发布时间：
值明显的反映是发情牛频繁运动，不愿躺卧，爬跨或接受别的牛只爬跨，另外外阴部红肿、流粘液，个别牛还有少量的血色。目前发情观察和判断的方法主要由外部观察和内部检查来综合判断。1、外部观察：母牛的发情，主要根据外部表现来判断发情状况。（1）发情前期：母牛常爬跨其它母牛，从阴道流出稀薄、透明的粘液，阴户开始发红、肿胀，但此时不让其它母牛爬跨。（2）发情中期：性欲旺盛，流出的粘液量增多，且粘稠、不透明，被其它母牛爬跨时，安静不动，有的弓腰、举尾、频频排尿，呈现愿意接受交配的样子。（3）发情后期：接近排卵时，又表现不让其它母牛爬跨，其它症状（如粘液量、透明度、阴户红肿等）都较中期差。2、内部检查（1）、阴道检查：发情母牛的阴道粘膜充血、肿胀、有光泽，粘液积存于阴道下，子宫颈管和子宫外口松驰并开张，利于精子进入子宫内。发情终了时，粘液充血消失，呈浅桃红色，粘液变少。（2）、直肠检查：手伸入母牛的直肠内，隔着直肠壁触子宫体变化（发情牛子宫触诊有弹性，无发情时子宫松弛）来判断母牛的发情情况，可以鉴定是真发情还是假发情；还可以诊断子宫是健康的还是疾病状态。但母牛的发情持续期较短，卵泡较小，直肠检查时要细心、沉着，结合综合观察，适时配种。
母牛发情受某些因素制约，超出正常规律，就叫异常发情。母牛的异常发情主要有以下几种：
（1）隐性发情（安静发情）
母牛发情时没有发情表现，但卵泡往往能发育成熟并排卵。这种情况在产后母牛、高产牛和瘦弱母牛中较多。其主要原因是促卵泡素和雌激素分泌不足。正常情况下，奶牛产后第一次发情出现在产后30～50天，出现时间与营养和产奶量有关。高产奶牛往往产后第一次发情出现的较晚，且发情征状不明显，不易观察与判断。由于母牛发情持续的时间短，尤其在冬季舍饲期容易漏配，必需严加注意。
（2）假发情
母牛只有外部发情表现而不排卵。一种是有的母牛在妊娠5～6个月时突然有性欲表现，如接受其他牛的爬跨，但进行阴道检查时，阴道无黏液，子宫颈口闭锁，直肠检查时能摸到胎儿。另一种是母牛虽具备发情的各种表现，但卵巢无发育的卵泡，因而不排卵。这种现象常发生在卵巢机能不全的青年母牛和患有子宫内膜炎、阴道炎的母牛中。
（3）持续发情
有的母牛连续发情不止，有的持续一周以上。其主要原因有两种：一种是卵巢囊肿。由于不排卵的卵泡继续增生、肿大，在卵泡壁继续分泌雌激素的作用下，母牛表现为持续发情。另一种是卵泡交替发育。开始在一侧卵巢有卵泡发育，产生雌激素，使母牛发情，但不久另一侧卵巢又有卵泡发育，于是前一卵泡发育中断，后一卵泡继续发育，这样的交替产生雌激素，使母牛只有发情表现而不排卵。
（4）乏情
也就是母牛不发情。营养不良、卵巢疾病、子宫疾病或者严重的全身性疾病等都能使母牛不发情。泌乳盛期的高产母牛，也常在分娩后很久不发情。针对这些不同情况，应采取相应的有效措施，促其尽快发情配种。
牛发情表现：
1、母牛开始发情时，往往有公牛跟随，欲爬，但母牛不接受，兴奋不安，常常叫几声，此时阴道和子宫颈呈轻微的充血肿胀，流透明黏液，量少；
2、以后母牛黏液与日俱增，不安定，公牛或其他母牛跟随，但母牛尚不接受，子宫颈充血肿胀开口较大，流透明黏液，量多，储留在子宫颈附近，黏性较强；
3、到了发情盛期，经常有公牛爬跨，母牛很安定，愿意接受，并经常由阴道流出透明黏液，牵缕性强；子宫颈呈鲜红色，明显肿胀发亮，开口较大。
牛的发情鉴定方法为：发情母牛站立不安、大声哞叫、弓腰举尾、频繁排尿，相互舔嗅和外阴部，食欲下降，反刍减少即为牛的发情。
发情母牛阴唇稍肿大、湿润、黏液流出量逐渐增多。发情早期黏液透明、不呈牵丝状。由于多数母牛在夜间发情，因此在接近天黑和天刚亮时观察母牛阴户流出的黏液情况，判断母牛发情的准确率很高。
在运动场最易观察到母牛的发情表现，如母牛抬头远望、东游西走、嗅其他牛、后边也有牛跟随，这是刚刚发情。发情盛期时，母牛稳定站立并接受其他牛的爬跨。
扩展资料：
牛的发情介绍如下：
根据母牛卵巢上卵泡的大小、质地、厚薄等来综合判断母牛是否发情。方法是将牛保定在六柱栏中，术者指甲剪短并磨光滑，戴上长臂形的塑料手套，用水或润滑剂涂抹手套。术者手指并拢呈锥状插入肛门，将粪便掏净，将手臂慢慢伸入直肠。
可摸到坚硬索状的子宫颈及较软的子宫体、子宫角和角间沟，沿子宫角大弯至子宫角顶端外侧，即可摸到卵巢。在生产中应建立配种记录和发情预报制度，对预计要发情的母牛加强观察，每天观察2～3次。
参考资料来源：百度百科-奶牛-表现特征
参考资料来源：人民网-对奶牛发情监测技术有了全球“话语权”
小小的水母美丢莎寄生在那不勒斯湾的一种海生活蛞蝓的体表上，两种生物互相依存。在生活的不同阶段，两者交换着捕食者和猎物的位置。 这是怎样纠缠不清的自我！“想想这些活物，让我起一种怪异的感觉。它们没有使我想起任何曾经见过的事。真的没有。这样的生活轮回，我从没听说过。这些东西是稀奇古怪的。没错儿，就是奇特。而与此同时，如同一个朦胧记得的梦，它们让我一下子想起了整个地球。”读过并仰慕刘易斯·托马斯《细胞生命的礼赞》的人们，不由得会牵挂那咱水母和蜗牛的命运。托马斯就是有这种魅力，能通过这种不可思议，然而又富有洞见的观察，来说明生和死这些永恒的课题。本书包含一些辉煌的新宝藏：论人类犯错误的天才；论疾病与自然的死亡，包括一只老鼠的平静死亡；论无性造人；论疣子；论蒙田，用Edward,O Wilson的话说，假如蒙田拥有20世纪生物学的深刻知识，他就会是今天的刘易斯·托马斯。
第一段：以诗歌,音乐等引出蜗牛话题.第二段：写蜗牛的艰苦生活环境.第三段：写蜗牛的行动,生活等说明蜗牛.第四段：写明蜗牛精神,发出感慨：蜗牛精神真可贵.第五段：写以前自己做的不足.第六段：承上启下说惭愧并说要学习蜗牛品质,打引号引出第七段.第七段：如何学第八段：总感慨结,再次感慨蜗牛
动物医学毕业论文选题如下：
一、论文选题
选题原则一是理论联系实际，二是刻意求新。立足于岗位，写自己感触较深的事或对社会现象剖析较深刻的事。论文选题范围如下：
1、对××场规划与布局状况的调查分析。
2、宜章县（或××乡镇）猪（或牛、羊、禽）品种、饲料资源状况与利用现状调查。
3、宜章县（或××乡镇）牛（羊、禽、猪）奶（肉）制品情况的调查分析。
4、对××场的生产经营状况的调查报告。
5、××病症状及治疗措施。
6、××养殖场免疫程序分析。
7、规模化奶牛场奶牛乳房炎的防治措施。
8、宜章县（或××乡镇）猪（或牛、羊、禽）等常见疫病发生情况的调查与分析。
二、毕业论文应遵循的原则
1、真实性原则
毕业论文内容应是自己在实习过程中亲自做的，如：养猪与猪病防治、养禽与禽病防治、养牛与牛病防治、饲料兽药生产与营销。
2、符合性原则
毕业论文的文本结构必须符合《学院毕业论文基本规范要求》的格式，共由4个主要部分组成：
（1）封面。
（2）论文摘要（不少于200字）。
（3）毕业论文正文（不少于2000字）。
（4）参考文献。
3、专题性原则
毕业论文应一事一论、一题一论，专门写某一方面的问题。
4、规范性原则
毕业论文内容格式应规范，符合科技论文基本格式要求，其逻辑关系是：提出问题（观点，即选题）→解决问题的方法（如试验材料与方法）→解决问题的结果，并对结果进行分析（结果与分析）→结论（结论与讨论、小结与讨论）。
5、创新性原则
毕业论文选题能够体现生产和研究的要求，在理论上或实践上有一定的研究价值，有新意。
6、科学性原则
毕业论文应观点明确，条理清晰，数据准确，论证严密合理，逻辑推理正确，总结出具有一定规律性的经验，有独到见解。
7、应用性原则毕业论文对解决实际的问题有很强的针对性，可通过实践检验和便于推广。
抗生素是治疗奶牛乳房炎的有效药物。它们能够抑制和杀死细菌，有效地控制奶牛乳房炎的症状，提高奶牛的生产效率。抗生素的研究意义重大，它有助于改善奶牛的生产效率，提高牛奶的质量和安全性，并延长奶牛的寿命。此外，抗生素的研究也有助于开发能够抵抗耐药细菌的新药，从而更有效地治疗奶牛乳房炎，进一步提高奶牛生产效率。抗生素研究还有助于更好地理解奶牛乳房炎的发病机制，以及细菌与宿主之间的相互作用。通过研究不同类型的抗生素，可以更好地了解它们如何作用于细菌，以及它们的抗菌机制。此外，通过研究抗生素的代谢产物，研究人员可以研究奶牛乳房炎的发病机制，以及牛对抗生素的耐受性。总之，抗生素对奶牛乳房炎的研究意义重大。它可以改善奶牛的生产效率和营养状况，提高牛奶的质量和安全性，增加牛奶的产量，同时也可以更有效地治疗耐药细菌，有助于更好地理解奶牛乳房炎的发病机制。
随着时代的不断变化与发展,我国传统的畜牧行业展开了相应的改革,我国的畜牧兽医行业也有了进一步的提升。下文是我为大家整理的关于畜牧兽医本科生毕业论文下载的范文，欢迎大家阅读参考!
浅析猪常见传染性疾病临床症状和预防治疗方法
1 猪副伤寒病
本病主要侵害 1～4 月龄仔猪，一年四季均可发生，但阴雨潮湿季节多发。病猪和带菌猪是主要传染源，可从粪、尿、乳汁、流产的胎儿、胎衣、羊水排菌，主要经消化道感染。在子宫内也可能感染。健康猪带菌相当普遍，当受外界不良因素影响以及抵抗力下降时，常导致内源性感染。主要特征是腹泻、下痢，若不及时准确治疗，很快就脱水死亡，死亡率高，经济损失大。
猪副伤寒病的症状
急性型：多发生于断乳前后的仔猪，常突然死亡。病程稍长，体温高达 41℃～42℃，腹泻，下痢，呼吸困难，耳根、胸前、腹下皮肤有紫斑，多以死亡告终。
亚急性和慢性型：表现体温升高，眼结膜发炎，有脓性分泌物。初便秘后腹泻，排灰白色或黄绿色恶臭粪便。病猪消瘦，皮肤有痂状湿疹。病程可达数周，最终死亡或僵猪。
防治措施
预防：加强防疫注射或投喂副伤寒苗。把好猪源关，自繁自养极佳。改善饲管及卫生条件，消除发病诱因，增强仔猪抵抗力。常洗用具、食槽，保持圈舍清洁、干燥，不留粪尿，以减少感染机会。
哺乳及培育仔猪防止舔食脏物，喂优质、易消化饲料，勿突然更换饲料。
治疗：肌注恩诺沙星、盐酸环丙沙星，服土霉素片;肌注氯霉素、庆大霉素，服土霉素片;肌注氯霉素、磺胺嘧啶钠，服土霉素片;肌注恩诺沙星、氯霉素，服土霉素片;盐酸环丙沙星、氯霉素，服土霉素片。
2 猪肺疫病
猪肺疫是多杀性巴氏杆菌感染引起的一种急性、败血性传染病，各龄猪均可感染发病，其特征是急性病例呈败血症死亡。本病对多种动物和人均有致病性，猪最易感，季节性不明显，以冷热交替，气候剧变，高温，潮湿，多雨季节多发。营养不良、长途运输、饲养条件不良等因素促进本病发生, 一般呈散发性或地方性流行。
猪肺疫的症状
急性病例高热达 41℃~42℃，呼吸困难，犬坐姿势，咳喘，口鼻流泡沫或清液，咽喉部急性肿大、红色、触诊坚硬有热痛感。腹侧、四肢内侧皮肤发红斑，指压褪色，终呼吸困难窒息而死;慢性病例主要呈现慢性肺炎、慢性胃肠炎症状，鼻流脓性分泌物，持续性咳嗽、呼吸困难，食欲不振，伴腹泻消瘦。
防治措施
预防：定期注射猪肺疫苗;把好猪源关;猪舍定期消毒，保持干燥、卫生、通风;发现病例及时隔离治疗。
治疗：静注磺胺嘧啶钠。肌注长效土霉素、恩诺沙星或卡那霉素，若并发它病要对症治疗。
3 猪传染性胸膜肺炎
病原是胸膜肺炎放线杆菌，各龄猪均易感，多发于 6 周龄至6 月龄猪。长途运输、饲管不当、气候骤变等因素可引发本病。病猪和带菌猪为主要传染源，主要经呼吸道气流感染。
猪传染性胸膜肺炎的症状
感染猪潜伏期 1～7 天。按病程长短分最急性型、急性型、亚急性型和慢性型。最急性型病猪突然死亡，死前无征兆，死猪腹部、耳、四肢发绀，口鼻流带血红色泡沫，死亡率高达 80%～100%。急性型病猪减食或废绝，体温 41℃左右，常站立或呈犬坐姿势不卧，精神沉郁，耳鼻、四肢皮肤呈蓝紫色，张口伸舌，喘，间歇性咳嗽，呼吸困难，表情极痛苦，常于 24 小时内病重窒息死亡，部分转为亚急性或慢性。亚急性型或慢性型病猪体温正常或稍高，咳喘，食欲减退，消瘦，病程延长或进一步恶化。
防治方法
预防：加强防疫，定期注射胸膜肺炎多价灭活苗;严把猪源关;强化饲养管理;严格消毒制度，保持圈舍清洁、干燥、通风;实行全进全出的饲养方式，发现病猪及时隔离治疗。
治疗：本病早期治疗效果较好，用药量要大。首选静注磺胺嘧啶钠，肌注长效土霉素、恩诺沙星或(卡那霉素、丁胺卡那霉素)。
可同时使用维 C、地米效果会更好。若并发其他病要对症治疗。
4 猪口蹄疫
口蹄疫属于一种急性、烈性的传染病，猪、牛、羊等偶蹄动物均易感染，本病传染性很强，无明显季节性，一年四季均可发生。以流涎，跛行，口腔、鼻盘、蹄部水疱为主要特征。
猪口蹄疫的症状
患病猪体温升高，全身症状明显，流涎，跛行，喜卧，鼻盘、口腔、齿龈、舌、乳房(主要是哺乳母猪)，蹄冠、蹄叉、蹄踵均会产生水疱，疱溃后、流脓血而形成烂斑，重者蹄壳脱落，病仔猪可因停食、肠炎腹泻等死亡。
防治方法
若发现猪患上口蹄疫，一定要上报动物检疫部门，不能隐瞒、出售、私屠乱宰;对病死猪要作焚烧、深埋等无害化处理;对圈舍、用具、槽子等进行严格的清洗消毒，以免口蹄疫经空气、污物、病肉等传播，传染给其他家畜甚至人。该病危害极大，无法根治，只能预防。因此预防十分关键，广大养殖户要十分重视，定期注射口蹄疫苗，切勿心存侥幸，造成重大经济损失。
5 猪丹毒病
该病是由猪丹毒杆菌引起猪的一种传染病。多发生在夏秋和梅雨季节，2 月龄以上猪最易感染。病猪潜伏期短的为 3~5 天，长的达半月之久。主要特征是在耳后、颈部、胸、腹侧等部位，皮肤出现各种形状红斑或疹块，呼吸困难，病死率很高，对养猪业危害很大。
猪丹毒病的症状
该病分为败血型、疹块型和慢性型。患猪体温升高，精神不振，食欲减退或废绝，口渴，大便干燥。在耳根、胸、背部、腹部、大腿上均出现形状不一、大小不一、界限明显、扁平肿胀的紫红色疹块，指按褪色。
防治措施
预防：定期预防注射猪丹毒苗。强化消毒制度，搞好圈舍卫生。严把猪源关，新购进的猪应隔离饲养一周，确定正常后再入圈喂养。
治疗：静注磺胺嘧啶钠，用复方氨基比林或安乃近 10~20 毫升稀释青霉素肌注，每天 2 次;中药疗法可用大黄、石膏、玄参、知母、连翘、地龙各 25 克，甘草 15 克，加水煎服 2 剂。
浅谈奶牛乳腺炎治疗新策略研究进展
乳腺炎(mastitis)是奶牛最常见的生产性疾病，给奶牛业造成了巨大的经济损失[1].奶牛乳腺炎分临床型和隐性乳腺炎两种，临床型乳腺炎以乳房红肿热痛、乳腺组织损伤为主要特征[2],而隐性乳腺炎虽无可见临床症状，但在大部分牛场存在，危害更大。奶牛罹患乳腺炎后，引起乳腺上皮细胞合成和分泌功能不同程度障碍，乳脂肪、乳蛋白和乳糖等主要乳成分合成量明显减少[3],造成牛奶品质显着下降。研究证实，综合评估各种因素造成的损失，奶产量及奶品质下降造成的损失占总损失的49%[1].
国内常见的奶牛乳腺炎治疗方法是使用抗生素，但由于乳腺炎病原菌种类多，乳腺感染致病机制复杂，其治疗效果不理想。长时间大剂量使用抗生素极易导致耐药菌株增多、乳中抗生素残留等问题，严重威胁乳品及生命安全。因此，开发能快速修复乳腺组织，恢复产奶量、提高奶品质的治疗方法迫在眉睫。
研究表明，乳酸链球菌素、Aegis溶菌酶、溶葡萄球菌酶、CpG-DNA、血小板浓缩液新型乳腺炎治疗制剂可用于奶牛乳腺炎临床治疗。另外，激素、调控乳腺细胞信号通路及嗜中性粒细胞数量等新型治疗策略也为快速高效防治乳腺炎提供了良好前景。
1治疗乳腺炎的新制剂
乳酸链球菌素
乳酸链球菌素 (Nisin)又称乳球菌肽或乳链菌肽，是从乳酸链球菌发酵物中提取的一种多肽抗菌类物质，已被证明是一种安全天然生物性食品防腐剂和抗菌剂[4].Nisin最先作为牛乳房乳头的一种消毒剂使用，具有良好的杀菌作用且无潜在组织损伤。Nisin作为乳腺炎治疗药物的主要作用机理是其吸附于细胞膜上以后，破坏细胞膜的完整性，引起细胞裂解及细胞内蛋白大量外泄，致病原菌死亡[5].
另外的研究也证实，Nisin在肺炎链球菌感染小鼠模型的治疗中，也起到良好的杀菌作用。从临床型奶牛乳腺炎分离出金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)和无乳链球菌的药敏试验结果可见，Nisin能够有效抑制这两种细菌的生长和繁殖[4].曹立亭等[6]使用Nisin乳腺灌注治疗临床型乳腺炎，测定治疗前后牛奶中乳脂肪含量、非脂乳固体含量、牛奶蛋白质含量、奶牛泌乳性能等指标，治疗后奶牛所产牛乳的上述指标均显着提高，提示使用Nisin可促进乳腺上皮细胞合成乳成分的能力增强及乳腺组织修复。Szweda P等[7]分离出37株牛乳腺炎源耐药菌株，药敏结果显示其中21株对Nisin敏感，进一步证明Nisin具有良好的杀菌作用。
Aegis溶菌酶
Aegis溶菌酶是一种有效的抗菌剂，能切断肽聚糖中N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-l,4糖苷键，破坏肽聚糖支架，在内部渗透压的作用下致细胞胀裂，引起细菌裂解[8].通过对比溶菌酶和头孢唑啉钠治疗临床型乳腺炎的治疗效果试验，溶菌酶组给药24h后乳清中丙二醛(malondialde-hyde,MDA)含量显着降低，揭示溶菌酶能抑制和清除炎症时产生的氧自由基，从而减少对乳腺细胞的损伤[9].进一步研究证实，鸡蛋清溶菌酶、鸭蛋清溶菌酶、10%溶菌酶制剂、细菌性溶菌酶对引起奶牛乳腺炎的葡萄球菌均有抑制作用[10],细菌性溶菌酶治疗效果最好，最有希望用来治疗细菌性乳房炎。
沈诚等[11]将人溶菌酶重组质粒pcDNAKLYZ乳腺灌注治疗隐性乳腺炎奶牛，比较灌注前后牛乳中的细菌阴性率，灌注前阴性率为0,灌注后阴性率为,显示重组质粒抑菌效果显着，该重组质粒对奶牛隐性乳腺炎具有较好的治疗效果。
溶葡萄球菌酶
溶葡萄球菌酶(lysostaphin)是一种从模仿葡萄球菌()中分离获得的含Zn2+内切肽酶，因能有效的清除金黄色葡萄球菌生物被膜而达到杀菌作用[12].Aguinaga A等[13]使用溶葡萄球菌酶和不同抗生素单独和联合使用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant )和甲氧西林敏感菌(methicillin-susceptible )的研究报告中显示，溶葡球菌酶跟抗生素联合使用比单独使用抗生素，具有较强的杀菌作用并且致MSSA及MRSA菌株的抗生素使用浓度分别降低了2倍~11倍和2倍~14倍。在另一研究中，用MRSA建立小鼠肺炎模型，分别应用不同剂量的溶葡萄球菌酶、万古霉素和PBS进行感染后治疗，结果显示溶葡萄球菌组具有低病死率、肺组织损伤减少、感 染 部 位 细 菌 数 较 少 特 征，并 成 剂 量 依 赖性[14].
Szweda P等[7]研究同时也指出耐药菌对溶葡球菌酶的最小抑菌浓度(minimal inhibitory con-centration,MIC)为μg/mL~μg/mL,远远小于MIC最大值32μg/mL,且所有耐药菌对溶葡萄球菌酶敏感。蒋司嘉等[15]使用低、中、高重组溶葡球菌酶粉治疗85头患乳房炎奶牛的104个乳区，试验结果表明低中高剂量重组溶葡萄球菌酶均能有效清除感染乳区的链球菌、葡萄球菌、化脓隐秘杆菌等革兰阳性菌，大幅降低牛奶中的白细胞数，提高日产奶量。不同剂量的重组溶葡萄球菌酶治疗隐性乳房炎、临床型乳房炎的有效率和治愈率都优于青霉素，治疗效果跟剂量呈正相关。
CpG-DNA
CpG-DNA是一些具有免疫激活功能的以未甲基化的CpG基序为核心的DNA序列，它包括含CpG基序的人工合成的CpG-ODN和自然界中低等生物的基因组DNA[16].在由大肠埃希菌建立的山羊乳腺炎模型中，试验组乳腺组织中大肠埃希菌数显着低于对照组，CpG-ODN对大肠埃希菌诱导山羊乳腺炎的乳腺有保护作用[17].在分别由金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌诱导的大鼠乳腺炎中，使用CpG-DNA的试验组乳腺组织白细胞介素-6(in-terleukine-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-ɑ(tumor necro-sis factor-ɑ，TNF-ɑ)和CpG-DNA特 异 性 受 体TLR-9(Toll-like receptor-9)mRNA表达水平较对照组显着提高，同时减轻炎症反应和炎症介质对组织的损伤，提示CpG-DNA具有乳腺保护作用，其作用机理可能为CpG-DNA与宿主体内天然免疫细胞上的模 式 识 别 受 体 相 结 合，引 起 相 应 的 免 疫 应答[18].
血小板浓缩液
血小板最常见的作用是在血管损伤部位聚集，形成凝血酶原和纤维蛋白原组成凝血表面从而达到止血作用[19].Pinto J M等[20]通过使用血小板浓缩液治疗一例人慢性皮肤溃疡，观察到肉芽组织增生，提示治疗有效，可能原因是血小板作为生长因子的载体刺激胶原蛋白产生、活化成纤维细胞和诱导细胞外基质重塑达到修复组织损伤作用。
Lange-Con-siglio A等[21]使用血小板浓缩液灌注感染乳腺，通过感染乳腺乳汁体细胞数和细菌数评估治疗效果，结果显示使用血小板浓缩液能显着降低牛乳中体细胞数和细菌数，血小板浓缩液在促进炎症消散、减少乳腺实质损伤、降低乳腺炎复发率方面有较好作用。进一步研究证实血小板浓缩液不仅对乳腺组织有修复作用，对奶牛乳腺炎病原菌也有抑制作用。
Bi-elecki T M等[22]采用Kirby-Baue纸片扩散法，观察到人富含血小板的血浆的琼脂平板可以显着抑制金黄色 葡 萄 球 菌 及 大 肠 埃 希 菌 的 生 长。
Marian E等[23]从事的另一项研究不仅验证了上述研究结果，而且显示血小板浓缩液对铜绿假单胞菌也有抑制作用。一项乳腺炎流行病学调查的研究显示，金黄色葡萄球菌乳腺炎发病率为,大肠埃希菌乳腺炎发病率引起的为[24],因此有望使用血小板浓缩液治疗由条件致病菌引起的乳腺炎。
2乳腺炎治疗新策略研究进展
激素调控乳腺细胞的分泌及修复
激素在生殖生理方面应用广泛，乳腺的生长发育和分泌功能均在大脑皮层和丘脑下部的调节下进行，多种内分泌激素发挥着重要作用[25-26].佟慧丽等[27]建立正常培养的奶山羊乳腺上皮细胞系，用催乳素处理体外培养乳腺上皮细胞，测定催乳素处理组乳腺上皮细胞乳糖和总蛋白水平，显示催乳素诱导乳腺上皮细胞乳糖及乳蛋白分泌水平明显升高。
陈建晖等[28]使用催乳素和孕酮处理奶牛乳腺上皮细胞系，测定处理后细胞中的酪蛋白和乳糖含量，显示催乳素处理组升高趋势显着，提示催乳素可以提高乳腺干细胞的数量。激素已被证实有助于提高乳腺细胞分泌能力，提高牛乳品质，促进乳腺组织恢复，但应用方法及其作用机制有待进一步研究。
调控乳腺细胞凋亡及相关信号通路的研究
研究证实乳腺炎的发生发展与乳腺细胞的凋亡及信号通路关系密切，肖阳[29]使用TUNNEL方法检测奶牛不同发育时期乳腺组织的细胞凋亡，证实泌乳晚期凋亡信号最强。乳腺细胞的分化、更新及凋亡与信号通路的调控联系紧密，与此相关的信号通路包括Wnt信号通路、Notch信号通路、Hedge-hog信号通路[26].Wnt信号通路中，β-catenin可以启动Wnt靶基因的表达;抑制β-catenin信号，乳腺细胞分化和增殖被抑制，Notch信号通路的激活能够促进乳腺细胞的自我更新，而Notch的过量表达会抑制细胞的分化。研究表明不同形式的TP63激活Hedgehog信号通路可促进乳腺细胞的有丝分裂[30].张雯[31]使用脂多糖(LPS)诱导的原代小鼠乳腺上皮细胞炎症模型，检测LPS刺激下细胞因子和炎性介质的分泌以及常见的两条炎症信号转导通路NF-κB和MAPK的变化，结果显示LPS刺激下，乳腺上皮细胞TRL4、NF-κB和下游细胞因子表达升高，显着抑制了p38、JNK和ERK、MAPKs磷酸化。分析各信号通路在乳腺细胞分化更新及凋亡中的机制，精细调控乳腺细胞凋亡也有望成为治疗乳腺炎的新方向。
调控乳腺组织嗜中性粒细胞数量的研究
金黄色葡萄球菌()等致病菌侵入奶牛乳腺后，中性粒细胞向感染乳腺组织集中，发挥吞噬功能清除病原，充当保护机体的第一道防线[32].然而，如果PMN在炎症灶过度激活或延迟清除，大量PMN可以通过释放氧自由基等有害内容物加重炎症反应，使炎症迁延、慢性化或扩散至全身[33].因此适时适度清除PMN对于控制乳腺炎症的发展和转归至关重要。
Wang Y等[34]使用650nm,低强度激光疗法作用LPS诱导的大鼠乳腺炎模型，经低强度激光疗法后，抑制PMN向乳腺腺泡聚集，降低髓过氧化物酶活性，从而减轻乳腺炎症反应。另一项研究证实，日粮中硒含量与乳腺中PMN数量直接相关，LPS诱导的小鼠乳腺炎的病理学切片显示，缺硒小鼠乳腺出现较多PMN浸润、乳腺中组织中促炎因子表达水平高于正常硒含量组小鼠，因此有望通过调控日粮中硒含量，调节乳腺中PMN数量，进而防治奶牛乳腺炎[32].
综上所述，乳腺炎是一种严重危害奶牛业的疾病，抗生素治疗乳腺炎由于其天然局限性，治疗效果并不理想。乳腺炎防治新制剂乳酸链球菌素、Aegis溶菌酶、溶葡萄球菌酶、CpG-DNA、血小板浓缩液有望替代传统治疗药物;激素疗法、调控信号通路及PMN数量有望作为预防治疗乳腺炎的新策略。积极开展牛乳腺炎治疗新制剂及新策略的研究，为高效防控奶牛乳腺炎提供良好条件。
参考文献：
[1]Sinha M K,Thombare N N,Mondal mastitis indairy animals:incidence,economics,and predisposing factors[J].Sci World J,2014:.
[2]宋亚攀，杨利国。中国奶牛乳腺炎防治研究进展[J].中国奶牛，2010(12)：48-54.
[3]张勇，杨永新，赵兴绪。临床型奶牛乳腺炎乳腺组织的比较蛋白质组研究[J].中国农业科学，2009,42(4)：1442-1446.
纯牛奶……………………………………500ml 原味酸奶…………………………………125ml 工具： 电饭锅、带盖瓷杯、勺子、微波炉（也可以用其他方法加热牛奶，但用微波炉不仅速度快，而且加热温度好掌握） 做法： 1．将瓷杯（连同盖子）、勺子放在电饭锅中加水煮开10分钟消毒。 2．将杯子取出倒入牛奶（7分满，牛奶如果是新开封的，本身已消毒得很好，可以不用煮开消毒），将牛奶放入微波炉加热，以手摸杯壁不烫手为度。 3．在温牛奶中加入酸奶，用勺子搅拌均匀，盖盖。 4．将电饭锅断电，锅中的热水倒掉，将瓷杯放入电饭锅，盖好电饭锅盖，上面用干净的毛巾或其他保温物品覆盖，利用锅中余热进行发酵。 5．8～10小时后，低糖酸奶就做好了。如果是晚上做的，第二天早晨就能喝到美味的酸奶了。 注意事项： 1．所用菌种酸奶不可以用加入果料的，更不可用果味酸奶。 2．牛奶加热的温度如过高，会杀死酸奶中的乳酸菌造成发酵失败，如温度过低又会造成发酵缓慢，以摸着不烫手为度。 3．不可用电饭锅的保温档进行发酵，因为保温的温度过高，保温发酵时，电饭锅必须断电。如果在冬天制酸奶，可以把瓷杯放在暖气上发酵。 4．发酵容器用带盖瓷杯最好，硬塑料杯子也可，但如杯子质量不过关的话，加热消毒时容易变形。盖子很重要，乳酸菌是厌氧菌，无氧环境更有利于发酵。 5．容器消毒最好不用消毒液，因为如果冲洗不干净，会杀死乳酸菌，使发酵失败。加热消毒是最安全的方法。 6．有抗奶（含有抗生素）或还原奶（用奶粉还原成的牛奶）都不适合作制作酸奶的原料。 7．成功的酸奶呈半凝固状，表面洁白光滑，没有乳清（淡黄色透明液体）析出，闻之有奶香味，如不怕胖又喜欢甜食，可在吃前加砂糖。不可在发酵前放糖。 8．自制酸奶保质期为2～3天。 ■制作酸奶的过程■ ◇1.准备一升的鲜奶.150G的酸奶一杯(最好选高钙低脂滴,因为健康嘛)放在室温下。 ◇2.准备一个玻璃瓶和搅拌棒.并且用沸水冲洗它们.给他们消毒。 ◇3.鲜奶用热水泡一会直到牛奶温热就可以了.大概30-40度.因为这个温度很适合乳酸菌的繁殖。 ◇4.把温热的牛奶倒入消毒好的玻璃瓶里面,把150G的酸奶放入里面,并且搅拌均匀。 ◇5.然后用保险膜盖上。 ◇6.放入烤箱,温度大概为30-40度左右.太高或者太低都不适合乳酸菌的生长。 ◇7.六小时后取出即可。 ■制作酸奶的诀窍■ 制作所需要的定温发酵器具也可以是闷烧锅，电饭锅，保温瓶， 烤箱，带烧烤功能的微波炉，烘碗机，消毒碗柜，插电保温器等等器具代替 ，总之就是要拥有实验精神，初次制作时多测试温度变化及发酵时间，发酵时间会随着温度降低而拉长。 ◆1.制作时所使用的器具都要先经过沸水消毒为佳。 ◆2.最适合乳酸菌发酵温度为 43－45℃ ,温度过高菌种会被杀死，过低则延长发酵时间而影响风味。 ◆3.用接种法制作的时候，购买的酸奶一定要选用生产日期最为接近的产品，因为这种刚生产出来的酸奶活菌数量多，活性较高，品质较比较稳定，一定要选用原味的，其它口味的都是添加了食用香精和色素的，会影响酸奶的制作品质。 ◆4.牛奶请选用一般低脂，全脂纯鲜奶或者纯奶粉，请勿选择特殊营养强化或者调味的牛奶。 ◆5.发酵时间在8小时，误差为±2小时，原因时保温器具的保温效果不通所致。 用两斤左右的牛奶放入锅中加热，同时倒入半斤左右的酸牛奶，充分的搅拌，牛奶热了以后关火（不要让牛奶沸腾）。牛奶凉到四十度左右，用高压锅放水加热到四十度，将牛奶放入干净的玻璃杯中，盖好盖子，放入高压锅中。不点火，直接将高压锅的盖子盖好，放上保险阀，闷十分钟左右。拿出来放凉了，可以放到冰箱里，味道更好。--------------------------------------------------准备材料： 1、任意品牌酸奶一杯/袋/盒（第一次作“引子”） 2、白砂糖两大勺（冰糖、蜂蜜、不加糖都可以） 3、牛奶一大袋（500g，据说含抗生素的牛奶作不出酸奶，不知真伪） 4、另备干净容器一个（饭盒啦，无油、无水、密封，透明漂亮者为上选） 制作过程： 1、5勺酸奶（引子）放入容器 2、2勺糖放入容器（爱吃甜的多放，想减肥、不怕酸的不放），后加也可以，不过我是先放，主要是舍不得酸奶“破相” 3、到入牛奶，搅拌均匀 4、加盖，放到温度高一点的地方（原参考值：摄氏30度需12小时，我家18度时，早上做晚上吃，晚上做早上吃，真的是“吃”而不是“喝”，目前我家牛奶消耗量成倍增长） 5、耐心地等上12个小时左右，打开盖子（中间不许偷看！）…凝固得象豆腐脑似的，就成功了，应该用平湖如镜来形容 6、先别着急品尝，先留出5大勺酸奶做引子 呵呵，其实简单地说就是：5勺酸奶+2勺糖+1袋牛奶搅拌均匀，静置12小时左右即可 加上应市的水果再冰镇一下味道会更好,不过一定要先留下“白”酸奶做引子 复杂版本： 原料： 纯牛奶500ml（经多次实验，完达山纸盒纯牛奶最好）原味酸奶125ml（作菌种用，实验证明万家宝原味酸奶最好） 工具： 电饭锅、带盖瓷杯、勺子、微波炉（也可以用其他方法加热牛奶，但用微波炉不仅速度快，而且加热温度好掌握） 制作方法： 1.将瓷杯（连同盖子）、勺子放在电饭锅中加水煮开10分钟消毒 2.将杯子取出倒入牛奶（7分满，牛奶如果是新开封的，本身已消毒得很好，可以不用煮开消毒），将牛奶放入微波炉加热，以手模杯壁不烫手为度。 如果是塑料袋装的牛奶，最好煮开后晾至不烫手，再做下一步。 3.在温牛奶中加入酸奶，用勺子搅拌均匀，盖盖。 4.将电饭锅断电，锅中的热水倒掉，将瓷杯放入电饭锅，盖好电饭锅盖，上面用干净的毛巾或其他保温物品覆盖，利用锅中余热进行发酵。 8-10小时后，低糖酸奶就做好了~~如果是晚上做的，第二天早晨就能喝到美味的酸奶了~~ 成功的酸奶呈半凝固状，表面洁白光滑，没有乳清（淡黄色透明液体）析出，闻之有奶香味，如不怕胖又喜欢甜食，可在吃前加砂糖。不可在发酵前放糖。 自制酸奶由于不能密封，所以储存时间也要比市场上卖的时间短，放在冰箱里只可以储存2-3天，随做随喝更好啊~~ 注意事项： 1.所用菌种酸奶不可以用加入果料的，更不可用果味酸奶。 2.牛奶加热的温度如过高，会杀死酸奶中的乳酸菌造成发酵失败，如温度过低又会造成发酵缓慢，以摸着不烫手为度（微波炉加热常常会造成受热不均，应该用勺子搅拌一下再试温度）。 3.不可用电饭锅的保温档进行发酵，因为保温的温度过高，保温发酵时，电饭锅必须断电。如果在冬天制酸奶，可以把瓷杯放在暖气上发酵。 4.发酵容器用带盖瓷杯最好，硬塑料杯子也可，但如被子质量不过关的话，加热消毒时容易变形。盖子很重要，乳酸菌是厌氧菌，无氧环境更有利于发酵。 5.容器消毒最好不用消毒液，因为如果冲洗不干净，会杀死乳酸菌，使发酵失败。加热消毒是最安全的方法。 6.有抗奶（含有抗生素）或还原奶（用奶粉还原成的牛奶）都不适合作制作酸奶的原料。 7.菌种酸奶因为质量不稳定偶尔也会造成发酵失败。 总之，多摸索，多实践，很快你就能成为自制酸奶的高手了酸奶的保健作用 1、维护肠道菌群生态平衡，形成生物屏障，抑制有害菌对肠道的入侵。 2、通过产生大量的短链脂肪酸促进肠道蠕动及菌体大量生长改变渗透压而防止便秘。 3、酸奶含有多种酶，促进消化吸收。 4、通过抑制腐生菌在肠道的生长，抑制了腐败所产生的毒素，使肝脏和大脑免受这些毒素的危害，防止衰老。 5、通过抑制腐生菌等有害细菌在肠道的生长，从而也抑制了这些细菌所产生的致病因子，达到防病的目的。 6、提高人体免疫功能，乳酸菌可以产生一些增强免疫功能的物质，可以提高人体免疫力，防止疾病。 7、酸奶是益生茵的丰富源泉 益生菌是指有益于人类的生命和健康的一类肠道生理细菌，如双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌等乳酸菌。目前市面上各种酸奶制品品种繁多，有凝固型的、搅拌型的，还有加入不同的果汁、酸甜可口、适应各人不同口味的果汁型酸奶。不管是何种酸奶，其共同的特点都是含有乳酸菌。这些乳酸菌在人体的肠道内繁殖时会分泌对人体健康有益的物质，因此酸奶对人体有较多的好处：一是能将牛奶中的乳糖和蛋白质分解，使人体更易消化和吸收；二是酸奶有促进胃液分泌、提高食欲、加强消化的功效；三是乳酸菌能减少某些致癌物质的产生，因而有防癌作用；四是能抑制肠道内腐败菌的繁殖，并减弱腐败菌在肠道内产生的毒素；五是有降低胆固醇的作用，特别适宜高血脂的人饮用；六是一般来说，无论是手术后，还是急性、慢性病愈后的病人，为了治疗疾病或防止感染都曾服用或注射了大量抗生素，使肠道茵丛发生很大改变，甚至一些有益的肠道菌也统统被抑制或杀死，造成菌群失调。酸奶中含有大量的乳酸菌，每天喝250～500ml，可以维持肠道正常菌丛平衡，调节肠道有益菌群到正常水平。 乳酸菌肠道清道夫，它能在肠内定居，使肠道菌相的构成发生有益变化，促进体内消化酶的分泌和肠道蠕动，清除肠道垃圾、抑制腐败菌的繁殖。
牛奶变酸搜酸奶?搞笑么首先，要搞清楚一个概念:酸牛奶与变酸牛奶的本质区别酸牛奶与变酸牛奶的主要区别为酸牛奶为牛奶中有益菌纯种发酵，而变酸牛奶是牛奶被杂菌污染变质，所以它们在本质性质上是有所不同的。所以，纯牛奶久放变酸了就意味沣它已经变质，是不能喝的了!新鲜的牛奶经巴氏消毒灭菌，冷却后加入适当的乳酸菌，置于恒温箱内，进行乳酸发酵，得到的凝块，即为酸牛奶。在乳酸发酵过程中，积累了乳酸，使牛奶质量发生了以下变化。改变了牛奶的自然风味，尤其是夏季冷藏后的酸牛奶，喝起来酸甜可口，清凉消暑。改变了牛奶的酸碱度，在酸性条件下，使牛奶中的蛋白质发生变性而凝固，这给与进入胃中的鲜奶遇到胃酸而发生变性凝固的情况相近。一般认为，天然蛋白质在体内消化的第一步就是蛋白质变性，因变性后的蛋白质结构松散，易被蛋白酶水解消化。酸牛奶比牛奶容易消化吸收的原因就在于此。随着乳酸浓度的提高，可以抑制酸奶中和肠道中有害微生物的长生繁殖，况且乳酸菌生长发育过程中还能产生一些抗菌素，对伤寒、痢疾等病菌有一定抑制，这就是酸奶酸而不坏，且能治疗腹泻的奥妙。乳酸菌在肠道还能合成人体必需的多种维生素，如维生素B族、维生素E族等，对人体健康成长大有益处。变酸的牛奶是指营养物被细菌污染，产生腐败物，不能食用。变酸的牛奶是由杂菌共同活动造成。变酸的牛奶中，含有许多病菌，病毒，如果人们饮用了这种牛奶，会发生食物中毒。
毕业论文其实不难，你可以找一些范本，自己仔细看看，然后照着它的格式写就可以啦。具体的内容要靠你自己去发掘。如果确实不会，俺给你一份
途牛网的商业模式有发展创新路径的启发。途牛网的商业模式中最为核心的就是产品定位是旅游线路和休闲游，结合其为旅行社代理并一次性收取旅游费用的交易和盈利模式，而途牛网的商业模式创新路径对我国旅游电商更好地朝着多元化、差异化方向发展具有重要的借鉴价值和意义。
电子商务市场的快速发展，推动着我国的很多行业慢慢过渡为电子商务类型行业，旅游业也不例外。旅游电子商务近年来在我国可谓是蓬勃发展，随着电子商务技术的不断加深与进步，有调查显示，约40%的网民在旅游时会选择利用互联网来进行车票或者旅游景点门票的预定。由此可见，电子商务已经被社会大众认同并且接受，旅游行业更应该根据自己的产业特性，适应网络环境下的旅游市场。本文根据自身所掌握的电子商务相关知识，选择途牛旅行网站为研究对象，对网站的经营模式包括：内容经营模式、管理模式、资本模式、商业模式等方面进行初步的探讨和分析，并选择几个和途牛旅行网同类型的网站进行对比，为了方便以后对类似运营模式的网站有较为深入的了解，对于网站的现状及未来发展趋势展开了讨论并提出自己的可行性方案。同时对网站现存问题提出自己的解决方案。关键词：途牛旅行网；商业模式；经营模式第1章绪论提到行业服务提供的服务模式，相信很多互联网用户并不会感到陌生，行业服务指的是某些具有专业针对性且在该行业背景内具有资源及实力的产业为该产业的消费性群体提供电子商务的平台以及最新的电子商务信息服务。电子商务是一种跨行业的先进的信息化产物，很多致力于提供产业服务的网站已经大获成功，而新模式的兴起也给我国的旅游业带来了新的商业契机。行业服务提供模式以其专业性强、对消费客户定位准确的优势促使传统旅游业由“线下”转“线上”，迅速的融入到网络旅游的浪潮中。我国现存的旅游网站数量繁多，例如携程网、去哪网等等，但是真正能够满足用户需求，提供给用户最优质服务的网站并不是很多。为了能够找出最适合中国电子商务旅游化市场的经营模式，本文选择了途牛旅行网作为分析对象，通过对网站自身的分析及同其他同类型网站的对比，初步探讨网站的优劣势，以及未来的发展方向。旅游电子商务化的概念旅游电子商务指的是把互联网作为主体，利用旅游资讯库以及电子银行作为基础，采用一种较为先进的方式来运作旅游业和旅游业分销系统的商务模式。我国的旅游网站在1996年萌芽，至今我国颇具规模、能够满足大部分旅游爱好者需求的网站已经多达5000余家，构成了庞大的电子商务旅游大军。电子商务有广义和狭义之分，这条准则同样适用于旅游电子商务。本文研究的途牛旅行网正是旅游电子商务狭义方面的缩影，狭义方面的旅游在旅游的产业中利用信息电子互联网，通过电子平台来实现旅游资讯或旅游商品以及服务类交易活动的合称，是一种全新的旅游类经济运作模式。旅游电子商务模式的出现为旅游行业带来了新鲜的血液，为广大的旅游爱好者提供了一个互联网的平台。当互联网在商业领域大显身手，众多企业和公司争相将自己的产品或服务推向网络，投入大量资金和人力建立网站大肆宣传形成“电子商务热”的潮流时，我国的旅游电子商务却并没有完全的成熟，准确的说我国的旅游网上产业正处在电子商务的第二阶段，即使有些旅游类网站已经被大众所接受并认同，但是真正意义上成功的能够同时完善网站架构、客户关系、盈利模式的网站并不多。有一些问题应该引起旅游业内从业者和旅游网站开发人员的关注：怎么能最好的利用因特网的潜力将旅游产业的内容资讯以及业务流程从线下转移到线上，如何能让网站的产品和提供的服务更贴近消费者的真实需求，如何整合旅游市场的利润获得切实的盈利。一个成功的旅游类电子商务网站，对于整个行业来说都具有划时代的意义。电子商务环境下的行业优势09年全球性的金融危机的风暴来袭，国际范围内的许多行业收到巨大的冲击，旅游业也未能幸免，经济危机压迫下人们丧失了出门观山游水的闲情逸致，但随着世界经济逐步跨出低谷，旅游业重现了星星之火，整体呈复苏势头。我国的旅游业正在进入新一轮的“黄金发展期”。
途牛旅游相对来说是一个不错的线上旅游网站，无论是价格上还是服务上都有一定的优势，尤其是海岛类的旅游产品，途牛旅游网还是非常不错的。要说发展前景，从目前的状态来说应该还是可以的，毕竟是刚上市的公司。
尽管在线旅游市场里携程仍然是无可争议的老大，但一批精准定位、打破传统用户和服务商们固有思维的新型商旅网已经突起。其中途牛旅游网就凭借在线订购旅游线路模式及兼有传统旅行社的线路优势，走出了自己的一片新天地。途牛网创立于2006年10月，彼时携程、艺龙已经是行业内的佼佼者，想要通过复制它们的模式获得胜利的可能性已经微乎其微。“在线旅游市场里，相比酒店机票的预订服务，专做旅游线路预订的很少，玩的人少就意味着机遇。”专家以为，尽管携程、艺龙等在渠道、产品资源等方面的优势为后来者建立了壮大的竞争壁垒，但途牛网只做旅游路线并对这一细分市场进行深耕细作，可以应用互联网优势整合旅游产业链，通过呼叫中心与业务运营体系服务客户。途牛网先是花费了半年时光树立了一个国内最全面的景点库，紧接着又做了两个颇有意思的产品，“路线图”和“拼盘”，致力于打造国内“驴友”交换的一个公共社区。而随着集合的人群越来越多，于敦德和他的伙伴也在途牛网成立半年后找到了明确的运营模式：国内有众多的旅行社，将这些旅行社的旅游线路集中在一起并且分类管理，游客通过访问途牛网了解感兴趣的旅游线路，也可以向途牛网的客服咨询，最后在途牛网完成预订。当游客与旅行社签署合同时，途牛网可以获得旅行社反馈的3%—7%的佣金。而在让客户满意的同时，途牛网也一直在采用各种办法扩展自身知名度。由于途牛网的重要客户群是白领阶层，有一定的消费能力，于是网络营销中的竞价排名成了途牛网的主要营销手腕。据统计，途牛网投入的网络竞价排名营销费用占了总预算过半份额，而传统推广方法消费的营销费用仅占总投入的30%。虽然投入不菲，不过实际的效果却很好。2007年是途牛网竞价排名营销的第一年，在没有积聚、没有品牌的情形下，就取得了超过百万元的赢利，客源中有60%—70%是冲着竞价排名而来的；2008年，竞价排名营销的后果更为显著，为途牛网带来了近千万元的赢利。当然，只有营销是远远不够的，不断追求创新能力走得更远。途牛网把更大心思花在产品和服务上，比如以往出现的是单个旅游路线产品，变成了多个产品可同时出现，力求让客户最简略、最便利地找到适合的路线；增强网络数据的实时更新，确保客户可以清晰看到所有旅游路线的订单数量、最新订单、热点订单、老客户评价等，以此为自己供给出行参考。同时针对旅游产品鱼龙混杂的情形，途牛网还制订了回访制度，对所有订单进行逐个回访，确保服务质量，所有的回访记载公开透明的显示在网站上，分5项内容依据客户的评价进行打分，并最终盘算出每个产品的满意度，便于跟踪晋升质量以及便利后续客户选择。根据数据，客户的总体满意度到达了95%。正是其在线旅游服务的模式弥补了传统旅游销售模式的空白，虽然没有传统旅行社的门店但却有完全的线路，同时比“酒店+机票”的模式更加直观和详尽，还具备网络销售的便宜和实惠，途牛网成立后持续两年的快速发展获得了风投们的青睐，2011年3月30日，途牛网获得了Gobi Partners（戈壁合伙人有限公司）首轮数百万美元的风险投资。“客户的服务满意度仍然是我们最为关注的，所以接下来重要还是以晋升服务的程度、进步客户对我们服务的满意度为目的做一些事情。”于敦德说，途牛网得到融资后重要用于呼叫中心的升级，业务运营体系的改良，业务人员的培训，度假产品的研发以及市场方面。易观国际的统计数据显示，2009年第二季度中国网上旅游预订市场范围约亿元，环比增加，同比增加13%，已经实现赢利并连续增加的途牛网还入选了国际有名的投资风向杂志《红鲱鱼》2009年亚洲科技创新公司100强。