112 方法: 抽取013ml 骨髓用涂有蛋白甘油的硅化玻片涂片5～7 张, 同时用EDTA 抗凝的试管抽取2ml 静脉血行流式细胞(FCM) 检查。113 免疫组化试剂来源: 来自福州迈新公司即用型第二代免疫组化ElivisionTMplus 广谱试剂盒。114 免疫组化步骤: ①石蜡涂片脱蜡和水化后, 用PBS (PH714) 冲洗3 次,每次3min。②根据每一种抗体的要求,对组织抗原进行相应的修复。③每张涂片加50ul3 %过氧化氢溶液, 室温下孵育10min , 以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS 冲洗3 次, 每次3min。④每张涂片根椐需要加50ul 的第一抗体( 如CD20 , CD3 , CD45RO , CD45RB ,TdT, MPO , CD5 , CD79 , CD56 , CD79a ,CD43 , CD5 , CD10 ) , 室温下孵育60min。⑤除去PBS 液, 每张涂片加50ul 聚合物( Polymer Enhancer) , 室温下孵育20min , PBS 冲洗3 次, 每次3min。⑥除去PBS 液, 每张涂片加50ul酶标抗鼠/ 兔聚合物(Polymerized HRP -Anti Ms/ Rb IgG) , 室温下孵育30min。PBS 冲洗3 次, 每次3min。⑦除去PBS液, 每张涂片加50ul 新鲜配制的DAB或AEC 溶液, 显微镜下观察3～10min。⑧自来水冲洗, 苏木紫复染, 011 %盐酸分化, 自来水冲洗, PBS 返蓝。⑨涂片经过梯度酒精脱水干燥, 用DAE 显色, 中性树胶封固。
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