蛙心灌流论文答辩

那是为了保持灌流液的压力恒定，否则就不能说明心肌功能变化是因为压力还是因为药物。在实验过程中，斯氏插管内液面高度发生变化，心肌收缩曲线会相对液面的升高、降低发生变化。心肌收缩幅度和速度既受前负荷的影响，也受后负荷的制约，斯氏蛙心插管尖端位于心室腔内，插管内的液体与心室腔直接相通，插管液面高度所产生的压力在心室舒张末期是作用于心肌的前负荷，此前负荷决定了心肌在收缩之前的初长度。因此根据starling心肌定律，液面高度的变化将导致心肌收缩力的改变，心室开始收缩时，插管内液体产生的压力又成为心肌收缩时所承受的后负荷，后负荷改变会使心肌收缩的幅度和速度发生变化。液面过高，心肌收缩曲线幅度降低，过高的液面使心室前负荷超过最适前负荷，心肌收缩强度不再增强或下降，因此实验中选取一最适液面高度，并应保持这一液面高度，以便客观的比较某种因素对心肌收缩力的影响。别人那看的

(1)取一蟾蜍毁其脑和脊髓，仰位固定于蛙板上，暴露心脏的方法同实验9。(2)心脏插管 分支前的主动脉下穿一线并打一松结备用 ，左侧主动脉穿一根线并结扎之，用左手提起结扎线，右手用眼科剪在左侧主动脉距分叉部3mm处剪一“V”型口。将盛有少量任氏 液的蛙心套管(用拇指将套管堵住，以防套管中的任氏液流出)从“V”型口插入动脉球底部，然后稍后撤套管，再转向心室中央方向插入，可见液面随心搏升降即可。将分支前主动脉下的松结扎紧，并固定在套管的小突上。小心提起套管和心脏，剪断主动脉左右分支；结扎与静脉窦相连的后腔静脉，并在结扎线以下剪断，将心脏摘出。

蛙心灌流实验结果分析

1、用0．65％Nacl溶液灌注蛙心出现心跳减弱

心肌的收缩活动是由Ca2+排触发的，由于心肌细胞的肌浆网不发达，故心肌收缩的强弱与细胞外Ca2+浓度呈正比。用 0．65％NaCL溶液灌注心，由于灌注液中缺乏Ca2+，以致心肌细胞动作电位二期内流Ca2+减少。

胞浆Ca2+浓度减少，心肌的收缩活动也随之减弱。如果长时间用0．65％NaCL溶液灌流蛙心，心脏最终会停止收缩，但心肌仍能产生动作电位（即产生兴奋），这种现象称为兴奋一收缩脱耦联，是心肌细胞内缺少Ca2+后的表现。

2、用高K+任氏液灌注蛙心时，心跳减弱

用高K+任氏液灌注蛙心时，心跳明显减弱，甚至出现心脏停止于舒张状态的现象。因为细胞外K+浓度增高时K+与Ca2+有竞争性拮抗作用，K+可抑制细胞膜对Ca2+的转运，使进人细胞内Ca2+减少，心肌的兴奋一收缩耦联过程减弱心肌收缩力降低。

当细胞外K+浓度显著增高时，膜内外的K+浓度梯度减小，静息电位的绝对值过度减少，Na+通道失活，心肌的兴奋性完全丧失，心肌不能兴奋和收缩，停止于舒张状态。

3、滴加2％CaCL2后，离体蛙心收缩力增强

用高Ca2+任氏液灌注蛙心，可见蛙心收缩力增强，但舒张不完全，以致收缩基线上移。在Ca2+浓度较高的情况下，心脏会停止在收缩状态。这种现象称为“钙僵”。

心肌的舒缩活动与心肌肌浆中 Ca2+浓度高低有关。当Ca2+浓度升高至10-5M水平时，作为钙受体的肌钙蛋白结合了足够的Ca2+，这就引起肌钙蛋白分子构型的改变，从而触发肌丝滑行，肌纤维收缩。

当肌浆中Ca2+浓度降至10-7时，Ca2 任氏液灌注蛙心,使得肌浆中Ca2+浓度不断升高，Ca2+与肌钙蛋白结合数量不断增加，甚至达到只结合而不解离的程度，于时心肌将持续收缩，因而出现“钙僵”。

4、滴加肾上腺素后，蛙心收缩增强

向蛙心滴加肾上腺素后，可见蛙心收缩增强，心脏舒张完全，其机理为肾上腺素与心肌细胞膜的β受体结合，提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性导致肌浆中Ca2+浓度增高，使心肌改缩增强。

另外，肾上腺素还有降低肌钙蛋白与Ca2+亲和力，促使肌钙蛋白对Ca2+的释放速率增加；提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度，刺激Na+— Ca2+交换使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速。这样，将使心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显加强。