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植物组织培养及其应用研究概况在世界各国科学家的不断努力下，近几十年来，植物组织培养技术迅速发展。利用组织培养，不仅可以大量生产优良无性系，获得人类需要的多种代谢物质，还可获得单倍体、三倍体、多倍体及非整倍体。通过细胞融合可以打破种属间的界限，克服远缘杂交不亲合性，在植物新品种的培育和种性的改良中发挥了巨大作用。组织培养的植物细胞是在细胞水平上分析研究的理想材料，从植物快繁、花药培养发展到细胞器培养、原生质融合以及DNA重组技术等，植物组织培养技术广泛应用于植物科学的各个领域及农业、林业、工业、医药等多种行业，已经成为当代生物科学中最有生命力的一门学科。1 植物组织培养的基本概念、原理和试验步骤1．1概念植物组织培养是在无菌条件下，将离体的植物器官(根尖、茎尖等)、组织(形成层、花药组织等)、细胞(体细胞、生殖细胞等)、胚胎(成熟或未成熟的胚)、原生质体等在人工配制的培养基上培养，给予适宜的培养条件，诱发其产生愈伤组织或潜伏芽或长成完整的植株的技术。1．2原理 植物组织培养的依据是植物细胞的“全能性”及植物的“再生作用”。1902年，德国著名植物学家 G．Haberlandt根据细胞学理论提出了一个观点，“高等植物的器官和组织可以不断分割，直至单个细胞，即植物体细胞，体细胞在适当的条件下具有不断分裂、繁殖并发育成完整植株的潜力”。1943年，美国人White在烟草愈伤组织中偶然发现形成一个芽，证实了G．Haberlandt的论点。 不同植物所需要的生长条件不同，所用的培养基也有所不同。较常用的基础培养基有MT、MS、 SH、N6、White等。在组织培养中，愈伤组织和胚状体能否形成是培育出新植株的关键。通过在基础培养基里添加一定浓度的外源激素，可以诱导出愈伤组织、胚状体、不定芽、根等器官，最终获得再生植株或次生物质。 用于植物组织培养的材料称为外植体，其主要形式有器官、胚胎、单细胞、原生质体等。根据外植体的不同，所需要的培养基种类、培养条件、外源激素的种类及比例等均不同。植物组织培养中，影响培养力的因素是多方面的，诱导愈伤组织成败的关键在于培养条件，植物激素是诱导愈伤组织和绿苗分化的关键因素。最常用的诱导愈伤组织的生长素是IAA、NAA和2，4一D，所需浓度为O．01～10 mg／L。最常用的细胞分裂素是KT和ABA，使用浓度为O．1～10 mg／L。KT的主要作用是促进细胞分裂和愈伤组织分化。ABA对植物体细胞胚的发生与发育具有重要作用。各类植物激素的生理作用虽有相对专一性，但是植物的各种生理效应是不同种类激素之间相互作用的综合表现。1．3试验步骤1．3．1选择和配制培养基 培养基是植物组织培养中的“血液”，血液的成分及其供应状况直接关系到培养物的生长与分化，因此了解培养基的成分、特点及其配制至关重要。1．3．2灭茵灭菌是组织培养中的重要工作之一，通常采用物理的或化学的灭菌方法。培养基用常压或高压蒸煮等湿热灭菌、器械采用灼烧灭菌、玻璃器皿及耐热用具采用干热灭菌、不耐热的物质采用过滤灭菌、植物材料表面用消毒剂灭菌、物体表面用药剂喷雾灭菌、接种室等空间采用紫外线或熏蒸灭菌。1．3．3接种将已消毒好的根、茎、叶等离体器官，经切割或剪裁成小段或小块放入培养基，整个接种过程要在无菌条件下进行。 l.3．4培养把培养材料放在有一定光照和温度等条件的培养室里，使之生长、分裂和分化，形成愈伤组织或进一步分化成再生植株。1．3．5试管苗驯化移栽 试管苗是在特殊环境条件下生长的幼苗，与自然生长的幼苗有很大差异，只有通过驯化，使之适应自然环境后才能移栽。2 植物组织培养的应用2．1植物快速繁殖和无病毒种苗生产植物快速繁殖技术始于20世纪60年代，法国的Morel用茎尖培养的方法大量繁殖兰花获得成功，从此揭开了植物快速繁殖技术研究和应用的序幕。目前，通过离体培养获得小植株并且具有快速繁殖潜力的植物已有100多科1 000种以上，有的已经发展成为工业化生产的商品。世界上80％～85％的兰花是通过组织培养进行脱毒和快速繁殖的。培养的植物种类也由观赏植物逐渐发展到园艺植物、大田作物、经济植物和药用植物等。在我国，同类的研究始于20世纪70年代。马铃薯无毒种薯和甘蔗种苗已在生产上大面积种植，30余种植物已进行规模化生产或中间试验。利用组织培养进行植物快速繁殖及无病毒种苗生产，不仅能够挽救珍惜濒危物种，而且能够解决植物野生资源缺乏的问题。2．2植物花药培养和单倍体育种 将植物花药培养成单倍体植株，再经过染色体加倍，能很快得到纯合的二倍体，这样将大大缩短育种年限。到目前为止，世界上通过花粉和花药培养已获得了几百种植物的单倍体植株。印度科学家应用这种方法培育的水稻品系，比对照产量提高15％～49％。韩国先后育成了5个优质、抗病、抗倒伏的水稻品种。我国自20世纪70年代开始该领域的研究，已经培育了40余种由花粉或花药发育成的单倍体植株，其中有10余种为我国首创。玉米获得了100多个纯合的自交系；橡胶获得了二倍体和三倍体植株。仅“九五”期间就育成高产、优质、抗逆、抗病的农作物新品种44个，种植面积超过660万 hm2。2．3植物胚胎培养杂交育种中，杂种胚常常败育，因此将早期生长的胚取出，应用组织培养方法，就有可能培育出杂交植物。已经有100篇以上幼胚培养成为植株的报道。国内外科学家应用植物胚胎培养技术获得了多种远缘杂交的重组体、栽培种和杂交品种。2．4植物愈伤组织或细胞悬浮培养利用植物愈伤组织或细胞悬浮培养可以生产用于预防和治疗疾病的植物次生代谢产物。近年来，这一领域的发展极为迅速，已经研究了400多种植物，从培养细胞中分离到600多种次级代谢产物，其中60多种在含量上超过或等于原植物，20种以上干重超过原植物的1 9，6。例如，从薯芋愈伤组织和悬浮细胞生产的diosgenin用于合成甾体药物。最近抗癌药物紫杉醇一红豆杉细胞培养物，可用75t发酵罐培养，已达到商业化生产水平。另外，达到商品化水平的还有紫草、人参、黄连、老鹳草等；长春花、毛地黄、烟草等已实现工业化生产；牙签草、红花等20多种植物正在向商品化过渡。2．5细胞融合与原生质体培养自1960年英国学者Cocking首次利用纤维素酶从番茄幼苗的根分离原生质体获得成功以来，到1990年已有100种以上植物的原生质体能再生植株。我国获得了30余个品种的原生质体再生植株，其中包括难度较大的重要粮食作物和经济作物，如大豆、水稻、玉米、小麦、谷子、高梁、棉花等。在木本植物、药用植物、蔬菜和真菌原生质体培养方面的进展也十分迅速。国外已先后获得了种内及种间的体细胞杂种植株。植物原生质体培养还可应用于外源基因转移、无性系变异及突变体筛选等研究，因而越来越受到人们的重视。2．6植物细胞突变体筛选植物细胞突变体的筛选最早始于1959年，G． Melchers在金鱼草悬浮细胞培养中获得了温度突变体。1970年，P．S．Carlson，H．Binding和Y．M． Heimer等分别分离出烟草营养缺陷型细胞、矮牵牛抗链霉素细胞系及烟草抗苏氨酸细胞系。迄今为止，已经在不少于15个科45个种的植物细胞培养中筛选出100个以上的植物细胞突变体或变异体。其中包括抗病细胞突变体，如玉米抗小斑病突变体和小麦抗赤霉病、根腐病突变体；抗氨基酸及其类似物细胞突变体，如甘蓝型油菜抗HYP突变体[263；抗逆境胁迫细胞突变体，如水稻耐盐突变体和小麦抗盐突变体；抗除草剂细胞突变体及营养缺陷型细胞突变体，如玉米抗除草剂变异体；株高突变体的筛选，如水稻矮秆变异体。2．7植物体细胞胚胎和人工种子1958年，Reinert在胡萝卜的组织培养中最先发现了体细胞胚胎(胚状体)。据不完全统计，能大量产生胚状体的植物有43科92属100多种。一些重要作物如水稻、小麦、玉米、珍珠谷等，也能通过离体培养产生胚状体。这些胚状体用褐藻酸钠等包埋，再加上人工种皮，就形成了人工种子。人工种子的优点是：繁殖快速，成苗率极高；不受气候影响，四季皆可工厂化生产。上世纪80年代初，美、日、法等国家相继开展了人工种子的研究，我国也于“七五”期间开展了此项研究，并于1987年列入了国家“863”高技术研究发展计划。2．8 植物组织细胞培养物的超低温保存与种质库建立植物细胞全能性的发现和证实，为植物种质资源的长期保存开辟了一条新途径。采用液氮超低温保存技术，能保持很高的存活率，并且能再生出新植株和保持原来的遗传特性。如建立茎尖分生组织培养物的超低温保存种质库，不仅可以防止种质的遗传变异和退化，而且可以长期保存无病毒的原种。2．9 植物组织培养与转基因技术的应用 我国第一个T—DNA插入突变体库的构建和研究为我国水稻功能基因组学研究奠定了良好的技术和材料基础，为确保我国拥有一批有自主知识产权的基因资源做出了积极贡献。由中国水稻研究所农业部水稻生物学重点开放实验室和中科院上海植物生理研究所合作，通过建立大规模、高效的农杆菌介导的转基因技术体系，将玉米转座子Ac—Ds等外源基因导入水稻未成熟胚和种子诱导的愈伤组织，获得了1．2万个独立的T—DNA插入株系，并构建了水稻突变体的数据库。 3 展望植物组织培养研究与应用是20世纪科技进步的重大成果之一，为研究植物生长发育、抗性生理、激素及器官发生与胚胎发生等提供了许多良好的实验材料和有效途径。植物组织培养方法不断提高的同时，也相应拓宽了其应用范围。由于组织培养在人工控制的条件下进行，容易掌握花芽分化和开花成因；通过胚胎培养，能够得到杂种或自交种；通过分离单倍体细胞，能培育纯合的二倍体优良品系；提高育种多样性的同时缩短了育种时间；通过突变体筛选，提高植物的品质，增强抗逆境胁迫能力，扩大植物的生长范围；将体细胞冷藏在低温下，建立基因库，达到保存物种的目的；获得药用价值高和工业生产所需要的次生产物，加快药物生产的时间并且减少了单纯依靠天然植物的被动性。植物组织培养技术已经渗透到科研、生产和生活各个领域，必将日臻完善。黑龙江农业科学2006，(3)
甘肃农业大学草业科学专硕毕业要求，一般来说呢，是研究生毕业必须要求他完成所学的各种课程，还要啊做好毕业论文进行答辩，通过之后才能够毕业
收稿日期：2007-10-25基金项目：深圳市科技和信息局基金资助项目作者简介：王丹（1982-），女，辽宁本溪人，硕士研究生，从事植物生物技术研究。注：雷江丽为通讯作者。大花美人蕉茎尖组织培养技术研究王 丹1,2，雷江丽2，吴燕民3，吕 慧2，郁继华1(1.甘肃农业大学 农学院，甘肃 兰州 730070；2.深圳市园林科学研究所，广东 深圳 518003；3.中国农业科学院 生物技术研究所，北京 100081)摘 要：以大花美人蕉（Canna×generalis）根茎茎尖为外植体进行组织培养技术研究，筛选出芽诱导适宜的培养基为MS + 6-BA 8.0mg/L（单位下同）+ TDZ 0.03；MS + 6-BA 8.0 + TDZ 0.03 + NAA 0.1 培养基能较好地诱导分化出丛生芽, 继代增殖培养中与MS + 6-BA 3.0 + TDZ 0.03 + NAA 0.1 培养基交替使用可减少畸形芽，增殖系数达1.67；适宜的生根培养基为MS + 6-BA 1.0 + NAA 0.5，生根率达66.67%，且植株生长健壮，移栽易成活。关键词：大花美人蕉；茎尖；组织培养中图分类号：Q943.1 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2008)01-0033-04Research on Shoot-tip Culture of Canna×generalisWANG Dan1,2, LEI Jiang-li2, WU Yan-min3, LÜ Hui2, YU Ji-hua1(1.College of Agronomy, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, Gansu China; 2.Shenzhen Institute of LandscapeGardening, Shenzhen 518003, Guangdong China; 3.Biotechnology Research Institute, Chinese Academy of AgriculturalSciences, Beijing 100081, China)Abstract: The paper mainly studied on tissue culture of Canna×generalis with the stem tips asexplants. The results showed that the bud inoculation medium was MS + 6-BA 8.0mg/L+ TDZ0.03mg/L; the best of clump shoot induction and differentiation medium was MS + 6-BA 8.0mg/L +TDZ 0.03mg/L + NAA 0.1mg/L; using MS + 6-BA 3.0mg/L + TDZ 0.03mg/L + NAA 0.1mg/L asproliferation medium, an optimal proliferation rate was obtained. When the two kinds of mediumused alternatively, the effect was better. The optimum rooting medium was MS + 6-BA 1.0mg/L +NAA 0.5mg/L, the rate of rooting could reach 66.67%, and cultured in this medium, the plant grewwell and easy to survival.Key words: Canna×generalis; shoot-tip; tissue culture大花美人蕉(Canna×generalis)属美人蕉科(Cannaceae)美人蕉属(Canna)的园艺杂交种[1]，是多年生喜光宿根草本花卉，原产美洲热带和非洲等地。其枝叶茂盛、花朵艳丽、姿态优美、花期长，在深圳地区几乎全年开花，是配置大型花坛的优良品种。大花美人蕉不仅观赏价值高，而且能吸收硫、氯、氟、汞等有害物质，具有净化空气、保护环境的作用，因此，世界许多城市的园林绿化中都广泛应用。美人蕉传统的繁殖方式主要采用分切地下根茎的方法，繁殖速度慢、增殖效率低，而且连续营养繁殖造成病毒积累致使病毒病在各地相当普遍，严重影响其观赏价值。利用茎尖组织培养进行脱毒试管苗快繁，是目前大力繁殖与推广美人蕉的主要手段。关于美人蕉组织培养的研究报道较少[2,3]，本研究探索其组织培养高效的再生体系，以期为品种提纯复壮及遗传转化、性状改良奠定基础。2008,37(1):33-36.Subtropical Plant Science第·34· 37 卷1 材料与方法1.1 材料供试材料为目前城市绿化中普遍应用的大花美人蕉‘President’品种。1.2 外植体选择与处理选择生长健壮、无病虫害的优良母株，挖取带芽胞的根茎，去除表面老皮并用肥皂水清洗。用75%乙醇棉擦拭，然后采用不同的消毒剂及处理时间（0.1%升汞10min、2%次氯酸钠10min、2%次氯酸钠20min、2%次氯酸钠 + 0.1%升汞5min、2%次氯酸钠 + 0.1%升汞10min），封闭式振摇灭菌。无菌水冲洗5 次，置于超净工作台上备用。接种前，剥去外部叶片，露出生长点，立即切取茎尖进行接种。1.3 培养方法及培养条件试验于2006 年10 月在深圳市园林科学研究所组培室进行。诱导、增殖和生根培养基均选用MS为基本培养基，在不同培养阶段附加不同种类、不同浓度配比的植物生长调节剂（表2～表4），蔗糖3%，pH 5.8。培养温度(28±2)℃，光照强度2 500 lx，光照周期为14h/d，相对湿度70%～80%。每处理接种30 瓶。定期观察试管苗生长与分化情况。2 结果与分析2.1 不同消毒处理方式对外植体无菌化的影响因供试外植体取自美人蕉地下根茎，表面污染物较多，不易消毒，且不同植物及外植体的成熟度对消毒剂的反应不同，故本试验选用升汞和次氯酸钠进行灭菌效果比较，以筛选合适的消毒剂及消毒处理时间。由表1 可知，2%次氯酸钠20min 处理的无菌化效果较好，但茎尖褐化较严重，说明灭菌时间过长对去老皮后的幼嫩根茎影响较大。0.1%升汞10min 处理与2%次氯酸钠 + 0.1%升汞 10min处理，无菌化效果差异不大，但2%次氯酸钠 + 0.1%升汞 10min 处理有轻微药害。因此，后续实验选用0.1%升汞处理10min 进行外植体消毒。2.2 不同生长调节剂配比对芽诱导的影响以MS 为基本培养基，附加不同浓度6-BA、NAA、2,4-D、KT、TDZ 等（表2），以筛选出较适宜美人蕉茎尖诱导分化的配方。因美人蕉根茎具有休眠特性，芽诱导分化较难。TDZ 具有很强的促进细胞分裂活性，0.05～1.0μmol/L 即可有效促进分化[4]，因此，本实验对TDZ 的诱导效果进行初步探索。试验表明，在不添加任何生长调节剂的MS 基本培养基（1 号）上，茎尖接种10d 后开始生长，叶片展开后，生长停止；15d 后转接到新的MS 培养基上无明显生长，随后叶片逐渐变黄、萎蔫，说明基本培养基中添加生长调节剂是美人蕉离体培养的必要条件。在仅添加6-BA 的2、3、4 号培养基中，高浓度的2 号培养基分化率为33.33%，明显好于3、4号培养基，说明美人蕉启动芽诱导分化需要高浓度的细胞分裂素（表2）。11～16 号培养基添加物为不同生长调节剂与TDZ 组合（表2）。仅添加TDZ 的培养基分化率为0，而多种生长调节剂配合使用分化效果更好[5]。其中15 号培养基的侧芽分化率最高，达63.33%，且每个茎尖可增殖2～3 个侧芽，但个别茎尖经多次转接后有畸形芽；与2 号培养基相比，分化率明显提高，说明添加低浓度TDZ 可促进芽诱导分化（表2）（图版-a）。5、6、7 号培养基为生根培养基，探讨NAA 对美人蕉茎尖生长和生根的影响。试验结果初步说明美人蕉在6-BA/NAA 小于2/0.5 时生根率可达50%以上（表2）。8、9、10 号培养基，探讨美人蕉脱分化，诱导愈伤组织，但结果均不理想。因此，建立高效的美表1 不同消毒剂及处理时间对外植体无菌化的影响处 理 接种数污染数污染率(%) 药害情况0.1%升汞10min 30 5 16.67 基本无药害2%次氯酸钠10min 30 12 40.00 无药害2%次氯酸钠20min 30 4 13.33 20%有轻微药害2%次氯酸钠+0.1%升汞5min 30 10 33.33 3%有轻微药害2%次氯酸钠+0.1%升汞10min 30 5 16.67 7%有药害第1 期 王丹,等：大花美人蕉茎尖组织培养技术研究 ·35·人蕉遗传转化再生体系还需进一步探索愈伤组织诱导途径。2.3 芽继代增殖为了探讨优化的芽继代增殖培养基配方，按表3 设计6-BA、NAA、TDZ 的正交实验，以15 号培养基上分化出的丛生芽为接种材料，进行继代增殖培养（图版-b）。由表3 可见，除17、18 号培养基外，低浓度TDZ（0.03mg/L）的分化促进作用较高浓度（0.3mg/L）的效果好，说明高活性的TDZ 浓度过高反而抑制分化。当TDZ0.03mg/L 时, NAA 0.1mg/L 促分化作用显著优于NAA0.5mg/L。在TDZ、NAA 浓度相同的情况下，随着6-BA 浓度的升高，分化率提高。但随着继代次数的增多，含高浓度6-BA的27 号培养基分化率略有下降，甚至有个别畸形芽产生，说明高浓度细胞分裂素对短期的分化有促进作用[9]，但继代数次后，芽已经萌动，自身具有分化能力，需适当降低6-BA 浓度进行壮苗，以避免畸形芽产生。因此，在增殖过程中交替使用分化增殖系数较高的19 号培养基和27 号培养基，既可保证较高的芽分化率，又可使继代苗生长健壮，减少畸形芽。2.4 生根诱导增殖芽3～5cm 长时，转接到生根培养基上培养约10d 后，可见到根生成（图版-c）。接种20d 后统计生根结果（表4）。从表4可见，所用培养基上都有根生成，说明美人蕉生根较容易；结合生根率和生长势，我们认为MS + 6-BA 1.0 + NAA 0.5培养基较适宜美人蕉生根。表2 不同植物生长调节剂组合的比较植物生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA 2,4-D KT TDZ分化率(%) 生根率(%) 备注1 0 0 0 0 02 9 0 0 0 0 33.33 参考[2]3 5 0 0 0 0 23.33 参考[3]4 3 0 0 0 0 6.675 2 1 0 0 0 60.006 2 0.5 0 0 0 56.677 2 0.2 0 0 0 08 0 0 4 0 09 0 0 2 1 0 参考[6]10 0 0.2 0 2 0 参考[7]11 0 0 0 0 0.2 012 0 0.1 0 0 0.2 23.33 参考[8]13 0 0 0.5 0 0.1 3.3314 0 0 1 0 0.1 6.6715 8 0 0 0 0.03 63.3316 5 0 0.5 0 0.03 50.00表3 不同生长调节剂配比对芽继代繁殖的影响生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA TDZ接种数分化率(%)增值系数 生长势17 3.0 0.5 0.03 30 30.00d 1.20d ++18 3.0 0.5 0.30 30 36.67cd 1.50bc ++19 3.0 0.1 0.03 30 56.67a 1.67a ++20 3.0 0.1 0.30 30 33.33cd 1.46bc ++21 5.0 0.5 0.03 30 43.33c 1.60ab ++22 5.0 0.5 0.30 30 26.67d 1.33c ++23 5.0 0.1 0.03 30 56.67a 1.60ab ++24 5.0 0.1 0.30 30 53.33ab 1.57b +25 8.0 0.5 0.03 30 50.00b 1.53b ++26 8.0 0.5 0.30 30 26.67d 1.37c +27 8.0 0.1 0.03 30 60.00a 1.73a ++28 8.0 0.1 0.30 30 26.67d 1.37c +注：++ 表示生长势强；+表示生长势弱。同列中不同字母表示差异显著(P＜0.05＝，表4 同。表4 不同的生长调节剂配比对组培苗生根的影响生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA接种数生根苗数生根率(%)植株生长势29 0 0.5 30 19 63.33b +30 0 1.0 30 21 70.00a ++31 1.0 0.5 30 20 66.67ab +++32 1.0 1.0 30 16 53.33c ++注：+++ 表示生长势强；++表示生长势中等；+表示生长势弱。第·36· 37 卷3 结 论美人蕉根茎生长在土壤中，无菌化操作较困难。灭菌试验表明，0.1%升汞震荡灭菌10min 效果较好，采回的外植体应尽快处理接种，放置时间过长伤口处易染菌，导致接种后褐化较严重。MS + 6-BA 8.0 + ZDT 0.03 + NAA 0.1 培养基能较好地诱导分化丛生芽，MS + 6-BA 3.0 + TDZ 0.03+ NAA 0.1 为较好的增殖培养基，在增殖培养过程中这两种配方交替使用效果更好；短时间使用高浓度生长调节剂对增殖有促进作用，但长时间使用高浓度生长调节剂会使组培苗质量下降。在试验中还发现，转接次数多的茎尖较转接次数少的分化率大，建议在接种后的10～20d 内及时转接。选用MS + 6-BA 1.0 + NAA 0.5 为生根培养基，生根率较高，根系粗壮、根毛密集，植株生长健壮（图版-d），且移栽成活率较高。参考文献:[1] Segeren W, et al. 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1.纸张为A4纸，页边距上2.5cm，下2.5cm，左3.0cm，右2.5cm
2论文由内容摘要与关键词、论文正文和参考文献组成。一级标题“一、”;二级标题“(二)”;三级标题“3.”
3.[内容摘要]和[关键词]均为宋体小四号加粗，内容宋体小四号，行距1.25cm
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农业大学本科生毕业论文(设计)格式要求
论文格式就是指进行论文写作时的样式要求，以及写作标准，下面我以农业大学本科生毕业论文(设计)格式为例，为大家展开介绍。
毕业论文(设计)是培养学生综合运用所学知识，分析和解决实际问题，提高实践能力和创造能力的重要教学环节，，是记录科学研究成果的重要文献，也是学生申请学位的基本依据。为保证本科生毕业论文(设计)质量，促进国内外学术交流，特制定《沈阳农业大学本科生毕业论文(设计)撰写要求与格式规范》
一、毕业论文(设计)的基本结构
毕业论文(设计)的基本结构是：
1.前置部分：包括封面、任务书、选题审批表、指导记录、考核表、中(外)文摘要、关键词和目录等。
2.主体部分：包括前言、正文、参考文献、附录和致谢等。
二、毕业论文(设计)的内容要求
(一)前置部分
1.封面：由学校统一设计。
毕业论文(设计)任务由各教学单位负责安排，并根据已确定的论文(设计)课题下达给学生，是学生和指导教师共同从事毕业论文(设计)工作的依据。毕业论文(设计)任务书的内容包括课题名称、学生姓名、下发日期、论文(设计)的主要内容与要求、毕业论文(设计)的工作进度和起止时间等。
3.论文(设计)选题审批表
4.论文(设计)指导记录
5.毕业论文(设计)考核表
指导教师评语、评阅人评审意见分别由指导教师和评阅人填写，答辩委员会意见、评定成绩以及是否授予学士学位的建议等材料应由答辩委员会填写。
6.中(外)文摘要
摘要是毕业论文(设计)研究内容及结论的简明概述，具有独立性和自含性。其内容包括论文(设计)的主要内容、试(实)验方法、结果、结论和意义等。中文摘要不少于400字;英文摘要必须用第三人称，采用现在时态编写。
7.关键词
关键词均应为专业名词(或词组)，注意专业术语的通用性，数量一般为3-5个;外文关键词与中文关键词一一对应。
8.目录
目录由论文(设计)的章、节、附录等序号、名称和页码组成。
(二)主体部分
1.前言(引言或序言)
简要说明本项研究课题的提出及其研究意义(学术、实用价值)，本项研究的前人工作基础及其欲深入研究的方向和思路、方法以及要解决的主要问题等。
2.正文
正文是毕业论文(设计)的核心部分，应占主要篇幅。正文内容必须实事求是，客观真切、准确完备、合乎逻辑、层次分明、语言流畅、结构严谨、书写工整，符合学科及本专业的有关要求。论文(设计)中的用语、图纸、表格、插图应规范、准确，量和单位的使用必须符合国家标准规定，不得使用已废弃的单位。凡有法定符号代表量和单位的，均用法定符号表示，引用他人资料要有标注。
(1)农科类
农科类毕业论文的正文部分，一般应包括：
a.材料与方法
材料主要描述用于试(实)验的生物、试剂、工具及主要配套用具等材料的规格、型号、数量。方法包括试验的设计方案和主要仪器安装，操作方法以及与试验有关的环境条件等。
b.结果与分析
结果与分析部分指对本试(实)验观测所获得的数据(现象、图像)，经过初步整理加工，对其结果进行逐项(条)分析，用文字加以表述。这部分是论文的核心内容，需要较详细、实事求是地阐述。
c.结论与讨论
结论是指对试验结果分析后的概述，一般是按一定的逻辑关系，先后归纳成结论性条文。讨论通常是对某些不成熟的结论，或经过本试验尚不能做出明确结论的现象或问题，加以推断性的解释。有的甚至对与前人持有不同观点的结论，发表商榷性意见，同时还可以提出进一步研究的建议。
农科类毕业论文总字数在10000字以上。
(2)工科类
工科类毕业设计(论文)的正文部分，一般应包括：
a.设计方案论证：应说明设计原理，进行方案选择，论述方案选择的合理性及特点。
b.计算部分：这部分在设计说明书中应占有相当的比例。一般应包括机器系统性能参数的选择与计算;主要零部件结构参数的选择与计算;各零件材料的选择等。在说明书中要列出各工作条件、给定的参数，计算公式以及各主要参数计算的详细步骤和计算结果。对应用计算机的设计还应包括各种软件设计。
c.结构设计部分：应包括机械结构设计、各种电气控制线路设计及功能电路设计、计算机控制的硬件装置设计以及以上各种设计所绘制的图纸等。
样机或试件的各种实验及测试情况：包括实验方法、线路及数据处理等。
d.方案的校验：说明所设计的系统是否满足各项性能指标的要求，能否达到预期效果。
e.结论:概括说明本设计的情况和价值,分析其优点、特色，有何创新，性能达到何水平，并应指出其中存在的问题和今后改进的方向，特别是对设计中遇到的重要问题要重点阐述并加以研究。
工科类毕业设计(论文)字数在10000字以上，机械类专业学生还要至少要独立完成零号图纸2张，电气类专业学生要有完整的'系统电气原理图或电气控制系统图。
(3)经管类
经管类毕业论文，可以是理论性论文、应用软件设计或调查报告。论文选题新颖，符合专业学科要求，具有逻辑性、结构严谨、论点明确、论据充分、资料翔实、数据准确、研究与写作方法规范。
经管类毕业论文字数在10000字以上。
3.参考文献
列出的参考文献限于作者直接阅读过的、最主要的且发表在正式出版物上的文献。参考文献的著录，按中文在前英文在后的顺序编号;或按在论文中出现的先后顺序编号。
期刊类文献书写方法：[序号]作者(不超过3人，多者用等或etal表示).题(篇)名[J].刊名(版本),出版年，卷次(期次)：起止页次.
图书类文献书写方法：[序号]作者.书名[M].版本.出版地：出版者,出版年.起止页次.
论文集类文献书写方法：[序号]作者.篇名[A].编著者.论文集名[C].出版地：出版者，出版年.起止页次.
4.附录
附录的主要内容有：某些重要的原始数据，数学推导，计算程序，框图，结构图，装配图等。
5.致谢
向指导教师，曾经支持和协助自己完成论文课题研究工作的教师、技术人员以及合作伙伴等人表示谢意，致谢写在毕业论文的最后。
三、毕业论文(设计)撰写与装订的格式规范
第一部分：封面
1.封面：由学校统一设计。
2.封皮颜色按学位种类划分，农科类用绿色封皮，工科类用黄色封皮，理科类用灰色封皮，管理学用粉色封皮。
3.需填写的项目一律电脑打印，不得手写。
第二部分：目录
目录(三号，宋体，加粗，居中)
中文摘要(关键词)(小四号，宋体，下同)…(页码)
外文摘要(关键词)………………………………(页码)
前言…………………………………………………(页码)
1 XXXXXX(一级标题)……………………………(页码)
1.1 XXXXXX(二级标题)…………………………(页码)
1.1.1 xxxxxx(三级标题)…………………………(页码)
1.1.1.1 xxxxxx(四级标题)………………………(页码)
参考文献……………………………………………(页码)
致谢…………………………………………………(页码)
第三部分：摘要与关键词
1.中文摘要与关键词(单独用页)
摘要(三号，宋体，加粗，居中)
摘要内容(五号，宋体)
关键词标题(五号，宋体，顶格，加粗)
关健词内容(五号，宋体，词间用分号隔开)
2.外文摘要与关键词(单独用页)
外文摘要标题(三号，英文用Times New Roman，加粗，居中)
外文摘要内容(五号，英文用Times New Roman)
外文关键词标题(五号，英文用Times New Roman，顶格，加粗)
外文关键词内容(五号，英文用Times New Roman，每个词组(或词)的第一个字母大写，词组(或词)间用分号隔开)
第四部分： 论文(设计)主题
1.标题
标题一律采用本规范中目录部分的样式，最多分四级。
一级标题，三号字，宋体，顶格，加粗
二级标题，四号字，宋体，顶格，加粗
三级标题，小四号字，宋体，顶格，加粗
2.正文
小四号字，宋体。
3.引文注释
引文后注释标示示例：激光平地技术能够大幅度地提高土地平整的精度，激光感应系统的灵敏度至少比人工肉眼判断和操作人员手动控制的准确度提高10～50倍，是常规平地技术所不及的[1]。这里[1]是右上标，其中[1]表示正文后面的参考文献中的第1个文献。
4.图表
正文中图、表均需编排序号，有图、表题目及说明(五号、宋体、加粗)。文中所列图形应有所选择，照片不得直接粘贴，须经扫描后以图片形式插入，插图宽度一般不超过10cm。标目中物理量的符号用斜体，单位符号用正体，坐标标值线朝里。标值的数字尽量不超过3位数，或小数点以后不多于1个0。如用30km代替30000m，用5μg代替0.005mg等，并与正文一致。中英文、罗马字符应统一，一般采用Time New Roman斜体(单位符号、缩写等除外)。
第五部分：参考文献
参考文献标题(三号，宋体，加粗，居中)
参考文献内容(五号、宋体;英文用五号，Times New Roman)
第六部分：附录标题(三号，宋体，加粗，居中)
内容的格式与正文相同。
第七部分： 致谢标题(三号，宋体，加粗，居中)
内容的格式与正文相同。
第八部分：版面要求
论文开本大小：210mm×297mm(A4纸)
版芯要求：左边距：25mm，右边距：25mm，上边距：30mm，下边距：25mm，页眉边距：23mm，页脚边距：18mm
字符间距：标准
行距：1.25倍
页眉页角：
从中文摘要开始，直到致谢为止;页眉的奇数页书写
沈阳农业大学学士学位论文。页眉的偶数页书写论文题目。在每页底部居中加页码。(宋体、五号、居中)
四、论文(设计)装订
经管学院的比较好过
我国对大学生的挫折教育是自上世纪末研究和开展的，但时至今日仍实效不足，大部分学校并未将大学生挫折教育作为一个系统的必要的工程去实施，以致不少悲剧连连发生。下面是我给大家推荐的大学生心理挫折及对策论文，希望大家喜欢!
《大学生挫折教育论》
[摘 要] 我国对大学生的挫折教育是自上世纪末研究和开展的，但时至今日仍实效不足，大部分学校并未将大学生挫折教育作为一个系统的必要的工程去实施，以致不少因大学生无法正面应对挫折而导致的悲剧连连发生。当今社会竞争愈发激烈，社会矛盾更加多元化，人际关系的复杂化等诸多因素都给涉世未深的“90后”带来了巨大的压力和挫败感。加强对“90后”大学生的挫折教育是改善当前“90后”大学生普遍心理素质较低、耐挫能力差的迫切要求。在科学分析大学生挫败感产生原因的基础上，应顺应时代发展，不断提出切实有效的策略，提高大学生心理素质和抗逆力，建立正确的世界观、人生观、价值观，保障大学生的全面发展。
[关键词] 大学生挫折教育;心理素质;干预对策;素质教育
【中图分类号】 G641 【文献标识码】 A 【文章编号】 1007-4244(2013)05-072-2
一、含义的界定
挫折和挫折感是普遍存在的一种社会现实和心理现象，是个体在实现目标过程中遇到难以克服的阻碍或干扰，使需要和动机无法满足而产生的紧张状态和情绪反应。
大学生挫折即大学生在大学期间在学习生活及人际等方面想达到某种目的或满足某种需求的过程中因情感、心理、行为等方面遭到阻碍或是干扰而导致形成的一种由烦恼、焦虑、困惑、迷茫等因素交织而成的一种负面的心理感受，此种心理感受有可能引发非正常思维或行为。
二、大学生挫折教育的现状
随着市场经济的不断深入，当代大学生自我实现的愿望不断提高，理想与现实的差距越来越大，同时他们正处于成年早期， 心理迅速走向成熟但又尚未完全成熟，往往表现出心理承受能力弱、耐挫折能力差的弱点，然而日趋激烈的社会竞争对人才的心理素质要求在不断提高。据调查，在北京市的大学生中，约25.56%的学生感觉有强烈挫折感，约29.35%的学生受挫折感困扰而处于心理上亚健康的状态。他们大多出生在20世纪90年代，相对优裕的生活环境为他们的成长提供了良好的物质条件，使他们减少了面对困难与承受挫折的机会，以至于许多大学生的抗挫折能力较差。由于家庭的溺爱，使他们很少接触到社会实践，抵抗挫折的能力得不到提高，因而容易产生脱离现实的虚幻想法，一旦遇到挫折，便产生消极的心理反应，导致情绪恶化或厌世，严重者甚至走向轻生。2012年7月12日，甘肃农业大学17号公寓一女大学生因无法正确看待自己考试作弊被校方发现这一事件而跳楼自杀，终结了自己宝贵的生命。挫折是每个人必然遭遇的问题，大学生因生活、学习中的小挫折频频陷入情感危机状态进而产生自我毁灭行为警示着社会各方对大学生进行抗挫折教育已刻不容缓。随着时代的进步、社会的发展，挫折教育日益被社会和广大家长接受和重视，并且成为教育界用心研究的课题，取得了一定的理论成果，但其中具有可行性的对策少之又少。
三、大学生挫折教育的重要意义
加强对“90后”的挫折教育既是我国素质教育新目标的必然要求，又是帮助学生“德、智、体、美”全面发展以更好地适应社会的历史重任，更是当前构建社会主义和谐社会的基本前提。高校学生工作者要注意培养学生的心理承受能力，增强学生的抗挫折能力，帮助他们树立科学的世界观、人生观和价值观，为他们提供情绪宣泄的安全机制，减轻他们的心理压力，从而使学生能更好的适应环境，迎接挑战。
四、当代大学生挫折感成因分析
大学生产生挫折感不是单一因素引发的，而是多种主客观原因综合互动的结果，主要可以归结为以下几方面：
(一)客观原因主要包括来自社会、学校、家庭环境等方面的因素。教育体制在学生挫折教育培养方面的欠缺，校方对学生挫折教育未给与足够重视，还有来自家庭方面的压力等都对大学生的心理挫折都有直接或间接的影响。
(二)主观原因主要包括来自学生自身智力、体力、外貌以及某些生理缺陷带来的限制。具体表现在：学业方面对专业学习缺乏兴趣;人际关系障碍;青春期的恋爱困扰;生理缺陷及疾病原因;期望值过高，理想追求受阻;就业挫折;物质需求性挫折等。
五、当代大学生挫折教育的对策
针对以上对当代大学生产生挫折感原因的分析和总结，另外在参考当前各高校在大学生挫折教育方面的一些具体实施办法的基础之上，就高校对于当代大学生的挫折感心理干预提出以下几点对策：
(一)教育大学生树立科学的世界观、人生观和价值观，确立正确的挫折观。一个人如果树立了正确的世界观、人生观和价值观，就能对社会、对人生、对世界上的事物有正确的了解和认识，并能采取适当的态度和反应，做到冷静而稳妥地处理问题。同时也能心胸开阔、乐观地面对生活，从而锻炼了抵抗挫折的能力。要教育学生面对挫折，培养挫折辩证观，挫折对人既是挑战，又是机遇，挫折可以使人生丰富多彩，帮助我们更好地认识自我和世界，大学生只有学会客观地分析挫折的原因，才能更好地了解自身及所处客观环境以及时调整个人努力的目标。
(二)教育大学生掌握一些应付挫折的具体方法。一是学会及时调整目标，当某一目标屡次无法达到时，可以考虑降低要求或采取其他方式。二是学会自我安慰， 挫折是走向成功的必经之路，遭遇挫折是每个人都会面临的事，我们不能在挫折面前全盘否定自己。三是学会转移注意力。经历挫折之后，通过短期内转移注意力，调节自我情绪，使心情得到放松，藉以减少精神痛苦，排遣烦闷。四是学会对亲人、朋友倾诉。遭受挫折后与亲人、朋友交谈，倾吐自己的不快，发泄自己的不满，一般情况下可以达到缓解自身压力，平衡自我心理的目的。
(三)学校应设立配备有高素质心理咨询指导人才的心理咨询室，开展热线咨询电话、心理咨询以及第二课堂活动。从新生入学起就重视学生心理素质的培养。可以为每一个学生建立保密心理档案，对发现有心理问题甚至心理疾病的同学要进行跟踪教育并建立预警机制。定期开展挫折教育讲座，从根源上解决问题，让挫折教育作为工作常态贯穿于素质教育的始终。
(四)发挥榜样的作用。高校可以将社会上勇敢战胜挫折的典型人、事，作为榜样，融于校园文化中，激励学生向榜样看齐;也可以组织学生观看励志类影视作品，陶冶性情、寓教于乐。
(五)提供情绪宣泄的安全机制，提高大学生对挫折的排解力。一个人处在受挫情境之中时往往会出现紧张的情绪反应，而这种紧张的情绪如果不能适时地宣泄出来，就可能被“累积”而导致病态心理乃至攻击行为的发生。所以，高校思想政治工作者要不断加强自身的思想政治理论素养，多与受挫者进行心理交流，采取个别谈话、意见箱等方式，给受挫者提供各种抒发受挫情绪的场所和机会，让他们自由地、毫无顾忌地倾诉自己的烦恼、苦闷和优虑，把不满的情绪全部宜泄出来，以达到内心的平衡。
(六)创设良好的群体环境，减轻大学生心理压力。大学生所在群体的人际关系以及环境氛围同其遭受挫折后，到底是战胜挫折、积极进取，还是畏缩不前、消极退却有很大关系。充满温暖、互相关心、爱护、体贴和帮助的群体氛围，会使受挫折从中获得战胜挫折的力量;而相互疏远、冷漠的群体氛围，则会降低受挫者战胜挫折的勇气。因此，高校思想政治工作者应该为受挫者创设一个良好的群体环境，使他们感受到集体的温暖。对于家庭比较贫困的大学生，要启动校园“爱心工程”，建立贫困生奖、贷、助、勤、免制度，鼓足他们克服困难的勇气;对于学习有困难的学生，建立班级“一帮一”互助小组，不让其在学习上掉队;特别对于心理有障碍的同学，教师要有更多的爱心和耐心，多和他们谈心、交流，鼓励其参加校园文体活动，帮助其克服孤僻、离群的心理，使他们在活动中意志得到磨练、情感得到升华。
(七)积极组织社会实践活动，完善大学生的个性。心理学研究表明，人对挫折的容忍力受到人的生理条件、遭受挫折的经验以及个人对挫折的思想准备的影响。磨炼大学生意志，提高大学生心理素质是提高大学生挫折容忍力的重要途径。教育工作者要积极引导大学生深入社会实践，引导大学生参加青年志愿活动、暑期“三下乡”等活动，使他们更好地认识社会，了解国情民情，接受生动的革命传统教育和吃苦耐劳、艰苦奋斗的教育。鼓励学生以义务的身份到社区医院、老人院、孤儿院、福利中心、收容所提供服务，奉献爱心培养自身的社会责任感和参与意识，发现个人价值的内容和体现方式，完善自身社会性人格和心理机制，增强战胜挫折、克服困难的能力，培养自己的挫折容忍力、情绪调适能力及心理承受能力。
(八)获得战胜挫折的经验。学生在学习、生活的过程中不免遭遇到一些小困难，一方面学校及家庭应形成教育合力，灌输给学生独立思考和处理问题的观念，培养学生凡事不过分依赖他人的好习惯，给与学生足够的信赖，摒弃以往事事包办的惯例，仅给予适当的引导和鼓励，让学生学会自己走出困境，获得战胜挫折的成就感。
(九)重视就业指导。当代大学生固有的优越感较强烈，不乏存在着眼高手低的现象，一方面高校应切实了解就业形势，在学生尚未毕业之前，多联系一些社会就业服务机构开展讲座，为在校大学生分析当前就业形势，给予就业建议，让学生对自身有个准确的定位。另一方面学生应重视实践、实习环节，高校老师应引导学生积极参与社会实践，严格完成实习工作任务，为大学生顺利步入工作岗位奠定基础。
(十)高校应在全校课程平台上专门开设挫折教育课程。可以将挫折教育从思想政治教育中单独分离出来，让学生更全面更系统地掌握挫折的基本知识、产生原因、应对办法，提高学生的抗挫折意识，增强学生应对挫折的自觉性。课程应本着理论教育与实践教育相结合的原则，采取多元灵活的授课方式，教师可以为学生创设各种遭遇挫折的情境，例如组织学生参加室外课堂或者野外生存训练，磨练学生的意志力和奋斗精神，培养他们冷静处理问题的能力。
(十一)组织学生学习如何正确应对突发的自然灾害和意外的危险状况。学校可模拟地震、海啸、泥石流、龙卷风等自然灾害突发的情境，教育学生在灾难来临时如何冷静理性地应对，求得生存。学校应教会学生如何在发生火灾、遭遇歹徒等意外状况中更好地确保自身安全，让学生在逆境中勇于面对挫折、挑战挫折。
(十二)号召学生积极参加体育活动。学校可以在夏、冬季节举办马拉松比赛，使参赛学生能在相对恶劣的天气状况下，勇于挑战自我，发现自我，使之身心得到锻炼，增强竞争和拼搏意识。学校可成立徒步旅行协会、山地自行车协会和攀岩协会等大学生感兴趣的与运动相关的协会，使学生在运动中磨练心智，发现潜能，培养良好的心理素质。
总而言之，大学生挫折教育根本上要依靠大学生自觉提高抗挫能力，同时需要社会、学校、家庭多方形成教育合力去完成，是一项长期复杂的工程，高校应发挥主力作用，同时家庭、社会应给与足够的配合和支持，切实提高大学生耐挫能力，保障大学生“德、智、体、美”全面发展。
参考文献：
[1]杜庆梅.90后大学生挫折教育研究.
[2]由雪莲，曲长旭，焦建亭. 大学生心理挫折感根源分析及解决途径调查研究[J].青年探索，2011，(04).
作者简介：李清怡(1991-)女，汉族，甘肃庆阳人，西北师范大学文学院文秘教育系，研究方向：文秘教育。
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收稿日期：2007-10-25基金项目：深圳市科技和信息局基金资助项目作者简介：王丹（1982-），女，辽宁本溪人，硕士研究生，从事植物生物技术研究。注：雷江丽为通讯作者。大花美人蕉茎尖组织培养技术研究王 丹1,2，雷江丽2，吴燕民3，吕 慧2，郁继华1(1.甘肃农业大学 农学院，甘肃 兰州 730070；2.深圳市园林科学研究所，广东 深圳 518003；3.中国农业科学院 生物技术研究所，北京 100081)摘 要：以大花美人蕉（Canna×generalis）根茎茎尖为外植体进行组织培养技术研究，筛选出芽诱导适宜的培养基为MS + 6-BA 8.0mg/L（单位下同）+ TDZ 0.03；MS + 6-BA 8.0 + TDZ 0.03 + NAA 0.1 培养基能较好地诱导分化出丛生芽, 继代增殖培养中与MS + 6-BA 3.0 + TDZ 0.03 + NAA 0.1 培养基交替使用可减少畸形芽，增殖系数达1.67；适宜的生根培养基为MS + 6-BA 1.0 + NAA 0.5，生根率达66.67%，且植株生长健壮，移栽易成活。关键词：大花美人蕉；茎尖；组织培养中图分类号：Q943.1 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2008)01-0033-04Research on Shoot-tip Culture of Canna×generalisWANG Dan1,2, LEI Jiang-li2, WU Yan-min3, LÜ Hui2, YU Ji-hua1(1.College of Agronomy, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, Gansu China; 2.Shenzhen Institute of LandscapeGardening, Shenzhen 518003, Guangdong China; 3.Biotechnology Research Institute, Chinese Academy of AgriculturalSciences, Beijing 100081, China)Abstract: The paper mainly studied on tissue culture of Canna×generalis with the stem tips asexplants. The results showed that the bud inoculation medium was MS + 6-BA 8.0mg/L+ TDZ0.03mg/L; the best of clump shoot induction and differentiation medium was MS + 6-BA 8.0mg/L +TDZ 0.03mg/L + NAA 0.1mg/L; using MS + 6-BA 3.0mg/L + TDZ 0.03mg/L + NAA 0.1mg/L asproliferation medium, an optimal proliferation rate was obtained. When the two kinds of mediumused alternatively, the effect was better. The optimum rooting medium was MS + 6-BA 1.0mg/L +NAA 0.5mg/L, the rate of rooting could reach 66.67%, and cultured in this medium, the plant grewwell and easy to survival.Key words: Canna×generalis; shoot-tip; tissue culture大花美人蕉(Canna×generalis)属美人蕉科(Cannaceae)美人蕉属(Canna)的园艺杂交种[1]，是多年生喜光宿根草本花卉，原产美洲热带和非洲等地。其枝叶茂盛、花朵艳丽、姿态优美、花期长，在深圳地区几乎全年开花，是配置大型花坛的优良品种。大花美人蕉不仅观赏价值高，而且能吸收硫、氯、氟、汞等有害物质，具有净化空气、保护环境的作用，因此，世界许多城市的园林绿化中都广泛应用。美人蕉传统的繁殖方式主要采用分切地下根茎的方法，繁殖速度慢、增殖效率低，而且连续营养繁殖造成病毒积累致使病毒病在各地相当普遍，严重影响其观赏价值。利用茎尖组织培养进行脱毒试管苗快繁，是目前大力繁殖与推广美人蕉的主要手段。关于美人蕉组织培养的研究报道较少[2,3]，本研究探索其组织培养高效的再生体系，以期为品种提纯复壮及遗传转化、性状改良奠定基础。2008,37(1):33-36.Subtropical Plant Science第·34· 37 卷1 材料与方法1.1 材料供试材料为目前城市绿化中普遍应用的大花美人蕉‘President’品种。1.2 外植体选择与处理选择生长健壮、无病虫害的优良母株，挖取带芽胞的根茎，去除表面老皮并用肥皂水清洗。用75%乙醇棉擦拭，然后采用不同的消毒剂及处理时间（0.1%升汞10min、2%次氯酸钠10min、2%次氯酸钠20min、2%次氯酸钠 + 0.1%升汞5min、2%次氯酸钠 + 0.1%升汞10min），封闭式振摇灭菌。无菌水冲洗5 次，置于超净工作台上备用。接种前，剥去外部叶片，露出生长点，立即切取茎尖进行接种。1.3 培养方法及培养条件试验于2006 年10 月在深圳市园林科学研究所组培室进行。诱导、增殖和生根培养基均选用MS为基本培养基，在不同培养阶段附加不同种类、不同浓度配比的植物生长调节剂（表2～表4），蔗糖3%，pH 5.8。培养温度(28±2)℃，光照强度2 500 lx，光照周期为14h/d，相对湿度70%～80%。每处理接种30 瓶。定期观察试管苗生长与分化情况。2 结果与分析2.1 不同消毒处理方式对外植体无菌化的影响因供试外植体取自美人蕉地下根茎，表面污染物较多，不易消毒，且不同植物及外植体的成熟度对消毒剂的反应不同，故本试验选用升汞和次氯酸钠进行灭菌效果比较，以筛选合适的消毒剂及消毒处理时间。由表1 可知，2%次氯酸钠20min 处理的无菌化效果较好，但茎尖褐化较严重，说明灭菌时间过长对去老皮后的幼嫩根茎影响较大。0.1%升汞10min 处理与2%次氯酸钠 + 0.1%升汞 10min处理，无菌化效果差异不大，但2%次氯酸钠 + 0.1%升汞 10min 处理有轻微药害。因此，后续实验选用0.1%升汞处理10min 进行外植体消毒。2.2 不同生长调节剂配比对芽诱导的影响以MS 为基本培养基，附加不同浓度6-BA、NAA、2,4-D、KT、TDZ 等（表2），以筛选出较适宜美人蕉茎尖诱导分化的配方。因美人蕉根茎具有休眠特性，芽诱导分化较难。TDZ 具有很强的促进细胞分裂活性，0.05～1.0μmol/L 即可有效促进分化[4]，因此，本实验对TDZ 的诱导效果进行初步探索。试验表明，在不添加任何生长调节剂的MS 基本培养基（1 号）上，茎尖接种10d 后开始生长，叶片展开后，生长停止；15d 后转接到新的MS 培养基上无明显生长，随后叶片逐渐变黄、萎蔫，说明基本培养基中添加生长调节剂是美人蕉离体培养的必要条件。在仅添加6-BA 的2、3、4 号培养基中，高浓度的2 号培养基分化率为33.33%，明显好于3、4号培养基，说明美人蕉启动芽诱导分化需要高浓度的细胞分裂素（表2）。11～16 号培养基添加物为不同生长调节剂与TDZ 组合（表2）。仅添加TDZ 的培养基分化率为0，而多种生长调节剂配合使用分化效果更好[5]。其中15 号培养基的侧芽分化率最高，达63.33%，且每个茎尖可增殖2～3 个侧芽，但个别茎尖经多次转接后有畸形芽；与2 号培养基相比，分化率明显提高，说明添加低浓度TDZ 可促进芽诱导分化（表2）（图版-a）。5、6、7 号培养基为生根培养基，探讨NAA 对美人蕉茎尖生长和生根的影响。试验结果初步说明美人蕉在6-BA/NAA 小于2/0.5 时生根率可达50%以上（表2）。8、9、10 号培养基，探讨美人蕉脱分化，诱导愈伤组织，但结果均不理想。因此，建立高效的美表1 不同消毒剂及处理时间对外植体无菌化的影响处 理 接种数污染数污染率(%) 药害情况0.1%升汞10min 30 5 16.67 基本无药害2%次氯酸钠10min 30 12 40.00 无药害2%次氯酸钠20min 30 4 13.33 20%有轻微药害2%次氯酸钠+0.1%升汞5min 30 10 33.33 3%有轻微药害2%次氯酸钠+0.1%升汞10min 30 5 16.67 7%有药害第1 期 王丹,等：大花美人蕉茎尖组织培养技术研究 ·35·人蕉遗传转化再生体系还需进一步探索愈伤组织诱导途径。2.3 芽继代增殖为了探讨优化的芽继代增殖培养基配方，按表3 设计6-BA、NAA、TDZ 的正交实验，以15 号培养基上分化出的丛生芽为接种材料，进行继代增殖培养（图版-b）。由表3 可见，除17、18 号培养基外，低浓度TDZ（0.03mg/L）的分化促进作用较高浓度（0.3mg/L）的效果好，说明高活性的TDZ 浓度过高反而抑制分化。当TDZ0.03mg/L 时, NAA 0.1mg/L 促分化作用显著优于NAA0.5mg/L。在TDZ、NAA 浓度相同的情况下，随着6-BA 浓度的升高，分化率提高。但随着继代次数的增多，含高浓度6-BA的27 号培养基分化率略有下降，甚至有个别畸形芽产生，说明高浓度细胞分裂素对短期的分化有促进作用[9]，但继代数次后，芽已经萌动，自身具有分化能力，需适当降低6-BA 浓度进行壮苗，以避免畸形芽产生。因此，在增殖过程中交替使用分化增殖系数较高的19 号培养基和27 号培养基，既可保证较高的芽分化率，又可使继代苗生长健壮，减少畸形芽。2.4 生根诱导增殖芽3～5cm 长时，转接到生根培养基上培养约10d 后，可见到根生成（图版-c）。接种20d 后统计生根结果（表4）。从表4可见，所用培养基上都有根生成，说明美人蕉生根较容易；结合生根率和生长势，我们认为MS + 6-BA 1.0 + NAA 0.5培养基较适宜美人蕉生根。表2 不同植物生长调节剂组合的比较植物生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA 2,4-D KT TDZ分化率(%) 生根率(%) 备注1 0 0 0 0 02 9 0 0 0 0 33.33 参考[2]3 5 0 0 0 0 23.33 参考[3]4 3 0 0 0 0 6.675 2 1 0 0 0 60.006 2 0.5 0 0 0 56.677 2 0.2 0 0 0 08 0 0 4 0 09 0 0 2 1 0 参考[6]10 0 0.2 0 2 0 参考[7]11 0 0 0 0 0.2 012 0 0.1 0 0 0.2 23.33 参考[8]13 0 0 0.5 0 0.1 3.3314 0 0 1 0 0.1 6.6715 8 0 0 0 0.03 63.3316 5 0 0.5 0 0.03 50.00表3 不同生长调节剂配比对芽继代繁殖的影响生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA TDZ接种数分化率(%)增值系数 生长势17 3.0 0.5 0.03 30 30.00d 1.20d ++18 3.0 0.5 0.30 30 36.67cd 1.50bc ++19 3.0 0.1 0.03 30 56.67a 1.67a ++20 3.0 0.1 0.30 30 33.33cd 1.46bc ++21 5.0 0.5 0.03 30 43.33c 1.60ab ++22 5.0 0.5 0.30 30 26.67d 1.33c ++23 5.0 0.1 0.03 30 56.67a 1.60ab ++24 5.0 0.1 0.30 30 53.33ab 1.57b +25 8.0 0.5 0.03 30 50.00b 1.53b ++26 8.0 0.5 0.30 30 26.67d 1.37c +27 8.0 0.1 0.03 30 60.00a 1.73a ++28 8.0 0.1 0.30 30 26.67d 1.37c +注：++ 表示生长势强；+表示生长势弱。同列中不同字母表示差异显著(P＜0.05＝，表4 同。表4 不同的生长调节剂配比对组培苗生根的影响生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA接种数生根苗数生根率(%)植株生长势29 0 0.5 30 19 63.33b +30 0 1.0 30 21 70.00a ++31 1.0 0.5 30 20 66.67ab +++32 1.0 1.0 30 16 53.33c ++注：+++ 表示生长势强；++表示生长势中等；+表示生长势弱。第·36· 37 卷3 结 论美人蕉根茎生长在土壤中，无菌化操作较困难。灭菌试验表明，0.1%升汞震荡灭菌10min 效果较好，采回的外植体应尽快处理接种，放置时间过长伤口处易染菌，导致接种后褐化较严重。MS + 6-BA 8.0 + ZDT 0.03 + NAA 0.1 培养基能较好地诱导分化丛生芽，MS + 6-BA 3.0 + TDZ 0.03+ NAA 0.1 为较好的增殖培养基，在增殖培养过程中这两种配方交替使用效果更好；短时间使用高浓度生长调节剂对增殖有促进作用，但长时间使用高浓度生长调节剂会使组培苗质量下降。在试验中还发现，转接次数多的茎尖较转接次数少的分化率大，建议在接种后的10～20d 内及时转接。选用MS + 6-BA 1.0 + NAA 0.5 为生根培养基，生根率较高，根系粗壮、根毛密集，植株生长健壮（图版-d），且移栽成活率较高。参考文献:[1] Segeren W, et al. 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格式和参考文献著录要求(这是我们学校的格式和要求，希望对你有帮助）1.本科毕业论文（设计）版式1.1 软件排版用微软Word软件排式，用A4 纸（297×210）纵向排式，文字从左至右通栏横排、打印。 1.2 页面设置页边距为上2.5cm, 下2.5cm, 左2.5cm, 右2 cm,装订线0，页眉边距为1.5cm,页脚边距为1.5cm。1.3 行间距固定值20磅2.本科毕业论文（设计）文字排式（包括中英文标题、正文文字、引文、注文、中英文摘要、中英文关键词）2.1论文题目、专业、学生和指导教师、摘要、主题词等排式2.1.1论文题目排式用小2～3号字，字体选用标宋（或黑体），居中排。论文题目的文字字数较少或较多时，按“2.3.3标题长度与转行”规定处理。2.1.2“专业”、“学生”和“指导教师”等排式“专业” 选用楷体4号字，排在论文（设计）题目的正下方，与论文（设计）题目之间空1行，居中排。“学生 □□□”与“指导教师 □□□”排为一行，选用楷体4号字，排在“专业”下方，与“专业”之间空1行，居中排。如有多位教师，可用“，”号间隔。2.1.3摘要排式摘要以摘录或缩编的方式复述本论文主要内容。要求：概括地、不加注释地摘录本论文的研究目的、方法、结果和结论；或简洁的介绍本论文阐述的主要内容及取得的进展。编写摘要应注意：客观反映原文内容，不得简单地重复题名中已有的信息，要着重反映论文的新内容和特别强调的观点。摘要宜采用第三人称过去式的写法（如“对……进行了研究”，“综述了……”等；不应写成“本文”、“我校……”等）。摘要不分段，以400字左右为宜。选用5号楷体字；“摘要”两字加黑。2.1.4主题词（关键词）排式主题词是表达论文主要内容的词或词组，是论文的重要检索点。主题词一般由3～5个词或词组组成。主题词直接从论文题目或论文正文中抽取。主题词在摘要后另起一行排。主题词的字级、字体和排式与“摘要”的相同。主题词与摘要之间不空行；主题词与正文之间空1行。2.2正文排式一律横排，通栏，文字选用小4号宋体。2.3标题排式标题可分为章（一级）、节（二级）、小节（三级）等。最小一级标题的字级应与正文文字的字级相同。2.3.1 标题的字级、字体（如标题级别较多，可在3号字与小4号之间用技术处理的方法区别，如加黑或不加黑）一级标题用小3号字，字体选用标宋黑体；二级标题用4号字，字体选用4号宋体加粗（或黑体）；三级标题用小4号字，字体选用楷体；最末一级标题用小4号字，字体选用宋体加黑（或黑体）。2.3.2 标题占行一级标题文字上下各空一行；居中排；二级标题的上面空一行，居中排；三级标题及其以下标题上下不空行，居左排。在两级标题连排的情况下，可省1～2行。2.3.3 标题长度与转行标题文字较多时，可按密排标题方式处理，即字与字之间不加间空。标题文字少时，可按疏排标题方式处理，即在字与字之间加间空。间空一般是两字间空两字，三字间空一字，四字间空半字，五字及五字以下不间空。标题文字长度占两行或两行以上的，可按多行标题方式处理，即应转行。标题转行：在标题文字的行长超过主体文字4/5行长的情况下，必须转行，转行标题文字居中排。标题转行不能割裂词义，如人名、地名、国名等，专有名词不能断开，虚词、术语、符号等不能转为下一行的第一字。在有副标题的情况下，应注意主题与副标题的关系与比例。2.4引文排式短句引文排式：与主体文字相同。大段引文排式：整段引文，另段起排，每行行头、行尾均缩进两格。引文上、下应各空一行。引文应变体。引文行头、行尾不加引号。诗歌等第一行的行头可后退四格或更多。2.5表格排式表格用字的字级用5号字（宋体）；表头（即表格名称）用5号黑体。每一表格应统一编号，该编号应在正文中相应处标明。表格宽度不能超过版心。续表（即一页未排完，下一页接着排的表）应在接排面的表上方加“续表”或“表×（续）”等字样，如续表不止一页，则需加上“续表一”等字样。如表格较大，也可用B4纸制成横表，按A4规格折叠后，装订入册。2.6图片排式手绘图、摄影照片、计算机制作图、印刷品等彩色、黑白图照均应清晰、清楚、准确，层次丰富。图片裁切或遮幅后不能造成不良效果。图片的长度和宽度不能超过版心尺寸。2.7目录排式目录中的标题不能超过三级。一级标题用小3～4号字；二级标题用4～小4号字；三级标题用小4号字。标题字体按由重到轻的原则选择。如一级标题用4黑，二级用4号字，三级用小4号字。标题文字居左，页码居右，之间用连续三连点连接。标题需转行的，转行后的标题文字应缩进1字处理。2.8 书眉排式“某某大学本科毕业论文” 或“某某大学本科毕业设计”用5号字居左排，论文题目或设计题目用5号字居右排；书眉与正文之间用下划线分隔。2.9 页码排式用5号字排在页脚居中。2.10 序言和后记排式字级与正文相同。字体可选用仿宋体或楷体等。版心宽度可略小于正文版心宽度。2.11附录排式附录应标明序号，各附录依次编排。如“附录1”排在版心左上角。“附录”用四号黑体字。附录文字的字级用5号字。3.本科毕业论文（设计）参考文献的著录要求 文科类各学院对论文（设计）的引、注、参考文献的著录要求，由各学院根据学科特点自行制订统一、规范的具体要求，并报教务处备案。理工医各专业毕业论文（设计）参考文献著录要求：引用资料、文献，均应说明来源。著录引文的参考文献采用顺序编码制。顺序编码制：按文章正文部分（包括图、表及其说明）引用文献的先后顺序连续编码。编码置于方括号中，用上标的形式（置于右上角），直接放在引文之后（如〔1〕；〔15,18〕；〔25－26〕）。3.1 专著著录要求、格式3.1.1专著著录格式主要责任者者.书名.其他责任者.版本.出版地：出版者,出版年：页次例1：刘少奇.论共产党员的修养.修订2版.北京：人民出版社，1962：76例2：中国科学院南京土壤研究所西沙群岛考察组.我国西沙群岛的土壤和乌粪矿.北京：科学出版社，19773.1.2专著中析出的文献著录格式 析出责任者.析出题名. 析出其他责任者.见：原文献责任者.原文献题目.版本.出版地：出版者，出版年.在原文献中的位置例1：黄蕴慧.国际矿物学研究的动向.见：程裕淇等编.世界地质科技发展动向.北京：地质出版社，1982：38－393.2 连续出版物（期刊）著录要求、格式析出责任（著）者. 析出题（篇）名. 析出其他责任者.原文献题名（刊名），版本.在原文献中的位置 例1：李四光.地壳构造与地壳运动.中国科学，1973（4）：400-429例2：赵均宇.略论辛亥革命前后的章太炎.光明日报，1977-03-24（4）3.3 会议录、论文集、论文汇编著录要求、格式著者.题（篇）名.In（见）：整篇文献的编者姓名ed.( 多编者用eds.),文集名，会议名，会址，开会年，出版地：出版者，出版年：页次3.4 学术报告著录要求、格式著者.题（篇）名.报告题名，编号，出版地：出版者，出版年：页次3.5 学位论文著录要求、格式著者.题（篇）名.学位授予单位，编号或缩微制品序号，年3.6 专利文献著录要求、格式专利申请者.专利题名.专利国别，专利文献种类，专利号.出版日期3.7其他私人通讯和未发表著作一般不能作为参考文献引用，如必须要引用时，应标明通讯人或著者的姓名、题（篇）名、地址和年、月、日。参考文献的著录要求摘自GB/T 3179-92
第一，本科毕业论文格式如下，毕业论文中附表的表头应写在表的上面，居中;论文附图的图题应写在图的下面，居中按表、图、公式在论文中出现的先后顺序分别编号。毕业论文中参考文献的书写格式严格按以下顺序：序号、作者姓名、书名(或文章名)、出版社(或期刊名)、出版或发表时间。论文格式的字体：各类标题(包括“参考文献”标题)用粗宋体;作者姓名、指导教师姓名、摘要、关键词、图表名、参考文献内容用楷体;正文、图表、页眉、页脚中的文字用宋体;英文用timesnewroman字体。第二，本科毕业论文格式如下，知网查重论文格式的字号：论文题目用三号字体，居中;一级标题用四号字体;二级标题、三级标题用小四号字体;页眉、页脚用小五号字体;其它用五号字体;图、表名居中。格式正文打印页码，下面居中。论文打印纸张规格：a4210×297毫米。第三，本科毕业论文格式如下，文件选项下的页面设置选项中，“字符数/行数”选使用默认字符数;页边距设为上：3厘米;下：2.5厘米;左：2.8厘米;右：2.8厘米;装订线：0.8厘米;装订线位置：左侧;页眉：1.8厘米;页脚1.8厘米。在格式选项下的段落设置选项中，“缩进”选0厘米，“间距”选0磅，“行距”选1.5倍，“特殊格式”选(无)，“调整右缩进”选项为空，“根据页面设置确定行高格线”选项为空。这些就是小编为大家讲的，主要的话还是要根据自己所在的高校规定的格式去写，大部分都是这样的。
本科论文答辩不同于研究生的有点走过场的感觉，讲下当时的经历吧1.其实PPT什么的都无所谓，除非有特殊要求，你要真想折腾，自己带投影机都行，只要从进门到开始讲解别超过3分钟，否则评委们就等得不耐烦了。2.气氛什么的可以忽略，你当面前坐着几棵萝卜白菜就行，至于那些说什么一答辩就紧张的，纯粹是自己吓自己。3.着装嘛，不要穿奇装异服，男同学不要戴耳钉，也别乱染发，有些老教授们就看不惯那个；女同学嘛，着装大方得体即可，首饰可以带，但是不要戴太艳丽的，整体感觉要端庄一些，Mini，大耳环，浓妆之类的只能给自己带来不必要麻烦。4.流程嘛，其实很简单：一排桌子前坐着几个答辩评委，叫到你以后，你先把论文交给他们，然后在讲台上把你的图纸之类的展示出来，然后就发挥你的口才吧，一般对各位教授一顿猛忽悠，他们都会放生你的。不过切记，图纸和设计上不要有明显的失误，特别是一些常识性的和专业性不强的失误，比如说，该擦掉的线没有擦掉，该在左边的东西你画都右边了，这种简单错误，一般容易被看出来，而且教授们往往也不能容忍。另外注意一点，如果是理工学科的，折叠图纸要专业点，会折图吧。千万别搞什么先对折，再对折，然后再对折----说出去丢人啊，教授们一看，连个图都不会叠？这4年书是怎么念得？那还不得好好挑挑你毛病？一副大图，折好了就像手风琴或者折扇一样，左右左右的折叠起来，这样图纸不仅好展开，而且收放简单，更不会搞的自己手忙脚乱的。这些都是给自己加印象分的。你要知道一点：对于大部分答辩评委来说，你的课题他此前很可能没有深入接触过，所了解的仅仅是你的当场介绍以及你交给他的论文，换句话说，他只有大概十来分钟时间来做准备----你可是准备了至少3个月吧如果你的论文不打算去获奖，对答辩成绩只追求到良好即可，不妨对自己的论文和成果反复熟悉，尽量多收集一些相关的知识、扩展和实际应用。争取讲解的时候滔滔不绝，思路清晰，语言流畅，一套讲下来，很多教授反而问不出来问题了。只能问你些简单的，大众化的问题，切记，真不懂得问题，不要不懂装懂啊，对手都是老狐狸了，不懂装懂会弄巧成拙的。他们问你问题的时候，你一定要谦虚谨慎，把他们当大爷一样供着就对了，最好再做到微笑服务（提前对着镜子练练吧）我当时答辩的过程，基本就是忽悠教授们吧。论文是答辩前4天连夜赶出来的，图纸是抄现成的设计的，计算答案一部分是别人算好的，另外一部分是根据那些数据，自行推测的（反正答辩时没人会演算你得计算过程，如果你的课题没有其他人参与，那么你的最终结果合理即可）记得嘴甜一点，提前向你的指导教授打听下你那组答辩评委（一般很容易做到，有时候你指导教授会专门给你们讲解下答辩技巧，并且介绍下答辩组成员。这要是没有，那你就去问一下好了），课题主任，那就叫主任；副教授，就叫教授；什么都不是，那估计是来凑数的评委，不知道该怎么叫，就尊称“您”好了，反正在座的那个都比你大，谦虚点也不吃亏。到了答辩现场时候，我上去先讲了30多分钟，着重介绍了课题的目的，方案，思路，用途，设计理念，设计创新点，结构优缺点，实用度，以及制作成本，推广前景，对设计者水平的提高，思路的开阔，眼界的扩展and so on。总之就是忽悠各位教授们，等我介绍完了，几个评委实在没什么可问的了，随便问了两个问题，放过过关：就这么临时拼凑的东西，最后得了个良好----这样子还能良好，我自己都觉得没天理了记住：一般每人给半小时左右的时间。你讲解的时间越少，留给评委的自由时间越多，对你来说就越危险！让他们一直听你的讲解,他们就没时间思考你设计上的结构和缺陷，最后一般就随便问你几个问题，就放你过关，出于安全考虑，你讲解的时间最好控制在27-29分钟，给评委留那么一点点的时间就行，他们会稍微拖延下答辩时间的，但是也就拖延几分钟，没多余时间为难你。我见过一些同学，只傻乎乎的讲上5分钟，然后就：请各位老师批评指。结果评委真的就满足了他的愿望：花了半小时，把整个设计被批得体无完肤，拿回去修改，准备二次答辩----何苦呢，多说几分钟生动的讲解词又累不死，何苦拿回来二次答辩啊听说曾经还有位师兄，上去先说了快一个小说，而且说的生动活泼，内容引人，颇有点说评书的感觉，最后答辩组长看了看他说：好了，装袋吧（当时，如果通过答辩，那么评委给你个档案袋，让你装你的论文，图纸什么的，最后写上名字即可：装袋吧，就是说通过了，你可以顺利毕业了）。当然了，这些也只是经验之谈。要想顺利通过答辩，功底还是扎实点的好，作为评委，可以指着你的设计的任何你部分，问你这部分的功能，效果，设计思路等等，再狠点的，还可以问你这么设计有什么优缺点，和其它部分的相关性怎么样。总之，要对你准备上交的论文做到了如指掌（论文是谁写的不重要，重要的是读透读熟，就好像是你自己设计的一样），这么一来，以不变应万变，区区答辩又能如何？呵呵，说了这么多乱七八糟的，希望对你能有点帮助，如果还有不明白的地方就再来问好了
论文的写作 你要先联系老师确定一个方向 后者 通过阅读文献得到关于答辩 可以去学生工作处咨询
根据甘肃农业大学官方文件，草业科学专硕毕业要求包括：1. 累计修满不低于36学分折合学分的课程；2. 在校期间参加学术论文答辩，达到要求；3. 论文质量达到一定标准的要求；4. 获得研究生学位考试英语4级或国家规定的其他外语水平。
1.平均分达到高校要求，平均分也就是说二年半下来全部课程成绩平均分要达到75分。2.论文答辩达到良好3.成人本科学士学位英语考试合格。