脑脊液常规检查毕业论文

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nǎo jǐ yè jiǎn chá

脑脊液（cerebrospinalfluid,CSf ）是存在于脑室及蛛网膜下隙内的一种无色透明液体。大约70%的脑脊液是在脑室的脉络丛通过主动分泌和超滤的联合过程形成的；约30%的脑脊液是在大脑和脊髓的细胞间隙形成的间质液。形成的脑脊液经第三、第四脑室进入小脑延髓池，然后分布于蛛网膜下隙内。脑脊注伯吸收是通过蛛膜绒毛而返回静脉。

脑脊液具有提供浮力保护脑和脊髓免受外力震荡损伤；调节颅内压力；供给脑、神以系统细胞营养物质，并运走其代谢产生；调节神经系统堿贮量，保持PH在7.317.34之间等作用。此外脑脊髓液还通过转动生物胺类物质影响垂体功能，参与神经内分泌调节。

由于血脑屏障的存在，脉络丛上皮细胞对血浆各种物质的分泌的超滤具有选择性。氯、钠、镁离子及乙醇等最易通过；白蛋白、葡萄糖、乳酸、钙离子、氨基酸、尿素和肌酐次之；而大分子如纤维蛋白原、补体、抗体、毒物和某些药物以及胆素红素、胆固醇等则极难或不能通过。

中枢神经系统任何部位发生器质性病变时。如感染、炎症、肿瘤、外伤、水肿和阻塞等都可引起脑脊液成分的改变。通过对脑脊液压力、一般性状、显微镜、化学成分、微生物、免疫学的检查，达到对疾病的诊断、治疗和预后判断的目的。

1．有脑脊膜 *** 症状时可检查脑脊液协助诊断。

2．疑有颅内出血时。

3．有剧烈头痛、昏迷、抽搐或瘫痪等症状和体征而原因不明者。

4．疑有脑膜白血病患者。

5．中枢神经系统疾病进行椎管内给药治疗、手术前腰麻、造影等。

要严格掌握禁忌证、凡疑有颅内压升高者必须做眼底检查，如有明显视 *** 水肿或有脑疝先兆者，禁忌穿刺。凡病人处于休克、衷竭或濒危状态以及局部皮肤有炎症、颅后窝有占位性病变或伴有脑干症状者均禁忌穿刺。

脑脊液由临床医师进行腰椎穿刺采集，必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。穿刺后应由医师用压力测定，正常人脑脊液压力卧位为0.781.76kpa（80180mmH2O），儿童为0.41.0kpa（40100mmH2O）。任何病变使脑组织体积或脑脊液量增加时，脑脊液压力均可升高。待压力测定后将脑脊液分别收集于3个无菌试管中，第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查，第三管作一般性状及显微镜检查。每管收集12毫升。脑脊液标本必须立即送验及时检查，放置过外将影响检验结果，是细胞破坏、变性、或细胞包裹于纤维蛋白凝块中，导致细胞数降低、分类不准确等。存放中的脑脊液葡萄糖会分解，使之含量降低；细菌自溶或残废可影响细菌检出率等。

1 ．颜色：正常脑脊液是无色透明的液体。在病理情况下，脑脊液可呈不同颜色改变。

（ 1 ）红色：常由于各种出血引起的，脑脊液中出现多量的红细胞，主要由于穿刺损伤出血、蛛网膜下腔或胺富强出血引起。前者在留取三管标本时，第一管为血性，以后两管颜色逐渐变淡，红细胞计数结果也依次沽少，经离心后上清液呈无色透明。当蛛网膜下腔或脑室出血时，三管呈无孔不入红色，离心后旧清液显淡红色或黄色。红细胞在某些脑脊液中5 分钟后，即可出现皱缩现象，因此红细胞皱缩现象不能用以鉴别陈早性或新鲜出血。

（ 2 ）黄色：可因出血、梗阻、郁滞、黄疸等引起。陈早性蛛网膜下腔或脑室出血，由于红细胞缺乏蛋白质和脂类对膜稳定性的保护，很易破坏、溶解、出血48 小时即可出现黄色。停止出血后，这种黄色仍可持续3 周左右。椎管梗阻如髓外肿瘤，格林 巴利综合征，当脑脊液蛋白质量超过1.5g/L 时，颜色变黄，其黄色程度与蛋白质含量呈正比。化脓性脑膜炎、重症结核性脑膜炎时，因脑脊液蛋白质含量明显增加而呈淡黄色或黄色。重症如黄疸如核黄疸、新生儿溶血病时脊液也呈黄染。

（ 3 ）白色或灰白色：多因白细胞增加所致常见于化脓性脑膜炎。

（ 4 ）褐色或黑色：常见于脑膜黑色素瘤。

2 ．透明度正常脑脊液应清晰透明。病毒性脑炎、神经梅毒等疾病的脑脊液也可呈透明明外观。脑脊液中白细胞如超进300 × 106/l 时可变为混浊；蛋白质含量增加或含有大量细菌、真菌等也可使其混浊；结核性脑膜炎常呈毛玻璃样微混；而化脓性脑膜炎常呈明显混浊。

填写报告时用“清晰透明”、“微浑”、“浑浊”等描述。

3 ．凝块或薄膜：收集脑脊液于试管内，静置1224 小时，正常脑脊液不形成薄膜、凝块和沉淀物。若脑脊液内蛋白质包括纤维蛋白质多于10g/L即可出现凝块或沉淀物，结核性脑膜炎的脑脊液静置1224 小时后，可见表面有纤维的网膜形成，取此膜涂片检查结核杆菌，阳性率较高。蛛网膜下隙梗时，由于阻塞，远端的脑脊液蛋白质含量常高达15g/L 此时脑脊液呈黄色胶冻状。

填写报告百可用“无凝块”、“有凝块”、“有薄膜”、“胶冻状”等描述。

4 ．比密可用折射仪法测定脑脊液的比密。健康有脑脊液比密为1.0061.008 。

正常脑脊液PH 为7.137.34，比动脉血的 Ph 低。目前认为二氧化碳易通过血脑屏障，使脑脊液PCO2 比动脉血高0.51.5kpa（411mmHg） ，而[HCO3]I 不易通过血脑屏障，脑脊液中浓度一般比动脉血低。脑脊液PH 比较恒定，即使全身酸堿失衡时对它的影响也甚小，在中枢神经系统炎症时脑脊液PH 降低，比脓性脑膜炎的脑脊液的PH 降雨量低更明显。如同时测定脑脊液的乳酸含量则更有价值。

1 ．蛋白质定性

[ 方法学评价 ]潘氏试验所需标本量少，灵敏度高，试剂易得，操作简便，结果易于观察，其沉淀多少与蛋白质含量成正经比，部分正常脑脊液亦可出现极弱阳性结果。Ross Jine 试验主在沉淀的是球蛋白，但敏感性较弱，NoneApett 试验可分别检测球蛋白和白蛋白，但操作较繁，极少选用。

2 ．蛋白质定量

[ 方法学评价 ]比浊法经磺基水杨酸和三氯乙酯为基础，在国内应用较广，但受白蛋白/ 球蛋白的比值变化而影响结果，同时还受加试剂的手激动、速度、室温和放置时间等影响，而且脑脊液用量相对较大。加一类是染料结合法、如考马斯亮蓝、丽春红S 、邻苯三酚红钼法等，具有灵敏度较高，标本用量少，重复性好等优点，但对PH 要求较严格。

[参考值 ] 脑脊液蛋白质的参考值因年龄和标本来源不同而有差异，成人腰池的蛋白质为200400mg/L ，脑池蛋白质为100250mg/L ，脑室内的蛋白质为50150mg/L 。新生儿由于血脑屏障尚不完善。因此脑脊液蛋白质含量相对高些，6 个月后小儿脑脊液中的蛋白质相当于成人水平。

[临床意义 ] 脑脊液蛋白质含量增加，提示患者血脑屏障受破坏，常见于脑、脊髓及脑膜炎的症、肿瘤、出血等以及脑软化、脑退化性疾病、神经根病变和引起脑脊液循环梗阻的疾病等，当脑脊液中蛋白质在10g/L 以上时，流出后呈黄色胶冻状凝固，而且还有蛋白 细胞分离现象，临床上称为Froin 综合征，是蛛网膜下腔梗阻性脑脊液的特征。

含血的脑脊液可使蛋白质含量增加，为鉴别原来有无蛋白质增加，可用每微升1 升个红细胞的相当增加蛋白质80mg/L 来推算，最后用含血的脑脊液中实测的蛋白质量减去出血时从血中带入的蛋白质量由含红细胞数推算成的蛋白质量，即为原来脑脊液的蛋白质含量。

3 ．蛋白电泳

[方法学评价 ]由于脑脊液蛋白质含量较少，在电泳前必须时行浓缩，一般用透析法，透析液可用高分子量聚乙三醇，右旋糖酐等，载体可用琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶或等电聚焦电泳，后者分辨率高。近年来采用效毛细管电泳法其分辨率更高，而且脑脊认不需要经过浓缩。

[参考值 ] 前白蛋白占26% ，白蛋白 55%65%，α 1球蛋白 3%8% ，α2 球蛋白 4%9%，β球蛋白 1018%，γ球蛋白 413%（滤纸法）。

[临床意义 ] 前白蛋白增加见于脑萎缩、脑积水及中枢神经变性疾病。白蛋白增加见于脑血管病变、椎管阻塞。α和β球蛋白增加见于脑膜炎、脑肿瘤。β球蛋白增加可见于动脉硬化，脑血栓待脂肪代谢障碍性疾病。γ球蛋白明显增加见于脑肿瘤。

4．免疫球蛋白

[参考值] 脑脊液中IGG为1040mg/L,IGA为06mg/L,IGM为013MG/L.脑脊液IG浓度除以mg/L表示以外，还有以下几种报告方式及参考值（见表151）。

表151 脑脊液免疫球蛋白的报告方式及参考值

[临床意义 ] Igg 指数及合成率在 90% 的多发性硬化症中增高。但在非多发性硬化的其他感染或炎症时，仍有2957% 病例也可异常。同时在确诊为多发性硬化症的脑脊液电泳中，大多数还在阴极端出现异常的寡克隆区带。后者是B 细胞通过接触病原因子或多发性硬化症自身抗原后，活化成浆细胞。由多个活化浆细胞寡克隆化后所分泌的。但也亲非多发性硬化症所特有，也可见于部分感染或炎症病例中。总之，脑脊液IGG 的定性怀定量检查结果正常时，可除排多发性硬化症；相反检查结果增高时，必须结合临床才能诊断为多发性硬化症，当脑脊液总蛋白量正常，而又出现异常的寡克隆区带时对多发性硬化症的诊断更具有重在意义。

IGA 增加见于化脓性、结核性脑膜炎及神经性梅毒等。

5 ．髓鞘堿性蛋白

[参考值 ] <4μ g/L

[ 临床意义] 脑脊液髓鞘堿性蛋白，测定已被子广泛应用于多发性硬化症的辅助诊断，大约90% 多发性硬化症患者急性期MBP 升高是髓索遭到破坏的近期指标。该病消退后两周可恢复至正常。虽然脑脊液中MBP 对多发性硬化症并非特异也可见于他急性中枢神经系疾病，如神经性梅毒、脑血管意外、外伤等，但仍不失为多发性硬化症的辅助诊断指标。应注意不同实验室由于方法不同，结果可有明显差异，一般认为大于8 μ g/l 为异常。

[临床意义 ] 脑脊液五管糖半定量法现已淘汰。目前已改用葡萄糖氧化酶或已糖激酶的定量测定法，后者无论特异性、准确性均佳，如需将标本保存较长时间，可加入适量氟化钠以抑制细胞或细菌利用葡萄糖。

[参考值 ]2.54.4mmol/L

[临床意义 ] 脑脊液中葡萄糖和血糖有密切关系，脑脊液葡萄糖约为血糖的60% 。也可以在 3090%范畴内变化，这是由于血浆葡萄糖达到平衡需12 小时。糖尿病或注射葡萄糖液使血糖升高后脑脊液中葡萄糖也可以升高。当中枢神经系统受细菌或真菌感染时，这些病原体或被破坏的细胞都能释放出葡萄糖分解酶使葡萄糖消耗，而使脑脊液中葡萄糖降低，尤经化脓性脑膜炎早期降低最为时显，甚至测定不出来。结核性、隐球菌性脑膜炎的脑脊液中葡萄糖降低多发生在中、晚期，且葡萄糖含量越低预后越差。病毒性脑炎时脑脊液中葡萄糖多为正常。

[参考值 ]120130mmol/L

[临床意义 ] 正常脑脊认氯化物比血浆高，0 这是因为脑脊液要维持Donnan 平衡所致脑脊液中氯化物也随血浆氯化物的改变而变化。当脑脊液中蛋折质增多时，为维持脑脊认渗透压平衡，氯化物多减少，如脓性脑膜炎，尤其以结核性脑膜炎时最为明显的，在低氯血症时呕吐、脱水等脑脊液氯化物也会减少。而病毒性脑炎时无显著变化，脑脊液中氯化物含量低于85mmol/L 时，有可能导致呼吸中枢抑制而出现呼吸停止，故如脑脊液中氯化物明显降低时应及时向临床医师通报，以便及早采取措施。脑肖液氯化物增加也可见于尿毒症患者。

正常脑脊液中含有多种酶如 Ld 、 CK 、AST 、 ALt 等。但其含量均较血清低得多。在某些伴有脑实质破坏疾病的时，AST 、 Ck 可以从脑组织释放到脑脊液中使其活性增加。最近认为测定脑脊认中CKBB 可作为院外心脏停搏患者大脑损伤的一个指标。脑脊液中LD 由于测定方法不同很难有一个公认的参考值，因此一般均以脑脊液LD/ 血清 Ld ，比值小于 0.1为判断标准，许多中枢神经系统疾病无法可导致脑脊液LD 升遍，包括局部缺氧性坏死、脑膜白血病和转移性肿瘤、测定脑脊液LD 同工酶发现，如血脑屏障受破坏时，脑组织经释放出LD2 、 LD3为主，如粒细胞增加则从细胞中主要释放出LD4 、 LD5。

有报告脑脊注中腺苷脱氨酶（ adenosine deaminase,ADA ）参考值为 08U/l 。关发现结核性脑膜炎患者脑膜炎患者脊液中ADA 升高，且与其它性质的脑膜炎相比有显著性差异，可用于结核性脑膜炎的诊断及鉴别诊断，正常脑脊液中溶菌酶含量甚微，甚至测不出来。化脓性或结核性脑膜炎患者脑脊液中溶菌酶含量升高，而病毒草性脑炎则正常。结核性脑膜炎患者脑膜炎脊液中溶菌酶升高程度又明显高于化脓性脑膜炎，且随病情恶化而逐渐升高，随着病情好转又逐渐下降，痊愈后溶菌酶含量可下降至零，因此脑脊液中溶菌酶含量测定有助于结核性脑膜炎的诊断及预后判断。

在脑组织氨基酸代谢过程中脱作用所产生的游离氨，可借谷氨酰胺合成酶的作用合成谷氨酰胺以消除氨对中枢神经系统的毒性作用。脑脊液中氨大约是动脉血中的1/3 。当脑膜脊液中谷氨酰胺升高时也反映大禽中氨增加，并可用于诊断肝性脑病。肝昏迷时可高达3.4mmol/L（<500mg/L） 。正常脑脊液中谷氨酰胺为0.40.96mmol/L（60140mg/L）。但脑脊液的谷氨酰胺也可在败血症脑病和呼吸衰竭继发性脑病时轻度增加。

正常脑脊液中乳酸为 1.55± 0.42mmol/l 。大脑发生病时通常有乳酸浓度增加，与动脉血中乳酸增高无关。治疗中输注乳酸并不会引起脑脊液中乳酸的增加。目前认为脑脊液中乳酸升高的来源有三：①大脑组织缺血、缺氧时乳酸堆集；②蛛网膜网腔下出血时红细胞无氧酵解产生的乳酸或化脓性脑膜炎时细菌酵解葡萄糖均可使乳酸增加；③过度换气引起脑脊液中乳酸升高。因此当蛛网膜下腔出血、脑外伤、癫痫、细菌隆脑膜炎时脑脊液中乳酸均有不同程度升高。有报告蛛网膜下腔出血患者脑脊液乳酸与出血时间有关，发现出血的当天乳酸水平即明显增加，病情严重者，在出血后5天至7天内仍继续升高，以后乳酸水平虽有下降，但一直高于正常，病情好转后脑脊液乳酸值于2周内恢复至正常。

脑脊液中CAMP参考值为13.0±2.3nmol/L。脑膜炎时由于细胞代谢紊乱可导致脑膜脊认中CAMP含量升高。有报道化脓性脑膜炎患者检测脑膜炎脊液中CAMP可能较蛋白质，葡萄糖以及细胞计数等指标更为敏感，恢复期脑脊认中CAMP逐渐下降至正常。

近来还对禽脊液中乐极生悲茶酚胺，5HT、乙酰胆堿等神经介质和代谢物质进行测定，以观察中枢神经活动与代谢情况以及估计用药效果。

包括细胞总数及白细胞计数。

[方法学评价]一般工法。细胞少时应将脑脊液直接灌入FuchsRosenthal计数板，总体积为3。6μl中计当选，但愿现用改良牛鲍氏计数盘的误差更大，所以应增加计数面积。如果标本内细胞较多，可用生理盐水或红细胞稀释液稀释后再用人工计数，也可用血细胞分析仪进行计数。

当穿刺损伤血管导致血性禽脊应付或出血性脑血管病时，计数细胞总数已无意义，白细胞数亦须经校正办法有二：①估计值：即以红细胞与白细胞数之比为700：1的关系估计白细胞数。也有学龄前者认为蛛网膜下腔出血的患者在发病34天内进行腰穿刺时由于红细胞破坏较早，应以每500个红细胞比1个白细胞计数较为合适。②通过外周血红细胞及白细胞数和脑脊液中红细胞计当选出从血液中带进脑脊液中白细胞数。以后者较为准确。

[参考值]成人脑脊液内无红细胞，白细胞极少，其参考范围：腰池中为（010）×106/L；脑室内为（05）×106/L，儿童为（015）×106/L，新生儿为（030）×106/L。如白细胞达（1050）×106/L为轻度增加，（50100）×106/L为中度增加，200×106/L以上显著增加。

[参考值]正常脑脊液中白细胞主要为单个核细胞。多为淋巴细胞及单核细胞。偶可见到软脑膜和蛛网膜细胞、室管膜细胞、脉络膜细胞等。

[方法学评价] 一般用脑脊液离心沉渣涂片，经瑞特染色后用油镜分类，但细胞形成常受影响。为了尽可能多地收集细胞和保持完好的细胞结构，国内一些单位已将细胞玻片离心沉淀仪运用于脑脊液细胞学检查，提高了癌细胞的检出率，在细胞染色技术上也采用我种方法。目前常用染色方法为MayGnimwaldGiemsa染色法。其客观存在如吖啶橙荧光染色法适用于于对瘤细胞的辨认；非特异性酯酶染色法适用脑脊液中T细胞辨认；高碘酸雪夫染色法用以鉴别腺癌细胞和原淋巴细胞；过氧化物酶染色用以鉴别形态相似的幼稚细胞；脂类染色法用于鉴别脂类吞噬细胞；硝基四氮唑染色法用于鉴定成熟和幼稚的中性粒细胞等。

经沉淀涂片认真寻找虫卵、幼虫等。

1．中枢神经系统感染性关病此时脑脊应付细胞病理学变化分三个不同时期：①急性炎性渗出期，呈粒细胞反应；②亚急性增殖期，呈激活淋巴细胞或单核巨噬细胞反应；③修复其呈淋巴细胞反应。化脓性脑膜炎的急性期变化最突出，持续时间最长；此期脑脊液细胞数每微升可高达数千，经中性粒细胞为产，当用抗生素治疗后，脑脊液细胞数迅速下降。渍毒性脑炎亚急性期出现较早，持续时间较长，脑脊液中细胞数轻度增加，以淋巴细胞为主，在单纯疱疹病毒性脑炎的脑脊液淋巴样细胞中可发现胞质内包涵体，结核性脑膜炎时其脑脊液细胞数可增加，但超过500×106/L者较为罕见，在发病初期以中性粒细胞为主，但很快下降，由于患者多在发病数天后才来诊治，因此首次腰穿时，脑脊液中中性粒细胞已趋下降而淋巴细胞为多。粒细胞、淋巴及浆细胞同时存在是结核性脑膜炎的特点。新型隐球菌性脑膜炎可在脑脊液中直接发现婚球菌，必要时用印度墨汁染色予以确诊。

2．中枢神经系统肿瘤脑脊液细胞当选可正常或稍高，以淋巴细胞为主。脑脊液中能否找到肿瘤细胞取决于肿瘤位置及恶性程度、穿刺部位和采集标本的多少。同时也与检查者技术水平有关，采用细胞正玻片离心沉淀仪可提高检出率。脑脊液找到白血病细胞是白血病脑膜转移的证据。

3．脑血管病脑脊液细胞学检查有助于鉴别脑出血或腰穿损伤性出血。前者在早期病后数小时可见大量红细胞和明显中性粒细胞增多，23天内达高峰，在脑脊液中可发现吞噬细胞，出血后数小时至第3天可出现含有红细胞的吞噬细胞，5天后可见含铁血黄素吞噬细胞。如为穿刺损伤性出血则不会有上述反应。

4．脑寄生虫病不仅脑脊液细胞数升高，并可见嗜酸性粒细胞增多，约占白细胞的60%或更高。浆细胞增多为加一特点。如将脑脊液离心沉淀物全倾倒在玻片上，在显微镜下检查可发现血吸虫卵、阿米巴原虫、弓形体、旋毛虫的幼虫等，甚至还可找至细粒棘球绛虫的头节或头钩。

5．红斑狼疮有时可在脑脊液中找到红斑狼疮细胞。

常见中枢神经系统疾病的脑脊液检查特点见表152。

表152 常见中枢神经系统疾病的脑脊液检查特点

定性定量g/L

脑膜炎

有凝块

增加，早期以中性粒细胞为主，其后以淋巴细胞为主

脑膜炎

脑膜炎

流行性乙

型脑炎

↑

清晰或

微混

↑

微混

1．神经性梅毒的检查祝经性梅毒素的诊断首先选脑脊液密螺旋体荧光抗体吸收试验，其敏感度，特异性均很高。次选为性病研究实验玻片试验，其敏感性较差，而特异性较高。如果患者脑脊液测定FTAABC阳性而VDRL试验阴性时，应结合患者神经系统体征台加综合判断。大约7580%具有活性动性神经梅毒的患者，其脑脊液中IGG合成率增加，IGG指数升高，且脑脊液中可有寡克隆区带出现。

2．结核性脑膜炎的检查：中枢神经系统受到结核菌抗原 *** 时能产生特异性抗结核抗体。目前认为最为简便、敏感性又高的是ELISA法。用此法测定结核性脑膜炎患者血清及脑膜脊液中抗结核菌纯化蛋白质生物或抗结核性脑膜患者血清及脑脊液中抗结核纯化蛋生物或抗结核分支杆菌抗原等特异性IGG抗体，台果脑脊液中抗体水平也高于自身血清，这对结核性脑膜炎的诊断及鉴别有价值。近年来用聚合酶连接反应可检测脑脊液中1020个结核杆菌，使脑脊液中有微量结核杆菌即可检测出来，是目前最敏感的方法。但影响PCR试验结果的因素很多，也可能因污染而出现假阳性，因此应结合临床情况及其它检查做出的判断。

3．淋巴细胞亚群检查：正常脑脊液经淋巴细胞亚群分析，T细胞所占百分率高于外周血。有人认为这可能是脑脊液中T细胞参加再循环而B细胞则不参加；T细胞还具有半寿期较长或由于血脑屏障而潴留等原因，因此中枢神经系统可能是免疫学特区，具有自己的免疫系统和免疫反应特征，要中枢祝经系统炎症百T细胞数量免疫力功能降低。多发性硬化症时，激活的辅助T细胞及B细胞绝对值均增加。

4．脑囊虫病检查：补体结合试验，胶乳凝集试验及间接血凝试验等在70年代曾被广泛采用，由于影响因素多，结果欠稳定、可靠性差而淘汰。目前认为ELISA法灵敏度较高某医院对958例脑囊虫病脑脊液用该法检测，阳性率高达92%。如用糖蛋白抗原和酶免疫印迹技术时，其敏感度可达95.24%。

其它脑寄生虫病也可通过脑脊液对相应的胶乳凝集试验、间接血凝、补体结合试验和酶联免疫试验进行检查，可起辅助诊断作用。

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1．显微镜检查：革兰氏染色后的显微镜检出是脑脊液微生物学检查中的第一步，这在化脓性脑膜炎时其阳性率约为6090%。如果脑脊液中细菌数量小于1000个/μl时可出现假阴性，但可以通离心沉淀涂片来提高阳性率。有人提出用吖啶橙荧光染料染色代替革兰氏染色，可提高细菌出率。结核杆菌用ZiehlNeeison染色阳性率仅40左右，可罗丹明B荧光染色来提高检出率。新型隐球菌检查一般用印度墨汁染色Berned认为有假阳性，推荐用苯胺黑代替印度墨汁。

医学检验技术(专科)毕业实习大纲 一、目的要求 毕业实习是学生完成教学计划所规定培养目标的重要阶段。通过临床实习，巩固和提高专业理论知识，能较熟练地掌握所学的各种检验基本技术，使学生具备独立操作、分析检验结果的能力。专科实习要求掌握门急诊医学检验的基本操作和流程;掌握血液、尿液等一般检查的基本技能和操作;运用所学的临床免疫学基本知识及技能，掌握临床免疫学检验的各种基本操作技术，熟悉目前常用的免疫自动化仪器的构造，原理及应用，并能对检验项目的结果做分析。初步具备符合大学专科毕业水平的检验技术工作能力。 二、实习内容 临床(基础)检验部分： (一)基本理论 1. 掌握临床一般检验的标本采集方法，常用试剂的配制。 掌握外周血常规检查的项目及临床意义。 掌握尿液标本的种类、注意事项;尿液的理学检查的.内容和临床意义;尿液干化学试纸条检测的项目、原理、注意事项和临床意义。 掌握粪便隐血试验的方法学评价和临床意义。 掌握阴-道分泌物的清洁度评价 2.熟悉精-液标本的常规检查项目及临床意义 熟悉脑脊液、浆膜腔标本的常规检查项目及临床意义 3.了解血液分析仪的质量控制过程。 了解脱落细胞学检查的方法;各系统脱落细胞检查的特点。 (二)基本技能 免疫学检验部分： (一)基本理论 1.掌握临床目前常用的血清学检测技术：乙肝血清标志物的测定、类风湿因子测定、循环免疫复合物测定、免疫球蛋白测定。 掌握常用的酶联免疫吸附试验检测技术、酶标仪的使用及洗板机的使用。 2.熟悉凝胶扩散试验技术。 熟悉临床常用的免疫标记检测技术：发光免疫技术、荧光免疫技术、斑点金免疫渗透试验检测尿β-HCG、斑点免疫层析试验检测沙眼衣原体。 3.了解放射免疫测定技术。 了解免疫固定试验技术。 了解补体与补体参与的反应技术。 (二) 基本技能 三、实习具体安排 医学检验专业专科学生可以自行联系或由学习中心指派到符合实习要求的医院、医学检验中心(院、所)实习临床检验、免疫学检验各六周。 学生进入实习科室进行临床实习，必须参加入科教育，听取带教老师介绍科室的管理模式和常规工作制度。在带教老师指导下，熟悉工作流程，掌握科室的操作规范。未经带教老师同意不得擅自采集标本和进行各项技术操作。 在实习期间学生应服从科室安排，参加科室值班工作，完成一定量的检验工作任务，做好工作记录。工作时得出的检验结果必须由带教老师审核签字，学生一律不得擅自发签检验报告单。 学生要爱护仪器设备、贵重仪器必须在带教老师指导下进行使用，不得擅自动用。每日实验完毕后应主动做好实验室清洁、整理和消毒工作，及时整理好工作台及一切器具后方可离去。 学生实习期间应积极参加各种业务讲座、学术报告会，认真做好实习笔记。并在带教老师指导下，结合工作实际，收集和整理一份医学检验学习资料。 每一轮转结束，由实习科室主管和带教老师负责，对学生进行一次出科考试，考核应掌握的理论知识和基本技能，并由本人写书面小结一份，由带教老师对实习生予以鉴定。 医学检验专业(本科，专升本)毕业实习大纲 一、目的要求 毕业实习是完成教学计划所规定培养目标的重要阶段。通过实习，使学生把所学的理论知识与临床实际紧密联系起来，培养学生主动学习、独立思考的习惯，并能较熟练地全面掌握所学的各种检验基本技术，具备独立操作、分析检验结果和初步的科研工作能力。本科阶段的实习，要求在掌握门急诊临床检验操作的基础上，掌握微生物检验的基本操作技术和检验方法;掌握血液一般检查的基本技能和操作;掌握常见血液病的血象和骨髓象特征，溶血性疾病、出凝血疾病的相关实验室检查，并能运用所掌握的知识联系实际，对检验结果进行分析和判断。初步掌握医学信息检索、临床资料采集分析等科研方法，达到大学本科毕业的检验专业人员的水平。 二、实习内容 临床(基础)检验部分： (一)基本理论 (1)掌握临床一般检验的标本采集方法，常用试剂的配制。 掌握尿液标本采集的种类、注意事项;尿液的理学检查的内容和临床意义;尿液干化学试纸条检测的项目、原理、注意事项和临床意义。 掌握粪便隐血试验的方法学评价和临床意义。 掌握阴-道分泌物的清洁度评价 (2)熟悉精-液标本的常规检查项目 熟悉脑脊液、浆膜腔标本的常规检查项目 (3)了解脱落细胞学检查的方法;各系统脱落细胞检查的特点。 (二)基本技能 临床血液学检验部分： (一)基本理论 (1)掌握外周血常规检查的项目及临床意义。 掌握溶血性疾病检查：孵育脆性试验、游离血红蛋白测定、异形红细胞形态分析。 掌握出血性疾病检查：PT、APTT、Fg、TT、凝血因子促凝活性测定。 掌握DIC的实验检查：PLG测定、FDP测定、D-二聚体测定。 (2)熟悉骨髓细胞Wright`s染色下的形态学分类。 熟悉血液分析仪的操作过程。 熟悉组织化学染色(过氧化酶染色、糖原染色、碱性磷酸酶染色、铁染色)的原理和临床应用。 熟悉血小板功能试验：血小板抗体测定、血小板聚集试验。 (3)了解血液分析仪的质量控制过程。 了解血栓前状态常以及分子标志物检测的项目和意义：TM、P选择素、F1+2、TAT、FPA。 (二)基本技能 微生物学检验部分： (一)基本理论 (1)掌握下列临床常见标本的核收、处理及接种：血液、脑脊液、尿液、粪便、痰液、穿刺液及生殖道分泌物。 掌握常用细菌染色法—革兰染色、抗酸染色。 掌握各类细菌形态、大小、排列与染色性。 掌握墨汁染色、乳酸酚棉兰染色。 掌握临床常见致病菌的培养与分离技术。 掌握临床常见致病菌的鉴定技术。 掌握结核分枝杆菌涂片镜检、培养与鉴定。 (2)熟悉常用染色液及培养基的种类。 熟悉临床常见厌氧菌的培养与鉴定技术。 熟悉支原体的培养与鉴定。 熟悉白假丝酵母菌及新生隐球菌的分离培养与鉴定。 熟悉体外药物敏感性试验。 (3)了解病毒的分离培养与PCR技术在微生物检测中的应用。 了解微生物实验室的生物安全管理的相关知识。 (二)基本技能 三、实习具体安排 医学检验专业本科(专升本)学生可以自行联系或由学习中心指派，但必须到符合实习要求的二级甲等及以上医院、地市级及以上医学检验中心(院、所)，在巩固临床检验基本技能的基础上，安排实习临床检验(以血液学检验为主)六周，微生物检验六周，以提高专科领域的临床检验知识水平和技能。 学生在实习期间服从科室安排，在带教老师指导下工作，遵守工作流程和科室操作规范，参加科室值班，完成一定量的检验工作任务，做好工作记录，以及不擅自动用贵重仪器设备、采集标本和出具检验结果报告的要求，与专科学生一致。 每一轮转结束，由实习科室主管和带教老师负责，对学生进行一次出科考试，考核应掌握的理论知识和基本技能，并由本人写书面小结一份，由带教老师对实习生予以鉴定。 学生一进入实习单位，即应联系和聘请毕业论文书写指导老师。指导老师可以和实习带教老师为同一人，也可以另行聘请，但一般应是副高职及以上职称，或具备研究生学历的中级职称检验专业人员。毕业论文书写期间，学生应密切与指导老师保持联系，听取指导;毕业论文格式一般为论著，不申请学位时也可以是综述。毕业论文书写从进入实习单位起，为20周。