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想问下，你如何查文献啊，谢谢了。 董博士 western 上样用的是全细胞裂解提取的细胞总蛋白，所以蛋白成分是很复杂的，显影的时候是根据自己的需要，参考蛋白marker，剪出自己感兴趣的蛋白对应大小的膜，孵育相应的特异性抗体得到的。
我做的是肾组织蛋白，上样量试过36ug~96ug,用B-actin做内参，刚开始是目的蛋白出，内参不出，现在内参终于出来了，但是表达的很低，还没有我的目的蛋白表达量高，这个不正常吧，为什么呢？还有就是我测的总蛋白浓度大概在15ug/ul~30ug/
蛋白质类 蛋白质/抗原/多肽 蛋白检测 蛋白分析 蛋白纯化 蛋白修饰 标准品/对照品 酶 核酸类 核酸/蛋白合成 核酸分析 核酸检测 核酸纯化 DNA/RNA cDNA及合成纯化 RNAi技术 PCR/RT-PCR 分子类 文库及构建 克隆与表达 表达分析 细胞生物学检测 免疫检测
相关专题 内参即是内部参照，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测基因的表达水平变化时常用它来做参照物。其作用是校正上样量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的结果才更为可信。
比如目的蛋白分子量为 45KD，此时不适宜选择 β -actin 作为内参，可以考虑选择 GAPDH 或者 β -tubulin 作为内参。 三.目的蛋白表达部位： 就一般的蛋白检测来说，β -actin、β -Tubulin 抗体等就可以了，而针对于核 蛋白的定量， 特别是样本蛋白就是核蛋白时，选择恰当的核蛋白内参则更能体现 内部参 …
内参是western blot法非常重要而必须的部分。它保证了目的蛋白表达量的相对多少。内参是指由细胞中管家基因编码的蛋白，其在各组织细胞中的表达相对稳定，因此在测定目的蛋白的相对水平时常用它做对照物。 一、内…
新时代下对于Western Blotting发表文章的新要求（一）. 深蓝云. 2020.09.01 23:54:58 字数 1,217 阅读 567. Western Blotting技术已经问世四十多年了，依然是蛋白分析中最常用和主流的方法。. 但近些年Western Blotting数据重现性，稳定性，定量准确性等问题，也使这项技术被推到 ...
综上所述，内参抗体在线性范围内才能够很好的反应蛋白上样量，因此上样量无论对于内参还是目标蛋白均很重要。. Stain-free总蛋白定量方法由于其准确性与便捷性，可作为我们WB内参定量的金标准！. 希望今天的分享对大家有所帮助，谢谢大家！. 参考文献：. 1 ...
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