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选题的目的和意义万能模板如下。
一、选题的目的
让导师判断题目是否有研究价值，研究方法是否可行，这种论证的逻辑是否有明显缺陷。
二、选题的意义
1、尊敬的各位老师。
2、您们好。
3、我叫xx，xx级xx班，（学号是xxxxxxx)，我论文的题目是《xxxxxx》。这篇论文是在xx老师的指导下完成的。在这期间，xx老师对我的论文进行了详细的修改和指正，并给予我许多宝贵的建议。
4、在此，感谢xx老师的精心指导，同时也对各位评审能在百忙之中抽出时间，参与论文的审阅和答辩表示感谢。下面我就把论文的基本思路向各位答辩老师作出简要陈述。
5、选题缘由。
6、选择本课题作为我论文的写作题材的原因如下。
7、资料收集准备工作。
8、选定题目后，为了完成论文，我进行了资料的收集，拟定提纲，论文初稿、修改、定稿等一系列程序。在毕业论文的准备和写作过程中，我阅读了大量的相关文献。
9、论文的结构和内容。
10、本篇论文已经完成，总的来说，在写作的过程中，我学到了许多东西，也积累了不少经验，更进一步丰富了自己的知识。在论文中一些内容表述、论证上存在着不足之处。
11、一些问题还有待进行一步思考和探究，借此答辩机会，希望各位老师能够提出宝贵的意见，指出我的错误和不足之处，我会虚心接受，从而进一步深入学习，使论文得到完善和提高。
12、我的答辩自述完毕，感谢各位老师。
选题的目的：选题是毕业论文写作的第一步，学生选好了题目，就有方向和动力，同时也确定了毕业论文的写作内容。
毕业论文写作是从提出问题即从选题开始，选题的过程实际上是毕业论文写作的准备，是与毕业论文材料收集过程相伴而行的。选好题后就要开展论题研究，主要包括开展调查、实验、试验，分析研究资料，形成自己的观点等；接着是草拟提纲或构思设计。
制定方案；最后，写成毕业论文或绘制设计图纸与设计说明书，并修改定稿，这是一个紧密相连的、一环紧扣一环的系统工程。
意义万能模板是：
1、学校学生现状：我们学校是一所发展中的学校。34个教学班，1700余名学生，办学已成规模。学校地处城乡结合处，独特的地理位置，农村学生、留守学生已成为学校受教育者的主体。他们其中一部分习惯差、毛病多。农村学生、留守学生占学生总人数的60℅左右。
他们的养成教育是当下必须面临亟待解决的问题。作为一名教育工作者，更有刻不容缓的使命感和历史赋予我们的责任感。
2、寻找空白，填补空白：我们在课题立项之前，在网上大量查找了国内学校进行养成教育研究的情况。通过浏览，看到钢花学校做得比较好。但我们发现，钢花学校在德育主题月活动、利用家长学校资源等方面还有待进一步的开发。
选题的目的和意义万能模板：选题目的和意义，是开题报告中的第一大块内容。要写好这块内容，首先要明白两者的区别。在明确两部分的区别之后可以对选题的相关领域进行搜索，明确当下该选题有哪些研究成果，还有哪些部分是你的选题需要补充和完善的。对选题的价值有一个综合性的判断。
1、选题目的和选题意义的区别。
选题目的：着重阐述论文要解决的问题，以及为什么要选择去解决这个问题，和这个问题追求的答案是什么。
选题意义：着重阐述该选题对理论研究的有何贡献。最好具体到对哪一方面的哪一项研究有怎样的贡献，如何促进其他研究项目的发展。
2、开始实战。
选题目的：你可以先写写，你的选题的起源以及该选题在国内外的研究现状，结合国内外研究现状分析你的选题是打算解决什么问题，以及如何解决问题，最好能分析一下，你选题的研究重点。
选题意义：你要说清楚你的选题将对那些研究理论和那些研究项目产生怎样的推动作用，或者你的选题在实际应用中有什么指导意义。选题意义要着重突出这几点：
1、你的选题是前人没有研究过的，最好有具体数据或者文章来说明这一点，这样比较有可信度。
2、你的选题前人研究过，但是出于各种原因并没有研究到位，或者没有解决实际问题，或者研究的方法和结果不尽如人意。以上两点都需要你有具体的例子或者数据来证明，提高可信度。
补充：选题目的和意义可以分开写也可以合并写，具体看个人爱好以及资料的详细程度。
这篇毕业论文选题报告中的"课题目的和意义"通常是为了表明你选择研究这个题目的原因和价值所在。课题目的可能就是你要解决什么问题或者探讨什么方面的研究，而意义则强调这个课题对于学术界以及实践应用上的贡献和价值。这些内容都是为了让导师和审阅者更好地理解和评估你的研究计划，并行使对你毕业论文的审查职责。
选题是学科教学研究中不可或缺的一环，它是学科教学研究活动的前提和基础，也是学科教学研究工作的灵魂。论文选题的目的是要确定论文的主题，为下一步的论文写作提供有力的支撑。论文选题的意义在于：
一是帮助论文作者获得深入的学习。选择好的论文选题，能够让论文作者能够有效地学习学科知识，以便更好地理解论文题目和内容，并在论文写作过程中加以运用。
二是更好地利用论文写作时间。选择一个靠谱的论文选题，能够让论文作者更好地安排论文写作时间，充分利用时间，在有限的时间里更有效地把论文写好。
三是提高论文的科学性和实践性。在执行论文的过程中，选择一个比较准确的课题，能够在有限的时间内完成论文，同时还能够有效地提高论文的科学性和实践性，使论文研究充满可读性和实用性。
四是提高论文审稿人的评估角度。选择适当的论文选题，能够有效地提高论文审稿人的评估角度，使论文具有较高的可读性和可操作性，有利于审稿人更好地评估论文的质量。
总之，论文选题的目的和意义是指导论文作者有效进行学术研究，提高论文的科学性和实践性，提高论文审稿人的评估水平，使论文研究具有更强的可读性和可操作性，从而提升论文研究的质量和价值。
选题的目的和意义万能模板：选题目的和意义，是开题报告中的第一大块内容。要写好这块内容，首先要明白两者的区别。在明确两部分的区别之后可以对选题的相关领域进行搜索，明确当下该选题有哪些研究成果，还有哪些部分是你的选题需要补充和完善的。对选题的价值有一个综合性的判断。
1、选题目的和选题意义的区别。
选题目的：着重阐述论文要解决的问题，以及为什么要选择去解决这个问题，和这个问题追求的答案是什么。
选题意义：着重阐述该选题对理论研究的有何贡献。最好具体到对哪一方面的哪一项研究有怎样的贡献，如何促进其他研究项目的发展。
2、开始实战。
选题目的：你可以先写写，你的选题的起源以及该选题在国内外的研究现状，结合国内外研究现状分析你的选题是打算解决什么问题，以及如何解决问题，最好能分析一下，你选题的研究重点。
选题意义：你要说清楚你的选题将对那些研究理论和那些研究项目产生怎样的推动作用，或者你的选题在实际应用中有什么指导意义。选题意义要着重突出这几点：
1、你的选题是前人没有研究过的，最好有具体数据或者文章来说明这一点，这样比较有可信度。
2、你的选题前人研究过，但是出于各种原因并没有研究到位，或者没有解决实际问题，或者研究的方法和结果不尽如人意。以上两点都需要你有具体的例子或者数据来证明，提高可信度。
补充：选题目的和意义可以分开写也可以合并写，具体看个人爱好以及资料的详细程度。
选题意义万能模板是先客观介绍情况，要如实陈述别人的观点。然后对前人所做工作进行客观评价，有什么不足和研究空白，论文所做工作与前人做工作的差异分析。说明现在有了这些研究，但还有很多问题值得研究。
毕业论文开题报告选题意义，或者说课题研究的目的，应该叙述自己在这次研究中想要达到的境地、希望得到的结果、对社会现实或者学术领域有什么意义。我理解的就是你的毕业论文选题和之前的研究相比，有什么创新的地方。如果应用到现实生活中，可能取得怎样的效果和现实意义。
1、学校学生现状，我们学校是一所发展中的学校，34个教学班，1700余名学生，办学已成规模。学校地处城乡结合处，独特的地理位置，农村学生、留守学生已成为学校受教育者的主体。他们其中一部分习惯差、毛病多。据我初步统计，农村学生、留守学生占学生总人数的60℅左右。
2、寻找空白，填补空白。我们在课题立项之前，在网上大量查找了国内学校进行养成教育研究的情况。通过浏览，看到钢花学校做得比较好。但我们发现，钢花学校在德育主题月活动、利用家长学校资源等方面还有待进一步的开发，特别是针对留守学生的养成教育研究，更是一个空白。
3、创品牌，出特色。提炼办学理念，打造学校品牌，是我们学校当前的战略选择，也是教育发展的必由之路。教育品牌一旦形成，就会凝聚成一个地方或者一个学校教育方面的影响力，彰显其办学水平及办学特色，满足社会对优质教育的需求。
选题的目的和意义万能模板：
1、尊敬的各位老师：
2、您们好！
3、我叫xx，xx级xx班，（学号是xxxxxxx)，我论文的题目是《xxxxxx》。这篇论文是在xx老师的指导下完成的。在这期间，xx老师对我的论文进行了详细的修改和指正，并给予我许多宝贵的建议。
在此，感谢xx老师的精心指导，同时也对各位评审能在百忙之中抽出时间，参与论文的审阅和答辩表示感谢。下面我就把论文的基本思路向各位答辩老师作出简要陈述：
4、选题缘由。
5、选择本课题作为我论文的写作题材的原因如下：
6、资料收集准备工作。
7、选定题目后，为了完成论文，我进行了资料的收集，拟定提纲，论文初稿、修改、定稿等一系列程序。在毕业论文的准备和写作过程中，我阅读了大量的相关文献。
8、论文的结构和内容
9、本篇论文已经完成，总的来说，在写作的过程中，我学到了许多东西，也积累了不少经验，更进一步丰富了自己的知识。
在论文中一些内容表述、论证上存在着不足之处，一些问题还有待进行一步思考和探究，借此答辩机会，希望各位老师能够提出宝贵的意见，指出我的错误和不足之处，我会虚心接受，从而进一步深入学习，使论文得到完善和提高。
10、我的答辩自述完毕，感谢各位老师！
注意事项
题目就是文章的眼睛，要明亮而有神，是论文研究内容的高度概括，是整篇论文的研讨中心，题目就是告诉别人你要干什么或解决什么问题。
因此，论文题目要注意以下几方面：题目应当精练并完整表达文章的本意，但切忌简单的罗列现象或者陈述事实；文章题目不宜使用公文式的标题；文章题目要体现研究的侧重点，要呈现研究对象以及要解决的问题（也就是研究的对象和研究内容一定要在题目呈现）。
论文题目要新颖、简洁，字数最好不超过20个字，如果确因研究需要，就采用主副标题。
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二、选题的意义
1、尊敬的各位老师。
2、您们好。
3、我叫xx，xx级xx班，（学号是xxxxxxx)，我论文的题目是《xxxxxx》。这篇论文是在xx老师的指导下完成的。在这期间，xx老师对我的论文进行了详细的修改和指正，并给予我许多宝贵的建议。
4、在此，感谢xx老师的精心指导，同时也对各位评审能在百忙之中抽出时间，参与论文的审阅和答辩表示感谢。下面我就把论文的基本思路向各位答辩老师作出简要陈述。
5、选题缘由。
6、选择本课题作为我论文的写作题材的原因如下。
7、资料收集准备工作。
8、选定题目后，为了完成论文，我进行了资料的收集，拟定提纲，论文初稿、修改、定稿等一系列程序。在毕业论文的准备和写作过程中，我阅读了大量的相关文献。
9、论文的结构和内容。
10、本篇论文已经完成，总的来说，在写作的过程中，我学到了许多东西，也积累了不少经验，更进一步丰富了自己的知识。在论文中一些内容表述、论证上存在着不足之处。
11、一些问题还有待进行一步思考和探究，借此答辩机会，希望各位老师能够提出宝贵的意见，指出我的错误和不足之处，我会虚心接受，从而进一步深入学习，使论文得到完善和提高。
12、我的答辩自述完毕，感谢各位老师。
选题的目的和意义范文模板：
1、当今世界，经济全球化已成为必然趋势。因此，国际化经营是现代产业经济发展的一个重要特点。21世纪是我国经济与世界经济融合的时代，国内的生产要素与市场要与国际市场接轨。
我国企业只有积极对外开发，利用国内过你两种资源，载世界范围内组织生产和经营活动，把国内的生产经营活动纳入世界经济分工体系才能求得生存和发展。这已成为我国企业界的共识。我国中小企业也将成为参与国际化经营的主体之一。
因此，对我国中小企业在国际化经营中所遇到的问题进行研究并分析出相应的对策十分有意义和必要。基于以上意义，我决定选择本题目通过对我国中小企业在国际化经营中所遇到的问题进行系统而深入的研究探索。
最终指出并回答国际化经营中我国中小企业所遇到的问题“是什么、为什么以及如何解决”给出相应对策，化解我国中小企业在国际化经营中的矛盾与尴尬，指引中小企业趋利避害，在激烈的国际竞争中健康发展。
2、随着高校的扩招，每年毕业的大学生人数越来越多，毕业学生的数据也越来越繁琐，这无疑给高校校友信息管理工作带来了一定的压力，因此，很多学校疏于对校友信息的更新与维护。这导致了一个现状，很多往届的毕业生在毕业后与母校之间的联系就逐渐减少。
使得校友与母校之间的信息沟通十分困难，同时校友与校友之间的沟通也十分困难，有时可能母校发生了重大事件或举办大型活动，而很多校友却毫不知情。而这些校友们能为学校的建设投入资金，给在校学生提供就业指导和就业机会，是学校和在校学生在校外庞大的潜在财富。
同时，也有很多对母校充满感情的校友希望能够及时无误地了解到母校的情况，能够与昔日同学随时随地地联系，互动。在这样的背景下，开发一个校友管理系统是非常有必要的。
我们管工学院刚刚成立不久，还没有完善的校友管理系统，因此本系统就是为了管工学院各专业的校友信息管理而设计的，目的是让为管工校友提供实用性的服务，让校友管理工作规范化，系统化，为校友与管工学院之间，校友与校友之间搭建良好的沟通平台。
毕业论文选题意义写法：
1、论文选题意义怎么写，重点在于表示明白论文选题的对理论研究有哪些贡献，或者对实践具有哪些帮助和指导。
2、在相关的选题相关领域进行搜索，明确当下该选题有哪些研究成果，还有哪些部分是需要去修改和补充的。对选题有一个综合性的判断。论文查重系统。
3、进入实战的部分，简单讲述一下该课题的起源和发展情况，接着阐明选题需要重点去解决哪些问题，也就是讨论的范围。
4、最后对你的选题进行价值性评估，说明这篇论文对理论产生哪些实质的推动作用，有什么指导的意义。
5、选题意义要着重突出这几点：
（1）你的选题是前人没有研究过的，最好有具体数据或者文章来说明这一点，这样比较有可信度。
（2）你的选题前人研究过，但是出于各种原因并没有研究到位，或者没有解决实际问题，或者研究的方法和结果不尽如人意。以上两点都需要你有具体的例子或者数据来证明，提高可信度。
6、选题目的：着重阐述论文要解决的问题，以及为什么要选择去解决这个问题，和这个问题追求的答案是什么。
药学毕业论文开题报告篇3 题 目 名 称： 番泻叶对小鼠尿量的影响 研究现状： 一、普鲁兰酶 普鲁兰酶(Pullulanase，. 2. 1. 41)是一种能够专一性切开支链淀粉分支点中的α糖苷键，从而剪下整个侧枝，形成直链淀粉的脱支酶。普鲁兰酶还可以分解普鲁兰多糖，普鲁兰酶来源于微生物，R-酶则来源于植物。普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气气杆菌Aerobacter. aerogenes}(典型菌为肺炎克雷伯氏杆)发酵获得，他们报道了该酶良好的酶学性能。之后，各国的科研人员经过广泛深入研究，从不同的地区、微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。 在淀粉加工工业中，α淀粉酶最为常用，它的功能是水解淀粉的α-1,4糖苷键，单独用它时，产物中含有大量分支结构的糊精，其中就含有大量的α-1,6糖苷键。假如不把淀粉的α-1,6糖苷键彻底分解的话，势必会造成很大的浪费。自然界中，存在有能分解淀粉的α-1,6糖苷键的酶，通称为解支酶。如寡α-1,6葡萄糖苷酶( , Oligo-l,6-glucosidase )，普鲁兰酶( )，异淀粉酶( , Isoamylose )，支链淀粉一6-葡聚糖酶( )，其中普鲁兰酶要求的底物分子结构最小，故而可以将最小单位的支链分解，导致可以最大限度的利用淀粉，所以在淀粉加工工业中有着重要的用途和良好的市场前景。故而许多国家都争相开发，但是到现在为止，只有丹麦的NOVO公司具有普鲁兰酶的生产能力。我国只有向其进口，但是其价格昂贵，限制了普鲁兰酶在我国的应用。其实，我国早在七十年代就开发普鲁兰酶的产生菌，但是该菌的酶学性质不适合生产，至今我国在普鲁兰酶的国产化方面还没有报道。 在淀粉的加工行业上，对普鲁兰酶的酶学性质的要求是耐酸耐热，其原因是因为通常使用外加酶化法，由于所用酶类的限制，普鲁兰酶的添加可以在两步反应的任何一步，但必须满足上述的反应的条件。因此所开发的普鲁兰酶的酶学性质必须满足现有的酶法水解制糖的条件，也就是耐酸耐热。 二、普鲁兰酶的研究现状 1.产普鲁兰酶的微生物 普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气杆菌(Aerobacter aerogenes)发酵获得。他们报道了该酶的良好性能之后，各国的科研人员经过广泛深入的研究，从不同的地区的微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。但是迄今为止，尽管发现许多微生物能够产普鲁兰酶，但是由于当今工业生产条件(酸性，温度)，大多数微生物所产的普鲁兰酶并无商业价值。以下便介绍一下普鲁兰酶的生产菌种。 蜡状芽抱杆菌覃状变种(Bacillus cereus ) 由日本的ToshiyukiTakasaki于1975年发现。该菌同时产生两种淀粉酶:β-淀粉酶和普鲁兰酶。最佳作用条件为pH6～，温度50℃，最大转化率(淀粉水解产生麦芽糖)大约为95%.酶学研究中发现，此酶在pH5，温度60℃依然保持大部分活性，该菌的营养细胞呈棒杆状，聚集成长短不等紊乱链状，无运动性，格兰氏阳性，产芽抱时细胞无明显膨胀。该菌最适生长温度30℃～37℃ ,最高生长温度在41℃～45℃，可以利用葡萄糖，甘露糖，麦芽糖，海藻糖，淀粉和糖原。 嗜酸性分解普鲁兰多糖芽抱杆菌() 上世纪八十年代初，丹麦Novo公司获得此菌，此菌所生产的普鲁兰酶耐热 (60℃)，耐酸()。该公司经过投入巨资开发研究，1983年Nov。公司在日本和欧洲市场同时商业化销售，商品名Prornozyme。如今，它是应用最广，产量最大的普鲁兰酶。呈棒状，深层发酵几小时后，可观察到类原生质体的膨胀细胞，较稳定，饱子呈圆柱体或椭圆体。格兰氏反应阳性，37℃生长良好，45℃以上和pI-1高于以上不长，在以普鲁兰糖为碳源的培养基(( ～)上生长良好。 枯草芽饱杆菌(Bacillus subtilis) 1986年，日本的Yushiyuki Takasaki报道了一株能产生耐热耐酸普鲁兰酶的菌种，被命名为Bacillus subtilis TU。此菌种所产生的酶为普鲁兰酶和淀粉酶的混合物，可水解淀粉为麦芽三糖和麦芽搪.水解普鲁兰糖为麦芽三糖，其中普鲁兰酶最佳作用pH为～，但在时亦有约50%的酶活，此普鲁兰酶最佳作用温度60℃。 耐热产硫梭菌(Clostridum Themosulfurogenes) 1987年.德国的等报道了一株能同时产a淀粉酶、普鲁兰酶和葡萄糖淀粉酶的菌种:耐热产硫梭菌。该菌种所产普鲁兰酶有较广的温度适应范围(40℃～85℃)，在～有较高的活性，在如此广的范围内都有较强活力无疑将扩大该普鲁兰酶的应用领域. Bacillusnaganoensis,Bacillus deramificans, 上世纪九十年代，Deweer发现了普鲁兰酶产生菌Bacillus naganoensis;Tomimura筛选出Bacillus deramifrcans。这两株菌所产的普鲁兰酶的酶学性质与Bacillus. Acidopullulyticus的酶学性质相似。这两株菌都是中度嗜酸菌，在以上就不生长，温度超过45℃以上同样也不生长。这两株普鲁兰酶产生菌的发现，进一步拓宽了普鲁兰酶的应用。 产普鲁兰酶的高温菌菌种 自上世纪八十年代以来，人们逐渐意识到在通常的自然条件下，很难筛选得到极端耐热的普鲁兰酶生产菌种，于是各国的科学家便把目光转移到温泉嗜高温细菌的筛选，而且现在已经取得较多的成果。Bacillus如vorcaldarius所产普鲁兰酶的最适温度和pH分别是75～85℃, , Thermotoga maritime的最适温度和pH分别是90℃, , Thermurs caldopHilus的最适温度和pH分别是75℃,, Fenidobacterion pernnavoran最适温度和pH分别是80～85℃, 2.普鲁兰酶的分子结构 至今为止，许多普鲁兰酶的基因己经被克隆，但是还没有见到任何有关普鲁兰酶结构的报道，但是在根据序列相似性对糖普键水解酶的分类，普鲁兰酶属于第13家族，α淀粉酶家族，这个家族中包含了30多种酶，可以分为水解酶，转移酶。异构酶三大类。这些酶能够水解和合成α～,α～,α～,α～,α～,α～糖苷键。其中很多酶的结构已经被报道，它们都采取了(β/α)8的结构，通过生物信息学的研究，这个家族的蛋白都有一个共同的结构，酶的活性中心都是(β/α)8折叠筒的结构，命名为结构域A。第13家族的大多数酶还具有结构域B，它是位于(β/α)8折叠筒中，第三个β片层与第三个α螺旋之间的一段序列，其特点是结构和长度差异较大，推测其功能是与底物的结合有关。在紧接着(β/α)8折叠筒后，还有C结构域，紧接C结构域，部分家族成员还有结构域D。 3.普鲁兰酶的应用 普鲁兰酶，在食品工业中是一种用途广泛的酶制剂和加工助剂。它能专一性分解淀粉中的支链淀粉和糖原分子及其衍生的低聚糖分支中的α～l, 6糖苷键，使分支结构断裂，形成长短不一的直链淀粉。因此，将该酶与 其它 淀粉酶配合使用时，可使淀粉糖化完全。近年来，普鲁兰酶己作为淀粉酶类中的一个新酶种，应用于淀粉为原料的食品等工业部门，在食品工业中有如下几方面的作用: 单独使用普鲁兰酶，使支链淀粉变为直链淀粉 直链淀粉具有凝结成块，易形成结构稳定的凝胶的特性，因此，可作为强韧的食品包装薄膜。这种薄膜对氧和油脂有良好的隔绝性，又因涂布开展性好，故适合于作为食品的保护层。它还适合于淀粉软糖制造，也可用作果酱增稠剂，用于装油脂含量高的食品，以防止油的渗出以及肉食品加工。近年来在食品工业中提倡使用可被生物降解的薄膜，直链淀粉在这些方面具有较大的发展前途。豆类直链淀粉含量较高，因此绿豆淀粉制成的粉丝韧性比其它淀粉好，如果用普鲁兰酶处理谷物淀粉，再制成直链淀粉后，可以制成高质量的粉丝。一般谷物淀粉中，直链淀粉含量仅占20%，支链淀粉含量约为80%。工业上每生产1吨直链淀粉就有4吨副产品的支链淀粉。美国虽然通过遗传育种的方法.得到含直链淀粉60%玉米新品种，但不大适于大量生产。国外已采用普鲁兰酶改变淀粉结构，可使支链淀粉变为直链淀粉。据报道，采用此法收率可达100%.制造直链淀粉的方法为，先采用普鲁兰酶分解经液化的分支部分，使其转变为直链淀粉，并以丁醇或缓慢冷却法沉淀淀粉。再回收含少量水分的晶型沉淀物，最后通过低温喷雾干燥法制成粉状的直链淀粉。 普鲁兰酶与β～淀粉酶配合使用生产麦芽搪 饴糖是我国传统的淀粉糖产品，其中所含部分麦芽糖，广泛用于糖果、糕点等食品工业。目前生产方法是以α～淀粉酶进行液化，再用β～淀粉酶水解支链淀粉，这样只能水解侧链部分。接近交叉地位的α～糖苷键时，水解反应停止。但如果使用普鲁兰酶共同水解，便能使分支断裂，提高淀粉酶水解程度，降低了β极限糊精的含量，大大提高了麦芽糖的产率，有利于生产麦芽搪浆。目前对加普鲁兰酶进行糖化己作了较大规模的试验。 试验条件为。每批投料量约为900公斤碎米，粉浆浓度为15～16Be°数皮用量(对碎米计)，β～淀粉酶活性2,000单位/克以上，;普鲁兰酶活性45,000～55,0 00单位/克，系由产气气杆菌生产，每批用量为1公斤。试验结果表明，加入普鲁兰酶糖化的试验糖与对照糖品相比，还原糖平均增加，麦芽糖含量平均增加了，糊精含量平均减少了高浓度麦芽糖浆较之高浓度葡萄搪浆，具有不易结晶，吸湿性小的特点，所以高浓度麦芽糖浆在食品工业中有着广泛的用途。采用普鲁兰酶与p一淀粉酶配合使用，成本低廉，麦芽糖收率达到70%左右，其至更高。 用于啤酒外加酶法糖化 啤酒生产中麦芽，既是酿造啤酒的主要原料，也为酿造过程提供了丰富的酶源。在啤酒酿造的糖化过程中，麦芽中分解淀粉的主要酶是α～淀粉酶、β～淀粉酶和分解淀粉α～1. 6糖瞥键的R一酶(植物普鲁兰酶或植物茁霉多糖酶)。β～淀粉酶与另两种淀粉酶协同作用，可使淀粉分解成麦芽糖(也包括少量的麦芽三糖和极少量的葡萄糖)和低分子糊精。使麦芽汁有比较理想的糖类组成。在工业生产中为了节约麦芽用量，采用所谓外加酶法糖化，即在减少麦芽用量的前提下，增加淀粉质辅助原料的比率，并加入适当种类的酶制剂进行搪化。要使大麦及其它辅助原料糖化完全，需要外加a一淀粉酶和分解α～糖苷键的普鲁兰酶制剂等。单独使用a一淀粉酶时产生麦芽糖和麦芽三搪是很不完全的。假如分解淀粉α～糖苷键的酶活性不足，淀粉分解就不完全，其结果是可发酵性糖含量低，制成的啤酒发酵度达不到要求。若采用能分解α～和α～糖苷键的糖化型淀粉酶，则其反应产物为葡萄糖，容易使酒味淡薄。采用普鲁兰酶与α～淀粉酶协同，效果良好，其分解产物主要是麦芽糖和少量的麦芽多糖。采用外加酶法糖化时，加入酶制剂的用量为:淀粉酶6～7单位/克大麦及大米:蛋白酶，60-80单位/克，并配合以菠萝蛋白酶10ppm，普鲁兰酶50单位/克大麦。以上三种酶制剂均添加于糖化或酒化开始。 总之，普鲁兰酶无论作为酶制剂和食品工业的加工助剂均有广阔的发展前途。 研究目的和意义： 酶制剂工业是上世纪七十年代就己经形成的一个重要的产业，目前世界酶制剂总产值达100亿美元，我国的产值约为100亿人民币，并且随着其应用领域的不断扩大以及新酶种的开发，这一市场正在迅猛发展。但是全球酶制剂产业几乎被几家外国公司所垄断，其中丹麦的NOVO公司几乎占全球总销售额的一半。本研究对普鲁兰酶的开发，对酶制剂产业的发展有重要的意义。 其次我国自从七十年代开始便对普鲁兰酶进行研究开发，但是所开发得到的普鲁兰酶，既不耐热也不耐酸，这就使其在工业化应用中受到了局限。为了改变我国对进口产品的依赖，填补我国这一领域的空白，寻找一条国产化的道路，本研究的目的是利用自然微生物资源，普鲁兰酶，提高我国淀粉原料的利用率，从而提高整个淀粉加工行业的生产率，这对我国淀粉加工产业的意义是不言而喻的。 研究内容(内容、结构框架以及重点、难点)： 一.普鲁兰酶产生菌的筛选 (1)样品的采集; (2)菌种初筛; (3)菌种复筛; (4)菌种保藏方法; (5)酶活力测定方法的建立。 二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究 (1)碳源，氮源对发酵产酶的影响; (2)初始PH对发酵产酶的影响; (3)接种量对发酵产酶的影响; (4)发酵温度对产酶的影响; (5)金属离子对产酶的影响。 重点或关键技术： (1)纯菌株的分离; (2)菌株的鉴定方法的选择。 研究方法、手段： 一.普鲁兰酶产生菌的筛选 (1)样品的采集：选择适合产生的地点(面粉厂.菜地.果园等)采集土样 (2)菌种初筛：在采集的土样用无菌水稀释后，在含有淀粉类的培养基中做平板涂步， 37℃培养48h后，用碘液进行显色反应，将有淀粉酶产生的菌落接于斜面中保存。 (3)菌种复筛：将前期分离的能产生淀粉酶的菌株涂步于普鲁兰糖平板上，37℃培养48h后用95%乙醇进行透明圈实验。有透明圈产生说明菌株产生普鲁兰酶，将产生透明圈的菌落挑于斜面培养基培养。 (4)菌种保藏方法： 采用4℃低温保藏。 (5)酶活力测定方法的建立：采用发酵培养液经过离心后利用DNS显色法 520nm测定吸光值，测定标准葡萄糖标准曲线，利用标准曲线计算普鲁兰酶酶活大小。 二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究 (1)碳源，氮源对发酵产酶的影响：采用不同碳源，氮源培养基培养一段时间，测定酶活力。(其他条件相同：接种量，装瓶量，初始PH值，转速，培养时间。) (2)初始PH对发酵产酶的影响：采用相同发酵培养基，在不同初始PH下接种等量种子液。在相同条件下培养，测定发酵液的酶活。(其他条件相同：接种量，装瓶量，转速，最佳培养温度，最佳培养时间。) (3)接种量对发酵产酶的影响：在发酵培养基中分别接入2%，4%，6%，8%， 10%，14%，18%的种子培养液于最佳碳源，氮源，最佳初始PH的培养基中，在相同条件下培养，分别检测酶活。(采用以上确定的最佳碳源，氮源，最佳初始PH。) (4)发酵温度对产酶的影响：采用相同培养基，在不同温度下(25℃，30℃，35℃，40℃，45℃)培养一定时间，测定酶活力。 (5)金属离子对产酶的影响：在基础培养基中加入少量不同金属离子，发酵后测酶活。(金属离子有： 锰离子，钙离子，锌离子，镁离子，铁离子，铜离子。) 研究进度 ：完成项目总体进度30%，样品土样的采集及前期的准备工作,菌株的初筛，包括(样品土样原液的涂步培养及摇床培养，产支链淀粉酶菌株的挑选及斜面培养)。 ：完成项目总体进度50%,菌株的复筛，包括(产普鲁兰酶菌株的筛选及斜面培养),葡萄糖标准曲线的测定,酶活测定方法的建立,并以酶活大小对菌株进行再次筛选。 ：完成项目总体进度80%,产酶条件的研究。包括：碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。并通过各中单因素试验确定发酵培养基的最佳碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。 2009、4—2009、5 ：完成项目总体进度100%,课题总结，撰写论文。 文献综述(包括：国内外研究理论、研究方法、进展情况、存在问题、参考依据等) 自从1961年Bender H.等人在研究一株产气气杆菌Aerobacter aerogenes(典型菌为肺炎克雷伯氏杆菌)时首次发现普鲁兰酶后，国际上对产生这种酶的微生物进行了广泛研究，发现许多微生物可以产生此酶，并筛选出一些适用于工业化生产的优良菌株。随着该酶的应用发展，对耐热性普鲁兰酶的研究也逐渐增多，已成功克隆并表达了该酶的基因。国内1976年开始对一株产气气杆菌(Aerobacteraerogenes 10016)的普鲁兰酶进行研究，对该菌株的产酶条件、酶的分离提取及酶学性质作了报道，并研究了该酶的食品级提取技术。此外，陈朝银、刘涛等人从云南温泉水样中筛选到一株产普鲁兰酶高温栖热菌菌株，通过诱导等实验将该酶的酶活从提高到170u/mL，酶产量提高了近2500倍左右，酶的最适作用温度及pH分别是75℃和，具有一定的耐热和耐酸特性。 陈金全等从温泉水样中筛选到一株产耐热耐酸普鲁兰酶的野生菌株，并根据形态、生理生化特征、细胞化学组分分析及16SrDNA序列比对、基因组DNA的G+C摩尔百分含量、同源性比对等实验，鉴定其为脂环酸芽抱杆菌属(Alicyclobacillus)的一个新种，所产酶最适作用温度为60℃，最适pH值，具有较好的耐热耐酸特性。杨云娟等利用毕赤酵母成功构建了普鲁兰酶表达量较高的基因工程菌，摇瓶发酵酶活可达，最佳发酵条件下产量可达 .酶的最适作用温度为600C，最适pH值，具有较好的耐热耐酸性。目前我国仍没有具备独立生产普鲁兰酶能力的厂商，要实现低成本、国产化的生产，还有很长的路要走。 技术应用于耐热脱支酶的研究，使耐热异淀粉酶的研究有了很大发展。Coleman等人将嗜热厌氧菌T. brockii普鲁兰酶基因克隆到中得到的克隆子分泌的普鲁兰酶数量高于出发菌株，Okada等人将Bacillus Steanther, onhiu:中编码热稳定异淀粉酶的基因克隆到:中，得到的转化菌株其异淀粉酶能在60 ℃稳定15分钟。Burchadf将。ostridium thermosulf urogenes DSM38%的嗜热异淀粉酶基因克隆并在中表达，所得酶的最适pH和最适温度与出发菌相同，而且在高温下仍能保持活性.Antranikiam等人将Pyrococcus舟riousous的异淀粉酶基因克隆到中并分离得到了酶蛋白。尽管如此，目前尚未有已将转基因的耐热性异淀粉酶工程菌应用到工业生产中的报道。众所周知，利用物理和化学诱变剂单独或复合处理微生物细胞是选育高产变种菌株行之有效的经典方法，它在为培育多种抗生素、氨基酸、核苷酸激酶(尤其是蛋白酶和淀粉酶)的高产变种菌株方面曾经起过极为重要的作用，至今仍然是方便易行和行之有效的方法之一。 主要参考文献： [1][美]惠斯特勒等编王雏文等译.淀粉的化学与工艺学[M].北京：中国食品出版社，1988 [2]张树政.酶制剂工业[M]. 北京: 科学出版社，1998 [3]邬显章.酶的工业生产技术[M]. 吉林: 吉林科学技术出版社，1988 [4]Taniguchi H, Sakano Y, Ohnishi M, Okada G(1985) Pullulanase[J].TanpakushitsuKakusan Koso. 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