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GB/T一5530—2005规定了测定动植物油脂酸度的方法包括热乙醇测定法、冷溶剂测定法和电位滴定法，其中热乙醇测定法为参考标准法，冷溶剂法只适用于浅色油脂，电位滴定法是利用pH计判断滴定终点，然后根据滴定所需氢氧化钾的量计算油脂酸值。折叠滴定法（国标法）1、实验试剂及器材试剂（1）中性醇一醚混合液：取95%乙醇（CP）和乙醚（CP）按1：1等体积混合，然后在混合液中加入酚酞指示剂数滴，用0.1mol·L-1KOH溶液中和至红色。（2）1%酚酞指示剂：用70%～90%乙醇配制。（3）0.1mol·L-1KOH标准溶液。（4）油脂（猪油，豆油等即可）实验器材电子天平；25mL碱式滴定管；100mL三角烧瓶（锥形瓶）。2、实验操作准确称取油脂1g～5g于三角烧瓶中，另取一个三角烧瓶不加油脂作空白，在两个瓶中加人中性醇一醚混合溶液50mL，振摇溶解（固体脂肪需水浴溶化再加人混合溶液）或40℃水浴中溶化透明后加入酚酞指示剂1滴一2滴，用0.1mol·L-1KOH标准液滴定（KOH浓度视脂肪酸败程度而定）至淡红色，1min不褪色为终点，记录0.1mol·L-1KOH用量。3．计算酸价=c（V2--V1）X56.1∕m式中：c为标准KOH溶液浓度，mol·L-1；V2为样品消耗KOH溶液毫升数，V1为空白所用KOH溶液毫升数，ml。m为样品质量，g。56．1为1mol·L-1KOH1ml所含KOH毫克数，mg。4、注意事项（1）每个样品做两个平行样，结果以算术平均值计。酸价值在2．0mgKOH·g-1以下时，两个平等试样的相对偏差不得超过8%，为其他值时两个平行试样的相对偏差不得超过5%，否则重做。（2）测定蓖麻油的酸价时，只用中性乙醇不用混合溶剂。
最好带着。稻谷脂肪酸值测定实验最好是在整洁的试验环境下进行，以免其他因素干扰试验结果。所以最好带着手套。稻谷在储藏过程中会发生一系列变化，脂肪逐渐分解，产生有利脂肪酸，导致稻谷脂肪酸值上升，从而影响到其品质。稻谷脂肪酸值是判定稻谷是否宜存的重要指标之一。稻谷脂肪酸值测定方法有很多种，比如滴定法、反滴定法、电位滴定法等。
近日，央视一则关于植物奶油(又称氢化油)危害的报道，再次将反式脂肪酸推至风口浪尖。据了解，反式脂肪酸又称反式脂肪或逆态脂肪酸，是一种不饱和人造植物油脂，生活中常见的人造奶油、人造黄油都属于反式脂肪酸。制造反式脂肪酸的“氢化处理”过程可以防止分子被氧化，使液体油脂变成适合特殊用途的半固体油脂并延长保质期，因此受到许多糕点制造商的欢迎。 据报道，反式脂肪酸对人体有一系列副作用，更是造成糖尿病的元凶。清远消费者对它的了解又有多少呢？记者对此展开了调查。 市民对反式脂肪酸知之甚少 “氢化植物油？反式脂肪酸？没听说过。”市民小周由于工作较忙，经常错过正常吃饭时间，因此在他的办公桌抽屉里总是装满各种零食，如饼干、蛋黄派等，但是他从没有听说过植物奶油，每次“入货”时，也不怎么留意食物的配料表，顶多是看一下什么品牌或什么口味的。有时候加夜班，为了提神也会喝咖啡。“我经常喝咖啡，也不觉得有啥问题。” “小孩子喜欢吃饼干、薯条这些零食，一般都会储备一点这样的零食哄孩子。我不清楚什么是反式脂肪酸，只知道零食吃多了容易使人发胖，对牙齿也不好。”市民刘女士说， 记者发现，很多档次高低不一的蛋糕店大多有个相同之处：销售人员均宣称店里的蛋糕是真正的纯正奶油蛋糕。而这些蛋糕看起来确实细腻、美观，让人觉得胃口大开。 “大多数甜品店使用的奶油都是混合了植物奶油和动物奶油两种。动物奶油是由牛奶中的脂肪分离获得的，植物奶油是以大豆等植物油和水、盐、奶粉等加工而成的，也叫人造奶油。从口感上说，动物奶油口味更好一些，你到糕点店里闻到的那个香味多是来自这个东西。而植物奶油不含胆固醇，看起来好像比较健康。”一位有多年甜品制作经验的糕点师傅告诉记者。不过他私下里表示，听过植物奶油中含有反式脂肪酸，好像对身体不太好，至于不好在哪里，他也说不清楚。 在记者的随机采访中，大多数市民表示一般只会看产品的品牌和保质期，至于配料当中的那些所谓的“植物奶油”、“植脂末”则完全看不懂，也不在意，更不知道它们有什么危害。 一些人则认为植物奶油更好，是动物奶油脂肪含量太高而出现的替代品。 “植物”不等同于“健康” 据了解，氢化油可以说是健康的头号杀手，因为自然界很少有氢化油的存在，人类自古以来的食物里也几乎没有这种东西。由于反式脂肪酸在我们身体里是完全不被接受的，所以会导致体内生理功能出现多重障碍。 “其实，‘植物’的不一定就是健康的。”广州中山大学孙逸仙纪念医院临床营养科主任陈超刚对媒体表示，植物油加氢可将不饱和脂肪酸转变成室温下更稳定的固态反式脂肪酸，这种反式脂肪酸对人体的危害比饱和脂肪酸更大。 人体每天所需的脂肪总量是固定的，除了不饱和脂肪酸，还有饱和脂肪酸，但是每天所需的总量有限，过多摄入不饱和脂肪酸，容易造成肥胖、心血管疾病的发生。 营养学专家指出，所谓的“植物黄油”和“人造奶油”、“人造黄油”、“人造脂肪”等，其实都是氢化植物油。“除了含一定量的反式脂肪酸，氢化植物油中还含有非常多的饱和脂肪酸，虽然还带着‘植物’两个字，但它比猪油所含的饱和脂肪酸还多！” 根据有关研究，反式脂肪酸对人体健康的影响一般有：降低记忆力；发胖；引发冠心病，形成血栓；影响男性生育能力；影响生长发育期的青少年对必需脂肪酸的吸收，会对青少年中枢神经系统的生长发育造成不良影响。 反式脂肪酸广泛存在 除了植脂末、氢化植物油之外，不少食品的成分表中标注含有“精炼植物油”、“植物奶油”等成分，其实这些油脂中都含有氢化油。换句话说，这些食品中都含有反式脂肪酸。 据了解，真正的奶油是以全脂鲜奶为原料的，但记者在一家蛋糕店看到，该店使用的人造奶油的外包装上显示，其配料主要为水、白砂糖、精炼玉米油、氢化棕榈油等，没有一点奶的成分。 一位有多年甜品制作经验的糕点师傅告诉记者，糕点行业内制作蛋糕用的“奶油”其实很少采用纯正奶油。因为纯奶油较难成型，放在冰箱里两个小时就会溶化，没法保存；而大家购买的奶油蛋糕大都质地松软，口感细腻，间隙小，有“卖相”，还可以冷藏两三天。“现在大多数甜品店里用的奶油都是混合了植物奶油的。” 植脂奶油”的主要成分是氢化植物油脂，再加上乳化剂、稳定剂、蛋白质、糖、食盐、色素、水、香精等辅料制成。这种“植物奶油”有着非常好的口感，高档植脂奶油可以做到入口即化，而且不容易变质。很多糕饼企业买来用在生日蛋糕、面包夹心等食品里。 夹心饼干、薯片、早餐麦片、方便面、方便汤、蛋黄派、多纳圈、巧克力、咖啡伴侣、沙拉酱、冰淇淋、速冻汤圆、糖果、色拉……在清远各大超市的食品货架上，到处可见含有“氢化植物油”、“植脂末”等成分的食品。 记者在超市看到，不少袋装甜点中，虽然没有写含有“植物奶油”或者“植脂末”，但是，却标注含类似“精炼植物油”或者“起酥油”。一位业内人士告诉记者，这些听起来好像食用油的物质其实多是由氢化棕榈油、氢化大豆油、氢化椰子油等物质组成，而这些均是“氢化油”的不同叫法，甚至不少被简单写成“奶油”的成分，也很有可能就是“氢化油”。 据广州媒体报道，在同一间超市里，95种饼干里有36种含人造脂肪，51种蛋糕点心里有19种含人造脂肪，16种咖啡伴侣全部含人造脂肪，31种麦片里有22种含人造脂肪。 有关媒体报道，2005年至2009年，一项中国食品油脂含量、反式脂肪酸种类含量的调查显示，抽检食品中87%的样品含有反式脂肪酸。包括所有的奶酪制品；95%的“洋快餐”、蛋糕、面包、油炸薯条类小吃等；约90%的冰激凌以及80%的人造奶油、71%的饼干。 另外，有专业人士指出，自然界也存在反式脂肪酸，当不饱和脂肪酸被反刍动物(如牛)消化时，脂肪酸在动物瘤胃中被细菌部分氢化。牛奶、乳制品、牛肉和羊肉的脂肪中都能发现反式脂肪酸，占2%—9%。鸡和猪也通过饲料吸收反式脂肪酸，反式脂肪酸因此进入猪肉和家禽产品中。 “物美价廉”惹的祸 “很多人会有这样的感觉，脱脂牛奶比起全脂牛奶，口感、香味都差远了，这就是脂肪在起作用。”从事食品安全检测工作的赵明说，添加了脂肪之后，食物的香味更加扑鼻，口感也更好，这是面包、饼干、奶茶、冰激凌等中都会添加脂肪的原因，植物奶油就是一种反式脂肪。 植物奶油最初是用来代替价格比较昂贵的动物奶油的。和动物奶油不太一样的是，植物油脂是一种液体，所以要通过氢化处理改变植物油脂性质，使之成为固体或半固体，方便运输与加工。与植物奶油类似，咖啡伴侣中的“植脂末”也是因为有相同的加工需要。 而薯条、薯片中含有的氢化油则是从另外一种渠道产生的。“植物油脂中含有不饱和脂肪，这是一种不稳定的物质，在高温的环境下会产生变性，形成有害于人体健康的反式脂肪，所以薯条、薯片中的氢化油更多的是在加工过程中产生的。” 为什么众多的商家都选择使用这种含有大量反式脂肪酸的“植物奶油”呢？采访中，多位业内人士向记者透露，“植物奶油”的低成本是关键。“植物奶油比鲜奶油的成本低。”一位不愿意透露姓名的食品企业采购人员在回答记者的疑问时说，“一箱植物奶油只需要100多元，可以制作出十几个或几十个蛋糕，而同样的一箱淡牛奶就需要花几百元。如果将这个差价乘以几千几万再乘以年数，你想想看，那就是一个庞大的数字了。” 面包、蛋糕、饼干、奶茶、薯条、薯片、冰激凌、咖啡……不知不觉中，植物油脂偷偷“占领”了我们的胃。为什么“遍地”都是植物奶油？归纳起来主要有三个原因，一是口感好，二是加工的需要，三是价格低廉。 继续阅读： 第21/212>页 请参见wiki版：警惕健康杀手反式脂肪酸 鉴别要看食品成分 分享这篇文章到： QQ空间 新浪微博 百度搜藏 开心网 人人网 G书签 搜狐白 TAG: 反式脂肪酸 植物奶油 鉴别 饱和脂肪酸 更多内容参见专题： >NO.43 Antpedia 一周新闻快讯（2010.11.22~2010.11.28） >反式脂肪酸——食品安全的隐患 其它网友还关注过： 反式脂肪酸危害多 部分国家已禁用 美味背后 反式脂肪酸的“罪与罚” 反式脂肪酸甲酯混标(13组分，C14-C22) 标准品促销 粮油食品中反式脂肪酸的检测分析方法通过验收 植物奶油含反式脂肪酸虽被曝光 美味依旧难挡 反式脂肪酸是营养问题 而不是食品安全问题 过量食用反式脂肪酸危害健康 如何科学对待 部分食品品牌“降反” 防“反”要看配料表 “植物奶油危机”：饼干和奶茶是“重灾区自己缩减
给孩子买小零食，发现好多知名品牌都有精炼植物油。比如现在手这的米多奇的香米饼。 以前自己吃零食，喜欢粗粮、坚果类，健康。但现在发现要想健康，还要仔细地看食品的成分。 但一看，多多少少地都难以让人信任。比如这个植物油。到底是什么？以前看过，觉得不够健康。现在一查，还是要小心些，尽量避开这些东东。 我们大家平常非常喜欢吃的奶油蛋糕、饼干、油酥饼、油炸干吃面、炸面包圈、薯片、巧克力、色拉酱、汉堡、炸薯条、炸鸡块、爆米花等美食，都含有精炼植物油。有的厂家会在包装上明确标出使用了精炼植物油，而很多厂家根本就不标明成分。要知道，精炼植物油里藏有许多反式脂肪酸，这对人体是非常不利的。 精炼会产生反式脂肪酸 美国麦当劳“薯条反式脂肪酸含量增加事件”发生后，反式脂肪酸对人体健康的危害已成为人们关注的焦点。过去人们曾认为饱和脂肪酸是身体健康的大敌，精炼植物油才能保障健康，其实食品中的反式脂肪酸比饱和脂肪酸的危害更大。 最新医学报告指出，反式脂肪酸和饱和脂肪酸一样，都会提高人体胆固醇含量，特别是低密度脂蛋白胆固醇含量。大量摄入可能会引发心血管疾病、胆囊疾病、Ⅱ型糖尿病、老年痴呆症、癌症（如结肠癌、前列腺癌、乳腺癌）等，还会抑制胎儿和幼儿的生长发育、危害男性生殖功能。而且反式脂肪不容易代谢，通常要50多天才能被代谢出体外。 反式脂肪酸是在植物油精炼加工过程中产生的。天然植物油如大豆油、菜籽油等，都是顺式结构的脂肪酸，因其不饱和程度较高，稳定性较差，容易发生氧化、酸败，不易长期保存和储存，故需进行部分氢化加工，以脱除植物油的异味及游离脂肪酸、醛、酮类等有害物质，以改善植物油的品质。但在精炼过程中，通常要在250℃以上高温处理，此过程会产生一定数量的反式脂肪酸。 另外，烹调时过高的油温或反复煎炸也会生成少量反式脂肪酸。 抵制口感的诱惑 氢化后的油脂呈固态或半固态，使食物口感更酥松，这也就是为什么人们普遍觉得一些酥化、松脆的食物特别香、特别可口的原因。人造黄油、煎炸油、起酥油等均属于氢化油脂，它们中的反式脂肪酸含量一般在5~45%之间，最高可达65%。据统计，美国人日常膳食用于烹饪和加工的植物油中80~90%的反式脂肪酸源于植物油的氢化。 要想真正减少反式脂肪酸对人们健康的损害，应该在膳食上减少反式脂肪酸的摄入量，特别是孕妇和乳母，其每天摄入量应低于2g。要避免和减少食用富含反式脂肪酸的各种奶油糕点、油炸小食等，尽量避免高温炒菜或是油炸烹调。 要呼吁人们少吃快餐及高油脂的甜点，尤其是那些经常给孩子买起酥面包、酥脆点心和洋快餐的家长，一定要警惕。 提醒：在超市选购食品时，不妨多留意以下标识： 凡成分中有精炼植物油、氢化植物油、半氢化植物油、人造黄（奶）油、鲜奶奶油、人造植物黄（奶）油、人造脂肪、起酥油或植脂末等字眼，就表示有反式脂肪酸，应尽量少选择这类产品。 结论：食品用油中的橄榄油、核桃油、葵花籽油、棕榈油或玉米油等及氢化程度较低的油中不含或少含反式脂肪酸，可放心食用。但用油量要控制，每天25克左右。 最后补充一点，你可能会在一些食物的配料表里发现有反式脂肪酸的面孔，但是在营养成分表里却写得反式脂肪酸含量为0，这时，你千万不要以为这个食物不含反式脂肪，因为不含反式脂肪酸的全氢化植物油或植脂末等，一定会在配料表里或显眼的位置就告诉你，它不含反式脂肪酸。而像我所说的那种情况是因为我国在2011年10月份发布了国标GB28050- 2011《预包装食品营养标签通则》，其中规定如果食品中的反式脂肪含量低于0.3g/100g的话，就可以标注为0。所以食物中“不含反式脂肪”和“反式脂肪酸的标注为0”，也要区分开来。 曾获得诺贝尔奖的反式脂肪酸到底是啥？为什么这么令人深恶痛绝？ 2018-07-29 20:32 大家可能经常听到“反式脂肪酸”这个词，摄入过多脂肪肯定是不好的，“反式脂肪酸”近些年更是像毒药一样人人喊打。 2013年美国FDA将“不完全氢化植物油”（最常见的人造反式脂肪酸）移出“一般认为安全”。 2018年5月14日，世界卫生组织宣布，计划在未来5年在世界范围内，全面消除食物中的人造反式脂肪。 反式脂肪，又称为反式脂肪酸，天然的牛乳、人乳都含有这种成分。 不过我们最关注的是人造反式脂肪酸，它主要是脂肪酸经氢化过后的产物，多见于氢化植物油，如人造黄油、代可可脂等。 采用氢化植物油的食物口感更佳，保持期也更长，因此这一技术被广泛用于食品生产、加工过程。 你可能不知道的是，人造反式脂肪酸还有过一段“辉煌”的历史。 欧美人烹饪习惯偏向使用猪油、牛油等固体动物油脂。但后来随着一段时间的物价上涨，原本供应量就不大的动物油脂价格更是水涨船高。 为了寻找价格低廉的固体油脂，商人们把目光移向了大豆。大豆在很长一段时间都是美国主要蛋白质来源，而且 大豆还有个重要的产物——大豆油。 然而欧美人并不喜欢这种液体油脂，于是科学家研究出植物油加氢技术。 方法是在少量的镍、钯、铂或钴等触媒金属的帮助下，将氢加入植物油里产生氢化反应。从而 提高了饱和脂肪酸在植物油中的比重，让植物油可以像动物油一样在常温中变成固体。 而反式脂肪酸，便是这个氢化反应的副产物。 1890年，化学家保罗·萨巴捷率先发明了 氢化技术 ，并因此获得了诺贝尔化学奖。 到了1901年，德国化学家威廉·诺曼则首次发现氢化技术可以将液态的植物油变成固体。 直到1909年，日化巨头宝洁公司买下该专利的使用权，并且开始了疯狂的广告、电视节目轮番轰炸。 再后来其他看到氢化植物油商业价值的巨头们也纷纷加入竞争的行列。 到1957年，人造黄油的销量终于首次超越了天然黄油。 从此这种廉价的固体的植物油真正走进千家万户，成了颠覆传统食品行业概念的产品。 更加如有神助的是当欧美的商人都在疯狂推销人造黄油的时候，美国的心血管疾病发病率逐年上升。 经过美国心脏协会等权威机构认定，动物脂肪中大量的饱和脂肪酸是罪魁祸首。 于是作为不饱和脂肪酸一员的氢化植物油顺理成章的免费加上了一个“健康”的标签。 原来广告中吹牛的“植物更健康”竟然出乎意料的有了权威认定。 本来只是“废物利用”的人造黄油竟然还比天然黄油更健康了。 于是1958年，美国国会也通过了《食品添加剂法案》。 “不完全氢化植物油”也被列入 “一般认为安全” 的清单。 这个“一般认为安全”的概念就是日常饮食中可以放心添加，基本不会危害健康。 食品加工业对于不完全氢化植物油的添加量甚至不需要经过审查。 但幸运的是始终有科学家对反之脂肪酸的安全性抱有怀疑。 一名叫费雷德·库默罗的心血管疾病专家，怀疑 造成血栓、动脉硬化的罪魁祸首，是人工生产出来的反式脂肪酸，而不是普通脂肪。 在几年的小鼠实验中，他就发现喂食人造反式脂肪的老鼠会发生了动脉粥样硬化。 而停止喂食人造反式脂肪一段时间后，动脉粥样硬化便又会消失。 于是早在1957年，他便发表了相关研究论文指出，氢化植物油会导致人体内的胆固醇升高，可能会导致冠心病。可惜当时并没有引起重视。 直到20世界80年代，才出现了对反式脂肪酸引起心血管疾病的“实锤”。 哈佛大学的威利特等，花了8 年的时间，调查饮食中的反式脂肪对10 万名妇女健康的影响。 他们发现， 反式脂肪可以让冠状动脉疾病风险增加50%。 2006年，更有一篇论文汇总分析了目前所有有关反式脂肪酸的研究。 得出“反式脂肪在膳食总能量中的比例每上升2%（相当于每天吃4克），会显著增加冠心病的风险”的结论。 再后来越来越多的研究成果证实了反式脂肪酸对健康的危害。 到了2008年，美国已经基本全面禁止餐饮业添加任何反式脂肪酸。 不过幸运的是由于中国的饮食习惯，反式脂肪酸摄入量远低于欧美国家。毕竟一般的家庭很少见使用固体油脂的习惯。 但要注意的是， 虽然平均摄入量少，但每个人的饮食习惯不同。有很多人都偏好含有反式脂肪酸的食物。 例如 “植脂末”、“奶精”、“植物奶油”、“人造奶油”、“代可可脂” 等等成分都需要引起注意。 此外，我国对反式脂肪含量的管理标准是：100克或100毫升食物中反式脂肪含量低于0.3克即可标示为“0”。 也就是说， 市面上一些标注着“零反式脂肪”的食物也不是完全可以放心大胆的吃。 学会认识一些食品成分表，是避免踩入狡猾商家陷阱的第一步。表 1 ：常见植物油中的反式脂肪酸含量（ g/100g ） 油脂种类及品牌 食品名称 反式脂肪酸含量（g/100g）* 大豆油 1号**精炼一级大豆油1.94 2号一级大豆油0.37 玉米油 1号植物甾醇玉米油1.10 2号压榨玉米油1.06 调和油 1号食用调和油1.01 2号食用植物调和油0.76 花生油 3号一级花生油0.50 葵花籽油 2号压榨葵花籽油0.62 橄榄油 4号特级初榨橄榄油0.11 黄油 5号含盐黄油3.11 6号植物黄油0.90 动物油脂类 猪油2.27 牛油7.22 奶油4.43 氢化植物油 氢化豆油45.31 氢化棕榈油9.28 氢化软棕榈油16.59 * 检验方法为AOCS Ce 1f-96。 ** 代表产品的不同品牌。下同。 由上述结果可见，除了橄榄油外，其余所有油脂（以每100克计）的反式脂肪酸含量都超过0.3克。氢化后的植物油中反式脂肪酸含量更高，如氢化豆油达到了45.31g/100g。氢化后的油脂虽然不会直接用来烹调，但作为一些包装食品的原料，会经常出现在各类食品中，值得引起关注。植物油也含有少量的反式脂肪酸，油脂加工工艺是导致反式脂肪酸含量差异的主要原因。压榨花生油的工艺条件较温和，仅存在少量的反式脂肪酸，而大豆油、玉米油、调和油通常进行高温脱臭，故其反式脂肪酸含量明显高于前者。另外，不同品牌的植物油中反式脂肪酸的含量也有一定差异。 3.2 饼干、糕点类反式脂肪酸含量 休闲食品已经成为人们闲暇生活不可或缺的一部分。对7种常见品牌中的19种产品，其中包括两种现制现售品牌的产品中脂肪含量较高的蛋黄派、巧克力派、小熊饼、糕点产品进行分析测定后发现，这些食品中均大都含有反式脂肪酸，有的含量较高，值得引起消费者的注意。详细结果如表2所示。 表 2 ：常见休闲食品中的反式脂肪酸含量（ g/100g ） 品牌 食品名称 配料中油脂名称 反式脂肪酸含量 11 号 小熊饼植物起酥油5.45 巧克力派-沙沙（巧克力注心饼）代可可脂、植物起酥油3.64 麦淇酪夹心（涂饰蛋类芯饼）植物起酥油、代可可脂3.14 12 号 巧克力味涂饰蛋类芯饼起酥油、氢化植物油3.64 注心蛋黄派起酥油、氢化植物油3.01 巧克力味注心蛋糕起酥油、氢化植物油0.86 13 号 巧克力（代可可脂）香橙味夹心饼干代可可脂（氢化）0.66 14 号 牛角面包氢化植物油0.09 巧克力小圈氢化植物油2.01 15 号 柚子布丁蛋糕3.87 咸味起酥点心0.62 16 号 牛角酥面包2.26 奶油蛋糕未测出 蛋挞0.65 原味奶酪蛋糕0.79 17 号 蓝莓奶酪三角派0.11 巧克力三角派0.16 南瓜三角派0.21 酥片油0.63 3.3 快餐食品中的反式脂肪酸含量 国外资料显示，洋快餐食品(薯条、炸鸡)和中国传统油炸食品油条中反式脂肪酸含量与油炸时间和煎炸油反复使用的周期有关。煎炸时间煎炸油反复使用的周期越长，反式脂肪酸的含量越高。本次实验同时采集了西方快餐代表品牌和部分速冻产品样品，具体检测结果见表3。 表 3 快餐食品中的反式脂肪酸含量（ g/100g ） 品牌 食品名称 反式脂肪酸含量 21 号 炸鸡翅0.12 炸鸡腿0.11 22 号 鳕鱼条0.16 油条0.09 薯条0.08 23 号 品牌油条0.06 24 号 素三鲜水饺未测出 白菜三鲜水饺未测出 芹菜三鲜水饺未测出 韭菜三鲜水饺未测出 荠菜三鲜水饺未测出 青菜猪肉水饺未测出 白菜猪肉水饺未测出 3.4 常用饮品中的反式脂肪酸含量 咖啡、奶茶等饮品是目前含脂肪类似物较高的饮品。试验调查分析了具有代表性5个品牌的产品，检测饮品中固体成分的反式脂肪酸含量。具体反式脂肪酸含量如表4。 表 4 常见饮品中的反式脂肪酸含量（ g/100g ） 品牌 食品名称 配料中油脂声称 反式脂肪酸含量 31号奶茶-（香浓原味）氢化植物油0.21 32号奶茶（巧克力味）氢化大豆油3.42 33号咖啡伴侣--植脂末食用氢化植物油 0.04 （重测） 34号咖啡奶末食用氢化植物油 未测出（重测） 35号小摊奶茶4.65 3.5 芝士、糖果和调味酱 芝士、糖果和调味酱的消费量也在逐年增高，试验调查分析了具有代表性6个品牌的产品，检测这类产品中的反式脂肪酸含量。具体反式脂肪酸含量如表5。 表 5 常见芝士、糖果和调味酱中的反式脂肪酸含量（ g/100g ） 品牌 食品名称 配料中油脂声称 反式脂肪酸含量 芝士片 41号原味香浓奶味黄油0.54 42号原味芝士片黄油0.52 糖果 43号牛奶巧克力夹心太妃糖氢化植物油、代可可脂0.79 44号代可可脂巧克力氢化植物油0.15 沙拉酱 45号沙拉酱植物油0.05 46号巧克力花生酱氢化植物油0.03
查重不过是对比一般每个数据库有不同的标准，比如连续多少个字相同就算，但是你用自己的话说出了别人的意思，只要字顺序不一样，是查不出来的
为增加货架期和产品稳定性而添加氢化油的产品中都可以发现反式脂肪酸。包括薄脆饼干、焙烤食品、谷类食品、面包、快餐如法国油炸食物、炸鱼、洋葱圈、人造黄油,也包括方便面。
1 感官检验 1.1 色泽和组织状态：取适量式样于50ml烧杯中，在自然光下观察色泽和组织状态 1.2 滋味和气味：取牛乳50ml于250ml三角瓶中置电炉上煮沸，冷却至70-80℃，保持瓶口与鼻子之间的距离在10cm左右，用手煽动瓶口上方的气体，使空气吸向自己，闻其气味。冷却至25℃时，用温水漱口，品尝其滋味。
2 理化检验
2.1 全脂乳固体 2.1.1 仲裁检验按GB 5409中规定的方法 2.1.2 验收检验按本标准4.2.1.2.1～4.2.1.2.2进行 2.1.1.1 仪器：FT120型（或S50型）全组份分析仪、50ml烧杯 2.1.2.2 方法:取约40ml、20～40℃经过滤、混匀的牛乳样品于烧杯中，将烧杯放在全组份分析仪的吸样管下，选择相应的检测程序，按检测键，待电脑显示屏出现检测结果时，即可读数。
2.2 脂肪：按GB/T 5413.3检验。取样量为10克。
2.3 蛋白质：按GB/T 5413.1检验。取样量为4克。
2.4 酸度：按GB/T 5409检验。
2.5 杂质度：按GB/T5413.30检验。
2.6 乳糖：按GB/T5413.5检验 2.7牛奶温度：取样后，立即将校准过的温度计插入样品中，待温度计温度不再变化时（一般为1分钟左右），读取读数。
3 卫生检验 3.1 抗生素：按GB/T 4789.27检验。
3.2 六六六、滴滴涕：按GB/T 5009.19检验。
3.3 黄曲霉毒素：按GB/T 5009.24检验。
3.4 铅：按GB/T 5009.12检验。
3.5 汞：按GB/T 5009.17检验。
3.6 无机砷：按GB/T 5009.11检验。
3.7 锡：按GB/T 5009.16检验。
3.8 铬：按GB 14962检验。 3.9 马拉硫磷：按GB/T5009.36检验。
3.10 倍硫磷：按GB/T5009.20检验。
3.11 甲胺磷：按GB/T14876检验。 3.12 菌落总数：按GB/T 4789.2、GB/T4789.18检验；平板法按3M Petrifilm细菌总数检测法检验
3.13 耐热芽孢 3.13.1仪器和材料:生化培养箱(36℃±1℃)、高压蒸汽灭菌锅、恒温水浴锅（46℃±1℃）、天平、电炉吸管（1ml和10ml，标有0.1ml单位的刻度）、三角瓶（容量为250ml、300ml）、平皿（皿底直径为9cm ）、试管（15mm×150mm）、酒精灯、试管架、试管筐、灭菌刀或剪刀、灭菌镊子、酒精棉球、记号笔、白瓷缸(用于煮开水)、温度计（1℃～100℃）、超净工作台
3.13.2培养基和试剂 3.13.2.1营养琼脂培养基：营养琼脂按说明分装于300ml三角瓶中，高压灭菌（121℃、15分钟）。
3.13.2.2生理盐水：8.5g氯化钠溶于1000ml蒸馏水中，分装、高压灭菌（121℃、15分钟～20分钟）。
3.13.3方法 3.13.3.1 用10ml灭菌吸管吸取5ml乳样加入灭菌试管中。
3.13.3.2 在另一支试管中加入与乳样等量的水。
3.13.3.3在装水的试管中插一根温度计。 3.13.3.4 将装有乳样和水的试管同时放入热水中(在电炉上用白瓷缸把水煮至有小气泡时)。
3.13.3.5 直至“装水试管”的温度达到80℃，计时，保温10分钟。
3.13.3.6 10分钟后，取出试管，用冷却水冷却奶样至室温。 3.13.3.7 用1ml灭菌吸管分别吸1ml冷却后混匀的乳样于两个灭菌平皿中。 3.13.3.8 及时将凉至46℃的营养琼脂注入平皿约15ml，并转动平皿使之混匀；同时做环境对照试验。
3.13.3.9 待营养琼脂凝固后，翻转平板。置于36℃±1℃的培养箱内培养72h±2h，取出计数（同菌落总数测定计数方法）。
3.14 耐热芽孢的测定 3.14.1设备和材料:生化培养箱(55℃±1℃)、高压蒸汽灭菌锅、恒温水浴锅（46℃±1℃）、天平、电炉、吸管（1ml和10ml，标有0.1ml单位的刻度）、三角瓶、平皿（皿底直径为9cm ）、试管（15×150mm）、酒精灯、试管架、试管筐、灭菌刀或剪刀、灭菌镊子、酒精棉球、记号笔、白瓷缸(用于煮开水)、温度计（1-100℃）、超净工作台
3.14.2 培养基和试剂 3.14.2.1 营养琼脂培养基：营养琼脂按说明制备、分装于300ml三角瓶中，高压灭菌（121℃、15分钟）。
3.14.2.2 生理盐水：8.5g氯化钠溶于1000ml蒸馏水中，分装后高压灭菌121℃、15分钟。 4.3.14.3 方法 3.14.3.1 用10ml灭菌吸管吸取5ml乳样加入灭菌试管中。
3.14.3.2 在另一支试管中加入与乳样等量的水。
3.14.3.3 在装水的试管中插一根温度计。 3.14.3.4 将装有乳样和水的试管同时放入沸水浴中(在电炉上用白瓷缸把水煮沸，并保持沸腾)。
3.14.3.5 直至“装水试管”的温度达到100℃，计时10分钟（如果水不到100℃就沸腾，则等候时间需延长；或在水中加入盐以提高沸点温度，但要避免奶样沸腾）。
3.14.3.6 10分钟后，取出试管，用冷水冷却乳样至室温。 3.14.3.7 用1ml灭菌吸管分别吸1ml冷却后混匀的乳样于两个灭菌平皿中。 3.14.3.8 及时将凉至46℃的营养琼脂注入平皿约15ml，并转动平皿使之混匀；同时做环境对照试验。
3.14.3.9 待营养琼脂凝固后，翻转平板。置于55℃±1℃的培养箱内培养72h±2h，取出计数（同细菌菌落测定计数方法）。 3.15 嗜冷菌：按IDF101A：1991检验。
4 掺假
4.1 掺碱的检出 4.1.1仲裁按GB/T 5409中2.8检验。 4.1.2 验收检验按本标准中4.1.2.1～4.1.2.4进行 4.1.2.1 原理：鲜奶中如掺碱，可使指示剂变色，根据颜色的不同，粗略判断加碱量的多少。
4.1.2.2 试剂配制：玫瑰红酸（0.05%乙醇溶液）：称取0.05g玫瑰红酸溶于100ml 95%的乙醇中。
4.1.2.3 检验方法：于盛有2ml牛乳的试管中加入2ml玫瑰红酸溶液，摇匀，观察颜色变化。
4.1.2.4 结果判定：
1原理样品用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后，蒸去溶剂所得的物质，在食品分析上称为脂肪或粗脂肪。因为除脂肪外，还含色素及挥发油、蜡、树脂等物。抽提法所测得的脂肪为游离脂肪。2 试剂2.1无水乙醚或石油醚。2.2 海砂:食品中水分的测定3仪器索氏提取器。4操作方法4.1样品处理4.1.1固体样品：精密称取2～5g(可取测定水分后的样品)，必要时拌以海砂，全部移入滤纸筒内。4.1.2 液体或半固体样品：称取5.0～10.0g，置于蒸发皿中，加入海砂约20g于沸水浴上蒸干后，再于95～105℃干燥，研细，全部移入滤纸筒内。蒸发皿及附有样品的玻棒，均用沾有乙醚的脱脂棉擦净，并将棉花放入滤纸筒内。4.2抽提将滤纸筒放入脂肪抽提器的抽提筒内，连接已干燥至恒量的接受瓶，由抽提器冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处，于水浴上加热，使乙醚或石油醚不断回流提取，一般抽取6～12h。4.3 称量取下接受瓶，回收乙醚或石油醚，待接受瓶内乙醚剩1～2mL时在水浴上蒸干，再于，95～105℃干燥2h，放干燥器内冷却0.5h后称量。4.4计算m1-m0X = ─────── × 100m2式中，X--样品中脂肪的含量，%；m1--接受瓶和脂肪的质量，g;m0--接受瓶的质量，g;m2--样品的质量(如是测定水分后的样品，按测定水分前的质量计)，g。 1原理样品经酸水解后用乙醚提取，除去溶剂即得游离及结合脂肪总量。2试剂2.1盐酸2.2 95%乙醇。2.3 乙醚。2.4 石油醚。3仪器100mL具塞刻度量筒。4操作方法4.1样品处理4.1.1固体样品：精密称取约2g，置于50mL大试管内，加8mL水，混匀后再加10mL盐酸。4.1.2 液体样品：称取10.0g，置于50mL大试管内，加10mL盐酸。4.2将试管放入70～80℃水浴中，每隔5～10min以玻璃棒搅拌一次，至样品消化完全为止，约40～50min。4.3取出试管，加入10mL乙醇，混合。冷却后将混合物移于100mL具塞量筒中，以25mL乙醚分次洗试管，一并倒入量筒中。待乙醚全部倒入量筒后，加塞振摇1min，小心开塞，放出气体，再塞好，静置12min，小心开塞，并用石油醚-乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10～20min，待上部液体清晰，吸出上清液于已恒量的锥形瓶内，再加5mL乙醚于具塞量筒内，振摇，静置后，仍将上层乙醚吸出，放入原锥形瓶内。将锥形瓶置水浴上蒸干，置95～l05℃烘箱中干燥2h，取出放干燥器内冷却0.5h后称量。4.4计算 1、原理：（1）在牛奶中加入氨水（浓氨水）破坏牛奶中蛋白质的胶体性质，使乳中酪蛋白钙盐生成可溶性的氨盐。（2）加入 95%乙醇使乳中脂类与非脂类分离。（3）加入乙醚抽取脂类。（4）加入石油醚除去乙醚中包容的水分。（5)到出醚层，挥发除去乙醚、石油醚；剩下的脂肪即为牛奶中的脂肪。2、检测步骤：（1） 用电子天平精确称取 10g均匀牛奶样（奶粉1克用 9毫升蒸馏水溶解分次洗于）于毛氏抽脂瓶中.（2） 加入 2ml 浓氨水，充分混匀。（3） 加入 10ml95%乙醇，加入 2滴刚果红，充分混匀。（4） 加入 25ml 乙醚，振摇 1分钟，100次/1分钟，振摇过程中要放气 1-2次，用混合液洗瓶塞。（5） 加入 25ml 石油醚，振摇半分钟，振摇过程中放气 1-2次，用混合液洗瓶塞后静置半小时。（6） 小心地将静置后的醚层倒入三角瓶（洗净、烘干 1.5小时后，天平室内无尘，自然冷却 1小时，称重m1 ）中，并用混合试剂洗瓶颈。（7） 再向毛氏抽脂瓶中加入 5ml乙醇，充分摇匀。（8） 加入 15ml 乙醚，振摇 100次/1分钟，用混合试剂洗瓶塞。加入15ml石油醚振摇半分钟，用混合试剂洗瓶塞，静置半小时。（9） 将静置后的醚层再倒入三角瓶中，并用混合试剂洗瓶颈。（10） 将两次抽提的醚液（在三角瓶内），于 30-60℃，水浴锅中，在通风橱里挥发除去乙醚、石油醚。（11） 将剩有脂肪的三角瓶放 98-100℃烘箱中烘 1.5小时，至恒重，取出在天平室内无尘自然冷却 1小时后称重m2.3、计算：m2-m1脂肪含量%=---------×100M式中：m2——脂肪和空三角瓶重(g)m1——空三角瓶重(g)M——称取牛奶质量(g)FT120测定（略）苏丹三鉴定法（1）把材料用切片机切成1MM的小薄片，并移至洁净的载玻片上（2）用滴管滴加2~3滴苏丹三染液，染色2~3min后用吸水纸吸去染液并滴加1~2滴50%的酒精洗去浮色再吸去酒精（3）滴加1~2滴蒸馏水后盖上盖玻片在显微镜下观察（4）橘黄色的小颗粒即为脂肪应用于脂肪测定的新技术：超微滤袋技术由于滤袋技术（Filter Bag Technology，FBT）用于批量分析饲料中的纤维含量的推广，使ANKOM Technology闻名于世。早在1993年ANKOM纤维分析仪就已经被世界各地广泛应用于准确测定酸性洗涤纤维（Acid Detergent Fiber, ADF），中性洗涤纤维（Neutral Detergent Fiber， NDF）和粗纤维（Crude Fiber， CF）。基于在纤维分析方面已获得的经验，ANKOM Technology新近又开发了一项快速批抽提脂肪技术（Accelerated Batch Extraction, ABE）。ANKOM 脂肪分析仪是采用ANKOM技术开发的一项使用普通溶剂快速抽提食品和饲料脂肪的新技术而研制成的。
⑴ 供给热能。脂肪是产热最高的一种能源物质，是蛋白质和碳水化合物的2．25倍。 ⑵ 构成身体组织，如磷脂、胆固醇等类脂质是构成细胞的重要成分。 ⑶ 供给必需的脂肪酸。亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸在体内不能合成，必须由食物供给。而必需脂肪酸对脑细胞的发达和神经纤维髓鞘的形成，维持皮肤和毛细血管的健康，促进生长发育等十分重要的作用。 ⑷ 促进脂溶性维生素A、D、E、K的吸收，有些脂肪如鱼肝油本身就含有丰富的维生素A、D。⑸ 维持体温和保护脏器。 ⑹ 提高膳食的味道，增进食欲。 植物油及海产鱼类是必需脂肪酸的良好来源，动物脂肪中必需脂肪酸的含量相对较少。如猪油含亚油酸仅8．3％，而豆油中却含有52．2％。关于人体对必需脂肪酸的需要量，专家们意见不一。一般认为应占全日总热量的2％。婴幼儿需求量大于成年人，应相当于总热能的3％，亦即一个6个月的婴儿如每日摄入热能600KcaL，则需必需脂肪酸2克。这个需求量在以植物油为主要烹调用油的人群中，一般是能满足的，因此，必需脂肪酸的缺乏病极少。按脂肪的来源，一般可分为动物脂肪和植物脂肪，这两者都可食用，但究竟哪种脂肪营养价值高呢？ 应从以下几方面考虑： （1）不饱和脂肪酸的含量。一般来说，植物脂肪（素油）中不饱和脂肪酸的含量较高。 （2）脂溶性维生素的含量。动物脂肪（荤油）中维生素A、D、K、E的含量相对较高。 （3）消化率。植物脂肪含人体必需的脂肪酸较多，容易消化吸收。 （4）贮存性。植物脂肪中多含不饱和脂肪酸，所以耐贮存。 由此可见，植物脂肪的营养价值比动物脂肪相对高。在常用植物脂肪中，豆油、麻油、花生油、玉米油、葵花子油都有丰富的人体必需脂肪酸，对于处在生长发育中小儿来说，应为脂肪的主要摄取对象。但动物脂肪中脂溶性维生素含量比植物脂肪高，所以也要适当吃些动物脂肪，以补充维生素A、D、E、K的摄入。调配幼儿膳食时，应注意不饱和脂肪酸的供给，因为不饱和脂肪酸是神经发育、髓鞘形成所必需的物质。如果食物中不饱和脂肪酸供应不足，可影响神经发育，也会导致幼儿体重下降。因此，调配婴幼儿膳食时须注意多用富含不饱和脂肪酸的食物，多用植物油。人乳含不饱和脂肪酸较多，以亚麻二烯酸和亚麻三烯酸为例，每100克脂肪中各含9．0和3．4克，而牛乳中则分别含1．8克及微量，显然人乳比牛乳好。婴儿在6个月以内，以乳类为主食，以母乳喂养为首选，在无母乳的情况下，才选用牛乳喂养。6个月以后。逐渐增加辅食，2～2．5岁逐渐过渡到吃成人食品，均应以植物油为主，不宜多食动物油。
你好啊，你的开题报告选题定了没？开题报告选题老师同意了吗？准备往哪个方向写？你的开题报告格式要求下载下来了没有？学校开题报告要求看了没有？因为每个学校开题报告格式要求都是不一样的？最后祝你选题顺利通过提供一个范文模板范例，仅供参考，希望对你能有帮助。毕业论文的开题报告范文随着现代信息技术的迅猛发展，网络技术在教育中的应用日益广泛和深入，特别是Internet与校园网的接轨，为中小学教育提供了丰富的资源，使网络教学真正成为现实，同时也为中小学教育开辟了广阔的前景。陈至立部长在全国中小学信息技术教育工作会议上指出：“全国实施中小学'校校通'工程，努力实现基础教育的跨越式发展。”“‘校校通’工程的目标是用5年到10年时间，加强信息基础设施和信息资源建设，使全国90%左右独立建制的中小学校能够上网，使中小学师生都能共享网上资源，提高中小学的教育教学质量。”“校校通”工程的启动和发展，给中小学教学带来革新的机会，为学科教学信息化奠定了物质基础。如何有效地利用网上的资源，建构基于网络的现代教学模式是一个迫切研究的问题，而开展网络教学模式研究的重要理论基础之一就是网络教学的设计与评价。因此，开展网络教学的设计与评价的探索与实践研究有着十分重要的意义。一、课题研究背景（一）国内外的研究现状1、网络教学的设计理论与方法的研究缺乏系统性通过对国内外有关的学术刊物（如《电化教育研究》、《中国电化教育》、《Educational Technology》等）、教育网站和国际国内有关学术会议（GCCCE、ICCE、CBE等）的论文集进行分析，网络教学的设计研究主要是关于建构主义学习环境的设计和协作学习的设计等方面，缺乏系统的研究。可以说，网络教学的设计理论的研究还处于初级阶段，还有很多问题需要去研究和探索。例如，在网络环境下如何利用网络资源进行主动学习、利用虚拟情境进行探究学习、利用通讯工具进行协商学习、利用工具进行创造学习的设计以及教师指导性活动的设计等方面，都值得我们去研究。2、网络教学的评价研究才刚刚起步随着Internet应用的普及，网络教学已成为一种重要的教学手段和教学场所。然而，与传统教学相比，网络教学的质量保证体系却显得不够完善、健全。如何保证网络教学的质量，建立一个行之有效的网络教学评价模型，已成为网络教学研究的一个重要课题。时至2000年，教育部批准全国31所高校建立网络教育学院，但却没有制定出如何保证网络教育质量的相关政策。美国国家教育政策研究所（The Institute For Higher Education Policy）于2000年4月也发表了一份名为"在线教育质量：远程互联网教育成功应用的标准"的报告，然而，这些文章（报告）也仅仅是描述性的定义网络教学的评价指标，而对如何组织评价、如何获取定量数据、评价数据如何促进教学等方面则很少涉及。目前，网络教学的支撑平台中的学习评价模块往往只含有测试部分，而缺乏相应的分析与反馈。（二）课题研究的意义1、促进网络教学的发展，提高网络教学的质量由于网络教学可以实现信息资源共享，在网上组织最优秀的教材和教法，使学习者在网上可以学到最新的知识，因此是教学改革发展的方向。通过本项目的研究与实践，使网络教学更能为学习者提供一个建构主义的学习环境，充分体现学生的首创精神，学生有更多的机会在不同情境下去运用他们所学的知识，而且学生可以根据自身的行动的反馈来形成对客观事物的认识和解决实际问题的方案，从而提供网络教学的质量。2、寻找利用计算机技术和网络技术实现学生远程交互自主学习的教学设计的技术解决方案3、完善和发展教学设计理论网络环境下的教学与传统教学，不仅是教学环境的不同，在教学内容、教学手段、教学传播形式上都有本质的区别。通过本项目的研究，能够解决网络环境下，教学如何进行教学设计，如何调控教学过程，如何有效实施教学活动以达成教学目标，是对教学设计理论的完善和发展。二、课题研究内容（一）研究的主要内容1、网络教学设计理论体系的研究包括教学目标的设计、建构性学习环境的设计、学习情境的设计、学习资源的设计、学生自主学习活动的设计、学生协作学习活动的设计、教师指导性活动的设计、学习评价工具的设计等。2、基于网络环境下的教学策略与教学模式的研究（1）网络教学策略的研究，如网络环境下的教学内容组织策略、网络环境下的教学情景营造策略、网络环境下的教学对话组织策略、网络环境下的的课堂管理策略等（2）网络教学模式的研究，如项目化学习模式、探索性学习模式、研究性学习模式等3、网络教学评价的内容体系、方法、步骤与模型的研究4、网络教学设计系统软件的开发与应用5、网络教学评价系统软件的开发与应用根据上述研究内容，总课题下设如下子课题：1、网络教学设计与教学评价的理论研究（谢幼如、李克东）2、网络教学资源的开发（邓文新）3、网络教学设计与教学评价系统的开发（柯清超）4、Web课程的教学过程设计及支持系统的研究（陈品德）5、网络教学设计与教学评价理论的应用研究（余红）（二）课题的研究目标本项目的研究目标是：运用现代教学理论与建构主义学习理论，通过教学改革与实验，探索网络教学的设计与评价的理论和方法，开发相配套的网络教学的设计和评价系统软件，探索普通中小学利用网络资源进行网络教学的途径与方法。（三）预期成果形式1、论文与专著发表有关网络教学的设计与评价的一系列学术论文，出版专著《网络教学的设计与评价》。2、电脑软件开发《网络教学设计系统软件》和《网络教学评价系统软件》，制作《网络教学设计》专题教学（学习）网站，建立《教学设计》多媒体资源库。三、研究方法与技术路线（一）研究方法与步骤本项目的研究主要采用行动研究、实验研究、评价研究等方法。对于较大规模的教学设计与教学模式的试验研究，将采用行动研究方法。对于个别带有创新性的，能提出重要见解的小范围的教学研究，则通过建立科学的假设，采用实验研究的方法。关于教学模式的评价和有关教学效果的分析，则采用评价研究方法。研究步骤如下：2002年5月-2002年8月，收集资料，建立模型2002年9月-2003年1月，开发软件2004年2月-2004年8月，教学试验，评价修改2005年9月-2005年12月，扩大试验，归纳总结（二）关键技术1、基于网络的协作化设计思维工具的通讯模型的构建；2、教学设计系统中师生教学活动的可视化表示与分析；3、网络教学的教学评价模型的构建；4、网络教学过程中学习反应信息的自动采集与处理。四、课题研究价值（一）创新点1、建立网络教学设计的理论体系与方法。2、建立基于网络环境的各类教学评价指标体系。3、开发出操作性强、具有实际应用价值的网络教学的设计工具和评价系统软件。（二）理论意义传统的教学设计是应用系统方法分析和研究教学的问题和需求，确立解决他们的方法与步骤，并对教学结果作出评价的一种计划过程与操作程序。现代教学设计理论已经不拘泥于系统论的理论基础，不强调对教学活动的绝对控制，逐渐放弃呆板的设计模式，开始强调教学设计的关系性、灵活性和实时性，从而更加有利于学生的创新精神和实践能力。本课题的理论成果将完善和发展传统的教学设计理论与方法。（三）应用价值1、通过课题的研究与实践，总结并形成基于网络环境下学科教学设计的理论与方法，优化中小学课堂教学结构。2、通过课题的研究与实践，探索并总结信息化时代如何改革传统的思想和模式，使学生学会利用网络资源进行学习的方法和经验。3、通过课题的研究与实践，探索普通中小学利用网络资源的途径与方法，形成一批优秀的网络教学课例。4、通过课题的研究与实践，开发出具有应用推广价值的网络教学的设计工具和评价系统软件。五、研究基础（一）已有相关成果1、曾于93年、97年两度获得国家级优秀教学成果奖，其中《多媒体组合教学设计的理论与实践》项目的成果在全国的大中小学广泛应用，《多媒体组合教学设计》（李克东、谢幼如编著，科学出版社）多次再版发行。2、出版的《多媒体教学软件设计》（含教材与光碟）（谢幼如等编著，电子工业出版社，1999年）、《多媒体教学软件设计与制作》（含教材与光碟）（李克东、谢幼如、柯清超编著，中央广播电视大学出版社，2000年）和《信息技术与学科教学整合》（李克东、谢幼如、柯清超等，万方数据电子出版社，2001年）在全国广泛应用。3、97年《多媒体技术在基础教育改革中的应用实验研究》和《小学语文"四结合"教学改革试验研究》获国家教委全国师范院校面向基础教育改革科学研究优秀成果二等奖。4、承担国家"九五"重点科技攻关项目《计算机辅助教学软件研制开发与应用》（简称96-750）《小学语文科学小品文》、《小学语文古诗欣赏》、《小学语文扩展阅读》、《初中语文新诗赏析》四个子课题的研制与开发，4个项目6张光盘全部通过教育部组织的专家组鉴定，被评为优秀软件，并由北京师范大学出版社和电子工业出版社出版，在国内及东南亚地区发行。5、2000年所完成的《学习反应信息分析系统》获广东省高等学校优秀多媒体教学软件一等奖，并出版专著《学习反应信息的处理方法与应用》（谢幼如、李克东著，暨南大学出版社，1999年）。（二）研究条件华南师范大学教育技术学科是国家级重点学科，华南师范大学教育信息技术学院是"211工程"重点建设学科单位，我国的教育技术学博士点之一。华南师范大学教育技术研究所拥有从事计算机教育应用研究的人员近30名，其中包括教授2名、副教授5名、讲师8名、博士研究生4名和硕士研究生近15名。他们在长期的研究工作中，对各种多媒体教学软件、网络教学应用软件、学科教学工具、资源库管理应用系统进行了深入的研究与探索，并已取得了实质性的进展和成果。本研究所拥有先进的计算机软件开发实验室两个、国家级的多媒体教学软件制作基地一个，在国内教育技术领域方面处于领先地位。（三）参考文献1、《多媒体组合教学设计》，李克东、谢幼如编著，科学出版社，1992年第一版、1994年第二版2、《多媒体教学软件设计》谢幼如等编著，电子工业出版社，1999年3、《信息技术与学科教学整合》，李克东、谢幼如主编，万方数据电子出版社，2001年4、《学习反应信息的处理方法与应用》，谢幼如、李克东著，暨南大学出版社，1999年5、《Global Education On the Net》，高等教育出版社、Springer 出版社，1999年6、《教学设计原理》，R.M.加涅、L.J.布里格斯、W.W.韦杰著，华东师范大学出版社，1999年7、《新型教学模式的探索》，谢幼如编著，北京师范大学出版社，1998年8、全球华人计算机教育应用大会（GCCCE）第一届至第五届论文集，1997年（广州）、1998年（香港）、1999年（澳门）、2000年（新加坡）、2001年（台北）9、《改善学习--2001中小学信息技术教育国际研讨会论文选编》，吉林教育出版社，2001年10、《认知过程的评估》，J.P.戴斯、J.A.纳格利尔里、J.R.柯尔比著，华东师范大学出版社，1999年11、《教育技术学研究方法》，李克东编著，北京师范大学出版社，2002年六、研究组织机构本课题的研究人员由教学设计专家、信息技术教育应用专家、网络技术专家、学科教学专家、中小学教师、教育技术研究人员与研究生组成，以大学的教育技术研究所为核心，主要以广东、江苏、浙江、福建等地区的部分中小学以及西部一些网络环境较好的中小学为研究基地，辐射其他地区的中小学，借助信息技术产业的技术力量，实现理论、技术与学科教学的优化整合。总课题组顾问：南国农教授（我国著名电化教育专家，西北师范大学）李运林教授（华南师范大学电化教育系原系主任）周君达教授（中央电化教育馆原副馆长）苏式冬教授（广东教育学院原副院长）许汉特级教师（广州市教研室）总课题组组长：谢幼如教授（华南师范大学教育技术研究所）李克东教授（华南师范大学教育技术研究所所长、博士生导师）总课题组成员：柯清超博士生（华南师范大学教育技术研究所）陈品德副教授、博士生（华南师范大学网络中心）邓文新讲师（华南师范大学教育技术研究所）余 红副教授（华南师范大学教育技术研究所）总课题组秘书：王冬青博士生（华南师范大学教育技术研究所）高瑞利硕士生（华南师范大学教育技术研究所）刘铁英硕士生（华南师范大学教育技术研究所）孔维宏硕士生（华南师范大学教育技术研究所）徐光涛硕士生（华南师范大学教育技术研究所）杨淑莲硕士生（华南师范大学教育技术研究所）尹 睿硕士生（华南师范大学教育技术研究所）
你好啊，你的开题报告选题定了没？开题报告选题老师同意了吗？准备往哪个方向写？你的开题报告格式要求下载下来了没有？学校开题报告要求看了没有？因为每个学校开题报告格式要求都是不一样的？最后祝你选题顺利通过 提供一个范文模板范例，希望对你能有帮助。毕业论文的开题报告范文随着现代信息技术的迅猛发展，网络技术在教育中的应用日益广泛和深入，特别是Internet与校园网的接轨，为中小学教育提供了丰富的资源，使网络教学真正成为现实，同时也为中小学教育开辟了广阔的前景。陈至立部长在全国中小学信息技术教育工作会议上指出：“全国实施中小学'校校通'工程，努力实现基础教育的跨越式发展。”“‘校校通’工程的目标是用5年到10年时间，加强信息基础设施和信息资源建设，使全国90%左右独立建制的中小学校能够上网，使中小学师生都能共享网上资源，提高中小学的教育教学质量。”“校校通”工程的启动和发展，给中小学教学带来革新的机会，为学科教学信息化奠定了物质基础。如何有效地利用网上的资源，建构基于网络的现代教学模式是一个迫切研究的问题，而开展网络教学模式研究的重要理论基础之一就是网络教学的设计与评价。因此，开展网络教学的设计与评价的探索与实践研究有着十分重要的意义。 一、课题研究背景 （一）国内外的研究现状 1、网络教学的设计理论与方法的研究缺乏系统性 通过对国内外有关的学术刊物（如《电化教育研究》、《中国电化教育》、《Educational Technology》等）、教育网站和国际国内有关学术会议（GCCCE、ICCE、CBE等）的论文集进行分析，网络教学的设计研究主要是关于建构主义学习环境的设计和协作学习的设计等方面，缺乏系统的研究。可以说，网络教学的设计理论的研究还处于初级阶段，还有很多问题需要去研究和探索。例如，在网络环境下如何利用网络资源进行主动学习、利用虚拟情境进行探究学习、利用通讯工具进行协商学习、利用工具进行创造学习的设计以及教师指导性活动的设计等方面，都值得我们去研究。 2、网络教学的评价研究才刚刚起步 随着Internet应用的普及，网络教学已成为一种重要的教学手段和教学场所。然而，与传统教学相比，网络教学的质量保证体系却显得不够完善、健全。如何保证网络教学的质量，建立一个行之有效的网络教学评价模型，已成为网络教学研究的一个重要课题。时至2000年，教育部批准全国31所高校建立网络教育学院，但却没有制定出如何保证网络教育质量的相关政策。美国国家教育政策研究所（The Institute For Higher Education Policy）于2000年4月也发表了一份名为"在线教育质量：远程互联网教育成功应用的标准"的报告，然而，这些文章（报告）也仅仅是描述性的定义网络教学的评价指标，而对如何组织评价、如何获取定量数据、评价数据如何促进教学等方面则很少涉及。目前，网络教学的支撑平台中的学习评价模块往往只含有测试部分，而缺乏相应的分析与反馈。 （二）课题研究的意义 1、促进网络教学的发展，提高网络教学的质量 由于网络教学可以实现信息资源共享，在网上组织最优秀的教材和教法，使学习者在网上可以学到最新的知识，因此是教学改革发展的方向。通过本项目的研究与实践，使网络教学更能为学习者提供一个建构主义的学习环境，充分体现学生的首创精神，学生有更多的机会在不同情境下去运用他们所学的知识，而且学生可以根据自身的行动的反馈来形成对客观事物的认识和解决实际问题的方案，从而提供网络教学的质量。 2、寻找利用计算机技术和网络技术实现学生远程交互自主学习的教学设计的技术解决方案 3、完善和发展教学设计理论 网络环境下的教学与传统教学，不仅是教学环境的不同，在教学内容、教学手段、教学传播形式上都有本质的区别。通过本项目的研究，能够解决网络环境下，教学如何进行教学设计，如何调控教学过程，如何有效实施教学活动以达成教学目标，是对教学设计理论的完善和发展。 二、课题研究内容 （一）研究的主要内容 1、网络教学设计理论体系的研究 包括教学目标的设计、建构性学习环境的设计、学习情境的设计、学习资源的设计、学生自主学习活动的设计、学生协作学习活动的设计、教师指导性活动的设计、学习评价工具的设计等。 2、基于网络环境下的教学策略与教学模式的研究 （1）网络教学策略的研究，如网络环境下的教学内容组织策略、网络环境下的教学情景营造策略、网络环境下的教学对话组织策略、网络环境下的的课堂管理策略等 （2）网络教学模式的研究，如项目化学习模式、探索性学习模式、研究性学习模式等 3、网络教学评价的内容体系、方法、步骤与模型的研究 4、网络教学设计系统软件的开发与应用 5、网络教学评价系统软件的开发与应用 根据上述研究内容，总课题下设如下子课题： 1、网络教学设计与教学评价的理论研究（谢幼如、李克东） 2、网络教学资源的开发（邓文新） 3、网络教学设计与教学评价系统的开发（柯清超） 4、Web课程的教学过程设计及支持系统的研究（陈品德） 5、网络教学设计与教学评价理论的应用研究（余红） （二）课题的研究目标 本项目的研究目标是：运用现代教学理论与建构主义学习理论，通过教学改革与实验，探索网络教学的设计与评价的理论和方法，开发相配套的网络教学的设计和评价系统软件，探索普通中小学利用网络资源进行网络教学的途径与方法。 （三）预期成果形式 1、论文与专著 发表有关网络教学的设计与评价的一系列学术论文，出版专著《网络教学的设计与评价》。 2、电脑软件 开发《网络教学设计系统软件》和《网络教学评价系统软件》，制作《网络教学设计》专题教学（学习）网站，建立《教学设计》多媒体资源库。 三、研究方法与技术路线 （一）研究方法与步骤 本项目的研究主要采用行动研究、实验研究、评价研究等方法。 对于较大规模的教学设计与教学模式的试验研究，将采用行动研究方法。 对于个别带有创新性的，能提出重要见解的小范围的教学研究，则通过建立科学的假设，采用实验研究的方法。 关于教学模式的评价和有关教学效果的分析，则采用评价研究方法。 研究步骤如下： 2002年5月-2002年8月，收集资料，建立模型 2002年9月-2003年1月，开发软件 2004年2月-2004年8月，教学试验，评价修改 2005年9月-2005年12月，扩大试验，归纳总结 （二）关键技术 1、基于网络的协作化设计思维工具的通讯模型的构建； 2、教学设计系统中师生教学活动的可视化表示与分析； 3、网络教学的教学评价模型的构建； 4、网络教学过程中学习反应信息的自动采集与处理。 四、课题研究价值 （一）创新点 1、建立网络教学设计的理论体系与方法。 2、建立基于网络环境的各类教学评价指标体系。 3、开发出操作性 强、具有实际应用价值的网络教学的设计工具和评价系统软件。 （二）理论意义 传统的教学设计是应用系统方法分析和研究教学的问题和需求，确立解决他们的方法与步骤，并对教学结果作出评价的一种计划过程与操作程序。现代教学设计理论已经不拘泥于系统论的理论基础，不强调对教学活动的绝对控制，逐渐放弃呆板的设计模式，开始强调教学设计的关系性、灵活性和实时性，从而更加有利于学生的创新精神和实践能力。本课题的理论成果将完善和发展传统的教学设计理论与方法。 （三）应用价值 1、通过课题的研究与实践，总结并形成基于网络环境下学科教学设计的理论与方法，优化中小学课堂教学结构。 2、通过课题的研究与实践，探索并总结信息化时代如何改革传统的思想和模式，使学生学会利用网络资源进行学习的方法和经验。 3、通过课题的研究与实践，探索普通中小学利用网络资源的途径与方法，形成一批优秀的网络教学课例。 4、通过课题的研究与实践，开发出具有应用推广价值的网络教学的设计工具和评价系统软件。 五、研究基础 （一）已有相关成果 1、曾于93年、97年两度获得国家级优秀教学成果奖，其中《多媒体组合教学设计的理论与实践》项目的成果在全国的大中小学广泛应用，《多媒体组合教学设计》（李克东、谢幼如编著，科学出版社）多次再版发行。 2、出版的《多媒体教学软件设计》（含教材与光碟）（谢幼如等编著，电子工业出版社，1999年）、《多媒体教学软件设计与制作》（含教材与光碟）（李克东、谢幼如、柯清超编著，中央广播电视大学出版社，2000年）和《信息技术与学科教学整合》（李克东、谢幼如、柯清超等，万方数据电子出版社，2001年）在全国广泛应用。 3、97年《多媒体技术在基础教育改革中的应用实验研究》和《小学语文"四结合"教学改革试验研究》获国家教委全国师范院校面向基础教育改革科学研究优秀成果二等奖。 4、承担国家"九五"重点科技攻关项目《计算机辅助教学软件研制开发与应用》（简称96-750）《小学语文科学小品文》、《小学语文古诗欣赏》、《小学语文扩展阅读》、《初中语文新诗赏析》四个子课题的研制与开发，4个项目6张光盘全部通过教育部组织的专家组鉴定，被评为优秀软件，并由北京师范大学出版社和电子工业出版社出版，在国内及东南亚地区发行。 5、2000年所完成的《学习反应信息分析系统》获广东省高等学校优秀多媒体教学软件一等奖，并出版专著《学习反应信息的处理方法与应用》（谢幼如、李克东著，暨南大学出版社，1999年）。 （二）研究条件 华南师范大学教育技术学科是国家级重点学科，华南师范大学教育信息技术学院是"211工程"重点建设学科单位，我国的教育技术学博士点之一。华南师范大学教育技术研究所拥有从事计算机教育应用研究的人员近30名，其中包括教授2名、副教授5名、讲师8名、博士研究生4名和硕士研究生近15名。他们在长期的研究工作中，对各种多媒体教学软件、网络教学应用软件、学科教学工具、资源库管理应用系统进行了深入的研究与探索，并已取得了实质性的进展和成果。本研究所拥有先进的计算机软件开发实验室两个、国家级的多媒体教学软件制作基地一个，在国内教育技术领域方面处于领先地位。 （三）参考文献 1、《多媒体组合教学设计》，李克东、谢幼如编著，科学出版社，1992年第一版、1994年第二版 2、《多媒体教学软件设计》谢幼如等编著，电子工业出版社，1999年 3、《信息技术与学科教学整合》，李克东、谢幼如主编，万方数据电子出版社，2001年 4、《学习反应信息的处理方法与应用》，谢幼如、李克东著，暨南大学出版社，1999年 5、《Global Education On the Net》，高等教育出版社、Springer 出版社，1999年 6、《教学设计原理》，R.M.加涅、L.J.布里格斯、W.W.韦杰著，华东师范大学出版社，1999年 7、《新型教学模式的探索》，谢幼如编著，北京师范大学出版社，1998年 8、全球华人计算机教育应用大会（GCCCE）第一届至第五届论文集，1997年（广州）、1998年（香港）、1999年（澳门）、2000年（新加坡）、2001年（台北） 9、《改善学习--2001中小学信息技术教育国际研讨会论文选编》，吉林教育出版社，2001年 10、《认知过程的评估》，J.P.戴斯、J.A.纳格利尔里、J.R.柯尔比著，华东师范大学出版社，1999年 11、《教育技术学研究方法》，李克东编著，北京师范大学出版社，2002年 六、研究组织机构 本课题的研究人员由教学设计专家、信息技术教育应用专家、网络技术专家、学科教学专家、中小学教师、教育技术研究人员与研究生组成，以大学的教育技术研究所为核心，主要以广东、江苏、浙江、福建等地区的部分中小学以及西部一些网络环境较好的中小学为研究基地，辐射其他地区的中小学，借助信息技术产业的技术力量，实现理论、技术与学科教学的优化整合。 总课题组顾问：南国农教授（我国著名电化教育专家，西北师范大学） 李运林教授（华南师范大学电化教育系原系主任） 周君达教授（中央电化教育馆原副馆长） 苏式冬教授（广东教育学院原副院长） 许汉特级教师（广州市教研室） 总课题组组长：谢幼如教授（华南师范大学教育技术研究所） 李克东教授（华南师范大学教育技术研究所所长、博士生导师） 总课题组成员：柯清超博士生（华南师范大学教育技术研究所） 陈品德副教授、博士生（华南师范大学网络中心） 邓文新讲师（华南师范大学教育技术研究所） 余 红副教授（华南师范大学教育技术研究所） 总课题组秘书：王冬青博士生（华南师范大学教育技术研究所） 高瑞利硕士生（华南师范大学教育技术研究所） 刘铁英硕士生（华南师范大学教育技术研究所） 孔维宏硕士生（华南师范大学教育技术研究所） 徐光涛硕士生（华南师范大学教育技术研究所） 杨淑莲硕士生（华南师范大学教育技术研究所） 尹 睿硕士生（华南师范大学教育技术研究所）
我们都很清楚，现在的生活水平提高了，但是人的健康问题多了，各种各样的美食，不但孩子爱吃，大人们也是越吃越过瘾，根本不在乎健康，快医院的人也越来越多了。我们不能光顾美食，吃美食的同时，对自己的健康要想好。要做到健康减肥，每天保证充足的营养，鸡鱼肉蛋都要吃点，多吃蔬菜水果，多吃清淡的菜肴，要营养，要健康减肥，还要注意锻炼身体，健康才能健康地减肥。
国外固定化脂肪酶现状应用领域广泛。作为绿色环保的催化剂，脂肪酶应用领域广泛，涉及到化工、医药、食品、纺织、能源、环境等多个领域。天然脂肪酶具有易失活、稳定性差、不可重复使用、产物纯化困难等缺点，常通过固定化方式来改善天然脂肪酶性能，随着生物催化技术的发展，固定化脂肪酶逐渐成为市场主流产品。
2.1 材料与仪器TG16高速离心机(19310 g，长沙英泰仪器有限公司);UV?2000紫外可见分光光度计(尤尼柯上海仪器厂); vertex 70型红外光谱仪(德国Bruker公司);AM?3250B型磁力搅拌恒温器(天津奥特赛恩斯仪器有限公司)。介孔分子筛SBA?15的合成利用表面活性剂Pouronic P123(EO20PO70EO20, 美国Aldrich公司)为模板剂，以浓HCl( 35%～37%)为催化剂，通过对正硅酸乙酯(Si(OC2H5)4, TEOS, 95.0%，日本Junsei Chemical公司)的分解和硅缩聚反应后而得到。编号Lu001和LLSD1的介孔分子筛合成方法基本相同，原料量略有不同，二者的BET比表面积762 m2/g，孔容0.87 cm3/g，孔径7.18 nm，壁厚3.55 nm。柱状假丝酵母脂肪酶(candida rogusa lipase, CRL)购自日本Amano酶技术公司;BCA蛋白定量试剂盒购自美国Pierce公司。实验用水为二次蒸馏水。2.2 傅立叶变换红外(FT?IR)测试样品和KBr在115 ℃下抽真空烘干10 h。将300 mg KBr和2.2 mg样品在研钵中混合研磨成细粉后压片，干燥后立刻置于红外光谱仪的石英原位池中测试。仪器分辨率为2 cm-1，扫描波数范围4000～400 cm-1，扫描128次。2.3 CRL在SBA?15上的固定化将CRL磷酸盐缓冲溶液(pH 7.0)以3000 r/min离心15 min，收集上清液，得原酶溶液。将适量SBA?15放入原酶溶液中，在15 ℃水浴和150～200 r/min下搅拌吸附21 h，再以10000 r/min下离心15 min，收集上清液为吸余液。用磷酸盐缓冲溶液清洗分子筛4次以洗脱疏松附着的酶，洗脱液再以10000 r/min离心15 min，取出上清液为清洗液。测定原酶溶液、吸余液和清洗液的酶蛋白含量，根据物料衡计算得出酶蛋白固定量(immobilized amount of enzyme protein, mg)，取单位质量分子筛的酶蛋白固定量为载酶量(enzyme loading, mg/g)。2.4 固定化CRL的泄漏将上述载酶SBA?15移入70 mL磷酸盐缓冲溶液中，在15 ℃水浴、以150～200 r/min搅拌并定时取样，样品再以10000 r/min离心15 min，分析上清液中的酶蛋白泄漏量。2.5 蛋白质定量方法分别用单波长紫外分光光度法、双波长紫外分光光度法和BCA法测定样品蛋白质含量。单波长紫外法公式为：C(protein)(g/L) =F×A280×D/d，式中A280为280 nm波长处吸光度，D为溶液稀释倍数，d为石英比色皿厚度(cm)，F为校正因子。双波长紫外法Warburg?Christian公式为：C(protein)(g/L)=1.55A280-0.76A260; Lowry?Kalckar公式为：C(protein)(g/L)=1.45A280-0.74A260，式中A260和A280分别为260 和280 nm紫外波长下的吸光度。BCA法参照美国Pierce公司蛋白定量方法测定。 分 析 化 学第37卷第8期尚 雁等：介孔分子筛SBA?15的脂肪酶固定量分析测定 3.1 蛋白质定量方法对比图1表明不同浓度CRL溶液在260～280 nm均有一个较强的吸收峰，该吸收峰为蛋白质芳香族氨基酸的特征峰，用于蛋白质含量测定。将粗酶浓度为6 g/L的CRL溶液进行不同倍数稀释，得到一系列相对浓度已知的酶溶液，分别用单波长和双波长紫外法以及BCA法测定酶浓度，验证所测浓度比例关系是否符合其相对浓度，由此得出各检测方法的准确度。图2结果说明BCA法测定结果与样品稀释后的相对浓度最接近，双波长紫外法测定值与BCA法接近，单波长法测定结果远高于BCA法和双波长紫外法。由表1中的相对浓度计算结果可知，BCA法的相对误差最小，单波长和双波长紫外法的相对误差较大。这是因为BCA法的原理是以工作试剂CuSO4中的Cu2+螯合蛋白质分子，发生显色反应测试吸光度，因此抗干扰能力较强，准确度较高。紫外分光光度法操作步骤少，简单快捷，不用显色试剂，不消耗样品。但是，直接检测光密度值受溶液中杂质干扰影响较大，误差较大。为考察介孔分子筛对吸光度的影响，分别在3 mL蒸馏水中加入0.1, 0.6和0.9 mg SBA?15(编号Lu001)，以蒸馏水为参比样，测定其吸光度，并计算出可能对蛋白质测定产生的浓度值偏差。表2说明SBA?15有明显紫外吸收。为此，本实验的样品溶液以10000 r/min离心，以消除介孔分子筛对吸光度的干扰。表1 不同方法测定蛋白质浓度的结果表2 SBA?15对吸光度的影响 表3为不同定量方法测定的 SBA?15(编号为Lu001)对CRL的固定量，3次平行实验的初始粗酶浓度均为6 g/L，SBA?15载体用量均为0.36 g，双波长紫外法测定结果略高于BCA法; 单波长紫外法测定结果远高于双波长法和BCA法。表3还说明BCA法的精密度高于单波长与双波长紫外法，这是因为BCA法靠显色反应测试吸光度，灵敏度较高，且介孔分子筛不参与显色反应，抗干扰能力较强，重现性好，更适合介孔分子筛载体的酶固定量和酶泄露量的测试;紫外分光光度法受溶液中杂质和残留介孔分表3 SBA?15上的CRL固定量及载酶量◆: 固定量(amount of immobilized protein); ◇: 载酶量(enzyme loading).子筛干扰较大。由于双波长紫外法测定的酶固定量结果与BCA法较接近，若实验条件有限或者为了不消耗样品且干扰因素较少，可使用双波长紫外法来代替BCA法测定酶固定量，每个样品中的介孔分子筛干扰可通过物料衡算而抵消。3.2 不同初始酶浓度时BSA?15载体上的酶固定量利用BCA法测定不同初始酶浓度条件下LLSD1对CRL的固定量，图3表明当酶浓度较低时，SBA?15载体对CRL的固定量和载酶量随酶浓度的增加而线性增加，但是当酶蛋白浓度达到约0.29 g/L(粗酶浓度约1 g/L)时固定量和载酶量达到平稳，最大载酶量为114.2 mg/g。3.3 两种SBA?15载体的酶固定量在初始酶浓度均为2 g/L、分子筛用量均为0.12 g相同条件下，LLSD1和Lu001对CRL的固定图4 LLSD1(a)和Lu001(b)的SEM电镜照片Fig.4 SEM images of LLSD1(a) and Lu001(b)量分别为13.70和2.00 mg;载酶量分别为114.2和16.6 mg/g。可见，LLSD1的固定量及载酶量远大于Lu001。图4为LLSD1和Lu001的SEM电镜照片，可见二者外观形状基本相同，均属于SBA?15的传统形状[9]，二者大小也无明显区别。图5是LLSD1和Lu001的FT?IR谱图，从图中可看出LLSD1表面上的羟基基团数量大于Lu001。由于酶的吸附是酶和介孔材料表面上的羟基通过氢键作用完成的，介孔分子筛表面上的羟基通过氢键作用可以促进对酶的吸附[10]。因此， 图5 Lu001(1)和LLSD1(2)的FT?IR谱图Fig.5 FT?IR spectra of Lu001(1) and LLSD1(2)两种介孔分子筛对酶固定量差异很可能与介孔分子筛的羟基含量有关，具有较高羟基含量有利于固定更多的CRL。3.4 SBA?15固定化酶的泄漏量固定化酶容易“脱落”到水相中成为游离酶，即“泄漏”[11]。图6表明Lu001固定化CRL在缓冲溶液中100 h后的泄漏率为0.56%，LLSD1的泄漏率为0.53%，泄露量均较低，说明SBA?15是良好的酶固定化载体。泄露率较低可能与SBA?15孔径大小有关。研究[3,12]表明, 当介孔材料的孔径与酶分子大小相适应时，固定化酶的稳定性较好。Lu001和LLSD1的孔径均为7.18 nm，假丝酵母脂肪酶的动力学直径约为5 nm，二者大小较匹配，使酶分子恰好固定于孔内而不易发生泄露。◆，■，▲，● 为泄露量(leakage); ◇，口，△，○为泄露率(leakage rate)，其中◆， ◇ ： 0.12 g LLSD1， 载酶量(enzyme loading) 114.2 mg/g; ■,口： 0.24 g LLSD1， 载酶量(enzyme loading) 111.3 mg/g;▲, △： 0.36 g Lu001， 载酶量(enzyme loading) 14.2 mg/g;●,○： 0.36 g Lu001， 载酶量(enzyme loading) 16.6 mg/g。 1 Lei C, Shin Y, Liu J, Ackerman E J. Journal of the American Chemical Society, 2002, 124: 11242～112432 Lei J, Fan J, Yu C Z, Zhang L Y, Jiang S Y, Tu B, Zhao D Y. Microporous and Mesoporous Materials, 2004, 73: 121～1283 Essa H, Magner E, Cooney J, Hodnett B K. Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic, 2007, 49: 61～684 Rosales?Herńandez M C, Mendieta?Wejebe J E, Correa?Basurto J, Vázquez?Alcantara J I, Terres?Rojas E, Trujillo?Ferrara J. International Journal of Biological Macromolecules, 2007, 40: 444～4485 Gao Bo(高 波), Zhu Guang?Shan(朱广山), Fu Xue?Qi(付学奇), Xin Ming?Hong(辛明红), Chen Jing(陈 静), Wang Chun?Lei(王春雷), Qiu Shi?Lun(裘式纶). Chem. J. Chinese Universities(高等学校化学学报), 2005, 26(10): 1852～18546 Humphrey H P Y, Wright P A, Botting N P. Microporous and Mesoporous Materials. 2001, 44?45: 763～7687 He J, Xu Y, Ma H. Journal of Colloid and Interface Science, 2006, 298: 780～7868 Xu Jian(徐 坚), Yang Li?Ming(杨立明), Wang Yu?Jun(王玉军), Luo Guang?Sheng(骆广生), Dai You?Yuan(戴猷元). Journal of Chemical Industry and Engineering(China)(化工学报), 2006, 10(57): 2407～24109 Zhao D Y, Feng J L, Huo Q S, Nicholas M, Fredrickson G H, Chmelka B F, Stueky G D. Science, 1998, 279: 548～55210 Zheng L Y, Zhang S Q, Zhao L F, Zhu G S, Yang X Y, Gao G, Cao S G. Journal of Molecular Catalysis B：Enzymatic, 2006, 38: 119～12511 Zhu Y F, Shen W H, Dong X P, Shi J L. Journal of Materials Research, 2005, 20: 2682～269012 Diaz J F, Balkus K J. Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic, 1996, 2: 115～126