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图书馆里随便一本SPSS统计书都会为你解答，网上的人顶多也就是拿着书按照书上写的告诉你。
我也不是生物的，但是毕业论文实验是做生物的，想请问一下你像我现在也要做抑菌实验 ，那我要先接种指示菌让它长满整个培养基才能用来做抑菌 ，那我要什么做才能让指示菌长满培养基呢？
微生物分离抑菌鉴定 应该是分离鉴定是一部分 还加上一个药敏吧？ 抑菌是指的药物对该微生物的抑制作用吗？ 你所做的微生物从哪分离的？杭州地区规模猪场主要细菌性病原微生物的分离鉴定及药敏试验 你看看吧
1.先自我介绍，问各位评委好2.介绍题目，根据关键词介绍背景资料3.简明扼要讲技术路线图：本文设计以用水提取法和乙醇回流提取法,提取鹿衔草、牛耳大黄、扁蓄、岩陀的有效成分,通过体外抑菌试验筛选抑菌效果最好的中草药进行体内抑菌试验。4.应用步骤详细补充5.结合图表分析结果6.讨论及做出结论
Abstract This paper studies the following two aspects: To study the characteristics of fermented bean curd growth of mold, by measuring the growth of biomass to determine the temperature, time, PH on the growth of mold fermented bean curd in order to determine the temperature, PH, the time the impact of fluctuations in its growth to determine the best conditions for growth are: temperature 25 ~ 27 ℃, PH , time 72h, to determine the growth characteristics of strains for industrial production of fermented bean curd taste better nutrition to provide theoretical data. In addition, this paper Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, E. coli bacteria for the test, using filter paper method for the determination of the proliferation of fungal fermentation broth of fermented bean curd Bacteriostasis, the inhibition zone respectively 17mm, 10mm, 20mm, this result can The shelf life for the fermented bean curd to provide a better theoretical basis.
我也不是生物的，但是毕业论文实验是做生物的，想请问一下你像我现在也要做抑菌实验 ，那我要先接种指示菌让它长满整个培养基才能用来做抑菌 ，那我要什么做才能让指示菌长满培养基呢？
论文陈述可以很好地组织和发展论点，并为读者提供关于论点的“指南”。
论文陈述包含以下内容：
1、陈述你对这个主题的主要观点
陈述观点时一定要表达一个主要思想，并陈述你的立场或看法。关于主题，需思考：
2、给出几个支持主要观点的理由
理由要写清楚，一定要用符合逻辑的事实和证据来支持这个理由。
3、给出一个与主要观点相反的观点
一个好的论文陈述要承认论点存在另一面。所以，同学可以在论文陈述中给出一个反论点。
论文陈述写作示例：
1、首先，从一个问题开始。例如：互联网对教育有正面或负面的影响吗?
2、其次，表明你对这个问题的立场。例如：互联网对教育的正面影响大于负面影响。
3、最后，发展你的答案。例如：互联网使用的负面影响被其对教育的诸多好处所抵消：互联网有助于学生和老师更容易地获取信息、接触不同的观点，以及这是一个灵活的学习环境。
想问一下作者，最后你成功了吗，我最近也在做这个抑菌圈实验，非常苦恼，我的图片和你差不多
微生物的发酵作用对传统酿造食品安全性的影响摘要：对我国酿造食品的工艺特点和生物转化作用机制进行了阐述，分析了发酵过程中微生物的发酵作用对食品酿造过程中的生物性污染、化学性污染和物理性污染等食品安全性因素的影响，得出我国传统酿造食品由于微生物的发酵作用经过分解、消除和滤过等过程使其更具有安全性特征。关键词：传统酿造食品；发酵作用；食品安全食品为人类提供营养要素，同时也是微生物生长的天然培养基。我国传统酿造食品（酱油、酱类、食醋、腐乳、白酒、酸菜、泡菜等）多以谷类、豆类、蔬菜等为原料，将自然界的群体微生物引入发酵过程共同作用形成风味独特的食品。通过微生物发酵作用引起的生物转化食品具有良好的品质、感官特性、可消化性和营养价值。随着现代工业发展，工业“三废”中的有毒有害物质（如重金属毒物、N-亚硝基化合物、多环芳烃化合物等）在环境中污染逐渐增多，这些有毒有害物质通过土壤、水体、空气等环境污染酿造食品原料、食品容器和包装材料等。化学农药、化肥和仓储药剂（如杀虫剂、杀菌剂、除草剂、植物生长调节剂、粮食熏蒸剂、防护剂等）通过各种渠道污染食品酿造原料，作为发酵原料的粮食在生产、加工、贮藏等环节受到霉菌、细菌、寄生虫等生物污染。本文从我国传统食品酿造的工艺特点、微生物的生物转化机制对食品污染的作用进行分析，探究传统酿造食品在发酵过程中的安全性问题。1传统酿造食品的工艺特点我国传统酿造食品历史悠久，经过千百年的实践形成独特的酿造工艺特点。敞口固态发酵传统酿造一般采用固态发酵技术，在添加谷糠或稻壳等辅料之后进行边糖化边发酵的“双边发酵”工艺，具有发酵时间长、产品风味浓厚、管理粗放等特点。整个过程采用敞口式工艺，充分利用物产资源与自然资源，制曲时富集各种功能性微生物，驯化和培育了特定的微生物群落结构体系，将主体微生物与环境微生物融为一体。同时摸索出一套完整的温度、湿度、酸碱度、通气量、发酵时间等酿造工艺条件，创立了产品增香与各种加工技术，对创造我国独特的酿造食品风味和保证产品质量具有十分重要的作用。多种微生物共同作用酿造过程是一个复杂的生物化学反应过程，产品品质主要取决于多种微生物的协同作用。微生物主要来自于曲种和环境，包括霉菌、酵母菌、细菌等，各种微生物共栖生长，赋予醅料复杂而完整的酶系，具有较强的糖化、液化和蛋白分解能力。各种微生物在发酵过程中盛衰交替，此消彼长，协同作用，产生单一菌种所不能比拟的作用。在发酵过程中水解与发酵交替进行，避免过高浓度底物对有益微生物和生化反应的负面影响。发酵时间长，酶促反应深入而完善，代谢产物丰富多彩，产品风味醇厚、浓郁[1-2]。多样的产品防腐措施传统酿造食品采取灵活多样的产品安全措施，一是依靠代谢产物本身的防腐作用（如白酒是依赖酒精的杀菌作用，食醋是靠醋酸的抑菌作用）；二是利用高浓度的食盐抑制微生物的生长繁殖（如酱油、酱、腐乳等）。2传统酿造食品的生物转化机制传统酿造过程是多种微生物将原料中的淀粉、蛋白质和脂类等大分子物质转化为产品的各种小分子风味物质，构成产品的主要成分。酱油的风味物质按其化合物性质可分为醇类、酯类、酸类、醛类及缩醛类、酚类、呋喃酮类和含硫化合物等[3-4]；食醋中除含有主要成分醋酸外，还含有糖分、氨基酸、酯、醛、醇、酚、酮类等化学成分[5-6]。酱油和食醋等酿造食品的风味物质构成产品特有的色、香、味，其来源主要是2方面，一是植物原料的“主生物质”（如蛋白质、淀粉等“，次生物质”如丹宁、芳香族化合物、异黄酮）；二是微生物及其酶对植物原料作用后的代谢产物。此外，白酒、酱油、食醋等在贮藏过程中各种代谢产物相互作用形成各种风味物质，据分析酱油含有300多种风味物质[4]。多糖的转化传统酿造食品原料的主要成分为淀粉，它在曲霉菌分泌淀粉酶的作用下分解为葡萄糖。这些单糖一部分作为霉菌、酵母菌和细菌生长繁殖的碳源和能源，一部分在微生物的作用下形成发酵产品的各种代谢产物。由淀粉转化来的代谢产物包括各种酸类、醇类、酚类以及低聚糖等[7]。酱油的糖分包括由大豆转化的低聚糖（如水苏糖、棉子糖等）和由小麦淀粉转化的蔗果三糖、低聚果糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖以及低聚木糖等，而酿造食品的酸类、醇类、酚类等小分子产物是构成产品风味的物质基础。蛋白质的转化
微藻不是一个分类学的名词， 而是指那些在显微镜下才能辨别其形态的微小的藻类群体。微藻通常是指含有叶绿素a并能进行光合作用的微生物的总称，属于原生生物的一种。应用生物技术进行大量培养或生产的微藻分属于4个藻门：蓝藻门、绿藻门、金藻门和红藻门。微藻细胞中含有 [2] ：蛋白质、脂类、藻多糖、β-胡萝卜素、多种无机元素（如Cu,Fe,Se,Mn,Zn等）等高价值的营养成分和化工原料。微藻的蛋白质含量很高，是单细胞蛋白(SCP)的一个重要来源。微藻所含的维生素A、维生素E、硫氨素、核黄素、吡多醇、维生素B12、维生素C、生物素、肌醇、叶酸、泛酸钙和烟酸等增加了其作为SCP的价值。藻中类胡萝卜素含量较高，具有着色和营养的作用，可用来防治癌症、抗辐射、延缓衰老,增强机体免疫力等生理作用。化学合成均为反式的β-胡萝卜素，对人体有致癌、致畸的作用，而顺式异构体在抗癌、抗心血管疾病功能比全反式异构体高，藻粉中β-胡萝卜素含量高达14%。藻细胞中甘油含量较高，是优质的化妆品原料,也是化工、轻工和医药工业中用途极广的有机中间体。藻多糖复合物可作为免疫佐剂增强抗原性和机体免疫功能，明显抑制实体瘤S180起到抗肿瘤的作用。
微藻是一类在陆地、海洋分布广泛，营养丰富、光合利用度高的自养植物，细胞代谢产生的多糖、蛋白质、色素等，使其在食品、医药、基因工程、液体燃料等领域具有很好的开发前景。微藻不是一个分类学的名词， 而是指那些在显微镜下才能辨别其形态的微小的藻类群体。微藻通常是指含有叶绿素a并能进行光合作用的微生物的总称，属于原生生物的一种。目前应用生物技术进行大量培养或生产的微藻分属于4个藻门：蓝藻门、绿藻门、金藻门和红藻门。微藻种类繁多，微藻细胞中含有：蛋白质、脂类、藻多糖、β-胡萝卜素、多种无机元素（如Cu,Fe,Se,Mn,Zn等）等高价值的营养成分和化工原料。微藻的蛋白质含量很高，是单细胞蛋白(SCP)的一个重要来源。微藻所含的维生素A、维生素E、硫氨素、核黄素、吡多醇、维生素B12、维生素C、生物素、肌醇、叶酸、泛酸钙和烟酸等增加了其作为SCP的价值。藻中类胡萝卜素含量较高，具有着色和营养的作用，可用来防治癌症、抗辐射、延缓衰老,增强机体免疫力等生理作用。化学合成均为反式的β-胡萝卜素，对人体有致癌、致畸的作用,而顺式异构体在抗癌、抗心血管疾病功能比全反式异构体高，藻粉中β-胡萝卜素含量高达14%。藻细胞中甘油含量较高，是优质的化妆品原料,也是化工、轻工和医药工业中用途极广的有机中间体。藻多糖复合物可作为免疫佐剂增强抗原性和机体免疫功能，明显抑制实体瘤S180起到抗肿瘤的作用.
（一）银杏叶的作用
1、降低人体血液中胆固醇水平，防止动脉硬化。对中老年人轻微活动后体力不支、心跳加快、胸口疼痛、头昏眼花等有显著改善作用。
2、通过增加血管通透性和弹性而降低血压，有较好的降压功效。
3、消除血管壁上的沉积成份，改善血液流变性，增进红细胞的变形能力，降低血液粘稠度，使血流通畅，可预防和治疗脑出血和脑梗塞。对动脉硬化引起的老年性痴呆症亦有一定疗效。
4、银杏叶制剂与降糖西药合用治疗糖尿病有较好疗效，可用于糖尿病的辅助药。
5、能明显减轻经期腹痛及腰酸背痛等症状。
6、用于支气管哮喘的治疗，也有较好疗效。
7、降低脂质过氧化水平，减少雀斑，润泽肌肤，美丽容颜。
（二）银杏叶的副作用
1、银杏叶中含有的银杏酸具有一定的水溶性，泡水喝之后不仅没有大家所认为的有利于身体健康的银杏内脂以及银杏黄铜，而银杏酸的含量却非常的丰富，对于身体百害而无一利。
2、银杏叶吃多了会导致身体出现中毒，主要的症状就是肌肉出现抽搐，而瞳孔也会放大。
3、银杏叶片中的主要成分是一种黄酮类化学物质，这种物质能够有效的抑制血小板激活因子，所以如果长期服用会抑制血小板的凝聚功能，增加大脑出血的危险可能。
银杏在植物界被称为活化石，是一种拥有着非常高的药用价值的植物。那么银杏叶的功效与作用有哪些呢?下面是我精心为大家整理的银杏叶的功效与作用，欢迎阅读。更多银杏叶的功效与作用相关内容请关注出国留学实用资料栏目!
1、降血压：
服用银杏叶之后能够很好的增加血管的通透性以及弹性，这样就能够起到降低血压的作用了。所以银杏叶泡水非常的适合高血压的患者服用，具有不错的降压效果。
2、降胆固醇：
银杏叶在进入身体之后能够有效的降低人体血液中胆固醇的含量，这样就能够更好的预防动脉粥硬化。人在上了年纪之后进行运动更加容易出现体力不支还有心跳加快的情况，甚至还有可能出现胸口疼痛，这个时候将银杏叶泡水喝能够很好的促进身体健康。
3、防治脑出血以及脑梗赛：
银杏叶中含有的某些物质能够很好的清除血管壁中的沉积物只，这就能更好的促进血液流的变形，对于红细胞的变形能力也有一定的促进作用，同时还能够降低血液粘稠度令血液运行更加的顺畅，对于与脑出血还有脑梗塞都有着很好的预防以及治疗作用。另外，很多老年人都容易患有动脉硬化所引起的老年痴呆症，经常服用银杏叶能够很好的防治。
4、减轻女性经期痛苦：
很多女性在月经期间容易出现痛经或者是腰酸背痛的情况，这对于我们的生活还有工作造成极大的困扰，如果将银杏叶泡水喝，能够很好的缓解。
5、治疗支气管哮喘：
如果患有支气管哮喘，那么也可以服用银杏叶，具有很好的治疗效果。
6、治疗糖尿病：
现代医学研究发现，银杏叶可以制作成为降糖西药，对于糖尿病具有很好的治疗作用，日常可以作为糖尿病的辅助药物。
7、美容养颜：
你知道吗，银杏叶泡水喝除了保健身体还有治疗疾病的作用之外，还具有很不错的美容养颜的效果。这是因为银杏叶在进入身体之后能够很好的降低脂质的过氧化水平，所以具有祛斑以及滋润肌肤的作用，经常服用能够令肌肤越来越漂亮。
8、防治冠心病、心绞痛：
现代医学研究发现，银杏叶中的提取物对于预防冠心病还有心绞痛具有非常不错的效果，能够很好的改善心脏的血流，对于心肌具有很好的保健作用，除此之外还能够降低身体中的胆固醇、甘油三酯等的含量，所以对于预防心脑血管疾病方面具有非常中药的意义。另外，日常如果出现了头晕、胸闷、气短以及乏力等都有着很好的改善效果。
9、预防高脂血症：
研究发现，银杏叶中所含有的提取物对于高脂血症具有很好的防治作用，进入身体之后能够有效的降低血脂水平，非常的适合中老年人服用。
10、改善脑供血：
专家告诉我们，颈动脉是身体向大脑输送血液的一个重要通道，这个时候如果服用银杏叶茶，能够很好的增加颈动脉中的血液流量，这样大脑的供血充足了，人不仅更加的精神，同时记忆力等等也会越来越好。
11、抗心肌缺血：
银杏叶提取物在进入身体之后，能够很好的治疗心肌梗塞的情况，促进身体健康。
12、改善糖尿病：
科学家通过临床实验发现，糖尿病的患者在服用银杏叶之后，百分之九十五以上都获得了显著的改善，并且血液中的血糖含量也获得很好的降低，有效的改善了糖尿病的症状。
13、保护心脏：
银杏叶能够很好的改善体内的血液循环，并且保证心肌的供养情况，对于左心室肥大的问题也能够很好的解决，所以具有很不错的防治心脏病的作用。
银杏叶的禁忌：
1、银杏叶中含有比较多的银杏酸，这种物质是含有一定毒性的。科学家通过实验发现，就直接没有经过任何加工的银杏叶中含有非常高的银杏酸含量。另外，银杏酸具有一定的水溶性，泡水喝之后不仅没有大家所认为的有利于身体健康的银杏内脂以及银杏黄铜，而银杏酸的含量却非常的丰富，对于身体百害而无一利。
2、银杏叶的副作用是比较大的，如果吃多了会导致身体出现中毒，主要的症状就是肌肉出现抽搐，而瞳孔也会放大。
3、研究发现，银杏叶片中的主要成分是一种黄酮类化学物质，这种物质能够有效的抑制血小板激活因子，所以如果长期服用会抑制血小板的凝聚功能，增加大脑出血的危险可能。所以说，老年人在服用的时候一定要注意适量，并且定期对身体进行检查，千万不能够盲目进行，特别是一些患有老年性血管硬化等疾病的患者来说，更加不能够长期服用，否则就会增加患有脑出血的几率。
4、中医方面认为，银杏叶属于实邪，所以日常服用的时候一定要慎重。虽然说银杏叶能够很好的促进身体中的血液循环，同时还能够预防心血管疾病，但是在服用的时候不能够和其他的治疗心血管方面的药物一起服用，否则有可能危害生命健康，具体的就有阿司匹林等。
一、采叶：
7- 8月份的上午 8- 10时，求银杏幼树主干、侧枝中部着生的绿色正常叶片，放筐中用清水洗净，摊开晾干，随采随炒，以保质量。
二、杀青：
选干净无异味的大铁锅，加热至锅面灰白色 (约 300℃ )，迅速投入 1千克青叶盖锅盖闷1分钟，见锅口有蒸汽时，立即揭盖，用双手迅速从锅底翻抓青叶，均匀抖散至锅底使叶片全部接触锅面，均匀受热，待叶片青草气味消失，呈无光泽的黑绿色，手握成团，略有弹性的出锅。
三、搓揉：
杀青后的叶片，倒在席上晾干带余热用手握成团，揉面团似向同一方面滚揉，反复数次，轻搓宽叶成长条状。
四、二次杀青：
将搓揉后的叶子，放入 170— 19 0℃的锅内，双手压在锅内滚炒叶数分钟再将叶团敢开均匀受热几分钟，如此重复约 20分钟，出锅摊晾席上回潮变软。
五、炒成茶：
将锅加热至 9 0%，投入晾后的叶子，进行复炒，渐退火降温、轻炒防碎，炒至茶叶烫手时取出，冷却袋装成品茶，此茶为绿茶，汤黄褐色或淡黄绿色，香气浓，余味略苦。
注意事项：
银杏叶内含有大量的银杏酸，银杏酸是含有毒性的，一般买来的叶子未经过深加工和提取，里面的银杏酸含量高达3000-4000ppm，特别银杏酸是水溶性的，一泡水不但没有吃到里面的银杏黄铜和银杏内脂等有效物质，反而效果是相反的，里面全是毒!
中医讲，银杏叶有实邪者忌用。银杏叶虽能促进血液循环，预防心血管病，但不能同时服用其它治心血管药物。
银杏叶片的功效与作用，银杏叶片为薄膜衣片，除去包衣后显浅棕黄色至棕褐色，味微苦；银杏叶片其实就是银杏叶的提取物经过加工制作而成，以下就是它的功效与作用一起去看看吧。银杏叶片用于瘀血阻络引起的胸痹心痛、中风、半身不遂，舌强语謇;冠心病稳定型心绞痛、脑梗死等疾病，银杏叶片有扩张脑血管、增加脑血流量，防止脑动脉硬化及治疗老年痴呆症等作用，是老年人的常用药物。银杏叶的功效1、降低人体血液中胆固醇水平，防止动脉硬化。对中老年人轻微活动后体力不支、心跳加快、胸口疼痛、头昏眼花等有显著改善作用。2、通过增加血管通透性和弹性而降低血压，有较好的降压功效。3、消除血管壁上的沉积成份，改善血液流变性，增进红细胞的变形能力，降低血液粘稠度，使血流通畅，可预防和治疗脑出血和脑梗塞。对动脉硬化引起的老年性痴呆症亦有一定疗效。4、银杏叶制剂与降糖西药合用治疗糖尿病有较好疗效，可用于糖尿病的辅助药。5、能明显减轻经期腹痛及腰酸背痛等症状。6、用于支气管哮喘的治疗，也有较好疗效。7、降低脂质过氧化水平，减少雀斑，润泽肌肤，美丽容颜。参考百度知道橙myzhe4736提供
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植物保护专业本科毕业论文（设计）开题报告
紧张又充实的大学生活即将结束，大学生们马上就要开始最难熬的毕业设计阶段，而我们做毕业设计之前要先写好开题报告，快来参考开题报告是怎么写的吧！以下是我整理的植物保护专业本科毕业论文（设计）开题报告，欢迎大家借鉴与参考，希望对大家有所帮助。
毕业论文题目：
菌寄生真菌纤细齿梗孢蛋白酶基因的克隆与表达
姓名： xx 学号： xxxx
年级： xxx 专业： 植物保护
指导教师：姓名 xxx 职称 教授
学科 植物病理
山东农业大学教务处
20XX年x月x日
一、选题依据（拟开展研究项目的研究目的、意义）
菌寄生(Mycoparasitism)是发生在菌寄生真菌与寄主真菌之间的一种寄生方式，是自然界普遍存在的一种真菌与真菌之间的相互作用。一直以来，生物间相互作用及信号传导的分子机制，是当今生命科学研究的热门。利用菌寄生真菌与寄主真菌作为研究的模式系统来揭示生物相互之间的相互作用机制有重要理论和实践意义。李多川(Li,1996)先生发现纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)和串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)的菌寄生关系以来，我们实验室试图通过研究纤细齿梗孢和串珠镰刀菌，来建立菌寄生真菌与寄主真菌相互作用机制研究的模式系统，从而揭示菌寄生真菌与寄主真菌之间相互作用的分子机制。纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)是串珠镰刀菌的一种重寄生真菌，该菌是一种接触性活体重寄生菌，离体试验发现其分生孢子只有在串珠镰刀菌细胞壁提取物刺激下才能萌发。这说明两者之间的重寄生关系是建立在二者识别与互作的分子机制上的(Li,2004)。在纤细齿梗孢和串珠镰刀菌相互作用过程中，几丁质酶、蛋白酶等细胞壁裂解酶可能起到重要作用。其中，蛋白酶在木霉属菌寄生真菌中的功能已经得到初步证明，而纤细齿梗孢的蛋白酶的研究还未见报道。因此，克隆纤细齿梗孢蛋白酶编码基因对于从分子水平上研究重寄生真菌和寄主识别和互作机制有着重要的意义。
二、文献综述内容(在充分收集研究主题相关资料的基础上，分析国内外研究现状，提出问题，找到研究主题的切入点，附主要参考文献)
纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)是李多川教授分离得到的一种活体营养接触型菌寄生真菌[1~3]，其寄主包括Fusarium moniliformeAlternaria alternata等。近年来，我们实验室一直在努力以其为基础研究菌寄生真菌与寄主真菌之间的相互作用的分子机制。经过多年的研究，人们渐渐认识到真菌细胞壁蛋白在细胞与外界的相互作用过程中扮演着重要的角色。细胞壁蛋白研究已经成为生物间相互识别机制研究的热点。鉴于以上原因，我们实验室成功分离纯化了纤细齿梗孢的寄主之一Alternaria alternata菌丝细胞壁上的一种特异性糖蛋白——凝集素，并初步证明其在和孢子吸附过程中起到识别因子的作用[4]。近年来，菌寄生真菌细胞壁裂解蛋白酶在菌寄生过程中的作用被人们逐渐重视起来。克隆和表达菌寄生真菌的蛋白酶编码基因变得很有意义。本研究试图以菌寄生真菌纤细齿梗孢(Olpitrichumtenellum)作为研究材料克隆了其蛋白酶基因。根据氨基酸的保守序列设计兼并引物，然后采用RT-PCR和RACE是一个较为快速、简单和高效的方法。本实验根据同源保守序列设计兼并引物，通过RT-PCR及RACE-PCR的方法，克隆了蛋白酶的编码基因的全长cDNA序列，并对该基因进行了序列分析，为后续试验打下了基础。
由于Olpitrichum tenellum在离开寄主的人工培养基中很难生长，纯化其蛋白酶变得非常困难。因此，我们需要使用外源蛋白表达系统得到蛋白，进一步研究其性质，从而搞清楚其在重寄生过程中的作用。在过去的几十年间，随着DNA重组技术的不断发展，通过构建遗传工程菌株，人们可以较容易地使各种各样的天然酶的基因在微生物系统中高效表达，从而在很大程度上摆脱对天然酶源的依赖。
基因工程的表达系统有原核表达系统和真核表达系统两大类。在原核表达系统中，大肠杆菌表达系统是目前了解最深入，实际应用最为广泛的表达系统。与其他表达系统相比，大肠杆菌表达系统具有遗传背景清楚、目标基因表达水平高、培养周期短、抗污染能力强等特点。在基因表达技术中占有重要的地位，是分子生物学研究和生物技术产业化发展进程中的重要工具[5]。
Pichia pastoris基因表达系统经过十几年发展，已基本成为较完善的外源基因表达系统，具有易于高密度发酵，表达基因在宿主基因组中稳定整合，能使产物有效分泌并适当糖基化，培养方便经济等特点。利用强效可调控启动子AOX1，已高效表达了HBsAg、TNF、EGF、破伤风毒素C片段、基因工程抗体等多种外源基因[6]，证实该系统是高效、实用、简便，能提高表达量并保持产物生物学活性的外源基因表达系统。表达系统在生物工程领域将发挥越来越重要的作用，促进更多外源基因在该系统的高效表达，提供更为广泛的基因工程产品[7]。
我们已经分离到蛋白酶的编码基因，本研究中将该基因的去掉信号肽序列的正确阅读框融合于原核表达载体pET-22b(+)和毕赤酵母表达载体pPIC9K上，分别转化 BL21及Pichia pastoris GSxx5，以期在这些菌株中有效表达该基因的编码产物，从而为以后功能研究打下基础。
1 李多川.1998.菌寄生真菌分子生物学研究进展.吉林农业大学学报,20：37~65.
2 21.李多川.1998.菌寄生真菌分子生物学研究进展.微生物学通报，25：345~347.
3 .李多川，沈崇尧.1997.菌寄生菌物与寄主菌物相互作用的研究进展.西北农业学报，6：94~98.
4 张成省，李多川，孔凡玉. alternata菌丝细胞壁凝集素的纯化与特性研究.植物病理学报，35(2)：141~147.
5 .xx.何诚，朱运松.1998.甲醇营养型酵母表达系统的研究进展.生物工程进展,18：7~xx.
6 彭毅，杨希才，康良仪.2000.影响甲醇酵母外源蛋白表达的因素.生物技术通报，4：33~36.
7 韩雪清，刘湘涛，尹双.2003.毕赤酵母表达系统.微生物学杂志，3：35~40.
三、研究方案(主要研究内容、目标，研究方法、进度)：
1、研究内容：
本课题选择纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)做为研究对象，通过RT-PCR及RACE技术分离克隆了其丝氨酸蛋白酶基因，并进行原核及真核表达，并对其的性质进行了研究，为进一步的研究工作打下基础。
2、研究的目标：
克隆了纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)的丝氨酸蛋白酶基因，进行原核及真核表达，并对其的性质进行了研究。
3、研究方法：
将纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)接种到LB培养基上，培养14个小时后，收集菌丝，然后采用总Trizol法提取RNA。再从GenBank数据库中搜索到大量的蛋白酶氨基酸序列，并根据同源性进行分类，分别设计兼并引物。再通过RT-PCR、3’-RACE、5’-RACE获得全长cDNA、DNA克隆，并将其连接到载体上，然后采用电击法将将重组质粒转入到全长cDNA、DNA克隆中，通过透析纯化蛋白酶，最后研究其特性。
四、研究进度：
20xx年5月23日~20xx年5月29日 整理收集资料，并跟着研究生学习基本实验技术。
20xx年5月30日~20xx年6月18日 提取RNA，设计引物、全长cDNA、DNA克隆 。
20xx年6月19日~20xx年7月15日 转化大肠杆菌、毕赤酵母表达，获得纯纯产物，并研究其特性。
20xx年3月~20xx年6月 对实验结果不理想的实验重做，整理实验数据，完成毕业论文，并准备毕业答辩。
五、技术路线：
收集菌丝
总RNA提取
同源序列 设计引物
特性研究
RT-PCR、
3’-RACE、5’-RACE
纯化表达产物
全长cDNA、DNA克隆 转化大肠杆菌、毕赤酵母
四、进程计划(各研究环节的时间安排、实施进度、完成程度)
20xx年5月23日~20xx年5月29日 整理收集资料，并跟着研究生学习基本实验技术。完成实验的1%。
20xx年5月30日~20xx年6月18日 提取RNA，设计引物、全长cDNA、DNA克隆。完成实验的50%。
20xx年6月19日~20xx年7月15日 转化大肠杆菌、毕赤酵母表达，获得纯纯产物，并研究其特性。完成实验的95%。
20xx年3月~20xx年6月 对实验结果不理想的实验重做，整理实验数据，完成毕业论文，并准备毕业答辩。完成100%。
五、导师对文献综述的评语
签字：
20xx年xx月xx日
六、专业意见
专业主任签字：
20xx 年 月 日
七、学院意见
学院(章)： 负责人签字：
20xx年xx月xx日
摘要：
针对目前浙江农林大学植物保护研究法实验教学方法、内容及手段等方面存在的一系列问题，提出了相关改革对策：优化实验课程内容，整合实验模块，学生自行设计实验方案等教学方法和手段的改革，以及课程考核方式和时间安排的调整，旨在培养学生的科研兴趣及创新能力。
关键词：
目前，国内外很多农业院校的植物保护专业均开设了昆虫研究法和植病研究法课程。为优化本科培养方案，浙江农林大学通过调整教学大纲，将植病研究法、昆虫研究法和农药研究法合并成一门植物保护研究法课程。植物保护研究法是植物保护专业重要的专业限选课程之一，是植物保护研究的重要组成部分，也是培养和提高学生专业实验技能和学习兴趣的重要课程，是一门专业性、实践性很强的实验学科。通过这门课程的教学，能使学生掌握植物保护研究的基本方法及基本原理，培养植物保护研究常规操作能力，以及查阅资料、设计实验方案和实际操作能力，提高学生的逻辑思维、整理资料、总结归纳和论文撰写的能力。笔者分析了浙江农林大学植物保护研究法实验教学中存在的问题，提出教学改革内容，并总结了改革成效。
1.实验教学存在的问题
传统实验教学的弊端传统实验教学的主要特征是“灌输式”“填鸭式”，学生在2个小时的实验过程中就是简单地按照实验指导书和实验大纲中的实验方法和步骤依葫芦画瓢，实验完成后，又按照统一的模式填写实验报告。在整个实验过程中，学生无需独立思考和分析，更谈不上发挥创新能力了。因此，很难让学生对实验产生兴趣，培养学生的创造性思维就更无从谈起了。虽然这种传统实验模式简明、清晰，有利于学生对相关结论的认可、理解和记忆，也有利于教师对整个教学过程的控制，教师和学生很轻松愉快地就能完成实验教学任务。学生走上工作岗位后，传统实验教学的弊端立即显现。学生缺乏设计实验的能力，在实验过程中缺乏发现问题、分析问题和解决问题的能力，实验后缺乏正确分析实验结果的能力。因此，传统的实验教学模式急需改革。
实验教学内容系统性不强植物保护研究法是植物保护专业本科学生的一门专业课程，其涉及的内容有昆虫研究法、植病研究法和农药研究法。在以往的实验课程中，只是简单地把这3门课的实验合在一起上，并没有把内容紧密联系在一起，如昆虫实验时，指导教师一般是教授昆虫学科的教师;而在进行植病实验时，则由讲授植病学科的教师指导。这样的实验模式难以使植物病虫害系统联系起来，学生学习专业知识不够系统和深入，容易造成理解上的片面性和孤立性，不利于掌握该专业的系统知识和技能。
实验考核不科学以往实验课程成绩评定的主要依据是实验报告，而每次实验课结束后，学生递交的实验报告只是把实验大纲(包括实验口的、原理、仪器与试剂、内容及方法)原文不动地抄一遍，实验结果更是千篇一律，这样实验就变成了预演过程，学生在实验中缺乏思考，不利于培养发现问题、提出问题、分析问题和解决问题的能力，背离了实验课教学的初衷。同时，还会导致每位学生的实验成绩差异微乎其微，不具有良好的区分度。
2.教学改革内容
重视教学环节在以往的实验课程中，实验教学所需要的实验用具和材料大多数都是实验教辅人员提前准备，导致他们的工作量非常大。让学生参与实验材料的准备和管理，一方面提高了教辅人员的工作效率;另一方面可以让学生对实验过程有全面了解，获得整个科研实践过程的训练，从而养成好的实验习惯，在未来的科研工作中做到计划周密、有条不紊地安排和实施实验计划。同时，在实验教学过程中，必须教育学生认真操作、仔细观察、实事求是地记录实验结果，并对实验进行科学分析。一日_发现弄虚作假的学生，一定要严厉批评，同时帮助他们分析失败的原因，找出解决的方法，有条件的情况下，让其重新做实验，让学生充分意识到科学研究允许失败，但是不能有半l从虚假。提高学生的实践能力实践教学是培养和训练学生实践操作能力，独立分析问题、解决问题能力的重要手段，尤其对于学生创新能力的培养，具有其独特的地位和作用。该项口分别以某种农作物病虫害为主轴展开一系列的实践性实验教学，要求学生自主设计实验和执行各项实验内容，指导教师负责答疑和提供技术帮助。学生通过自己分组、调查、取样、鉴定、查阅资料、讨论制订实验方案和动手实验等一系列步骤，不仅可以很好地将课堂上所学的理论知识与实践相结合，而且还有助于提高自学能力、实践能力和团队协作能力，进一步培养科学思维和创新能力。优化实验教学内容结构将整个实验课程设置成一个综合性的大实验：分别以某个农作物上的病虫害发生规律及防治措施贯穿整个课程。将口前昆虫研究法的昆虫标本的采集与制作、昆虫人工饲养技术、昆虫生态学研究方法、昆虫生理生化研究方法、昆虫分子生物学研究方法和害虫综合治理研究方法5个实验和植病研究法的植物病害调查、植物病原菌分离与鉴定技术、植物病原菌分子生物学鉴定技术、植物病原真菌遗传转化技术和植物病害综合治理技术5个实验合并成1个综合性大实验，将植物病虫害研究以故事的形式紧密地整合在一起，让学生将课堂知识与田间实际应用有机地联系在一起，加深对理论知识的理解，提高学习兴趣。整个实验就是以具体的作物病虫害发生为时间轴，具有很强的连贯性和系统性，学生只有认真完成每一个实验，才能很好地保证后续实验的顺利进行，有助于增强学生的责任感和团队合作精神，同时也改变了学生实验报告千篇一律的`现象。改革成绩评定方式实验课成绩一方面是对学生实验完成好坏的肯定，另一方面也对学生起到了一定的督促作用。为了做到对学生的全面评价，实验成绩除实验报告和考勤成绩外，应将实验过程中学生的学习主动性、动手操作能力、实验结果记录规范性量化纳入成绩考核。在实验过程中，教师应主动观察并记录每个学生的实际动手、操作能力，量化后按一定比例记入总成绩，对那些既有独立操作能力，又有创新意识的学生，适当给予创新学分。实验过程中，学生是否遵守实验室规则、是否具有团队合作精神，实验结束后，学生是否打扫卫生、是否清洗实验器材等，这些看似小问题，但也体现着一个人的品质和素养，做得好的学生也可以适当加分。
3.改革成效
提高学生的专业技能及其对专业知识重要性的认识学生能在同一时间完成植病研究法、昆虫研究法和农药研究法3门实验课程，体现了实验课程很强的连贯性和系统性。学生在实践过程中将这3门课程的相关内容紧密、有机地联系起来，对植物病虫害防治有了更深入的认识，同时也提高了学生的专业技能及其对专业知识重要性的认识。在实验的过程中，强调把学生的动手能力放在首位，让学生更多地参与到实验中，切身体会到所学专业的意义。
培养学生发现、提出、分析和解决问题的能力植物保护研究法实验教学模式具有系统化和整体化特点，同时涉及昆虫研究法、植病研究法、农药研究法等相关学科课程。在实验过程中，学生在对病虫害的认知及其防治等问题的处理上始终处于主体地位，在独立思考、查找资料、咨询专业教师、综合分析之后，拟定出具体的处理方案，能够融会贯通地掌握植物保护学科的理论知识和基本实践技能。
提高指导教师的业务水平新的实验教学模式综合运用了3门相关课程的理论知识，加强了课程的综合实践环节，因此指导教师自身的知识面、操作技术、实践应用和协调能力都需要提升。所以，这种实验教学模式促使教师在教学过程中同学生一起不断学习，丰富专业理论知识，完善专业实践体系，提高发现、提出、分析和解决问题的能力，了解和掌握学科及相关学科的发展动态、研究的新进展、出现的新技术，从而提高了指导教师的业务水平。
4.结语
植物保护研究法在植物保护专业2013级和2014级本科生实验课程教学中进行了实践，通过问卷调查，95%的学生认为在实验过程中有较多的动手机会，激发了自己对实验的兴趣，提高了自己分析和解决问题的能力。因此，认为该教学方法可以发挥学生的主观能动性、拓展学生的科研思路、激发学生的创新创造力和提高学生的独立应用实践能力，具有良好的教学效果。
看外包装的说明，比如益蜜舒的益生菌菌株编号是罗伊氏乳杆菌GMNL-89，鼠李糖乳杆菌GMNL-74，嗜酸乳杆菌DDS-1，植物乳杆菌GMNL-14。
爱禧氏益生菌一共含有7大菌种，远高于行业标准。分别是：植物乳杆菌：调节肠道菌群平衡，预防肠道疾病、刺激肠道分泌抗菌素，有效抑制或杀死大肠杆菌等致病菌。嗜酸乳杆菌：在肠道形成一层生物屏障，防止有害菌入侵，缓解胃肠、胃酸、胃痛等胃部不适症状，增强抵抗能力，抗过敏。两歧双歧杆菌：维护肠道菌群平衡，增强抵抗能力，降低胆固醇、抑制脂肪细胞合成。副干酪乳杆菌：促进肠道消化吸收、缓解乳糖不耐症，抗过敏。乳双歧杆菌：提高机体对常见呼吸道感染的抵抗力，同时降低急性呼吸道感染的发病率，适合婴儿服用。鼠李糖乳杆菌：调节肠道菌群、预防和治疗腹泻、排除毒素、预防龋齿、提高机体免疫力及抗癌等重要的生理保健功能，适合婴儿服用。婴儿双歧杆菌：保护婴幼儿肠道健康。而且爱禧氏益生菌来自原生态的云贵高原，纯净安全无污染，更适合中国人体质！
益生菌分为属、种、株，菌株号就像人的身份证一样，相同的益生菌名称，不同的菌株号作用是不一样的，且标有菌株号的益生菌一般都有相应的临床验证和文献支持。所以，产品配料表中标注菌株号是很有必要的。与菌共舞产品所选菌株均标有象征菌株身份的菌株号，可以放心购买使用。大大的不错哦。