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你好，计算机病毒的预防和诊断的毕业论文
随着Internet的迅速发展我国的互联网用户不断的增加，成为仅次于美国的国家，位居世界第二。互联网的发展也使得计算机病毒开始渗透到信息社会的各个领域，给计算机网络系统带来了巨大的破坏和潜在的威胁。为了确保信息的安全与畅通，研究计算机病毒的防范措施已迫在眉睫。计算机病毒的防治目前主要有主动防御技术和启发式病毒扫描技术等，也在朝着一些新的趋势发展。【目前主要有主动防御技术和启发式病毒扫描技术等。本文将从计算机的特点入手，来探讨对付计算机病毒维护计算机网络安全的方法和措施。
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中小企业防病毒侵扰的低成本解决方案 文章摘自：中华论文网 在信息化浪潮席卷全球的互联网时代，面对每年呈直线上升的各类病毒在网络恣意横行，无数网民和企业无不谈“毒”色变。但众多中小企业却认为下载几个盗版软件，或者购置几个基本的防毒设备便可万事大吉，正是因为企业这样为单纯节省经营成本，而未对网络安全防护工作引起足够的重视，当面对变异速度惊人的多种病毒的侵袭时，缺乏专业的防毒服务指导，致使其网络安全时刻处于危境之中，当病毒侵袭时，便造成其大量的经济损失，令目前中小企业的网络安全工作如履薄冰。 现有防护工作频遭病毒挑战 中小企业网络安全处境堪忧 据有关资料统计，中国超过90%的中小企业用户仍长期依赖陈旧的基础网络安全防护设备，缺少完备的安全预警系统和专业的防毒指导服务，对病毒预先防范的意识非常薄弱。大多数的中小企业或出于业务量方面的限制，或是对网络安全工作不够重视，加之公司内部员工通常都不懂得如何正确使用互联网络和邮箱，导致中小企业在网络安全工作方面存在很多的漏洞，使花样百出的病毒得已乘虚而入。如果病毒一旦爆发，对于这样的企业来说，面对公司内部网管人员防毒经验有限，又没有足够的资源应对当前的威胁，其经果将造成公司整个应用系统整体瘫痪，从而损失大量的直接成本。有些企业为了避免损失进一步扩大，便花很高的费用请专业的公司重新恢复系统，造成高额的防毒成本，也很大程度上降低公司整体的经济效益。 有一家规模200人左右的私企，由企业自身的业务性质决定，对互联资源的使用非常频繁，同事之间的信息互通和资源共享更是再普通不过的工作方式，可由于“QQ书虫”和“MSN骗子”这类即时工具的病毒泛滥，为安全起见，网管无奈关闭了相应的IP，使得办公区内电话铃四起，员工的身影四处可见，办公氛围非常糟糕。而企业因提倡反辐射的“绿色办公”应运而生的笔记本策略，使员工大部分都用配备了笔记本电脑，去年秋天企业就因为有个喜欢回家玩两下子的员工，拖着染了一身“传奇木马”病毒的笔记本来到公司而自己却浑然不知，连接公司的局域网后，就使上台机器都感染了木马病毒，公司的网络瞬间陷入瘫痪，网管措手不及，不得已从外面请来了“IT保姆公司”的好几位专家一起来帮忙杀毒，整整杀了近一周的时间。 “虽然我们已经在整体的网络安全上做了很好的防护，杀毒软件、硬件防火墙都已安装、配备，但是病毒的种类花样翻新实在太快，而且公司很多员工对网络知道也不知道，很难从病毒灾难中吸取经验，所以还是无法避免这类的情况发生。如果能够有那种可以随时发现系统漏洞，并可以提供给我一些数据分析和专业防毒指导方面的服务，将会给我很大的帮助”这家公司的网管如是说。 从中小企业的网络安全隐患重重的原因可以看出，普通的反病毒系统只能防护已知问题，对新病毒攻击还是无可奈何；传统防病毒效能滞后，智能防病毒天天误报，速度和精度无法同时达到标准；没有可以根据情境动态调教反病毒系统的设定和策略的资源支持等等，众多的网络安全问题挥之不去，中小企业不断地被动接受各种病毒的挑战，网络处境不堪其忧，对更有效的主动式病毒防护服务的需求日益强烈。 专家级的安全服务 解决中小企业网络安全问题 趋势科技推出的网络安全专家服务（TMES）将打破单纯依靠传统软硬件防毒服务的被动式网络安全解决方案，为以主动式网络安全服务极大程度地缓解了企业级用户糟糕的网络安全现状，并将在中小企业目前存在的种种网络安全防护问题上，推出更具针对性的专家级网络安全服务。 作为可信赖的网络安全专家，趋势科技调查发现，大多数的中小企业还未认知到，造成其被百毒困扰现状的本源实为缺少专业的网络安全服务，而有少数的中小企业虽已开始认识到缺少网络安全服务威胁的严重性，却由于市场上存在的服务过于复杂，企业网络管理人员不能找到一个针对中小型企业的简便的安全服务，因而放弃使用。趋势科技针对中小企业的网络安全的管理痛点推出自动防护的一站解决方案，并且可形成防病毒系统完整的日常报表，直接就能根据当前的网络状况给出专家级的分析建议，网络管理员不用再头疼自己去进行分析总结还不能肯定自己的判断了，从而让中小型企业也能享受到专家级的安全服务和咨询。 趋势科技的网络专家服务，也将一并解决中小企业网络管理人员缺乏的现实问题，令其在感染恶意网络威胁可以严重地影响生产率的情况下，利用自动防护的一站式解决方案可将这种威胁所导致的可能损害方面所花费的时间最小化，从而使客户能够全神关注于其最有价值的事务，推动企业向前发展。种种迹象表明，企业单纯依靠软硬件被动式杀毒的时代已经一去不复返了，简单的病毒防护方式已让企业不能够应对互联网络环境的日新月异，拥有基础的软硬件设备，还要配合主动式病毒防御服务，才能建立起更为完善的网络安全防护体系，全面有效控制病毒的滋长。而产品与服务相结合的防毒方式也将成为未来信息安全发展的必然方向。
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医学微生物学论文题目参考
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预防医学毕业论文选题
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医学检验免疫毕业论文题目
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11、酶免工作站监控系统的设计与实现
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15、我国医学检验本科专业人才培养的问题与对策研究
16、基于电化学分子信标基因传感技术的HIV-1核酸检测新方法研究
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27、医用臭氧与α-干扰素对照治疗慢性乙型病毒性肝炎
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30、临床毛细管电泳的研究
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在5月12日，有一个勒索病毒攻击了全球各个国家的电脑，导致很多电脑瘫痪，这里有人不知道这个勒索病毒是什么回事，怎么传播，还有怎么处理，这里我就来给大家介绍一下。
医院员工称，他们的电脑屏幕上弹出窗口。黑客们发送的消息说，医院的电脑已经被控制，必须缴纳赎金才能阻止所有的文件被删除。
同样的攻击快速蔓延，意大利、俄罗斯相继被勒索病毒攻击。
勒索病毒是谁弄得？勒索病毒是谁发的？
病毒发行者利用了去年被盗的美国国家安全局（NSA）自主设计的Windows系统黑客工具Eternal Blue，将2017年2月的一款勒索病毒升级。被感染的Windows用户必须在7天内交纳比特币作为赎金，否则电脑数据将被全部删除且无法修复。勒索病毒要求用户在被感染后的三天内交纳相当于300美元的比特币，三天后“赎金”将翻倍。英国NHS官方宣布，袭击该系统的勒索病毒叫做WannaCry（想哭吗）或Wanna Decryptor（想解锁吗）。
国内方面，校园网成勒索病毒重灾区
国内方面，校园网成勒索病毒肆虐之所。5月12日晚间20点左右，国内部分高校学生反映电脑被病毒攻击，文档被加密。攻击者称需支付比特币解锁。目前受影响的有贺州学院、桂林电子科技大学、桂林航天工业学院、大连海事大学、山东大学等。正直毕业季，北辰提醒广大学子及时备份毕业论文，升级电脑安全等级，避免遭受损失。
据360安全中心分析，此次校园网勒索病毒是由NSA泄漏的“永恒之蓝”黑客武器传播的。“永恒之蓝”可远程攻击Windows的445端口（文件共享），如果系统没有安装今年3月的微软补丁，无需用户任何操作，只要开机上网，“永恒之蓝”就能在电脑里执行任意代码，植入勒索病毒等恶意程序。
为何校园网成重灾区？
360针对校园网勒索病毒事件的监测数据显示，国内首先出现的是ONION病毒，平均每小时攻击约200次，夜间高峰期达到每小时1000多次；WNCRY勒索病毒则是5月12日下午新出现的全球性攻击，并在中国的校园网迅速扩散，夜间高峰期每小时攻击约4000次。
由于国内曾多次出现利用445端口传播的蠕虫病毒，部分运营商对个人用户封掉了445端口。但是教育网并无此限制，存在大量暴露着445端口的机器，因此成为不法分子使用NSA黑客武器攻击的重灾区。正值高校毕业季，勒索病毒已造成一些应届毕业生的论文被加密篡改，直接影响到毕业答辩。
目前，“永恒之蓝”传播的勒索病毒以ONION和WNCRY两个家族为主，受害机器的磁盘文件会被篡改为相应的后缀，图片、文档、视频、压缩包等各类资料都无法正常打开，只有支付赎金才能解密恢复。
如何应对勒索病毒？
针对NSA黑客武器利用的Windows系统漏洞，微软在今年3月已发布补丁修复。此前360安全中心也已推出“NSA武器库免疫工具”，(NSA武器库免疫工具：)免疫工具可以关闭漏洞利用的端口，防止电脑被NSA黑客武器植入勒索病毒等恶意程序。建议电脑用户尽快使用360“NSA武器库免疫工具”进行防御。
比特币黑产链？
安全专家发现，ONION勒索病毒还会与挖矿机（运算生成虚拟货币）、远控木马组团传播，形成一个集合挖矿、远控、勒索多种恶意行为的木马病毒“大礼包”，专门选择高性能服务器挖矿牟利，对普通电脑则会加密文件敲诈钱财，最大化地压榨受害机器的经济价值。
据外媒报道，与勒索病毒相连的比特币账户已经有了不少进账。由于勒索付费也突显了比特币无法被监管部门追踪的特性。
【关键词】 树突状细胞；绿色荧光蛋白；RNA；转染 Effect of dendritic cells transfected with total RNA of HepG2 cell line using GFP marker in vitro 【Abstract】 AIM: To investigate the feasibility of GFP as a marker to observe the dendritic cells (DCs) transfected with total RNA of tumor cells and the feasibility of the transfected DCs serving as a vaccine for potential immunotherapy. METHODS: Plasmid pGFPC3 was transfected into HepG2 stably. Total RNA was extracted from the HepG2GFP using Trizol; DCs were induced by liver cancer patients peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), and transfected with the total RNA. The effect of transfection was observed by a fluorescence microscope, the changes of phenotype were detected by flow cytometry, and the change of IL12 secretion in the supernatant of DCs was detected by ELISA assay. The cytotoxic effect of CTLs was assessed by MTT assay. RESULTS: GFP was expressed stably in the HepG2GFP cells that presented green fluorescence under a fluorescence microscope, so did DCs transfected with total HepG2GFP cell RNA. After transfection, the expression of membrane molecules such as CD80 ( to ), HLADR ( to ), CD83 ( to ), CD86 ( to ) was increased dramatically, IL12 secretion in the supernatant was elevated significantly 〔(±) ng/L to (±) ng/L, P＜〕. The CTLs activated by DCs transfected with total HepG2GFP RNA showed a potent specific lysis to HepG2 cells. CONCLUSION: GFP could be used as a marker to observe the effect of transfection of DCs with total tumor cell RNA. DCs transfected with total tumor cell RNA may serve as a promising vaccine of immunotherapy. 【Keywords】 dendritic cell；green fluorescent protein；RNA；transfection 【摘要】 目的：探讨GFP作为标记观察肝癌细胞RNA转染DCs效果的可行性及肿瘤细胞RNA转染DCs制备疫苗的可行性. 方法：绿色荧光蛋白质粒载体 pGFPC3稳定转染肝癌细胞HepG2，Trizol法提取筛选后细胞HepG2GFP总RNA；分离肝癌患者外周血单核细胞体外诱导DCs细胞，总RNA转染DCs，荧光显微镜下观察转染效果，流式细胞仪检测转染前后DCs表型变化；ELISA法检测转染前后上清中IL12变化情况；MTT法检测效应细胞对靶细胞的杀伤率. 结果：pGFPC3稳定转染肝癌细胞HepG2后可得到稳定表达GFP的细胞HepG2GFP，荧光显微镜下呈绿色荧光；总RNA转染的DCs荧光显微镜下呈绿色荧光，CD80(上升至)，HLADR(上升至)，CD83(上升至)，CD86(上升至)表达明显升高，上清IL12分泌量ng/L显著增高(±→±，P＜)；诱导的CTL能够对肝癌细胞株HepG2起特异性杀伤作用. 结论：GFP可以作为肿瘤细胞RNA转染树突状细胞的观察标记，肿瘤细胞RNA转染DCs可作为一种有效的肿瘤疫苗. 【关键词】 树突状细胞；绿色荧光蛋白；RNA；转染 【中图号】 0引言 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是一种常见的恶性肿瘤，适合手术治疗的患者只占一少部分，具有较高的复发率，预后很差，严重威胁人类健康〔1〕. DCs(dendritic cells, DCs)是体内功能强大的专职性抗原提呈细胞，它能够高效的摄取、处理抗原，并将处理后的多肽呈递给静息型T细胞，引起针对该抗原的特异性免疫反应〔2〕. 国内外类似的研究中，都没有明确的可以观察肿瘤RNA转染DCs效果的指标，我们应用绿色荧光蛋白质粒载体 pGFPC3稳定转染肝癌细胞HepG2，提取筛选后细胞HepG2GFP总RNA转染DCs，观察转染后DCs绿色荧光蛋白表达及特异性表面标志及功能相关分子表达，检测其上清细胞因子分泌，探讨其作为肿瘤疫苗的可行性. 1材料和方法 材料肝癌患者外周血单个核细胞来源于我科造血干细胞移植患者；HepG2肝癌细胞株由我科常规传代培养. 流式细胞仪（BD），DG3022A型酶联免疫检测仪（华东电子管厂），荧光显微镜Optiphot XIF（Nicon）等均为我院常备. FITCCD80，FITCHLADR，PECD83，PECD86抗体购自BD公司；rhGMCSF，rhIL4购自Peprorotec公司；TNFα购自我校生物技术中心；绿色荧光蛋白载体pGFPC3由陕西省肿瘤医院贾军博士惠赠；脂质体Transfection2000，Trizol Reagent购自Invitrogen；RPMI 1640培养基、胎牛血清、G418购自Gibco公司，Xvivo无血清培养基购自BioWhittaker；IL12 ELISA检测试剂盒购自Bioscience公司；MTT购自Sigma公司. 方法参照Transfection2000说明书，pGFPC3转染HepG2，G418筛选2 mon. 筛选细胞命名HepG2GFP，荧光显微镜下观察. Trizol试剂提取HepG2GFP总RNA，紫外灯下观察，-80℃冻存备用. 同样方法提取HepG2总RNA. 取肝癌患者造血干细胞分离液，贴壁法分离单核细胞，贴壁细胞在细胞因子rhGMCSF，rhIL4作用下，诱导DCs. 倒置显微镜、电子显微镜观察细胞形态，流式细胞仪检测细胞表型. 转染树突状细胞收集培养4 d的DCs，转入6孔板，转染HepG2GFP总RNA. 另设转染HepG2总RNA及空白对照组. 继续培养48 h. 荧光显微镜下观察. 细胞因子分泌的测定48 h后，收集各组DCs上清，ELISA法检测转染前后各组细胞上清中IL12分泌量. 效应收集各组DCs，30 Gy 60Co照射后与复苏冻存的非贴壁细胞按20∶1比例混合接种于24孔板，培养5 d，收集的细胞即为效应细胞. 收集对数生长期的HepG2细胞作为靶细胞，将效应细胞与靶细胞按20∶1比例混合接种于96孔板. 同时设单一靶细胞组、单一效应细胞组. 培养24 h后，MTT法检测.以下述公式计算杀伤效率.CTL杀伤效率=〔1-（效靶A490-效应细胞A490）/靶细胞A490〕×100%.统计学方法：结果采用SPSS 统计软件分析.2结果 总RNA转染DCs稳定转染及筛选后得到的HepG2GFP细胞，能够稳定的表达GFP，荧光显微镜下所有细胞都呈现绿色荧光（图1），传代20次以上仍无消失. 与对照细胞相比，GFP基因修饰细胞在形态、生长等特性上均无显著改变，也未见GFP表达对靶细胞的毒性. 使用Trizol提取HepG2GFP细胞总RNA后，取2 μL总RNA进行凝胶电泳，可见5 s，18 s和28 s条带（图2）. 单个核细胞贴壁后，贴壁细胞在细胞因子GMCSF，IL4的作用下，培养第2日出现细胞集落，但细胞集落较小. 5 d后，集落明显增加、变大，出现具有毛刺状突起的细胞. 至7 d，集落开始减少，产生大量具有树枝状突起的细胞（图3A，B）. 荧光显微镜下，HepG2GFP总RNA转染DCs组细胞呈绿色荧光，而HepG2总RNA转染组及空白对照组则无明显荧光表达（图4A，B，C）. 图1荧光显微镜下pGFPC3稳定转染后HepG2胞浆荧光阳性 ×250（略） 图2HepG2GFP细胞的总RNA电泳（略） 图3树突状细胞形态(第7日)（略） 流式细胞仪检测细胞表型诱导d 7，DCs表达CD80 ，HLADR ，CD86 ，CD83低表达，仅；转染后上述分子表达明显升高，分别为CD80 ，HLADR ，CD86 ，CD83 ，提示转染后细胞具有成熟DCs特征. 图4总RNA转染DCs×250（略） 检测IL12分泌HepG2GFP总RNA转染DCs组上清中IL12分泌明显增加，显著高于转染前〔（±) ng/L vs (±) ng/L； n=6，P＜〕. 介导细胞毒效应HepG2GFP总RNA转染DCs刺激的CTL对HepG2细胞杀伤率为（±）%，未转染的DCs刺激的T细胞对HepG2的杀伤作用为(±)%，无DCs刺激T细胞对HepG2的杀伤作用为(±)%，总RNA转染DCs刺激的CTL对HepG2细胞杀伤率明显高于两个对照组（n=6，P＜）. HepG2GFP总RNA转染DCs刺激的CTL对SMMC7721和K562细胞杀伤率分别为(±)%和(±)%，对HepG2细胞杀伤率明显高于SMMC7721和K562细胞（n=6，P＜）. 3讨论 DCs是体内功能最强大的专职性抗原提呈细胞，它在T细胞免疫中发挥着极其重要的作用〔2〕. 应用各种肿瘤抗原致敏DCs制备疫苗是近年来研究的热点 〔3-8〕. 肿瘤细胞总RNA转染DCs制备疫苗与其他方法相比，具有如下优越性：首先，它不受已知肿瘤抗原的限制，可诱导出多克隆的CTL；其次，转染所需的RNA可以通过扩增方法得到，很少量的肿瘤组织样本即可扩增得到大量的RNA〔8〕. 但目前国内外的研究中，尚未有可以明确观察总RNA转染DCs效率的方法. 我们应用稳定表达GFP的HepG2GFP总RNA转染DCs，以GFP为标记观察总RNA转染DCs的效率，探讨其作为肿瘤疫苗的可行性，为肝癌临床治疗提供实验基础. 本试验中，HepG2GFP总RNA转染后的DCs在荧光显微镜下观察，胞质呈现绿色荧光，证实GFP mRNA可以在DCs胞质内正常表达，同时说明肿瘤细胞总RNA同样也可以在DCs胞浆内进行翻译表达. 转染后CD83，CD80，CD86，HLADR表达明显升高，IL12分泌明显增加，说明RNA转染，促进了DCs的体外成熟. 成熟DCs主要通过MHCI类途径，将肿瘤细胞总RNA在DCs胞质内进行翻译表达的肿瘤抗原呈递给T淋巴细胞. 此途径诱导的T淋巴细胞主要为CD8+细胞毒性T淋巴细胞（CTL）. 本试验中，诱导的CTL对HepG2的细胞毒效应明显高于对照组T细胞，证实诱导的T淋巴细胞为肿瘤特异性的. 因此，在当前仍未发现肝癌特异性抗原情况下，应用肝癌细胞总RNA转染DCs制备瘤苗，诱导针对肝癌细胞的多克隆CTL，可以作为肝癌DCs疫苗的一个发展方向. 【参考文献】 〔1〕 Qin LX, Tang ZY. The prognostic molecular markers in hepatocellular carcinoma 〔J〕. World J Gastroenterol, 2002, 8(3):385-392. 〔2〕 张红梅,任军,张利旺,等. 外周血造血干细胞体外定向诱导树突状细胞及功能鉴定〔J〕. 第四军医大学学报,2003, 24(1):83-85. 〔3〕 Kaplan JM, Yu Q, Piraino ST, et al. Induction of antitumor immunity with dendritic cells transducted with adenovirus vector encoding endogenous tumorassociated antigens 〔J〕. J Immunol,1999, 163(2): 699. 〔4〕 Schnurr M, Galambos P, Scholz C, et al. Tumor cell lysatepulsed human dendritic cells induce a Tcell response against pancreatic carcinoma cells: An in vitro model for the assessment of tumor vaccines 〔J〕. Cancer Res, 2001, 61(17):6445-6450. 〔5〕 Barbuto JA, Ensina LF, Neves AR, et al. Dendritic celltumor cell hybrid vaccination for metastatic cancer 〔J〕. Cancer Immunol Immunother, 2004, 53: 1111-1118. 〔6〕 Heiser A, Maurice MA, Yancey DR, et al. Induction of polyclonal prostate cancerspecific CTL using dendritic cells transfected with amplified tumor RNA 〔J〕. J Immunol, 2001, 166: 2953-2960. 〔7〕 Heiser A, Coleman D, Dannull J, et al. Autologous dendritic cells transfected with prostatespecific antigen RNA stimulate CTL responses against metastatic prostate tumors 〔J〕. J Clin Invest, 2002, 109(3):409-417. 〔8〕 Kalady MF, Onaitis MW, Emani S, et al. Dendritic cells pulsed with pancreatic cancer total tumor RNA generate specific antipancreatic cancer T cells 〔J〕. J Gastrointest Surg, 2004, 8(2):175-181.
【关键词】 靶向给药；药剂学；药物载体0引言常规剂型的药物经静脉、口服或局部注射后，药物分布于全身，真正到达治疗靶区的药物量仅为给药量的小部分，而大部分药物在非靶区的分布不仅无治疗作用，还会带来毒副作用. 因此，药物新剂型的开发已成为现代药剂学发展的一个方向，其中靶向给药系统（Targeted drug delivery system, TDDS）的研究已经成为药剂学研究热点〔1〕. TDDS指一类能使药物浓集定位于病变组织、器官、细胞或细胞内的新型给药系统. 靶向制剂具有疗效高、药物用量少. 毒副作用小等优点. 理想的TDDS应在靶器官或作用部位释药，同时全身摄取很少，这样，既可提高疗效，又可降低药物的毒副作用. TDDS要求药物能到达靶器官、靶细胞，甚至细胞内的结构，并要求有一定浓度的药物停留相当长的时间，以便发挥药效. 成功的TDDS应具备3个要素：定位蓄积、控制释药、无毒可生物降解. 靶向制剂包括被动靶向制剂、主动靶向制剂和物理化学靶向制剂3大类. 目前，实现靶向给药的主要方法有载体介导、受体介导、前药、化学传递系统等. 现就靶向给药方法研究进展作一介绍.1载体介导的靶向给药常用的靶向给药载体是各种微粒. 微粒给药系统具有被动靶向的性能. 有机药物经微粒化可提高其生物利用度及制剂的均匀性、分散性和吸收性，改变其体内分布. 微粒给药系统包括脂质体(LS)，纳米粒(NP)或纳米囊(NC)，微球(MS)或微囊(MC)，细胞和乳剂等. 微粒靶向于各器官的机制在于网状内皮系统(RES)具有丰富的吞噬细胞，可将一定大小的微粒( μm)作为异物摄取于肝、脾；较大的微粒(7~30 μm)不能滤过毛细血管床，被机械截留于肺部；而小于50 nm的微粒可通过毛细血管末梢进入骨髓.肝癌、肝炎等肝脏疾病是常见病和多发病，但目前药物治疗效果很不理想，其原因除药物本身药理作用尚不够理想外，不能将药物有效地输送至肝脏的病变部位也是一重要原因. 将一些抗肿瘤、抗肝炎药物制备成微粒，给药后可增加药物的肝靶向性. 米托蒽醌白蛋白微球（DHAQ BSA MS）的体内分布研究发现，给药20 min时，DHAQ BSA MS和米托蒽醌（DHAQ）在小鼠体内分布有显著差异，DHAQ BSA MS约有80%的药物集中在肝脏，而以上的DHAQ存在于血液中〔2〕. 张莉等〔3〕考察去甲斑蝥素（NCTD）微乳的形态、粒径分布及生物安全性，研究NCTD微乳及其注射液在小鼠体内的组织分布，结果表明，NCTD微乳较NCTD注射液增强了药物的肝靶向性，降低了肾脏分布，在一定程度上延长药物在小鼠体内的循环时间. 纳米粒和纳米囊肝靶向制剂的研究报道较多，如氟尿嘧啶、阿霉素、羟基喜树碱、狼毒乙素、环孢素等抗癌药物都被制成了纳米靶向制剂〔4〕. 王剑红等〔5〕采用二步法制备米托蒽醌明胶微球，粒径在 μm范围的占总数，体外释药与原药相比延长了4倍. 经小鼠体内分布试验表明具有明显的肺靶向性，靶向效率增加了3~35倍，肺中药代动力学行为可用一室开放模型描述，平均滞留时间延长10 h. 在纳米粒表面上包封亲水性表面活性剂，或通过化学方法连接上聚乙二醇或其衍生物，可以减少与网状内皮细胞膜的亲和性，从而避免网状内皮细胞的吞噬，提高毫微粒对脑组织的靶向性. Gulyaev等〔6〕以生物降解材料聚氰基丙烯酸丁酯为载体，以吐温80为包封材料制备了阿霉素毫微粒，研究结果表明脑中阿霉素浓度是对照组的60倍. 一些易于分解的多肽或不能通过血脑屏障的药物（如达拉根、洛哌丁胺、筒箭毒碱）通过制成包有吐温80的生物降解毫微粒在动物身上已取得一定的靶向治疗效果〔7〕. 研究表明粒径是影响微粒进入骨髓的关键因素，粒径越小越容易进入骨髓. 彭应旭等〔8〕制得不同粒径的柔红霉素聚氰基丙烯酸正丁酯毫微粒，小鼠尾静脉给药，小粒径组（70±24） nm骨髓内柔红霉素浓度是大粒径组（425±75） nm的倍. 骨髓会因肿瘤浸润、化疗药物或严重感染受到抑制. 研究表明，多种生长因子，如人粒细胞集落刺激因子（GCSF），粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GMCSF）可促使骨髓细胞自我更新、分裂增殖，并提高其活性. 利用骨髓靶向载体可提高药物在骨髓内分布，并避免血象中的不良反应. Gibaud等〔9〕以聚氰基丙烯酸异丁酯、异己酯毫微粒为载体携带GCSF，提高了其在骨髓内的分布.基因治疗是一种专一性的靶向治疗. 基因治疗就是利用基因转移技术将外源重组基因或核酸导入人体靶细胞内，以纠正基因缺陷或其表达异常. 纳米颗粒作为基因载体具有一些显著的优点. 纳米颗粒能包裹、浓缩、保护核苷酸，使其免遭核酸酶的降解；比表面积大，具有生物亲和性，易于在其表面耦联特异性的靶向分子，实现基因治疗的特异性；在循环系统中的循环时间较普通颗粒明显延长，在一定时间内不会像普通颗粒那样迅速地被吞噬细胞清除；让核苷酸缓慢释放，有效地延长作用时间，并维持有效的产物浓度，提高转染效率和转染产物的生物利用度；代谢产物少，副作用小，无免疫排斥反应等.2受体介导的靶向给药利用细胞表面的受体设计靶向给药系统是最常见的主动靶向给药系统. 去唾液酸糖蛋白受体（ASGPR）是一种跨膜糖蛋白，它存在于哺乳动物的肝实质细胞上. 其主要功能是去除唾液酸糖蛋白和凋亡细胞、清除脂蛋白. 研究发现，ASGPR能特异性地识别N乙酰氨基半乳糖、半乳糖和乳糖，利用这些特性可以将一些外源的功能性物质经过半乳糖等修饰后，定向地转入到肝细胞中发挥作用. Lee等合成了三分枝N乙酰氨基半乳糖糖簇YEE，它与肝细胞的结合能力为乙酰氨基半乳糖单糖的1万倍. 我们考察了半乳糖苷修饰的十六酸拉米夫定酯固体脂质纳米粒（LAPGSLN）的肝靶向性，其靶向效率为，比未修饰纳米粒的靶向效率高倍〔10〕. 药物通过与大分子载体连接，再对载体进行半乳糖化，可以产生较好的肝靶向效果. 若能使药物直接半乳糖化，则可以简化耦联环节，提高靶向效率. 这一思路对蛋白类药物而言，较易实现. 蛋白质或多肽(分子质量在一定范围)在连接上半乳糖后，都有可能成为受体结合的肝靶向性物质. 小分子物质经类似途径能否靶向于肝，取决于糖和药物密度、分子质量、摄取屏障等多方面因素. 小分子药物共价连接乳糖或半乳糖，初步揭示其靶向性并不好，有关机制和可行性尚待进一步探讨.半乳糖基化壳聚糖（GC）与质粒pEGFPN1混和制备成纳米微囊复合物，体外转染SMMC7721细胞. 将含1 mg质粒的纳米微囊经肝动脉和门静脉注射入犬体内，实验结果表明半乳糖基化壳聚糖在体外有较高的转染率，在犬体内有肝靶向性，可用作肝靶向基因治疗的载体〔11〕. 大多数肿瘤细胞表面的叶酸受体数目和活性明显高于正常细胞. 以叶酸作为导向淋巴系统或肿瘤细胞的放射性核素的载体，同时将叶酸作为靶向肿瘤细胞的抗肿瘤药物的载体已做了广泛的研究〔12〕.表皮生长因子受体（EGFR）是一种跨膜糖蛋白，由原癌基因cerbB1所编码，是erbB受体家族之一，在多种肿瘤中观察到EGFR高水平的表达，如神经胶质细胞瘤、前列腺癌、乳腺癌、胃癌、结直肠癌、卵巢癌和胸腺上皮癌等. 针对富集EGFR的恶性肿瘤，方华圣等〔13〕成功地建立了EGFR富集的恶性肿瘤的靶向基因治疗方法.3抗体介导的靶向给药mAb是药物良好的靶向性载体， 将其通过共价交联或吸附到药物载体(如脂质体、毫微粒、微球、磁性载体等)或药物具有自身抗体(如红细胞)或抗体与细胞毒分子形成结合物，避免其对正常组织毒性，选择性发挥抗肿瘤作用. 徐凤华等〔14〕利用己二酰肼制备腙键连接的聚谷氨酸表阿霉素，然后使其与单抗交联制得偶合物. 偶合物较好地保留了抗体活性，体外细胞毒性较游离药物略有下降，但表现出单抗介导的靶细胞选择性杀伤作用，为其进一步制备细胞靶向的肿瘤化疗药物奠定了基础.用于治疗白血病的CMA676是由一种人源化的mAb hp 与新型的抗肿瘤抗生素calicheamicin的N乙酰γ衍生物偶联而成的〔15〕，当CMA676与CD33抗原相结合，抗原抗体复合物迅速内在化，进入胞内后，calicheamicin衍生物被水解释放，通过序列特异性方式与DNA双螺旋的小沟结合，使脱氧核糖环中的氢原子发生转移，从而使DNA双链断裂，诱导细胞死亡〔16〕. EGFR mAb可直接作用于EGFR的细胞外配体结合区，阻滞配体的结合，如IMCC225, ABXEGFR和EMD55900等，能抑制细胞生长和存活率，诱导细胞凋亡和抑制血管生成，曲妥珠单抗(Trasruzumab)作用于erbB2的细胞外区域，该药已获美国FDA批准用于转移性的乳腺癌的治疗〔17〕. IMCC225具有增强细胞毒性药物和放射治疗效应的作用，IMCC225与拓扑特肯(TPT)的联合用于荷有人类结肠癌移植体的裸鼠，能提高其生存率〔18〕. 由第四军医大学和成都华神集团股份有限公司联合研制的治疗肝癌新药碘〔13lI〕美妥昔单抗注射液，日前获得国家食品药品监督管理局颁发的生产文号，即将上市. 这是全球第一个专门用于治疗原发性肝癌的单抗导向同位素药物.4制成前体药物一些药物与适当的载体反应制备成前体药物，给药后药物就会在特定部位释放，达到靶向给药的目的. 脑是人高级神经活动的指挥中枢，也是神经系统最复杂的部分. 但由于血脑屏障（bloodbrain barrier, BBB）的存在，使得大部分治疗药物不能有效透过BBB. 含OH, NH2, COOH结构的脂溶性差的药物可通过酯化、酰胺化、氨甲基化、醚化、环化等化学反应制成脂溶性大的前体药物，进入CNS后，其亲脂性基团通过生物转化而释放出活性药物. 张志荣等〔19〕合成了3′, 5′二辛酰基氟苷，并制备了其药质体，给小鼠静脉注射后用HPLC法测定药物在体内各组织的分布，结果表明，氟苷酯化后的前体药物的药质体有良好的脑靶向性.结肠内有大量的细菌，能产生许多独特的酶系，许多高分子材料在结肠被这些酶所降解，而这些高分子材料作为药物载体在胃、小肠由于相应酶的缺乏不能被降解，这就保证药物在胃和小肠不释放. 如多糖、果胶、瓜耳胶、偶氮类聚合物和α, β, γ环糊精均可成为结肠给药体系的载体材料. 常利用结肠内厌氧环境，使偶氮键还原的特点制成偶氮前体药物. 柳氮磺胺吡啶是由5氨基水杨酸（5ASA）与磺胺吡啶用偶氮键连接而成. 口服后在结肠释药，发挥5ASA治疗溃疡性结肠炎的作用,减少其胃肠吸收产生的全身不良反应. 5ASA也与非生理活性的高分子聚合物通过偶氮双键制成前体药物〔20〕. 糖皮质激素共价连接于多糖〔21〕，环糊精〔22〕制成的前药，口服后在结肠部位可释放出药物，可用于结肠炎的治疗. 我们〔23，24〕合成了果胶酮洛芬（PTKP）前药，进行了体内外评价. 结果表明，此前药在不同pH环境下结构稳定，只能被结肠果胶酶特异性降解，释放出KP，发挥治疗作用. 也可以利用结肠pH差异和时滞效应设计结肠靶向给药系统〔25〕.5化学传递系统化学传递系统（chemical delivery system, CDS）是一种输送药物透过生理屏障到达靶部位，再经生物转化释放药物的药物传递系统. CDS通常是将含OH, NH2, COOH结构的药物共价连接于二氢吡啶载体（Q），药物（D）与靶向剂二氢吡啶结合为DQ结合物，建立了二氢吡啶―二氢吡啶钅翁盐氧化还原脑内定向转释递药系统. Chen等〔26〕设计了Tyr Lys的脑靶向CDS，并评价它的药效. Lys的C末端接亲脂性胆甾烯酯，N末端通过一种L氨基酸桥接靶向剂1，4二氢葫芦巴碱（含吡啶结构）制成Tyr Lys CDS，全身给药后，通过被动扩散机制透过BBB，且经酶催化1，4二氢葫芦巴碱变为季铵盐型使其存留于脑内. 通过小鼠甩尾间隔期实验证明，Tyr Lys CDS作用时间明显延长. Mahmoud等〔27〕将吸电子羧甲基连接到氮原子构建了一种新的二氢吡啶载体介导的脑定向转释系统(N羧甲基1,4二氢吡啶3,5二酰胺),该载体稳定,具有良好的脑定向转释能力.靶向给药的研究还面临许多实质性的挑战. 提高药物在靶组织的生物利用度；提高TDDS对靶组织、靶细胞作用的特异性；使生物大分子更有效地在作用靶点释放，并进入靶细胞内；体内代谢动力学模型；质量评价项目和标准，体内生理作用等问题都是研究的重点. 随着靶向给药系统研究的深入，新的靶向给药途径、新的载药方法将会不断出现，遇到的问题会逐步解决. 靶向给药的研究不仅具有理论意义，而且会产生明显的经济和社会效益.【参考文献】〔1〕 Theresa MA, Pieter RC. Drug delivery systems: Entering the mainstream 〔J〕. Science, 2004；303（5665）：1818-1822.〔2〕 张志荣，钱文. 肝靶向米托蒽醌白蛋白微球的研究〔J〕. 药学学报，1997；32（1）： ZR, Qian WJ. Study on mitoxantrone albumin microspheres for liver targeting 〔J〕. Acta Pharm Sin, 1997；32（1）：72-78.〔3〕 张莉，向东，洪诤，等. 肝靶向去甲斑蝥素微乳的研究〔J〕. 药学学报，2004；39（8）： L, Xiang D, Hong Z, et al. Studies on the liver targeting of norcantharindin microemulsion 〔J〕. Acta Pharm Sin, 2004；39（8）：650-655.〔4〕 韩勇，易以木. 纳米粒肝靶向作用机制的研究进展〔J〕. 中国药师，2002；5（12）： Y, Yi YM. Studies on the liver targeting mechanism of nanoparticles 〔J〕. Chin Pharm, 2002；5（12）：751-752.〔5〕 王剑红，陆彬，胥佩菱，等. 肺靶向米托蒽醌明胶微球的研究〔J〕. 药学学报，1995；30（7）： JH, Lu B, Xu PL, et al. Studies on lung targeting gelatin microspheres of mitoxantrone 〔J〕. Acta Pharm Sin, 1995；30（7）：549-555.〔6〕 Gulyaev AE, Gelperina SE, Skidan IN, et al. Significant transport of doxorubicin into the brain with polysorbate 8Ocoated nanoparticles 〔J〕. Pharm Res, 1999；16（10）：1564-1569.〔7〕 Ramge P, Unger RE, Oltrogge JB, et al. Polysor bate 80coating enhances uptake of polybutylcyanoacrylate（PBCA）nanoparticles by human and bovine primary brain capillary endothelial cells 〔J〕. Eur J Neurosci,2000；12（6）：1931-1940.
细胞毒性是化学物质（药物）作用于细胞基本结构和/或生理过程，如细胞膜或细胞骨架结构，细胞的新陈代谢过程，细胞组分或产物的合成、降解或释放，离子调控及细胞分裂等过程，导致细胞存活、增殖和/或功能的紊乱，所引发的不良反应。按作用机制可分3种类型：①基本细胞毒性，涉及一种或多种上述结构或功能的改变，作用于所有类型的细胞；②选择细胞毒性，存在于某些分化细胞上，主要通过化学物质的生物转化，与特殊受体结合或特殊的摄入机制所引发；③细胞特殊功能毒性，对细胞结构和功能损伤轻微，但对整个机体损伤非常严重。类似毒性作用可通过细胞因子、激素和递质的合成、释放、结合和降解影响细胞与细胞间的交流或特殊的转运过程而实现。毒性作用也可能来自化学物质对细胞外过程的干扰，任何一种非动物检测系统对多种因素都应加以考虑。1983年Ekwall提出“基本细胞功能”的概念，即多数化学物质毒性作用是对细胞功能的非特异性损伤，却可引起器官功能的特异性改变甚至机体死亡。有研究显示化学物质体外细胞毒性与其引起的动物死亡率及人体死亡的血药浓度之间都存在良好的相关性。化学物质产生的损伤和死亡，最终可表现为细胞水平上的改变，由此推测体外细胞毒性可以预测体内急性毒性。从早期研究至今已有50多年，可预测体内急性毒性的体外系统得到发展。体外细胞毒性和急性毒性之间的定量研究主要是对RC（Registry of Cytotoxicity）数据库（美国国立职业安全与卫生研究所化学物质毒性作用数据库）中多种化学物质的体外细胞毒性IC50值及体内急性毒性LD50值进行相关分析，获得RC预测模型，用于急性毒性LD50值预测。利用细胞毒理学比较多种检测终点、不同组织和种属的预测能力，发现啮齿动物细胞系对啮齿动物急性毒性，人源细胞系对人体急性毒性均有良好的预测能力。BALB/c3T3细胞和人正常角质细胞（NHK）在验证实验中具有良好的稳定性及预测能力，因此推荐作为细胞毒性分析常用细胞系，其它细胞系及检测终点也可使用。体外方法有助于预测化学物质急性暴露引发的全身和局部影响，并评估体内毒性浓度。因此进行急性毒性检测前首先进行体外细胞毒性分析，然后根据RC预测模型进行LD50值预测，选择体内急性毒性最适宜的开始剂量，减少实验动物的使用。
细胞数量确定1.将细胞悬浮液（100μL/孔）接种在96洞孔板中。将板在潮湿的培养箱中预孵育（例如，在37℃，5％CO2下）。2.向板的每个孔中加入10μLCCK8溶液。注意不要在孔洞中引入气泡，因为它们会干扰.读数。3.将培养板在培养箱中孵育1-4小时。4.使用酶标仪测量450 nm处的吸光度。细胞增殖和细胞毒性测定1.将种子细胞以103-104个细胞/孔的密度在96孔板中在100μL培养基中培养。将细胞在CO2培养箱中于37℃培养24小时。2.将不同浓度的待测物质加入板中。3.将培养板在培养箱中孵育适当的时间（例如，6,12,24或48小时）。4.使用重复移液器向板的每个孔中加入10μLCCK8溶液。注意不要在孔洞中引入气泡，因为它们会干扰.读数。5.将培养板在培养箱中孵育1-4小时。6.在读取孔板之前，重要的是在轨道振动器上轻轻混合1分钟，以确保颜色均匀分布。7.使用酶标仪测量450 nm处的吸光度。数据分析统计分析有几种方法，您可以选择使用.值或细胞数量，我们提供其中一种方法。细胞存活率（％）= [（As-Ab）/（Ac-Ab）]×100抑制率（％）= [（Ac-As）/（Ac-Ab）]×100As =实验孔吸光度（含有细胞，培养基，CCK-8和待测化合物的孔的吸光度）。Ab =空白孔吸光度（含有培养基和CCK-8的孔的吸光度）。Ac =对照孔吸光度（含有细胞，培养基和CCK-8的孔的吸光度）。制作标准曲线1. 细胞计数板计数细胞悬液中的细胞数。2. 使用培养基，等比稀释细胞悬液为一个浓度梯度，通常需要5-7个浓度梯度，每组几个复孔。然后接种细胞。（注意每孔的细胞数量。如果您将细胞悬液稀释在管中，在加入培养板的孔之前，请小心再次混匀细胞。每孔中细胞悬液的体积应该是一致的。）3. 培养直至细胞贴壁（通常2-4小时），然后每100 μl培养基加入10 μl CCK-8。继续孵育1-4小时，用酶标仪测量450nm处的吸光度。制作出一条以细胞数为X轴坐标，.值为Y轴坐标的标准曲线。可以基于该曲线确定待测样品的细胞数。使用此标准曲线的先决条件是培养检测条件相同。注意事项1. 确保药物和CCK8均匀分布在培养基中。2. 细胞增殖越多, 颜色越深; 细胞毒性越强，颜色越浅。3. 对于贴壁细胞，每孔至少需要1000个细胞（100 μl培养基）。对于白细胞，由于灵敏度较低，每孔至少需要2500个细胞（100 μl培养基）。推荐的96孔板每孔最大细胞数为25000。如果使用24孔或6孔板进行该检测，请计算相应的每孔的细胞数，并调整CCK-8的体积，使其为每孔总液体体积的10％。4. 因为CCK8测定是基于活细胞中的脱氢酶活性，影响脱氢酶活性的条件或化学物质可能导致实际活细胞数与使用CCK-8测定活细胞数之间有差异。5. WST-8可能与还原剂反应生成WST-8 formazan。如果使用还原剂 (例如一些抗氧化剂)会干扰检测。如果待检测体系中存在较多的还原剂，需设法去除。6. 孵育2小时后，背景.值一般为单位。7. 注意不要在孔中引入气泡，因为它们会干扰.值。8. 如果您想对CCK8溶液进行灭菌，请使用 μm的膜过滤溶液。9. 孵育时间因孔中细胞的类型和数量而异。通常，白细胞着色较弱，因此可能需要较长的孵育时间（长达4小时）或大量细胞（~105细胞/孔）。10. 如果细胞悬液中存在高浊度, 测量并减去样品在600nm或更高波长的值。11. CCK8不能用于细胞染色。12. 培养基中的酚红不会影响实验结果，酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。13. CCK8的毒性非常低，在CCK8测定完成后，相同的细胞可用于其他细胞增殖测定，例如结晶紫测定，中性红测定或DNA荧光测定。（除非细胞极为稀少，不推荐。）14. 该试剂盒可用于大肠杆菌，但不能用于酵母细胞。15. 在读取平板之前，您可以在摇床上轻柔混匀。16. 我们建议将细胞接种在靠近培养板中央的孔中，最外围一圈孔中的培养基容易蒸发，可以用PBS，水或培养基填充这些孔。17. 如果您没有450nm滤光片。您也可以使用吸光度在430和490nm之间的滤光片, 450nm滤光片具有最佳灵敏度。18. 测量450nm处的吸光度，如果您需要进行双波长测定，作为参考波长可以测定650nm处的吸光度。19. 药物中金属离子的存在可能会影响CCK8的灵敏度。终浓度为1mM的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会抑制 5%、15%、 90% 的显色反应，使灵敏度降低。如果终浓度是10mM的话，将会100%抑制。Glpbio是新启的世界领先的高性能的生命科学产品供应商之一，产品涵盖癌症、神经科学、抗感染、表观遗传学等20个热门研究领域，覆盖Akt、Jak等近千个细分靶点。上海宏叶生物科技有限公司是GlpBio在中国区的总代理。推荐测试剂 Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
细胞毒性可以会导致细胞死亡，细胞其他的不良反应，这样实验将不能进行。在实验中，一般都有规定细胞毒性不高于某个数，这是基本的检测。
细胞毒性是化学物质（药物）作用于细胞基本结构和/或生理过程，如细胞膜或细胞骨架结构，细胞的新陈代谢过程，细胞组分或产物的合成、降解或释放，离子调控及细胞分裂等过程，导致细胞存活、增殖和/或功能的紊乱，所引发的不良反应。按作用机制可分3种类型：①基本细胞毒性，涉及一种或多种上述结构或功能的改变，作用于所有类型的细胞；②选择细胞毒性，存在于某些分化细胞上，主要通过化学物质的生物转化，与特殊受体结合或特殊的摄入机制所引发；③细胞特殊功能毒性，对细胞结构和功能损伤轻微，但对整个机体损伤非常严重。类似毒性作用可通过细胞因子、激素和递质的合成、释放、结合和降解影响细胞与细胞间的交流或特殊的转运过程而实现。毒性作用也可能来自化学物质对细胞外过程的干扰，任何一种非动物检测系统对多种因素都应加以考虑。1983年Ekwall提出“基本细胞功能”的概念，即多数化学物质毒性作用是对细胞功能的非特异性损伤，却可引起器官功能的特异性改变甚至机体死亡。有研究显示化学物质体外细胞毒性与其引起的动物死亡率及人体死亡的血药浓度之间都存在良好的相关性。化学物质产生的损伤和死亡，最终可表现为细胞水平上的改变，由此推测体外细胞毒性可以预测体内急性毒性。从早期研究至今已有50多年，可预测体内急性毒性的体外系统得到发展。体外细胞毒性和急性毒性之间的定量研究主要是对RC（Registry of Cytotoxicity）数据库（美国国立职业安全与卫生研究所化学物质毒性作用数据库）中多种化学物质的体外细胞毒性IC50值及体内急性毒性LD50值进行相关分析，获得RC预测模型，用于急性毒性LD50值预测。利用细胞毒理学比较多种检测终点、不同组织和种属的预测能力，发现啮齿动物细胞系对啮齿动物急性毒性，人源细胞系对人体急性毒性均有良好的预测能力。BALB/c3T3细胞和人正常角质细胞（NHK）在验证实验中具有良好的稳定性及预测能力，因此推荐作为细胞毒性分析常用细胞系，其它细胞系及检测终点也可使用。体外方法有助于预测化学物质急性暴露引发的全身和局部影响，并评估体内毒性浓度。因此进行急性毒性检测前首先进行体外细胞毒性分析，然后根据RC预测模型进行LD50值预测，选择体内急性毒性最适宜的开始剂量，减少实验动物的使用。
可以通过细胞毒实验的数据评估药物的有效性、毒性、耐药性、药物对细胞凋亡、增殖等作用的影响。药物对细胞的所有作用，最后综合的表现为细胞毒效果，其实也就是看加药后细胞的死活，这个实验是非常有意义的，在研究药物确切的机理前 ，在预实验中先做下细胞毒实验可以事半功倍
生物学特征：不耐热、酸，56°C数分钟即失去致病力，干燥、紫外线、 乙醚、甲醛、漂白粉等均可使流感病毒失活，对化学药品敏感，具有较强传染性 。
流行特点：其RNA为单股负链。传染源主要是急性期患者和隐性感染者。患者感染该病毒后，可获得同型免疫力；甲型流感病毒极易发生变异，常引起世界性爆发大流行。
流感主要通过近距离空气飞沫传播（即流感患者在讲话、咳嗽或打喷嚏的过程中，将含有流感病毒的飞沫排放到空气中被周围人群吸入而引起传播），也可通过口腔、鼻腔、眼睛等处粘膜直接或间接接触传播。接触患者的呼吸道分泌物、体液和污染病毒的物品也可能引起感染。通过气溶胶经呼吸道传播有待进一步确认。
防治方法：充足休息，避免过度疲劳，充足的睡眠是保证正常免疫力的重要方法；居室注意通气和湿度。小儿咽喉和鼻腔的粘膜娇嫩，干燥的空气刺激粘膜，使病毒容易附着。在没有雾霾时注意通风，家里湿度调节在50%-60%之间。
扩展资料：
流感病毒呈球形，新分离的毒株则多呈丝状，其直径在80至120纳米之间，丝状流感病毒的长度可达4000纳米。流感病毒结构自外而内可分为包膜、基质蛋白以及核心三部分。
当流感病毒在宿主细胞内完成其繁殖之后，基质蛋白是分布在宿主细胞细胞膜内壁上的，成型的病毒核衣壳能够识别宿主细胞膜上含有基质蛋白的部位，与之结合形成病毒结构，并以出芽的形式突出释放成熟病毒。
参考资料来源：
百度百科-流感病毒
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病毒可以算作某种疾病。
[作文课堂]2009最热素材：甲型H1N1流感 背景概况2009年3月，墨西哥和美国等先后发生甲型H1N1流感，其病毒为A型流感病毒，H1N1亚型猪流感病毒毒株，该毒株包含有猪流感、禽流感和人流感三种流感病毒的基因片断，是一种新型猪流感病毒，可以人传染人。观点罗列1、人类不能善待动物，恶劣的饲养环境为病毒的生长和变异提供了机会。
人类不爱护环境和滥用抗生素 。2、人类对自然的掠夺破坏越来越厉害。
研究证明，66%的传染病病是从动物身上传播而来。3、病毒加快变异论：病毒变异性的加快与“物种障碍”的跨越加快，使人类面临的危险越来越大。
4、病毒比人类更具有智慧论：病毒不断寻找人类的弱点，加以利用。人类与病毒的持续战斗，病毒战斗力越来越强大。
5、全球公共卫生预防机制应该趋于更加完善，科学预防需要全球合作，科技发展需要大力尊重自然。6、气候变化论：气候变化促进动物传染病的发生与传播。
全球气候变化肯定会促生部分细菌发生变化，这样，人类的危险不单单就是宏观上的，微观世界也在酝酿着病变。集中讨论点关键词 人与自然 自然环境 环境保护 人类危机 全球问题 公共卫生 反省意识 生物病毒 生态掠夺 人为阴谋 生命代价 和谐契合 【焦点解读】 人类正在改变着地球，而这些改变的背后却引发了良性质变和危险隐患。
随着时间的迁移，有了许多新的疾病和名词， “非典”、“禽流感” 、“甲型H1N1”流感这些看似陌生却又如此熟悉的病菌像一阵飓风骤然降临，而这一切正在改变着我们。这一社会焦点是值得我们的重点关注。
它关涉着“人与自然” 、“全球问题”、“公共卫生”、“生态保护” 、“环境”、“危机”、“反省”、“灾难”、“珍惜”、“尊重”、“震撼”、“生命”、“合作”、“和谐”等话题，而这写话题也是我们高考所关注的。[运用实例] 话题1 人与自然 自然，是动植物的栖息地，是生命的起源，是我们的一切的源泉。
人类诞生于天地之间，生存于大自然之中。集灵气与采万精华的我们勇敢地从洪荒时代走到了文明的世纪。
人与自然存在着莫大的关系。在自然中，人类的智慧创造了经济的奇迹，而无知与贪婪却留下了可怕的后果。
现在的地球已经发出了痛苦的 *** ：环境污染，生态恶化，病毒横行。这一切是值得我们的深思。
03年的非典、04年禽流感、今天的甲型流感无不让我们深思人类应如何对待大自然？人类该怎样与自然和谐共处呢？也许是一个简单的答案：善待自然和谐相处。善待万物，就象善待我们的朋友；拯救地球，就是拯救我们的家园！人与自然相通相依，协调一致，和谐共处，是人与自然和谐共处的主要思想。
话题2 灾难 面对“甲型H1N1流感”的到来，也许我们想到一个灰色的词“灾难”。其实我们已经经受了无数的灾难了。
厄尔尼诺、温室效应、全球气候变暖、海啸、非典、还有现在的甲型流感，这里的每一场灾难无不伤痛着人类的脆弱的神经。而这一切究竟缘何。
也许是自然对人类的惩罚，也许是地球对人类的惩罚，到底是什么，为什么会有这么多的灾难，我们在思索着。人类进入工业时代后，掠夺性地开采，工业污染严重，全球温室效应明显，人类的进步是建立在掠夺自然的基础之上；任意残杀其他物种，北冰洋的海豹被剥皮，海洋里的蓝鲸被宰杀，山林里的稀有物种被烹饪等等，人类的食欲是建立在残杀生灵的基础之上。
简单地总结，境破坏，生态失衡，灾难就频发。低下头吧，高傲的人类将目光放的长远些吧；咽下涎吧贪吃的人类将口味放的平常些吧，不然，人类只能自己承担地球的惩罚——频发的灾难。
话题3 反省 反省是人类不断进步的思源。而缺乏自我反省是人类的共同弱点，不仅限于对大自然的傲慢，更主要的是总有理由为自己的过失开脱责任。
气候异常，三废严重，恶疾流行，灾害频仍，因工业和现代社会生活方式诱发的环境恶化问题，已成为当前世界性的热门话题和共同难题。当人们纷纷行动起来，就事论事地解决各种具体的环保问题的时候， 人类需要真正反省自己了。
因为对大自然的傲慢，环境污染破坏已促成了更多的菌体变异。人类的自我中心主义，漠视自然的盲动行为，已经成为了悬在人类头上的达摩克利斯之剑，还有多少病毒将要变异？人类还要尝试多少自食其果？这一切在告诉我们，必须静下思维来，认认真真地反省了，反省人与自然的关系，反省自然环境的问题，反省工业与自然的关系，反省人类自身的弱点等等。
从根本的内容，根本的原因，根本的关系上，我们去反省，也是对人类哲学及我们的人性本质思考。话题4 生命 生命是宝贵的，地球上的无数形式的生命都是宝贵的。
地球上的生命又都有着各种千丝万缕的联系，生命的彼此关联又都造就了世界的多彩。丰富多彩的地球世界，又时时刻刻充满了各种因素的威胁与危机，而这些威胁与危机动辄就是生命的毁灭。
历史上的“西班牙流感”夺走40000—50000人的生命；“亚洲流感”使全球至少100万人死于这场灾难；“香港流感” 至少波及世界55个国家和地区，造成全球150万-200万人死亡。现代医学的进步依然挽救不了03年的非典的900。
时序已进入秋天，在这季节交替的时候，最容易生病了，从开学的第一天进校门口要量体温，我察觉到了，为了要防止流感疫情的扩散，大家都绷紧了神经，我们要彻底的执行各项防疫工作，一起来对抗新流感。
新流感让家庭、学校都紧张都不得了，面对新流感，每个人都要特别小心才行。新流感是由飞沫、接触传染的，平时咳嗽、打喷嚏时要以手帕、面纸或袖子掩住口鼻，使用后立即丢弃。尽量开窗户，保持居家空气流通。用肥皂勤洗手，搓洗超过二十秒，双手不碰眼、口、鼻。避免带小孩出入人潮拥挤的公共场所或医院。
除此之外，规律运动、均衡饮食和充足睡眠也是很重要的！记得早晚量体温，若有发烧超过38度、喉咙痛、咳嗽、打喷嚏或非过敏引起之流鼻水等类流感症状，立即带口罩就医，并且在家休息，还要将健康状态回报学校。
让我们大家一起做个防疫小战士，阻止流感病毒继续残害我们的身心灵，不让她张狂肆虐，到处横行！
可怕的病毒作文妈妈怕钻来钻去的蟑螂，爸爸怕臭气冲天的榴莲，姐姐怕跳上跳下的小狗，而我最怕的却是小到连肉眼都看不见的病毒。
一开始它只是在我眼中的一个小不起眼的角色，我一点也不把它放在眼里。第一次我被“病毒”攻击时，是在我很小的时候，当时还差一点要把医院当成家，幸好妈妈告诉医生我们家没有住在这附近，所以我们像刚去大采购般的抱着一大堆药袋回家；后来我病恹恹的回到家，“碰！”一声的就倒在床上，什么事都不想做，像一个死人一样躺在那里，妈妈也进来为我说故事，为我打气。
这一次的感冒难受得令人印象深刻。又有一次是在月考前几天，正当我在复习功课时，病毒又悄悄的溜了进来，而我却没发觉，突然间感到全身无力，连笔都拿不稳，接下来又是一阵阵头痛，那时我全身紧绷，动弹不得，简直觉得快要倒下去年；软弱无力的我，扶着墙一步一步的走出房间，痛苦的叫着爸妈，爸爸立刻赶过来，妈妈的谈话声也停了，忙忙的把我拉去看医生，刚好那几个月正是感冒病毒大流行的时刻，到了医院，医生说要等到第二天才能知道到底是不是流感。
回家时，明明太阳很大，我的身体却还一直抖啊抖的，病毒真是一个的可怕的恶魔啊！像个嘴巴张得大大的怪物永远吃不饱，有些人努力和它对抗，但还是被它吞了。几次遇到病毒的经验，现在想起，就像是昨天才发生一样，历历在目，如今的我，已经不再把病毒看成一个小不起眼的小角色，而是把它看成一个生活中要小心预防的大人物。
我在父爱中成长嘀嗒嘀嗒……雨又一次在洗涤着大自然！就像父亲一次次用他温暖、哲理的话语为我抚平心灵的创伤。
此刻我的心又严重感染病毒了。我和好朋友吵翻了，一肚子气没处发。
回到家，看什麽都不顺眼，谁没惹我都想跟谁急，弄得狗见了狗怕，猫见了猫躲。 写作业时，竟把笔咬炸了。
爸爸听见了，坐到我身边语重心长地说：“怎麽？心情又不好了？是和朋友吵架了吧？朋友之间吵吵架是很正常的事，关键是看你怎麽处理了。先找找自己的原因，想想是自己哪里没做好。
朋友之间要宽容，不要耍小性子，错了就勇敢地去向朋友道歉，真正的友谊是经得住考验的，朋友一定不会和你计较的。不要带着坏心情学习，这样是没有效果的。”
听了爸爸的话，我的心情豁然开朗，就像雨后的天空，是那麽的明亮，纯洁如新。我的心情又阳。
春节，本应该是中华儿女共享团圆的节日。然而，一场新型冠状病毒疫情却不期而至，从武汉蔓延开来。很多人避而不及、争相远离武汉。网络发达，使每个中华儿女都知道了。
一些省份的人囗中说着""武汉加油″，但只要一听到身边有武汉人，就立马变脸，唯恐避之不及，甚至驱逐武汉人。他们没有想过那些站在一线的医护人员，他们没有想到那些逆行者，他们顾不上与家人一起吃年夜饭，但他们无怨无悔，让世界看到中国医护人员的坚强与伟大。
湖北省中医院医生卢振华却写下一封请战书，自请额外排班、不计报酬，在这份仅有178字的请战书中，他写道：本人将克服家庭一切困难，投入到这次抗击病毒的战斗中，为夺取胜利贡献自己的一点力量！
除夕，正当神州千家万户共享团圆之时，各地一支支的“逆行队伍”却在行动，无数医护人员都摩拳擦掌，纷纷请战，一份份“请战书”上摁下的一个个鲜红手印，表达着他们战胜病毒的铁血意志。
人非草木，孰能无情？他们是医护人员，他们也是社会普通的一员，他们也是普通人，他们为人子女、为人父母、为人夫、为 *** ，过年了，谁不希望与家人共享天伦，但危急时刻，他们毅然选择站在第一线，因此才有了更多人的健康安全，才有了更多家庭的天伦之乐。
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逆行者们是我们值得尊敬的人，为了不让更多的人担心，我们要用我们的行动告诉他们，我们一直在你们后方，不让自己添乱，即使没有在第一线，我们依然会用自己的方式去努力，去奋斗，让武汉知道，我们与武汉同在，中国与武汉同在，中国不会抛弃任何一个城市。
今天，我们之所以能够过一个平安、祥和、团圆和年味十足的春节，只因有着无数“逆行者”的付出。向那些逆行者们道一声谢谢，你们辛苦了。正是：从来都没有什么岁月静好，只是有人替你负重前行。
中国以前那么多的困难都挺了过去，这次，也一定会挺过来的。中国一定会赢。武汉加油！逆行者加油！中国加油！