石斑鱼养殖论文参考文献

你可以去青年绿色在线社区看看， 此网站每年都会在该网站选出一个代表，参加一年已度的联合国世界环保大会，并且在该网站长期有专家指导和讨论，只要你有环保意识，有自己的想法，就可以参加。 同时你也可以在上面查询有关资料及其论文，以及环保产品。

古往今来，地球妈妈用甘甜的乳汁哺育了无数代子孙。原来的她被小辈们装饰得楚楚动人。可是，现在人类为了自身的利益，将她折磨得天昏地暗。人类只有一个地球；而地球正面临着严峻的环境危机。“救救地球”已成为世界各国人民最强烈的呼声。 我为周围环境的恶化而感到心痛，我想：作为未来接班人的青少年，如果不了解人类环境的构成和环境问题的严重性，无视有关环境保护的法律法规，不去增强环境保护意识，自觉履行保护环境的义务的话，我们的生命将毁在自己的手中，老天将对我们作出严厉的惩罚。为此我下定决心要从我做起爱护环境，保护我们这个赖以生存的家园，做一个保护环境的卫士。 在刚过去的一年中，我积极参加学校开展的植树活动，带领我们初一(6)中队的班干部创立了“绿色天使”植绿护绿小组，鼓励队员们在校园里认养了一棵小树苗，利用课余时间给它梳妆打扮，为它长成参天大树打下了基础。在学校组织的“让地球充满生机”的签字活动中，我郑重地在上面签下自己的名字，并写下了自己对环保的决心和期望，对美好未来的憧憬。我积极参加学校在世界环境日举行的有奖征稿，认真查阅、收集各类资料，进行社会调查，撰写有关环境治理设想方面的文章，我经常去参加学校组织的环保讲座，观看环保方面的录相带，积极参预环保知识问答调查活动，认真填写每一项提问。我参与了“红领巾植绿护绿队”的网站建设，在上面发布大量的环保图片和环保知识，以及关于环保的各方面的法律知识，我国在环保方面发展动向、世界各国的环境保护情况；每个月我都利用网络、报纸，查找一些最新的不同的专题和板块“环保资讯”来告诉大家；还定期制作一些宣传板来宣传环保知识和生活中的环保常识。提高了大家的环保意识；号召同学们从不同的方面来关爱自己的家园，从身边的小事做起，为周围的环境奉献自己的一份力量!我积极动员身边的人一起来依法保护和建设人类共有的同样也是仅有的家园，为促进经济和社会的可持续发展，为人类的文明做出贡献。我还和同学们共同发起“养一盆花，认养一棵树、爱惜每一片绿地，让我们周围充满绿色”和“小用塑料袋不使用泡沫饭盒和一次性筷子，让我们远离白色污染”的倡议。让我们放下方便袋，拿起菜篮子，让我们共同走向美好的绿色的明天，走向辉煌、灿烂的未来! 据我收集到的一份报告说：“环境问题是由于人类不合理地开发和利用自然源所造成的。触目惊心的环境问题主要有大气污染、水质污染、噪声污染、食品污染、不适当开发利用自然资源这五大类。”一个个铁一样的事实告诉我们，它们像恶魔般无情地吞噬着人类的生命。它威胁着生态平衡，危害着人体健康，制约着经济和社会的可持续发展，它让人类陷入了困境。为此我作出宣告：“只要我们——人类有时刻不忘保护环境的意识，有依法治理环境的意识，地球村将成为美好的乐园”。未来的天空一定是碧蓝的，水是清澈的，绿树成荫鲜花遍地，人类可以尽情享受大自然赋予我们的幸福。 “真正检验我们对环境的贡献不是言辞，而是行动。”虽然我现在做得只不过是一些微小的事，但是我坚信要是我们人人都有保护环境的责任心，从自己做起，从小事做起，携手保护我们的家园，自然会给人类应有的回报。在温暖的摇篮——草原上小憩；在慈祥的笑脸——天空下成长，在爱的源泉——河流中沐浴 黄色星期天 天贤粱粕��厣贤粱粕�V灰�缫淮担�嗣俏薮Χ恪U饩褪巧吵颈�?nbsp; 就在4月7日也就是星期天的早晨，一拉开窗帘不禁让我大吃一惊。我看到外面的天空已不在像以前那样蔚蓝，阳光已不在像以前那样明媚。远处的那些高楼大厦像海市蜃楼一样隐隐约约。在沙尘暴的影响下，楼内的人都点着灯为自己照明。天和地的界限已不那么清晰，而是浑黄一体。大街上的人们都全副武装，包着头巾捂着嘴。生怕沙土进到自己的呼吸道里。一走出家门，一股沙土的气味扑面而来，一阵风吹过，脸上就会感到大大小小的沙粒打在你的脸上，顿时我那干净的脸像涂上了一层土黄色的釉彩，把我的脸打扮成了土著人的脸色。我低头一看，大地也穿上了一层土黄色的衣裳。过了一会，又下起雪来。许多人都高兴起来，他们认为雪花是洁白美丽的。但他们错了，今天的雪花像炸弹一样，落在人们的身上，炸出了一朵朵“黄花”。弄得人们狼狈不堪。我也被“炸”的像小泥猴似的。 今天的情景，使人们再一次看到了破坏环境所带来的恶果。在一次次灾难的提醒下，人们已经认识到遵循自然规律，爱护我们的生存环境已刻不容缓。我相信，随着科学技术的不断进步，经过全人类不断努力，植树造林，保护环境，保持生态平衡，灾难的发生频率会逐渐减少。地球那副美丽的面孔又会重新出现在我们的眼前！ 人类，只有一个地球 我热爱地球，热爱我们赖以生存的家园。爱她的青山绿水，爱她的碧草蓝天…… 在四野飘香的花丛中，我和蝶儿一起嬉戏、欢笑；在郁郁葱葱的森林里，我与小鸟一起追逐、歌唱；清晨，我迈着轻盈的步履去原野上踏青，雾霭缭绕着、白纱般的柔柔地漂浮在空中。吮吸着花草的芳香， 欣享着阳光的沐浴，我被陶醉在这如痴如醉的梦幻里；夜晚，我坐在稻谷飘香的农家小院里，仰望着璀璨的星空，聆听着蝉鸣嘹响，蛙声如潮，仿佛置身于一个童话般的王国。春天，我坐在牛背上，在一望无际的大草原上，听那牧歌婉转，牧笛悠扬。 夏天，我坐在小船上，任双桨拍打着那碧绿的湖水， 看海鸥轻盈地掠过辽阔的湖面；秋天，我站在树下，凝神瞩望着那金黄的叶子一片片地落下；冬天，我站在窗前，欣赏着如絮的雪花在空中翩翩飞舞。在这如诗如画的仙境里，我的心都醉透了! 曾几何时，人们乱砍乱伐，使大自然的生态平衡遭到了破坏。沙丘吞噬了万顷良田，洪水冲毁了可爱的家园，大自然的报复让人类尴尬哑然。梅水溪曾经说过，没有自然，便没有人 类，这是世界一大朴素的真理。一味地掠夺自然，征服自然，只会破坏生态系统，咎由自取，使人类濒于困境。这句话说得一点也不错，人不给自然留面子，自然当然也不会给人留后路，98洪水、2000年的沙尘暴，其实，这就是大自然向人类发出的警示。 曾几何时，人们乱捕乱杀，使人类的朋友惨遭涂炭。"千山鸟飞绝，万径人踪灭"，这就是对捕杀动物后果的最真实的写照。从大学生的伤熊事件到愚人们的疯狂捕猎，人类是否也将要把枪口对准自己？切记，保护动物就等于保护我们自己。 曾几何时，战争的爆发，使我们赖以生存的星球满目疮痍。炮火对植被的破坏，核辐射对生命的摧残，尽管广岛、长崎上空的蘑菇云已经散去了半个多世纪，可那里依然还是不毛之地。由此可见，和平是全人类绿色环保的重要前提。 真不敢想象，我们如果再这样继续下去，这个世界将会是一幅怎样的惨景呢？地上寸草不生，天空尘沙弥漫，人类将在魔鬼般的尖叫声中化成堆堆白骨。到那时我们只能说，人类曾经属于过地球，但地球将永远不会再属于人类了。 顾炎武曾经说过，天下兴亡，匹夫有责。保护环境与维护生态平衡的历史重任要落到我们跨世纪一代的肩上。让我们都来关爱自然，热爱地球吧，手挽手、肩并肩、心连心地铸起一道绿色环保的大堤，捍卫资源、捍卫环境、捍卫地球、捍卫我们美好的家园吧！ 岐江情 岐江河--我的母亲河，由北而南，蜿蜒流淌。我在她怀里成长。她孕育了我童年的欢乐。我的金色的童年的欢乐时光，都和岐江河一起度过的。 记得我只有豆丁般大的时候，数不清的早晨，看着那朝晖在河上跳跃，把那清澈的河水映得通红，像是给岐江河披上了红纱巾，周围郁郁葱葱的榕树也穿上了朝阳的锦衣。三五成群的男女老少，沿河漫步，尽情呼吸清新的空气，欣赏小鸟清风奏出的晨曲。 每逢端午节的时候，精彩绝伦的龙舟赛便在江上举行。人们接踵而至，争先恐后地聚集到江边看热闹，一条条龙舟整齐地排开在江面，船上的每一个有着古铜色肌肤的大汉都使出浑身的力量。每一声礼炮后，龙舟齐头并进，掀起一江浪涛。江边的人们有的急得直跺脚，有的高声喝彩，有的像长颈鹿一样把脖子伸得老长……江里的龙舟在一片锣鼓声中耕波犁浪，勇往直前…… 我童年的幸福，都沉浸在岐江河那清澈的碧波里。只要清风一吹，一切美好的回忆都从荡漾的碧波里旋出来了。如今当我独自一人去问候岐江河时，它已面目全非了：污浊的河水夹杂着许多垃圾在晃动，偶尔还有一两条死鱼浮上来，散发出醺心的腐臭。绿色，没有了，鸟声，听不见了。河边堆积了大堆垃圾，往日清新芬芳的和风也变得腥臭苦涩了。我伤心地向岐江河呼喊："你昔日的丰姿到哪去了？"可它只用波浪拍打着河岸，像垂危的病人，呻吟着，伤心地向人们哭诉："清救救我吧！" 也许是因为它过去的美，也许是因为它现在的丑，也许是时代的要求吧，岐江河发出的求救终天得到了回应。市政府十分重视岐江河的整治，组织人力物力拆掉岐江河两岸参差不齐的破旧建筑，在河岸上植起了绿树红花，禁止人们往江上倒垃圾，禁止往江里排放污水，岐江河开始恢复了生机，重现了昔日美丽的倩影。我想：假以时日，岐江河--我的母亲河，她将比以前更爱护我们的家园 我们生命的摇篮是地球母亲。地球母亲的身上有高山、大海，有高原、平原。最可贵的是它有生命，我们人类就生活在地球上,我们就是地球的主人. 地球是所有生物共有的家园,是我们赖以生存的环境,地球母亲可以供给我们吃的、穿的、用的、玩的,地球母亲用它甘美的乳汁哺育着它的儿女,我们在地球母亲温暖的怀抱里幸福地成长。我们为什么能幸福地生活在地球上呢？因为地球母亲可以供给我们充足的氧气,可以供给我们充足的水分,充足的食品......她是一位关心儿女,爱护儿女的好母亲。 然而我们人类是怎样对待地球母亲的呢？我们人类为了自己的生存，或者说为了自己生活的更好，就不顾地球母亲的身体，工厂乱排放污水，烟囱冒着浓浓黑烟，乱砍伐森林树木，乱浪费资源等等。破坏了地球周围的大氧层，清澈的河水变得混浊，茂密的森林变得狼狈不堪，蔚蓝的天空变得灰暗，碧绿的青山变得光秃，泥石流、森林火灾、动物绝迹、水源严重缺乏，一连串的灾害接踵而来，已使我们的地球母亲难以承受。而我们面临的确是地球毁灭的现实。啊！实在太可怕了，到那时我们不知道该怎么办，我们将如何生存？ 我们已经看到了严重的后果，我们能任其毁灭吗？不能！我们人类应该积极行动起来，为我们的地球做一些力所能及的好事，现在我们已经开始保护我们的环境，爱护我们的地球了，比如，我们建起了水力、风力发电站，开始保护野生动物，保护森林，保护水源，节约用水，开始绿化、美化我们的地球了，这是可喜的，这样可以延长我们地球母亲的寿命，使她越来越年轻，身体越来越壮。在地球毁灭的前一夜，我们应该做什么呢？我们要来保护、爱护地球，要来绿化、美化地球，使我们的地球母亲永远年轻。 我再来问个问题小朋友，地球到底会不会毁灭呢？这就要看我们怎掩盖胡她了，如果我们像爱护自己的眼睛一样爱护她的话，相信她会永远年轻的。 还我青山绿水 我是赫赫有名的晋江。我把自己全部的心血都倾注在几十万子孙后代的身上。如今，我的工业越来越发达，儿孙们的生活也越来越红火，可我却今非昔比，千疮百孔，丑陋不堪，再也找不到几处净空、净土、净水了。 我在思索，在寻找，发现原来是因为许多富起来的儿孙不能善待我。你看：如林而立的烟囱口上呛人的浓烟滚滚升腾，笼罩住我的头；穿梭不息的车辆喷出的废气，无时无刻地向我扑来，熏得我的脸发黑；儿孙们的生活垃圾，工厂排出的废液，大部分渗入我的肌肤，流进我的血液，侵害我的躯体…… 无奈中的我日复一日，年复一年地发出呻吟。有一天，一群快乐的红领巾唱着歌，扛着农具和树苗，来到我的身边。我认识他们--那些伤害我的人的后代。我有点儿害怕：他们要干什么？我正在忧虑着，那群红领巾已经开始行动--植树！我欣喜若狂，深情地注视着他们：挖坑、培土、提水、浇水……他们干得可积极啦！挖坑的肩上搭着一条湿毛巾，铲子紧握手中，用劲往土里一插，再使把劲儿用脚一蹬，往后一仰，舀汤似地将土挖起来，往身后一”泼”，土落了下来。反复几次后，一个坑就挖好了。放树苗的小心翼翼地将树苗放入坑内，扶正，让挖坑的培上土，再让提水的浇上水。只见他们个个脸上挂着汗珠，欣慰地笑了。多乖的孩子呀！霎时间，委屈、痛苦化为乌有。我忙托风婆婆为他们拂去脸上的汗珠。他们帮我做新衣裳，我能不高兴吗？他们还在我这儿撒下了花的种子，不久的我将穿上一件五彩缤纷的花裙子！我能不激动吗？ 你不知道吧？这群红领巾还帮我清理了垃圾，从树上取下了一个个塑料袋，并告诫人们少用“白色污染”。在红领巾的带动下，那些缺德的公民也渐渐地正直起来了。以前垃圾箱旁蚊蝇乱飞的情景消失了，街道两旁的树灰尘不见了。我的生活亮丽斑澜了！ 我陶醉了：满山苍翠，一水碧波，芳草茵茵，鸟语花香……这才是原来的我呀！感谢孩子们还我青山绿水，还我多姿风采，我将赐予子孙们无尽的宝藏和永恒的幸福…… 共筑校园和谐的蓝天(演讲稿) 和谐，多么美好的一个词语，多么美好的意境。请让我们一起来感受一下和谐吧:春风是和谐的，她使坚冰融化，万物复苏，把人们带到美好的季节；春雨是和谐的，她“随风潜入夜，润物细无声”。古往今来，和谐思想绵绵不绝。从孔子提倡的“礼之用，和为贵”“和而不同”，到到孟子“天时不如地利，地利不如人和”的论断；从洪秀全提出的“有田同耕，有饭同食，有衣同穿，有钱同使”的理想方案，到康有为描绘的“人人相亲，人人平等，天下为公”的社会状态，从孙中山“大同世界”的理想，到毛泽东“环球同此凉热”的追求，悠悠中华几千年，历代思想家、政治家，无不推崇团结互助的理念，和谐社会始终是人们最崇高的理想。 和谐就是融洽和睦、协调发展。和谐社会应该是团结友爱、互帮互助的社会。但现实生活中，由于许多同学、思想觉悟、价值观念、利益追求、兴趣爱好的差别，有些人的行为方式不利于团结互助，甚至一些损人利己现象也时有发生；还有的同学喜欢搞小自由主义，当面不说，背后乱说，班级不说，校外乱议论，导致同学与同学之间互相猜疑，引起同学之间不和睦；甚至有的同学把社会上一些：惟利是图，损人利己，爱占便宜；甚至于尔虞我诈、坑蒙拐的行为，也或多或少的带到了校园，这样不仅可耻，简直可以说是道德的囚犯。胡总书记把“以团结互助为荣、以损人利己为耻”作为社会主义荣辱观的重要内容提出来，丰富了社会主义道德建设的内容，同时也丰富了我们的校园文化，我们中学生在这个富有感召力的今天，我们应该做的是；同学之间要和谐，要团结友爱互助；校园要和谐，构筑一个团结友爱、文明向上的和谐校园。 历史经验一再告诉我们：有没有团结互助的道德风尚，是判断一个群体是否健康、一个社会是否和谐的重要标志之一。继承中华民族优良的传统文化，很重要的一个方面，就是弘扬团结友爱、互帮互助的美德。 是啊！我国素以“礼仪之邦”著称于世，讲“仁爱”、行“友善”、重“人和”的传统美德。我们新一代的中学生应该传承这些传统美德、今天要为构建一个和谐的校园努力，明天我们要为构建一个和谐的社会而付出，这是历史付与给我们的重任！这是时代付与给我们的使命！ 环保,从身边小事做起... 最近，北京一群中学生给朱镕基总理写了一封提倡环境保护的信，引起了总理的高度重视。朱总理在同学来信上批示说，初二学生如此关心环保，实令我等长辈惭愧。……扪心自问，我们每一位又何尝不应该对此深刻反省呢？ 环境保护对我们来说并不是一个新问题，我国政府也早就提出了明确的治理目标。作为现实生活中的每一个普通人，虽然不可能都直接从事环保工作，但我们完全可以从小事做起，从我做起。当看到洗手间的水龙头在滴水时，是不是能够举手关上呢？当电池用完后能否分类收藏处理而不是随手扔掉呢？当购物时能否自觉不使用超薄塑料袋呢？……一件件小事虽然都很不起眼，但却体现我们究竟具备了多少环保意识。 笔者知道有一位老太太，她每次上街买菜都要自带一个小布袋，每次上餐馆吃饭都要自带一个小钢勺。看起来很平常，但能够像这位老同志那样，长年自觉坚持不使用白色塑料袋，不使用一次性筷子，确实不容易。这不但要有坚定的环保信念，还需要有良好的习惯。无可置疑，环境意识与人们的受教育程度密切相关，在大学校园里我们最容易找到环境保护的支持者。但是，我们同样也能够经常在大学的食堂垃圾桶里发现大量的剩饭剩菜。笔者还听说有这么一位大学生，他热心环保事业，曾积极奔赴云南边陲保护金丝猴，但他却可以数次忘了关掉水房里哗哗流的水龙头。这提醒我们，全面的环境保护和全民族环保意识的普及与提高，决非轻而易举；环境保护不仅仅包括动物、森林的保护、防止大气和水的污染这样一些“大事”，也包括我们周围生活中无处不在的各种小事。 人类对环境的保护，归根结底是基于保护地球上日益枯竭的资源，保护我们生存发展的最起码条件。当工业文明进入20世纪后，它对环境的破坏日趋严重，对资源的使用走向了滥用，这引起了人们越来越高度的警惕。各国政府为了保护环境，采取了许多措施，环境保护也取得了长足的进展，并且成为人类社会的共识。今天，提起环境保护，几乎没有什么人会公开反对，但是真正做到自觉长久地保护环境，保护资源，还有许多工作在等待着我们去做。我认为首要的就是要在全民族树立起环保意识，具体地说就是树立资源意识，生存意识。要让大家都认识到，保护环境与资源和我们每个人息息相关，保护环境不仅是关乎子孙后代的千秋大业，而且已经直接关系到人类社会今天的生存！不能抱着环保多我一人少我一人差别不大的思想，也不能对保护环境有任何松懈和怕麻烦的思想。政府部门对环境保护固然负有重要的责任，而每个单位，每个企业，每个人对此更是承担了更为直接、更为具体的责任。只要我们从自己做起，从小事做起，大家共同努力，持之以恒，就一定能为社会、也为自己留下一片碧水蓝天。在这一点上，北京的中学生们已经为我们提出了不少好的建议，难道我们还有什么需要犹豫的吗？

最出名的还是游本昌，出演济公，把济公演活了。

PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。下面是我整理的关于pcr技术论文，希望你能从中得到感悟!

技术的研究进展

摘要 PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。因其高强的特异性和灵敏度以及检测速度快、准确性好等优点，已被广泛地应用于水产、微生物检测等许多领域。该文从PCR技术的原理及应用方面进行了综述，并对其发展做出了展望。

关键词 PCR技术;研究进展;应用

中图分类号 Q819 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2012)10-0047-02

PCR(polymerase chain reaction，PCR)即聚合酶链式反应，它是一种体外酶促合成，扩增特定DNA片段的方法。1985年，美国Karray等学者首创了PCR技术，并由美国Cetus公司开发研制[1]。随着科学技术的发展和突破，PCR技术已在多个领域得到广泛地应用，如微生物检测、兽医学、水产养殖等方面。由于该技术具有较强的灵敏度、准确度和特异性，又能快速进行检测，因而其应用领域也在不断延伸[2-3]。随着PCR技术的不断发展，在常规PCR技术的基础上又衍生出了许多技术，如多重PCR(mutiplex PCR)技术[4]、实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR，FQ-PCR)技术[5]、单分子PCR技术[6]。

1 PCR技术原理

PCR技术是根据待扩增的已知DNA片段序列、人工合成与该DNA 2条链末端互补的2段寡核苷酸引物，在体外将待检DNA序列(模板)在酶促作用下进行扩增。PCR的整个技术过程经若干个循环组成，一个循环包括连续的3个步骤：第1步是高温条件下的DNA模板变性，即模板DNA在93~94 ℃的条件下变性解链;第2步是退火，即人工合成的2个寡核苷酸引物与模板DNA链3’端经降温至55 ℃退火;第3步是延伸，即在4种dNTP底物同时存在的情况下，借助TaqDNA聚合酶的作用，引物链将沿着5’-3’方向延伸与模板互补的新链[7]。经过这个循环后，合成了新链，可将其作为DNA模板继续反应，由此循环进行。循环进程中，扩增产物的量以指数级方式增加，一般单一拷贝的基因循环25~30次，DNA可扩增l00万~200万倍[1]。PCR反应的步骤很简单，但是具体的操作是复杂的，如退火温度的确定、延伸时间的长短以及循环数等。因此，不同的反应体系应该确定适当的反应条件，以避免假阴性或假阳性等情况的产生。

2 PCR技术的分类

在传统PCR技术的基础上，根据人们的需要以及各个领域的应用要求，又衍生出很多种类的PCR技术。新技术在各领域广泛应用并逐渐改进，为进一步的研究提供了基础。

2.1 实时荧光定量PCR技术

1996年，学者经过研究，在传统PCR技术的基础上，首创了实时荧光定量PCR技术，新技术已经应用至医学领域、分子生物学和其他基础研究领域。实时荧光定量PCR技术基于传统技术的优势，还具有实时性、准确性、无污染，实现了自动化操作和多重反应，是PCR技术研究史上从定性到定量的飞跃[8]。

荧光定量PCR技术最大的特点是能将荧光基团加入到PCR反应体系中，借助于荧光信号，累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析[9]。实时监测这一特点是常规PCR技术所不具有的，因为其对扩增反应不能进行随时的检测。常规PCR技术的扩增终产物需要在凝胶电泳等条件下才能进行，无法对起始模板进行准确的定量，而荧光定量PCR技术的反应进程可以根据荧光信号的变化做出准确的判断[10-11]。一个PCR循环反应结束之后，定量PCR仪可以收集1个荧光强度信号，荧光信号强度的变化可以反映产物量的变化情况，这样就可以得到1条荧光扩增曲线[12]。荧光信号在指数扩增阶段，PCR产物荧光信号的对数值与起始模板量之间存在线性对应关系，然后进行定量分析[13]。

2.2 多重PCR技术

多重PCR(mutiplex PCR)技术是PCR技术的一种，为同一管中加入多对特异性引物，与PCR管内的多个模板反应，在一个PCR管中同时检测多个目标DNA分子。多重PCR技术可以扩增一个物种的一个片段，也可以同时扩增多个物种的不同片段[14]。

在同一反应体系中，多重PCR技术进行多个位点的特异性扩增时，引物间的配对、引物间的竞争性扩增等会对扩增效果产生重要影响。一方面，如果能选择适宜的反应体系和反应条件，可极大地提高多重PCR的扩增效果[15]。主要包括退火温度、退火及延伸时间、PCR缓冲液成分、dNTP的用量、引物及模板的量等。另一方面，DNA的抽提质量也影响多重PCR扩增效率，如DNA抽提不干净或降解都将影响PCR扩增效果[16]。

2.3 单分子PCR技术(SM-PCR)

单分子PCR技术是在传统PCR技术的基础上发展的，基本循环过程相同，但在反应条件、模板数量、DNA 聚合酶选择、引物设计方面具有不同点。该技术是以少量或单个DNA分子为模板进行的PCR[17]。

单分子PCR技术反应中，DNA 模板浓度极低，这就要求模板有较高的质量。因为这是试验成败的决定性因素。在设计引物时，应该严格控制GC的含量和Tm值，同时尽量避免引物间存在可配对序列。在反应混合物模板数极低的情况下，若引物之间存在少量配对序列，扩增时极易形成二聚体，使反应无法进行，得不到所需要的产物[18]。由于单分子PCR技术反应的变性温度(96~98 ℃)大多比常规PCR技术(94 ℃)略高，因而对DNA 聚合酶热稳定性的要求也更加严格，需要有较好的热稳定性，以防止温度过高而使其失活。其变性时间(5~15 s)、退火时间及延伸时间也短于常规PCR技术[17]。

3 PCR技术的应用

3.1 PCR技术在水产上的应用

基因表达是检测某个基因在不同发育期或不同组织中的表达量变化，或受到某种试验处理过程中的影响而出现表达量变化的情况。有学者应用real-time PCR技术研究碳水化合物含量对翘嘴红鲴糖代谢酶G6Pase、GK以及PEPCK表达量的影响[19-21]，研究结果可为翘嘴红鲴饲料配方中的最合适糖含量提供理论依据。孙淑娜等[22]研究叶酸拮抗剂对斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2表达的影响，表明叶酸拮抗剂对早期胚胎的心脏发育影响较大，可导致斑马鱼心脏发育延迟及心脏形态异常，并下调斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2的表达，这可能是叶酸生物学活性受抑后导致心脏发育异常的机制之一。Sawyer et al[23]以斑马鱼的未受精卵、胚胎、仔鱼和成鱼为研究材料，采用实时荧光定量PCR技术，检测了P450aromA和P450aromB在不同组织的表达量，表明在各组织中均有2种基因的表达，但表达量显著不同，呈现组织特异性。

3.2 PCR技术在微生物检测上的应用

1990年，Bej et al[24]在利用多重PCR的方法检测了Leg-ionella类菌种和大肠类细菌，其结果是通过点对点方法固定的多聚dT尾捕捉探针和生物素标记的扩增DNA进行杂交来检测的。张志东等检测口蹄疫病毒(FMDV)持续性感染的带毒动物，表明实时荧光定量PCR技术具有快速检测、准确、客观等优势，较优于传统的检测方法[25-26]。Metzger-Boddien et al[27]对PCR-ELISA的方法进行了评价，结果显示，样品中沙门氏菌的检出率可以达到98%。

4 展望

传统PCR技术以及衍生出来的新型PCR技术自面世以来，已被广泛应用到生命科学的各个领域。随着技术方法的不断改进与完善，荧光定量PCR技术将会逐渐完善并广泛应用。多重PCR技术在食品病原微生物、非致病微生物及环境微生物检测中具有重要作用;未来的研究主要集中在去除食品抑制因子干扰、改进样品前处理技术等方面，其次是整合应用多重PCR与其他技术，必将在未来食品微生物检测中有非常好的应用前景。

5 参考文献

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一阵强风吹过来，所有人都站住了，只有一个人倒下——

那个人，很可能吃不够蛋白质，所以肌无力。

这是因为，蛋白质在人体内被分解成氨基酸，能帮助肌肉增长，我们的身体如果没有蛋白质，就会 手无缚鸡之力。

另外，蛋白质分解成的氨基酸还有协助身体代谢、运输氧气及营养物质、提升免疫力、调节身体 pH 值等作用。不吃蛋白质，会使骨骼生长受损、肌肉增长受阻、免疫力急速下降……

氨基酸又分为非必需氨基酸和 8 种 必需氨基酸 。非必需氨基酸可以由人体自行合成，必需氨基酸不能合成（或合成速度不能满足人体需要），只能 从食物中摄取 ，它们包括亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、苏氨酸和赖氨酸。

01

动物是蛋白质的宝库

有些健身达人人会选择吃蛋白粉的方式，补足这些必需氨基酸。

那么普通人是否也一定要通过蛋白粉来摄取蛋白质呢？其实， 这完全没有必要 。大自然是蛋白质的宝库，普通人可以直接从自然食物中，摄取一天的蛋白质所需，补足必需氨基酸。

值得注意的是，天然食物中，植物类的蛋白质往往缺乏赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸等氨基酸。连蛋白质含量较为全面的大豆，含有的蛋氨酸也微乎其微。

相反，动物中的蛋白质 非常全面 ，各种肉类和海鲜，几乎都含有 8 种必需氨基酸 。而且，动物的蛋白质比例也非常高，100 克食物中蛋白质的含量可达到 20 克。肉类和海鲜，是真正的蛋白质宝库！

通常，每个人应该根据自身体重，摄入 0.8-1.5 克 /公斤体重的蛋白质。假如你 50 公斤重，那么每天应该摄入 40 克-75 克的蛋白质，一天 吃 200-300 克的肉 就能轻松补足。

相比直接吃蛋白粉，从 天然食物 中摄入蛋白质，还有以下好处：

1. 食物营养更丰富

食物中除了含有蛋白质，还含有脂肪、维生素、矿物质等营养。当你吃鸡的时候，不仅为身体提供了蛋白质，还顺便补充了必需脂肪酸、维生素 A、维生素 E、镁、钙等营养。

2.带来幸福感

比起蛋白粉，肉类和海鲜更加美味，吃的时候会产生幸福感。

那么肉类和海鲜的蛋白质，到底该怎么吃呢？

02

肉和海鲜该怎么吃？

a.肉类蛋白

1.牛肉、猪肉、羊肉、鸡肉有差吗？

健身的人，通常更喜欢吃牛肉和鸡肉，原本我以为这两种肉有什么特别之处，结果查询大量研究数据后发现：

在氨基酸组成上，牛肉、猪肉、羊肉、鸡肉，差别并不大。

一项调查将猪肉、牛肉和羊肉中所含的氨基酸进行横向比较，结果发现它们在氨基酸组成上相差无几：

从上表可以看出，虽然羊、猪、牛肉含有的氨基酸在具体数值上有些许差距，但必需氨基酸占比分别是 37.2%，38.3%，39%， 差距微乎其微 。

其中，亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸合称为支链氨基酸，对肌肉的生长和维持，起着至关重要的作用。因此，这三种氨基酸也是想增肌的健身人士最关心的。

但事实上，支链氨基酸 占总氨基酸的占比，在猪、羊、牛肉分别是17.2%、17.4%、19.2%，差距也不明显。如果你特别在意增肌，可以选择以 2% 优势略微领先的牛肉。（或选择支链氨基酸可以占到 25% 的分离乳清蛋白）

除牛肉外，鸡肉也是健身餐的常客，那么它的氨基酸组成又如何呢？

我们来看一下鸡肉的氨基酸含量：

上面这张图，是一项对比了三种鸡肌肉氨基酸含量的研究数据。这张图显示，三种鸡的氨基酸组成虽有差距，但差别不大。

以平均值计算，三种鸡的必需氨基酸占比约为 41.4%，支链氨基酸占比约为 18.3% ，只是比猪肉、羊肉微微优胜 1%，还略低于牛肉。

比起肉类， 鸡蛋 在支链氨基酸比值中表现更亮眼，蛋清的支链氨基酸占比达到 22% ，是增肌更好的选择。

但没有强烈增肌需求的人，其实没必要为了那微不足道的差距，独孤一味只吃蛋清、牛肉或鸡肉，搞得自己食不知味。

1.肉蛋白也有增肌效果

就算有增肌需求的人，也不一定需要靠吃蛋白粉增肌，吃肉增肌的效果也不错。

有项研究将 41 名男性女性，随机分成 4 组，接受 8 周的阻力训练。每次训练后，他们分别摄入46 克的乳清蛋白浓缩物（WPC）、牛肉蛋白分离物（beef）、水解鸡蛋白（Chx）、麦芽糖糊精（对照组）。

最后，研究者用双能 X 射线吸收测定法确定各组成员身体成分的变化，发现 8 周后摄入蛋白的组别，比起对照组， 瘦体重 明显增加。

瘦体重：指的是除去身体脂肪后的体重，包含肌肉的重量，瘦体重增加，说明 肌肉重量增加 。

在这个实验中， 乳清蛋白组、牛肉蛋白组、鸡蛋白组和对照组 瘦体重增加比例，分别是 4.7%、4.0%、3.6%、3.4% 。

如果你想佛系增肌的话，也可以通过「吃肉+锻炼」来增肌。

国外有不少健身达人，从来不吃蛋白粉，也照样有着一副完美身材。比如健身教练 Max Lowery 就只靠食物补充蛋白质，这丝毫不影响他的 诱人腹肌和帅气脸庞 。

不过如果你是不爱吃肉星人，那么吃蛋白粉也无妨。

3.肥瘦相间的肉更营养美味

另外，还有一群人健身，不敢吃脂肪含量高的肉，只愿意吃干巴巴的鸡胸，其实也没必要这么做。

瘦肉就相当于动物的肌肉，所以蛋白质含量更高。同样是猪肉，100 克瘦猪肉的蛋白质含量在 20 克左右，肥瘦相间的猪肉蛋白质含量约 13 克，全肥肉只含有 2.4克 蛋白质。

羊肉、牛肉也和猪肉类似，越瘦的肉，蛋白质含量越高。而鸡肉、鸭肉的脂肪储存在皮脂里，去皮的鸡胸肉和鸭胸肉蛋白质含量，就比带皮的更高。

那么为什么不要为了摄取更多蛋白质，只吃瘦肉和去皮肉呢？因为相比纯瘦肉，肥瘦相间的肉和带皮肉，在补给蛋白质的同时，也可以补给 人体必需脂肪酸 ，营养更为全面。

另外，在美味程度上，肥瘦参半的肉，也比干巴巴的瘦肉好吃多了！

涮火锅的肥羊肥牛、慢炖而成的五花腩、肥美香滑的大鸡腿，也都是蛋白质的良好来源。

b.海鲜蛋白

1.海鲜中的蛋白质也不逊色

除了肉类，海鲜也是蛋白质宝库。常见的数十种 鱼、虾、贝类 中含有的蛋白质也不少。

可以看出，从 蛋白质含量 来看，鱼、虾略微低于肉类，而贝类更是拖了后腿。但从 必需氨基酸的占比 来看，海鲜的必需氨基酸占比又比肉类更高。

一项研究调查了同一海域的四种石斑鱼，检测它们肌肉中的 氨基酸组成 ：

从上表可以看出，石斑鱼的 必需氨基酸占比非常高，平均值达到了 48.9% ，比肉类高出了 10 个百分比。

把石斑鱼和牛肉拉出来一比，你会发现 100 克石斑鱼含有的必需氨基酸达到 19.4*48.9%=9.48克 ，而牛肉只有 20.2*39%=7.88 克 。

另一项调查，测定了 6 种贝类的氨基酸组成：

结果显示，6 种贝类的必需氨基酸占比最低的也达到了 41.4% ，最高的达到了 58.6% 。

总体上看，贝类的蛋白质含量虽然较肉类和鱼类低， 但必需氨基酸占比很高 。

想补充蛋白质，不用执着地狂吃肉，香甜的虾、肥美的蟹、清香的鱼、美味的贝，都是完美选择。

c.烹饪有利于蛋白质吸收

选对了食材，也要合理烹饪，否则便是暴殄天物。

烹饪加工过程中，温度、PH 值、机械作用等会让食物中的蛋白质结构发生变化，这叫做 蛋白质变性 。有人一听蛋白质变性，就以为这是坏事，其实不然！

因为温度升高，煮熟的肉就发生了蛋白质变性，在色、香、味、形、质上与生肉有了天壤之别。而且，当蛋白质变性后，人对蛋白质的 消化吸收率更高 。继续加热，蛋白质还会发生水解，形成多肽，多肽还可再分解成各种氨基酸，溶解于汤汁中，让汤汁又营养又美味。

中国菜的烹饪艺术博大精深，许多技法都是利用了蛋白质变性的特点，让食物在色香味上更上一层楼：

搅拌可以让蛋白质产生凝胶，才有了弹牙的鱼丸、牛肉丸；水解让蛋白质产生明胶，才有了爽口的皮冻、蹄冻等水晶菜；震荡让蛋白质体积变大，才有了鸡蛋糊这样的“芙蓉菜”……

好好做菜，不仅可以让食物更美味，还让蛋白质更易吸收，一举两得！

03

补蛋白质，不要单一，搭配着吃更好

虽说动物肌肉的氨基酸构成大同小异，但不同动物之间还是有略微区别。比如鸡肉中的色氨酸含量不高，名字中同样带“鸡”的火鸡，色氨酸含量就高了许多。

另外，每种食物的其他营养成分也不同，脂肪酸、维生素、矿物质含量可能会天差地别。

比如肉类含有优质的油脂，海鲜相较不如；

深海鱼含有丰富的 omega-3，肉类落了下风；

猪肉含有维生素 B₁，鸡肉逊色不少……

如此种种，不一而足。 如果要补足足够的氨基酸以及其他营养，难道要拿出计算机废寝忘食地计算吗？

要知道，同样是猪肉，不同的猪种，不同的年龄，不同的部位，营养构成也会不同。所有食物的具体成分，都会因为季节、地域、部位有变化。就算随身携带磅秤、计算机、营养成分鉴定仪器，也难做到精确地计算营养成分。

所以要达到好的饮食效果，无需煞费苦心地计算，最好的方法就是 一锅端 ，每样肉、每种海鲜都吃点，这样就哪种营养都不会少了。

04

写在最后

虽说蛋白质是人体必不可缺的营养元素，我们也推荐大家一天摄入自身体重的 0.8-1.5 克 /公斤的蛋白质。但这只是理论，现实操作起来，还是应该以个人状况来定。

如果你哪天狂运动，撸铁跑步跳跃陆续有来，只觉食欲大增，这种情况就应该多吃点：吞下半只鸡、怼下几块五花腩、细品一条鱼也是等闲。

如果你看了个悲剧电影，哭得雨带梨花，根本吃不下东西，那么跳过一两餐也未尝不可。

只有长期蛋白质摄入不足，才会损害身体 健康 。 一两天摄入不足问题不大，今天少吃了，明天就多补点。

做人嘛，最重要的就是开心！

我们整理了一份蛋白质大全，教你 5 分钟认清它们的优劣！

脂肪和蛋白质，到底吃多少克才合适？

蛋白质吃多会伤肾？谣言！高碳水才是祸害肾脏的真凶！

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参考文献

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好看!

游嘉瑞 1935年4月生，福建永泰人。现任中共福建省委统战部副部长、省人大常委、省政协委员、省工商联党组书记、中国书法家协会常务理事、省地方志编纂委员会副主任、福建省诗词学会常务副会长、福建省对外文化交流协会副会长、福建省书法家协会常务理事、福建省海云墨会副主任、闽台经济文化交流促进会副会长、林则除基金会常务理事副秘书长、中国统战理论研究会理事、炎黄文化研究会常务理事。程门立雪裔，幼贫耕谈不倦；工余之暇寄情翰墨，研究书法悟出“云无富蒸蒸千万，书无定法法自在“之哲理，以行草见长，得到“笔通神”赞誉，篆刻宙拙朴茂，微雕独运《案头摩崖石刻》，纳伟岩摩崖石刻于寸石，诗文立意高运，清新超俗，有《石竹叙》、《苦笋颁》问世，《做为非公有制经济领域的经战工作》获全国二等奖，书法作品获王子杯海峡两岸书画大赛》金奖和菲律宾《中华吟神墨诗书画国际展览》国际文化交流荣誉金奖。作品选入海内外书法集20余种。专著有《游嘉瑞诗书印选》、《案头摩崖石刻》、《翰园碑林》等，专题片有《墨林竹韵》、《寿山寿案头摩崖石刻》、《榕城人》。曾入编《当代书法家传记》、《中国当代书法家辞典》、《中国当代书法家大辞典》等。游克仁 1956年毕业于上海水产学院，1956-1959年任职于浙江省水立厅；1960-1962年在浙江省海洋水产研究所；1963-1969年在福建平谭县东澳水中；1970-1978年在平潭二中；1979-1984年在平潭县水技站；1985年至今在平潭县科委工作。从事科研工作30余年，参与浙江、福建省、市重大高科技课题10多项，获省市级科学推广二、三等奖、科技大会奖和科技成果奖。1959年，1984年、1990年先后出版《打洋船渔业》《南方养殖》(合著)及《网箱养真铜、石斑鱼技术》专著三册；1979-1998年在省级以上77家报刊刊登713篇文章(论文75篇)，年平均34篇多，1998年突破95篇。曾参加《机围立式起网机试验》获省科技推广奖、大会奖和成果奖；负责《海湾扇贝秋季人工育苗技术》《刀额新对虾育苗与养殖技术》，1995年列为国家科技成果。1990-1994年荣获省、市、县科协系统、政府先进工作者。部分著作和论文受到国内外专家学者的极大关注和好评，如《悲翠贻贝育苗技术》论文1994年中科院辑入《贝类养殖》专题文献；《海湾扇贝秋季全人工育苗》论文由科教兴国系列丛书编委会辑入《中国农业文库》。对《中肋骨条藻培养技术》(墨西哥湾扇贝育苗与养殖)进行了深入的研究，并提供了重要科学数据。善于参加水产养殖试验和业余创作。近年来负责承包《网箱养殖真鲷》生产与研究，取得成效。目前正致力于鱼病防治试验研究工作(课题组成员)。 游尧生 男，1943年7月生，湖北省靳春县人。湖北省靳县公路段党总支部书记。高级工程师，高级政工师，一生从事公路工作，被誉为“公路铁人”。“茒五”期间，他负责施工的全省重点工程黄界公路的工程质量在全省名列前茅，受到省政府表彰。1990年初，他带领职工出县闯市场，4年时间承建了国家重点工程宜黄高速公路共11个标段，质量优，信誉高，创造了可观效益，单位、个人每年都受到省指挥部表彰。1994年1月后，他先后任段长，党总支书记，大力綂行改革，加强党的组织建设和精神文明建设，年年出色地完成了各项任务，其改革经验在全区推广，县公路受到地区行署、省交通厅和人事厅的表彰，被授予地级文明单位和县“先进党组织”。改革开放以来，他30多次被上级党委、政府、主管部门评为先进工作者，优秀共产党员，优秀政工干部，“七五”、“八五”均受地区行署表彰，被省政府授予“湖北省“七五”交通重点工程优秀建设者”。近年来在报刊上发表，10多篇文章，有的论文并获奖。