究却寥寥无几，在各大期刊上也很少有见发表。而本论文正是在这个基础上，主要讨论了4种三唑类药物以及其金属络合药物的毒力之间的关系，从而选择出更有效的三唑类络合金属药物应用于杀菌剂，以求更广谱，更经济，更有效的应用于农业作物，降低作物病虫害，提高农作物产量，对农药技术开发和研究提出更高了要求。相信未来随着一类新颖三唑类药物金属配合物的合成及研究的深入，三唑类杀菌剂的应用必将得到进一步推广[8]。
致 谢
首先我感谢所有浙江科技学院生化系所有的老师对我的生活和学习上无微不至的教导和帮助，也感谢所有的同学在我大学生涯中对我的关心和支持。
感谢张培志老师帮我联系浙大生物研究所，使得我有机会学到很多在学校难以学到的知识和实验技能。这次毕业论文我跟马忠华、张培志老师做课题，这次毕业论文实习经历使我受益匪浅。这次毕设实习给予我的不仅是实验和工作的锻炼，更给我一种力量,改变了我的某些人生观，今后我将以对科学研究的态度面对人生，面对未来，勇往直前。
最后，我还要感谢浙大几位研究生对我实验的帮助,特别感谢我的导师张培志老师和浙大马忠华教授，在实际生活中的帮助，以及在学习和实习过程中给予的关心与帮助。并且
在此衷心感谢在此审阅论文的各位老师！祝愿老师们身体健康，工作生活愉快！
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附 录
表6 第一次三唑酮-丝核菌直径数据(单位:cm)
b26 编号 三唑酮原药 三唑酮Zn 三唑酮-Cu（乙醇） 三唑酮-Cu（甲苯）
ck A 3.5 , 3 2.8,2.9 3，2.7 3，2.9
B 3.5 , 3 3.7,3.7 3.7，3.2 3.2，3.1
0.2 A 3.1 , 2.8 3.1,2.9 2.6，2.5 3.2，3.2
B 3.1, 3.2 3.5,3 3.2，2.7 3.2，3
0.8 A 2.6,2.4 2.3，2.1 2.8，2.5 2.7，2.6
B 2.8,2.6 2.8，2.6 2.5，2.4 3.1，2.7
3.2 A 1.7,1.7 1.9，1.9 1.5，1.5 1.5，1.3
B 1.9,1.9 1.7，1.6 1.7，1.6 1.6，1.8
12.8 A 1.2,1.1 1.2，1.2 1.3，1.3 1.4，1.4
B 1.2,1.2 1.4,1.3（补） 1.4，1.4 1.2，0.9
51.2 A 0.9,0.8 0.9，0.8 1，0.9 0.8，0.9
B 0.9,0.8 0.9，0.8 0.9，0.9 0.9，0.9
JXXF2 编号 三唑酮原药 三唑酮-Zn 三唑酮-Cu（乙醇） 三唑酮-Cu（甲苯）
ck A 4.1,4 4.3,4.1 3.7,3.3 3.3,3.8
B 5.3,5 3.5,3.6 6.6（补） 2.8,2.6
0.2 A 2.6,2.6 4.3,4 3.8,3.7 4.5,3.4
B 2.5,2.5 4.2,3.3 4.5,4.3 4,3.8
0.8 A 3.3,3.2 3.1,3.2 2.9,2.9 3.3,3.2
B 3.4,3.2 3.2,3.2 3.1,3.1 3.3,3
3.2 A 2.1,2 2.4,2.2 2.2,2 2.3,1.9
B 2.1,2.1 2.3,2.2 2,1.8 2.2,2.1
12.8 A 1.4,1.5 1.6,1.5 1.5,1.4 1.6,1.4
B 1.3,1.3 1.6,1.5 1.6,1.6 1.7,1.6
51.2 A 1.1,1.2 1,0.9 1,1 0.8,0.8
B 1.1,1.2 0.9,0.9 1,0.9 0.8,1
（*注：其中一个JXXF2的D3的CK皿和B26的D2的12.8皿因实验中倒坏,数据由第二次测量时补上）
JXXF2 编号 三唑酮原药 三唑酮-Zn 三唑酮-Cu（乙醇） 三唑酮-Cu（甲苯）
ck C 6，6 6,6 6,6 5.7,6
D 6，6 6,6 6,6 6,6
0.2 C 6，6 4.7,4.7 5.2,5.2 4.3,4.5
D 6，6 5.3,5 5.2,5.9 5.3,5
0.8 C 3.6,3.9 3.1,3.2 4,4 3.5,3.6
D 3.5,3.2 3.2,3.2 4.3,4.1 3.9,3.8
3.2 C 2.5,2.4 2.2,2.3 2.8,2.3 2.5,2.7
D 2.5,2.2 2,2 2.5,2.4 2.8,2.6
12.8 C 1.7,1.8 1.7,1.9 1.9,1.8 1.9,1.8
D 1.7,1.7 1.9,1.8 1.7,1.8 2,1.9
51.2 C 0.8,0.8 1,1.1 1.1,1.1 1.1,1
D 0.8,0.8 1,0.9 1,1 1.1,1.2
B26 编号 三唑酮原药 三唑酮-Zn 三唑酮-Cu（乙醇） 三唑酮-Cu（甲苯）
ck C 4.5,4.2 4.5,5.2 4.6,5.5 4.8,4.3
D 5,4.7 4.4,4.4 4.3,4.7 4.5,4.3
0.2 C 3.5,3.4 4.1,4.3 4.2,4.1 3.4,3.5
D 4.5,4.2 4.4,4.8 4.2,4 4.2,4
0.8 C 2.6,2.7 2.3,2.4 2.7,2.7 3,3.3
D 2.5,2.3 2.3,2.4 2.8,2.9 2.9,3
3.2 C 1.6,1.4 1.8,1.7 1.9,1.8 2,2.1
D 1.8,1.9 1.7,1.9 2,2.1 2,2
12.8 C 1.2,1.3 1.3,1.4 1.2,1.3 1.4,1.4
D 1.2,1.3 1.4,1.4 1.3,1.3 1.4,1.4
51.2 C 0.5,0.6 0.9,0.9 1,1 0.9,0.8
D 0.8,0.7 1,0.9 0.9,0.9 1,0.9
表7 第二次三唑酮-丝核菌直径数据(单位:cm)
表8 三唑酮-灰霉直径数据(单位:cm)
灰霉 编号 三唑酮原药 三唑酮-Zn 三唑酮-Cu（乙醇） 三唑酮-Cu（甲苯）
CK A 5,4.8 3.7,4.8 5.2,5.8 5.4,5.2
B 5.3,5.4 5.5,5.7 5,5.8 5.5,5.5
C 5.9,5.9 6,6 5.9,5.9 6,6
D 6,6 6,5.9 5.9,5.8 6,5.9
0.2 A 6,5.7 5,5.2 5.2,5.9 5.6,5.6
B 5.9,5.9 5.3,5.8 5.8,5.9 5.4,5.5
C 5.9,5.9 6,5.8 5.3,5.5 6,6
D 5.7,5.9 5.5,5.4 5.5,4.7 5.7,5.5
0.8 A 5.2,5.2 5.2,5.4 5.3,5.4 5.2,5.1
B 5.2,5.3 5.4,5.4 5.4,5.7 5.2,5.2
C 5.4,5.3 5.2,5.3 5.6,5.9 5,5.3
D 4.9,5 5.3,5.4 5.4,5.6 5,5.3
3.2 A 3.8,3.4 4,4.1 4,4 4.2,3.7
B 3.8,3.5 3.8,4.1 4,3.9 4,3.6
C 4,3.8 4.3,4.2 3.8,3.7 4,3.7
D 3.8,3.9 4.2,4.4 4,4.1 4,4.1
12.8 A 2.1,2.0 1.9,1.4 2.2,2.1 2.3,2.2
B 2.1,1.8 2.1,1.9 2.3,2.4 2.3,2.2
C 2.1,2 2.2,1.5 2.1,1.9 2.2,2.2
D 2.1,2.1 2.3,1.8 2.4,2.4 2.5,2.3
51.2 A 0.7,0.7 0.51,0.51 0.6,0.6 0.8,0.9
B 0.6,0.6 0.51,0.51 0.6,0.7 0.7,0.7
C 0.51,0.51 0.51,0.51 0.51,0.51 0.6,0.51
D 0.6,0.6 0.6,0.5 0.51,0.51 0.6,0.6
表9 三唑酮-KAC直径数据(单位:cm)
kac 编号 三唑酮原药 三唑酮-Zn 三唑酮-Cu（乙醇） 三唑酮-Cu（甲苯）
CK A 5.4,5 5.6,4.8 4.5,2.9 4.3,3.8
B 5.5,5.2 3.4,1.7 3.7,3.4 5.3,4.5
C 5.4,5 4.2,3.2 5.1,5.4 4.8,4.6
D 4.8,5 4.8,4.2 4.3,4.2 1.2,2
0.2 A 3.5,3.2 4.6,2.9 4.3,4.5 4.8,4.4
B 4.3,4.9 4.1,3.7 3.3,2.9 3.4,2.3
C 3.1,2.4 4.7,3.5 5,2.8 4.4,3.9
D 2.8,2.4 4.6,4.1 4.8,4.2 2.7,3.1
0.8 A 2.5,2.5 2.9,2.4 2.2,2 2.5,2.4
B 2.7,2 2.6,1.9 2.3,2.1 3.5,2.1
C 2.8,2.3 2.4,2.6 2,1.8 1.6,1.5
D 2.4,2.1 2.4,2.9 2,1.9 2.4,2.5
3.2 A 1.2,1.3 1.5,1.6 1.5,1.5 1.4,1.4
B 1.1,0.9 1.5,1.5 1.3,1.4 1.2,1.2
C 1.3,1.2 1.5,1.4 1.5,1.3 1.
3,1.2
D 1.5,1.4 2,1.9 1.8,1.5 1.4,1.3
12.8 A 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
B 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
C 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.51
D 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.51
51.2 A 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
B 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
C 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
D 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
表10 戊菌唑-JXXF2直径数据(单位:cm)
JXXF2 编号 戊菌唑原药 戊菌唑-ZN 戊菌唑-CO 戊菌唑-CU 戊菌唑-NI
CK
A 4.3 4.2 4.3 4.3 4.5 4.4 4.7 4.6 4.7 4.6
B 4.4 4.3 4.7 4.5 4.4 4.3 4.9 5 4.6 4.2
C 4.6 4.6 4.3 4.3 4.3 4.3 4.9 4.8 4.6 4.2
D 4.2 4.3 4.5 4.3 5 5 4.9 4.8 4.8 4.7
0.2
A 2.4 2.4 2.5 2.5 2.5 2.3 2.2 2.2 2 2
B 2.4 2.3 2.4 2.1 2.5 2.4 2.3 2.2 2.1 2.1
C 2.4 2.4 2.3 2.1 2.5 2.4 2.3 2.2 2.1 2.1
D 2.4 2.2 2.4 2 2.5 2.4 2.3 2.3 2.1 2.2
0.8
A 2.2 2 2.4 2.1 1.7 1.7 1.9 1.8 1.4 1.4
B 1.6 1.6 2.2 1.9 1.6 1.6 1.8 1.9 1.5 1.3
C 1.8 1.7 2.1 2 1.8 1.7 1.8 1.8 1.3 1.2
D 1.9 1.8 2.4 2.4 1.8 1.7 1.8 1.8 1.3 1.5
3.2
A 1.9 1.2 2.4 2 1.6 1.4 1.7 1.6 1.2 1.2
B 1.7 1.8 2.1 1.8 1.4 1.4 1.4 1.4 1.3 1.4
C 1.6 1.2 2.5 2.1 1.5 1.4 1.5 1.4 1.4 1.2
D 1.3 1.2 2 1.6 1.4 1.4 1.5 1.4 1.2 1.3
12.8
A 0.8 0.9 1.3 1.4 0.9 0.9 1.7 1.5 0.6 0.6
B 0.8 0.7 1.9 1.1 1 1 1.8 1.9 0.7 0.6
C 1.9 0.8 1.9 1.7 0.9 0.9 2 2 0.7 0.6
D 0.7 0.8 2.1 1.6 0.9 0.9 2.3 1.8 0.8 0.7
51.2
A 0.51 0.51 1.5 1.4 0.51 0.51 1.3 1.2 0.51 0.51
B 0.51 0.51 1.8 1.3 0.51 0.51 1.8 1.6 0.51 0.51
C 0.6 0.51 1.8 1.9 0.51 0.51 1.8 1.3 0.51 0.51
D 0.51 0.51 2 1.5 0.51 0.51 1.8 1.8 0.51 0.51
表11 戊菌唑-B26直径数据(单位:cm)
B26 编号 戊菌唑原药 戊菌唑-ZN 戊菌唑-CO 戊菌唑-CU 戊菌唑-NI
CK A 3.5,3.6 4.2,4 4.4,4.5 3.7,3.8 3.6,3.7
B 4.1,3.9 4.3,4.4 4.4,4.4 4.1,3.9 4.3,4.2
C 4.4,4 4.6,3.8 3.7,3.7 4.3,4.4 3.7,3.7
D 4.1,4.2 4.3,4.2 4.1,4.2 4.3,4.1 3.9,3.7
0.2 A 1.9,1.8 2.3,2.2 1.9,1.8 2.3,2.2 1.8,1.6
B 1.9,1.8 2.3,2.2 1.9,2 2.4,2.4 1.8,1.7
C 2.2,2.2 2.4,2 1.9,2 2.6,2.5 1.7,1.6
D 2.2,2.2 2.3,2.3 1.9,2 2.4,2.2 1.7,1.7
0.8 A 1.4,1.4 2,1.9 1.5,1.4 1.4,1.4 1.4,1.4
B 1.6,1.5 2.6,1.8 1.5,1.4 1.6,1.5 1.4,1.4
C 1.6,1.5 2.3,2.1 1.5,1.5 1.6,1.5 1.4,1.5
D 1.5,1.4 2.2,2.1 1.5,1.6 1.6,1.5 1.4,1.3
3.2 A 1.2,1.1 1.4,1.5 1.2,1.2 1.3,1.3 1.1,1.1
B 1.2,1.1 1.5,1.3 1.2,1.2 1.3,1.2 1.3,1.3
C 1.2,1.2 1.4,1.4 1.2,1.2 1.2,1.2 1.4,1.1
D 1.2,1.3 1.4,1.4 1.2,1.2 1.2,1.2 1.4,1
12.8 A 0.8,0.8 1.5,1.3 0.9,0.9 1.1,1 0.9,0.8
B 0.9,0.9 2.1,1.6 0.9,0.9 1,0.9 1.1,0.8
C 0.9,0.8 2.2,1.6 0.9,0.9 1,1 1,0.9
D 0.9,0.9 1.3,1.5 0.9,0.8 0.9,0.9 1.1,0.9
51.2 A 0.6,0.51 1.3,1.4 0.51,0.51 0.6,0.6 0.7,0.7
B 0.6,0.6 1.8,1.2 0.6,0.6 0.6,0.7 0.8,0.7
C 0.6,0.51 1.4,1 0.6,0.6 0.7,0.7 0.6,0.51
D 0.6,0.6 1.5,1.4 0.6,0.6 0.7,0.6 0.7,0.6
表12 戊菌唑-灰霉直径数据(单位:cm)
灰霉 编号 戊菌唑原药 戊菌唑-ZN 戊菌唑-CO 戊菌唑-CU 戊菌唑-NI
CK
A 4.7,5 5.1,5 4.8,4.9 4.9,4.8 5,5
B 5,5 5.1,5 4.8,4.9 5,5 5.2,4.9
C 4.9,4.8 5,4.8 4.8,4.7 4.9,4.9 5.2,5
D 4.8,4.7 5.1,5 5,4.9 1.2,1.1 5,5
0.2
A 4.9,4.8 3.3,3.3 4.7,4.6 2.1,2.4 5.2,5
B 5.1,5.3 1.7,1.4 3.7,3.9 2.1,2.3 5.1,5
C 5.1,5.2 3.8,4 4.8,4.6 1.8,1.7 4.9,4.6
D 4.8,4.9 1.8,2.1 4,4.4 2.1,2.2 4.9,4.9
0.8
A 2.8,3.2 3,2.9 3.2,3.2 3.8,3.7 3.8,3.8
B 2.6,2.5 2.8,2.7 3.8,3.8 3.8,3.5 4.2,4.1
C 3.5,2.9 3.1,3.2 3.8,3.8 3.5,3.5 3.9,3.7
D 3.2,3.1 2.8,2.9 3.9,3.8 3.6,3.5 4,4.2
3.2
A 1,1.2 2.4,2.2 0.5,0.5 0.7,0.7 1.3,1.3
B 1.3,1.1 2.5,2.6 0.5,0.5 0.8,0.6 1.4,1.3
C 1.3,1.2 2.4,1.9 0.5,0.5 0.8,0.7 1.6,1.4
D 1.1,1.2 2.6,2.4 0.5,0.5 0.8,0.9 1.6,1.9
12.8
A 0.5,0.5 2.5,2.3 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
B 0.5,0.5 2.3,2.4 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
C 0.5,0.5 2.3,2.2 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
D 0.5,0.5 2.2,2.1 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
51.2
A 0.5,0.5 2.3,2.2 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
B 0.5,0.5 1.4,0.9 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
C 0.5,0.5 2.1,2.2 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
D 0.5,0.5 2.1,2.3 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
kac 编号 戊菌唑原药 戊菌唑-ZN 戊菌唑-CO 戊菌唑-CU 戊菌唑-NI
CK
A 1.4,1.3 2.2,2.6 3.6,3 1.6,1.4 2.4,2.4
B 3.3,3 2.3,2.3 2.5,2 2.6,2.1 3.2,2.8
C 3.1,3.1 2.2,2.1 2.6,2.5 2.1,2.3 2.5,2.4
D 3.3,2.5 2.1,2.4 2.1,1.8 2.8,2.5 2,1.7
0.2
A 2.1,1.7 0.5,0.5 2.6,2.5 2.3,2.4 2,1.7
B 2.2,2.3 1.7,1.8 2.7,1.9 2.3,2.3 1.8,1.7
C 2,2 1.9,1.8 1.7,1.3 1.6,1.2 1.8,1.6
D 2.2,2.1 0.7,0.8 2.2,2.3 1,0.8 1,1
0.8
A 1,1 0.9,0.8 1.4,1.2 1.6,1.5 1.4,1.3
B 0.9,0.8 0.9,0.8 1.6,1.2 1.6,1.5 0.8,0.7
C 0.9,0.7 0.8,0.6 1.2,1.1 1.5,1.5 1.1,0.8
D 1,1 1.4,1.3 1.5,1.2 1.5,1.4 0.9,0.9
3.2
A 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
B 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
C 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
D 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
12.8
A 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
B 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
C 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
D 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
51.2
A 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
B 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
C 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
D 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
表13 戊菌唑-KAC直径数据(单位:cm)
表14 戊唑醇-JXXF2直径数据(单位:cm)
JXXF2 编号 戊唑醇原药 戊唑醇-ZN 戊唑醇-CU 戊唑醇-CO 戊唑醇-Mn 戊唑醇-NI
CK A 5.6,5.7 5.7,5.7 5.4,5.3 5,5.1 5.5,5.1 4.6,4.3
B 4.7,5.2 4.9,4.9 5.1,4.6 4.8,4.7 4.5,4.9 5,5
0.2 A 1.8,1.7 1.7,1.8 1.3,1.4 2.1,1.8 1.8,2.1 1.9,1.8
B 2.3,2.2 2.5,2.2 2,1.7 1.7,1.6 2,2.1 1.9,1.8
0.8 A 1.5,1.3 1.5,1.2 1.6,1.4 1.7,1.7 2.1,1.8 1.7,1.7
B 2,1.8 1.8,1.8 1.7,1.5 2,1.8 1.9,1.6 1.9,1.7
3.2 A 1.3,1.1 1.5,1.5 1.8,1.4 1.4,1.2 1.7,1.3 1.2,1.2
B 1.4,1.5 1.5,1.2 1.1,0.8 1.4,1.3 1.8,1.4 1.5,1.3
12.8 A 0.6,0.7 0.8,0.6 0.8,0.7 0.8,0.9 1,0.9 1.1,0.8
B 1,1 1.2,1 1,1 1.4,1.2 2,1.9 1.1,1.1
51.2 A 0.7,0.7 0.8,0.6 0.8,0.7 0.8,0.9 1,0.9 1.1,0.8
B 1,0.6 0.9,1 1,0.9 1.2,1.1 1.2,1.1 1.2,1
表15 戊唑醇-B26直径数据(单位:cm)
B26 编号 戊唑醇原药 戊唑醇-ZN 戊唑醇-CU 戊唑醇-CO 戊唑醇-Mn 戊唑醇-NI
CK A 4.8,4.8 5,4.8 5.3,5.1 5.3,5.4 4,4.2 4.9,4
.9
B 3.6,4 4.7,4.5 4.8,4.9 4.3,4.9 4.7,4.4 3.9,4
0.2 A 2.8,2.7 1.9,1.7 2.2,2.1 2.8,2.6 2.6,2.2 2.3,2
B 2.6,2.4 2.7,2.3 2.7,2.7 2.5,2.2 2.4,2.2 2.5,1.8
0.8 A 1.8,1.7 2.4,2.3 2.3,2.1 2.1,2 1.7,1.8 2,1.8
B 1.7,1.5 1.8,1.8 2.4,2.2 2.6,2.4 1.9,1.5 1.9,2.1
3.2 A 1.9,1.5 1.5,1.7 1.6,1.5 1.4,1.4 1.5,1.5 1.2,1.3
B 2,1.6 1.2,1.3 1.4,1.5 1.7,1.6 1.7,1.6 1.7,1.3
12.8 A 0.8,0.8 1.1,1.2 0.8,0.9 0.8,0.6 1.6,1.3 1.2,1.3
B 0.6,0.7 1.0,0.8 0.9,0.9 1,0.9 1.5,1.7 1.5,1.3
51.2 A 0.6,0.7 0.9,0.8 0.7,0.6 0.7,0.5 0.6,0.6 0.6,0.7
B 0.6,0.7 0.8,0.8 0.7,0.7 0.5,0.7 0.7,0.8 0.7,0.6
表16 戊唑醇-灰霉直径数据(单位:cm)
灰霉 编号 戊唑醇原药 戊唑醇-ZN 戊唑醇-CU 戊唑醇-CO 戊唑醇-Mn 戊唑醇-NI
CK A 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9
B 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9
0.2 A 4.3,4.5 5.2,5.3 5.4,5.3 5.2,5.2 4.8,5 5.2,5.1
B 4.5,4.7 4.7,4.9 5,5 5.1,5.2 4.9,5 4.9,5.1
0.8 A 4.4,4.3 3.9,3.9 3.9,3.8 4,4 3.8,3.7 3.8,3.9
B 4.3,4.4 3.9,3.7 3.6,3.6 4,3.9 3.8,3.8 3.8,3.7
3.2 A 3.5,3.3 2.3,1.9 1.8,1.7 2.3,2.2 1.6,1.8 2.3,2.5
B 3.3,3.3 1.8,1.8 1.7,18 1.8,1.5 2.1,2 2.5,2.5
12.8 A 0.5,0.5 0.5,0.5 0.8,0.9 0.5,0.5 1,1 1.7,1.2
B 0.5,0.5 0.5,0.5 0.7,0.7 0.5,0.5 1.3,1 1.5,1.3
51.2 A 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
B 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
表17 戊唑醇-KAC直径数据(单位:cm)
KAC 编号 戊唑醇原药 戊唑醇-ZN 戊唑醇-CU 戊唑醇-CO 戊唑醇-Mn 戊唑醇-NI
CK A 4.2,4.9 5.2,5.3 4.8,4.6 4.5,4.7 4.8,4.8 5,4.8
B 4.7,4.4 4.4,4.6 4.3,4.5 4.3.4.1 3.8,4 4,4
0.2 A 3.1,3.2 2,1.9 1.2,1.2 1.7,1.9 1.1,1.1 1.2,1.2
B 2.9,3.3 1.9,2.1 1.1,1 1.7,1.7 1.2,1.2 1.2,1.2
0.8 A 1.6,1.6 1,1.2 0.9,0.8 0.9,0.8 0.7,0.8 1,0.9
B 1.8,1.7 0.9,1 0.9,1 1.3,1.3 1,1 0.8,0.8
3.2 A 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
B 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
12.8 A 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
B 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
51.2 A 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
B 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5 0.5,0.5
表18 腈菌唑-JXXF2直径数据(单位:cm)
JXXF2 编号 腈菌唑原药 腈菌唑-ZN 腈菌唑-CU 腈菌唑-CO 腈菌唑-Mn 腈菌唑-NI
CK A 5.6,5.7 5.7,5.7 5.4,5.3 5,5.1 5.5,5.1 4.6,4.3
B 4.7,5.2 4.9,4.9 5.1,4.6 4.8,4.7 4.5,4.9 5,5
0.2 A 2,2 2.5,2.4 1.9,1.8 1.8,1.7 1.7,1.6 1.8,1.8
B 1.8,2.1 2.1,2.3 2.1,1.8 1.8,1.8 1.9,1.8 1.8,1.9
0.8 A 1.6,1.8 2,1.8 2,1.9 2,2.1 1.9,1.8 1.8,1.9
B 1.5,1.7 2,1.7 1.7,1.5 2,1.8 1.9,2.2 1.7,1.8
3.2 A 1.2,1.3 1.6,1.4 1.4,1.4 1.5,1.5 1.5,1.6 1.7,1.7
B 1.8,1.2 1.8,1.6 1.7,1.3 1.6,1.4 1.7,1.6 2.2,1.6
12.8 A 1.3,1.2 1.3,0.8 1.3,1 0.9,1.1 1.6,1.5 1.6,1
B 1.2,1.2 1.6,1.8 1.3,1.1 1.2,1.5 1.3,1.4 1.3,1.3
51.2 A 0.9,0.9 0.6,0.7 0.7,0.7 0.7,0.8 0.6,0.7 0.6,0.7
B 0.8,0.9 0.8,0.9 0.7,0.8 1.2,1.1 0.9,0.7 0.8,0.6
表19 腈菌唑-B26直径数据(单位:cm)
B26 编号 腈菌唑原药 腈菌唑-ZN 腈菌唑-CU 腈菌唑-CO 腈菌唑-Mn 腈菌唑-NI
CK A 4.8,4.8 5,4.8 5.3,5.1 5.3,5.4 4,4.2 4.9,4.9
B 3.6,4 4.7,4.5 4.8,4.9 4.3,4.9 4.7,4.4 3.9,4
0.2 A 2.5,2.4 2.6,2.7 2.3,2.1 1.7,1.5 2,1.7 2.7,2.3
B 2.8,2.7 2.8,2.9 2.2,2.1 1.8,1.9 1.7,1.5 2.6,2.6
0.8 A 1.4,1.5 1.8,1.7 2,1.6 1.7,2 2.1,1.7 1.8,1.5
B 1.7,1.5 1.7,1.5 1.8,1.6 2,2 2,1.6 2,1.8
3.2 A 1.6,1.4 1.5,1.5 1.5,1.4 1.7,1.7 1.7,1.7 1.8,1.5
B 1.6,1.5 1.5,1.3 1.5,1.3 1.7,1.8 2.3,1.7 2,1.4
12.8 A 1.7,1.5 1.5,1.3 1.1,1 1.3,1.2 1.4,1.4 1.1,1.2
B 1.5,1.5 1.1,1.1 1.2,1.2 1.1,1 1.6,1.3 1,1
51.2 A 1,0.8 0.8,0.9 0.8,0.8 1.2,1.2 0.8,1.1 0.7,0.7
B 0.9,0.8 0.8,0.8 0.8,0.7 1.1,1 0.9,1 0.7,0.7
灰霉 编号 腈菌唑原药 腈菌唑-Zn 腈菌唑-Cu 腈菌唑-Co 腈菌唑-Mn 腈菌唑-Ni
CK A 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9
B 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9
0.2 A 5.9,5.9 5.9,5.8 5.9,5.9 5.9,5.9 5.8,5.8 5.9,5.7
B 5.9,5.9 5.9,5.8 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.5 5.9,5.9
0.8 A 5.6,5.8 5.6,5.6 5.7,5.6 5.7,5.5 5.5,5.7 5.6,5.6
B 5.9,5.9 5.8,5.8 5.8,5.7 5.7,5.7 5.8,5.8 5.9,5.7
3.2 A 4.9,4.8 4.9,5 5.3,4.9 5,5 4.8,4.8 5.1,5.2
B 4.8,5 5,5 5.2,5 5,4.9 4.9,4.7 5.1,5.2
12.8 A 3.2,3.2 3.7,3.7 3.2,3.3 3.2,3.1 4.2,4.2 3.2,3.3
B 3.2,3.2 3.6,3.9 3.3,3.1 3,3 4,4.1 3.1,3.1
51.2 A 0.7,0.7 1.4,1.2 1,0.8 2,1.7 1.6,1.5 1,0.8
B 1.2,0.9 1.3,1.4 0.6,0.7 1.2,1 1.7,1.6 1.4,1.5
表20 腈菌唑-灰霉直径数据(单位:cm)
表21 腈菌唑-KAC直径数据(单位:cm)
KAC 编号 腈菌唑原药 腈菌唑-Zn 腈菌唑-Cu 腈菌唑-Co 腈菌唑-Mn 腈菌唑-Ni
CK A 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9
B 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.9
0.2 A 5.9,5.9 5.9,5.8 5.9,5.9 5.9,5.9 5.8,5.8 5.9,5.7
B 5.9,5.9 5.9,5.8 5.9,5.9 5.9,5.9 5.9,5.5 5.9,5.9
0.8 A 5.6,5.8 5.6,5.6 5.7,5.6 5.7,5.5 5.5,5.7 5.6,5.6
B 5.9,5.9 5.8,5.8 5.8,5.7 5.7,5.7 5.8,5.8 5.9,5.7
3.2 A 4.9,4.8 4.9,5 5.3,4.9 5,5 4.8,4.8 5.1,5.2
B 4.8,5 5,5 5.2,5 5,4.9 4.9,4.7 5.1,5.2
12.8 A 3.2,3.2 3.7,3.7 3.2,3.3 3.2,3.1 4.2,4.2 3.2,3.3
B 3.2,3.2 3.6,3.9 3.3,3.1 3,3 4,4.1 3.1,3.1
51.2 A 0.7,0.7 1.4,1.2 1,0.8 2,1.7 1.6,1.5 1,0.8
B 1.2,0.9 1.3,1.4 0.6,0.7 1.2,1 1.7,1.6 1.4,1.5
表22 （盆载）三唑酮-灰霉直径数据(单位:cm)
灰霉 编号 三唑酮原药 三唑酮-Zn 三唑酮-Cu（乙醇） 三唑酮-Cu（甲苯）
200ppm A 4,3.5 1.4,1.3 2,2 2,2
B 1.5,1.5 2.2,2.7 2,2.1
C 2.1,2.5 0,0 1.8,2.1
100ppm A 1.2,1.7 3.5,4 2.7,2.6
B 1,1 1.2,1.1 2,2.5 2.5,3
C 2.2,1.8 2,1.3 2.9,1.8 4,2.6
50ppm A 2.5,3 1.5,2 2.6,3.4 2.1,2.7
B 3.5,4 3.5,3 2.7,3
C 3,2.2 1,1 2.3,2.5
（*注：空白格处为枯死或结果失真叶片，数据不可用）
表23 （盆载）戊菌唑-灰霉直径数据(单位:cm)
灰霉 编号 戊菌唑原药 戊菌唑-Zn 戊菌唑-Co 戊菌唑-Cu 戊菌唑-Ni
200ppm A 1.3,1.4 2.3,2 1.8,2.5 1,1.5
B 3.8,3.2 2.8,2.5 1.5,1.7
C 1.7,1.9 1.8,2 2.2,1.6 1.3,1.2
100ppm A 2,1.8 2.5,2.4 2.5,1.8 1.8,2.6
B 3,2 2.5,2.1 1.5,2 2,3
C 1.5,1.8 3,2.2 2,3 2.4,2.3
50ppm A 2.5,3 2.5,1.7 3.5,4 1.8,2.8 2.7,2.8
B 2.8,2.8 2.5,3 2.3,2.5 4.2,3.2 4,2.9
C 2.2,3 1.4,2 2.9,2.4 1.7,2
CK 5,5 3,4 3.8,4.7 1.2,1.3 3.5,3.2
4.5,3.2 3.7,2.9
（*注：空白格处为枯死或结果失真叶片，数据不可用。以上CK为附表22，23共用）
