目的:分析最新近红外荧光标记(NIRF)电泳迁移率变动分析(EMSA)技术的优缺点,在此基础上对NIRFEMSA技术进行实验方法的改进.方法:设计了3种NIRF-EMSA实验方法,即扫胶法、染胶法和扫膜法,通过实验比较了3种方法的实验程序复杂性、优缺点及检测 ...
⒊溶液的离子强度 电泳液中的离子浓度增加时会引起质点迁移率的降低。 其原因是带电质点吸引相反符合的离子聚集其周围,形成一个与运动质点符合相反的离子氛( ionic atmosphere ),离子氛不仅降低质点的带电量,同时增加质点前移的阻力,甚至使其不能泳动。
电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的电泳迁移率。在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶),电导率最小,DNA几乎不移动,在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液),则电导很高并明显产热,严重时会引起凝胶熔化 …
电泳迁移率变更分析(EMSA)操作步骤. 1.细胞核蛋白提取:取约8.8×106个HSC-T6细胞,5ml PBS/Phosphatase Inhobitors冲洗,收集细胞。. 加入0.25 ml 1×Hypotonic buffer重悬,冰浴15min;加入25μl …
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 其基本原理是蛋白质可以与末端 ...
影响泳动度的主要因素有:. 1、首先决定于带颗粒的性质,即颗粒所带净电荷的数量,大小及形状. 一般说来,颗粒带净电荷多,直径小而接近于球形,则在电场中泳动速度快,反之则慢。. 泳动度还与分子的形状,介质粘度,颗粒所带电荷有关,泳动度与颗表面 ...
琼脂糖凝胶厚度对DNA电泳的影响. 孙岩 李武修 唐胜建. 【摘要】: 目的研究不同厚度的琼脂糖凝胶对电泳的影响。. 方法用扩增得到的产物进行不同厚度的琼脂糖凝胶电泳,溴化已锭染色成像并求出进行相对迁移率等相关分析。. 结果迁移距离5-7 mm厚度凝胶时最大 ...
A:在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。. 在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间 ...
目的:分析最新近红外荧光标记(NIRF)电泳迁移率变动分析(EMSA)技术的优缺点,在此基础上对NIRFEMSA技术进行实验方法的改进.方法:设计了3种NIRF-EMSA实验方法,即扫胶法、染胶法和扫膜法,通过实验比较了3种方法的实验程序复杂性、优缺点及检测 ...
⒊溶液的离子强度 电泳液中的离子浓度增加时会引起质点迁移率的降低。 其原因是带电质点吸引相反符合的离子聚集其周围,形成一个与运动质点符合相反的离子氛( ionic atmosphere ),离子氛不仅降低质点的带电量,同时增加质点前移的阻力,甚至使其不能泳动。
电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的电泳迁移率。在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶),电导率最小,DNA几乎不移动,在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液),则电导很高并明显产热,严重时会引起凝胶熔化 …
电泳迁移率变更分析(EMSA)操作步骤. 1.细胞核蛋白提取:取约8.8×106个HSC-T6细胞,5ml PBS/Phosphatase Inhobitors冲洗,收集细胞。. 加入0.25 ml 1×Hypotonic buffer重悬,冰浴15min;加入25μl …
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 其基本原理是蛋白质可以与末端 ...
影响泳动度的主要因素有:. 1、首先决定于带颗粒的性质,即颗粒所带净电荷的数量,大小及形状. 一般说来,颗粒带净电荷多,直径小而接近于球形,则在电场中泳动速度快,反之则慢。. 泳动度还与分子的形状,介质粘度,颗粒所带电荷有关,泳动度与颗表面 ...
琼脂糖凝胶厚度对DNA电泳的影响. 孙岩 李武修 唐胜建. 【摘要】: 目的研究不同厚度的琼脂糖凝胶对电泳的影响。. 方法用扩增得到的产物进行不同厚度的琼脂糖凝胶电泳,溴化已锭染色成像并求出进行相对迁移率等相关分析。. 结果迁移距离5-7 mm厚度凝胶时最大 ...
A:在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。. 在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间 ...