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收稿日期：2007-10-25基金项目：深圳市科技和信息局基金资助项目作者简介：王丹（1982-），女，辽宁本溪人，硕士研究生，从事植物生物技术研究。注：雷江丽为通讯作者。大花美人蕉茎尖组织培养技术研究王 丹1,2，雷江丽2，吴燕民3，吕 慧2，郁继华1(1.甘肃农业大学 农学院，甘肃 兰州 730070；2.深圳市园林科学研究所，广东 深圳 518003；3.中国农业科学院 生物技术研究所，北京 100081)摘 要：以大花美人蕉（Canna×generalis）根茎茎尖为外植体进行组织培养技术研究，筛选出芽诱导适宜的培养基为MS + 6-BA （单位下同）+ TDZ ；MS + 6-BA + TDZ + NAA 培养基能较好地诱导分化出丛生芽, 继代增殖培养中与MS + 6-BA + TDZ + NAA 培养基交替使用可减少畸形芽，增殖系数达；适宜的生根培养基为MS + 6-BA + NAA ，生根率达，且植株生长健壮，移栽易成活。关键词：大花美人蕉；茎尖；组织培养中图分类号： 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2008)01-0033-04Research on Shoot-tip Culture of Canna×generalisWANG Dan1,2, LEI Jiang-li2, WU Yan-min3, LÜ Hui2, YU Ji-hua1( of Agronomy, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, Gansu China; Institute of LandscapeGardening, Shenzhen 518003, Guangdong China; Research Institute, Chinese Academy of AgriculturalSciences, Beijing 100081, China)Abstract: The paper mainly studied on tissue culture of Canna×generalis with the stem tips asexplants. The results showed that the bud inoculation medium was MS + 6-BA ; the best of clump shoot induction and differentiation medium was MS + 6-BA +TDZ + NAA ; using MS + 6-BA + TDZ + NAA asproliferation medium, an optimal proliferation rate was obtained. When the two kinds of mediumused alternatively, the effect was better. The optimum rooting medium was MS + 6-BA +NAA , the rate of rooting could reach , and cultured in this medium, the plant grewwell and easy to words: Canna×generalis; shoot-tip; tissue culture大花美人蕉(Canna×generalis)属美人蕉科(Cannaceae)美人蕉属(Canna)的园艺杂交种[1]，是多年生喜光宿根草本花卉，原产美洲热带和非洲等地。其枝叶茂盛、花朵艳丽、姿态优美、花期长，在深圳地区几乎全年开花，是配置大型花坛的优良品种。大花美人蕉不仅观赏价值高，而且能吸收硫、氯、氟、汞等有害物质，具有净化空气、保护环境的作用，因此，世界许多城市的园林绿化中都广泛应用。美人蕉传统的繁殖方式主要采用分切地下根茎的方法，繁殖速度慢、增殖效率低，而且连续营养繁殖造成病毒积累致使病毒病在各地相当普遍，严重影响其观赏价值。利用茎尖组织培养进行脱毒试管苗快繁，是目前大力繁殖与推广美人蕉的主要手段。关于美人蕉组织培养的研究报道较少[2,3]，本研究探索其组织培养高效的再生体系，以期为品种提纯复壮及遗传转化、性状改良奠定基础。2008,37(1): Plant Science第·34· 37 卷1 材料与方法 材料供试材料为目前城市绿化中普遍应用的大花美人蕉‘President’品种。 外植体选择与处理选择生长健壮、无病虫害的优良母株，挖取带芽胞的根茎，去除表面老皮并用肥皂水清洗。用75%乙醇棉擦拭，然后采用不同的消毒剂及处理时间（升汞10min、2%次氯酸钠10min、2%次氯酸钠20min、2%次氯酸钠 + 升汞5min、2%次氯酸钠 + 升汞10min），封闭式振摇灭菌。无菌水冲洗5 次，置于超净工作台上备用。接种前，剥去外部叶片，露出生长点，立即切取茎尖进行接种。 培养方法及培养条件试验于2006 年10 月在深圳市园林科学研究所组培室进行。诱导、增殖和生根培养基均选用MS为基本培养基，在不同培养阶段附加不同种类、不同浓度配比的植物生长调节剂（表2～表4），蔗糖3%，pH 。培养温度(28±2)℃，光照强度2 500 lx，光照周期为14h/d，相对湿度70%～80%。每处理接种30 瓶。定期观察试管苗生长与分化情况。2 结果与分析 不同消毒处理方式对外植体无菌化的影响因供试外植体取自美人蕉地下根茎，表面污染物较多，不易消毒，且不同植物及外植体的成熟度对消毒剂的反应不同，故本试验选用升汞和次氯酸钠进行灭菌效果比较，以筛选合适的消毒剂及消毒处理时间。由表1 可知，2%次氯酸钠20min 处理的无菌化效果较好，但茎尖褐化较严重，说明灭菌时间过长对去老皮后的幼嫩根茎影响较大。升汞10min 处理与2%次氯酸钠 + 升汞 10min处理，无菌化效果差异不大，但2%次氯酸钠 + 升汞 10min 处理有轻微药害。因此，后续实验选用升汞处理10min 进行外植体消毒。 不同生长调节剂配比对芽诱导的影响以MS 为基本培养基，附加不同浓度6-BA、NAA、2,4-D、KT、TDZ 等（表2），以筛选出较适宜美人蕉茎尖诱导分化的配方。因美人蕉根茎具有休眠特性，芽诱导分化较难。TDZ 具有很强的促进细胞分裂活性，～μmol/L 即可有效促进分化[4]，因此，本实验对TDZ 的诱导效果进行初步探索。试验表明，在不添加任何生长调节剂的MS 基本培养基（1 号）上，茎尖接种10d 后开始生长，叶片展开后，生长停止；15d 后转接到新的MS 培养基上无明显生长，随后叶片逐渐变黄、萎蔫，说明基本培养基中添加生长调节剂是美人蕉离体培养的必要条件。在仅添加6-BA 的2、3、4 号培养基中，高浓度的2 号培养基分化率为，明显好于3、4号培养基，说明美人蕉启动芽诱导分化需要高浓度的细胞分裂素（表2）。11～16 号培养基添加物为不同生长调节剂与TDZ 组合（表2）。仅添加TDZ 的培养基分化率为0，而多种生长调节剂配合使用分化效果更好[5]。其中15 号培养基的侧芽分化率最高，达，且每个茎尖可增殖2～3 个侧芽，但个别茎尖经多次转接后有畸形芽；与2 号培养基相比，分化率明显提高，说明添加低浓度TDZ 可促进芽诱导分化（表2）（图版-a）。5、6、7 号培养基为生根培养基，探讨NAA 对美人蕉茎尖生长和生根的影响。试验结果初步说明美人蕉在6-BA/NAA 小于2/ 时生根率可达50%以上（表2）。8、9、10 号培养基，探讨美人蕉脱分化，诱导愈伤组织，但结果均不理想。因此，建立高效的美表1 不同消毒剂及处理时间对外植体无菌化的影响处 理 接种数污染数污染率(%) 药害情况升汞10min 30 5 基本无药害2%次氯酸钠10min 30 12 无药害2%次氯酸钠20min 30 4 20%有轻微药害2%次氯酸钠+升汞5min 30 10 3%有轻微药害2%次氯酸钠+升汞10min 30 5 7%有药害第1 期 王丹,等：大花美人蕉茎尖组织培养技术研究 ·35·人蕉遗传转化再生体系还需进一步探索愈伤组织诱导途径。 芽继代增殖为了探讨优化的芽继代增殖培养基配方，按表3 设计6-BA、NAA、TDZ 的正交实验，以15 号培养基上分化出的丛生芽为接种材料，进行继代增殖培养（图版-b）。由表3 可见，除17、18 号培养基外，低浓度TDZ（）的分化促进作用较高浓度（）的效果好，说明高活性的TDZ 浓度过高反而抑制分化。当 时, NAA 促分化作用显著优于。在TDZ、NAA 浓度相同的情况下，随着6-BA 浓度的升高，分化率提高。但随着继代次数的增多，含高浓度6-BA的27 号培养基分化率略有下降，甚至有个别畸形芽产生，说明高浓度细胞分裂素对短期的分化有促进作用[9]，但继代数次后，芽已经萌动，自身具有分化能力，需适当降低6-BA 浓度进行壮苗，以避免畸形芽产生。因此，在增殖过程中交替使用分化增殖系数较高的19 号培养基和27 号培养基，既可保证较高的芽分化率，又可使继代苗生长健壮，减少畸形芽。 生根诱导增殖芽3～5cm 长时，转接到生根培养基上培养约10d 后，可见到根生成（图版-c）。接种20d 后统计生根结果（表4）。从表4可见，所用培养基上都有根生成，说明美人蕉生根较容易；结合生根率和生长势，我们认为MS + 6-BA + NAA 培养基较适宜美人蕉生根。表2 不同植物生长调节剂组合的比较植物生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA 2,4-D KT TDZ分化率(%) 生根率(%) 备注1 0 0 0 0 02 9 0 0 0 0 参考[2]3 5 0 0 0 0 参考[3]4 3 0 0 0 0 2 1 0 0 0 2 0 0 0 2 0 0 0 08 0 0 4 0 09 0 0 2 1 0 参考[6]10 0 0 2 0 参考[7]11 0 0 0 0 012 0 0 0 参考[8]13 0 0 0 0 0 1 0 8 0 0 0 5 0 0 表3 不同生长调节剂配比对芽继代繁殖的影响生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA TDZ接种数分化率(%)增值系数 生长势17 30 ++18 30 ++19 30 ++20 30 ++21 30 ++22 30 ++23 30 ++24 30 +25 30 ++26 30 +27 30 ++28 30 +注：++ 表示生长势强；+表示生长势弱。同列中不同字母表示差异显著(P＜＝，表4 同。表4 不同的生长调节剂配比对组培苗生根的影响生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA接种数生根苗数生根率(%)植株生长势29 0 30 19 +30 0 30 21 ++31 30 20 +++32 30 16 ++注：+++ 表示生长势强；++表示生长势中等；+表示生长势弱。第·36· 37 卷3 结 论美人蕉根茎生长在土壤中，无菌化操作较困难。灭菌试验表明，升汞震荡灭菌10min 效果较好，采回的外植体应尽快处理接种，放置时间过长伤口处易染菌，导致接种后褐化较严重。MS + 6-BA + ZDT + NAA 培养基能较好地诱导分化丛生芽，MS + 6-BA + TDZ NAA 为较好的增殖培养基，在增殖培养过程中这两种配方交替使用效果更好；短时间使用高浓度生长调节剂对增殖有促进作用，但长时间使用高浓度生长调节剂会使组培苗质量下降。在试验中还发现，转接次数多的茎尖较转接次数少的分化率大，建议在接种后的10～20d 内及时转接。选用MS + 6-BA + NAA 为生根培养基，生根率较高，根系粗壮、根毛密集，植株生长健壮（图版-d），且移栽成活率较高。参考文献:[1] Segeren W, et al. The genus Canna in Northern South America[J]. Acta Bot Neerl., 1971,20(6): 663-680.[2] 刘文萍,等. 美人蕉茎尖组织培养及快繁技术[J]. 北方园艺, 2001(6): 32.[3] 丁爱萍,等. 美人蕉组织培养及快速繁殖技术[J]. 园林科技, 2006(1): 11-12.[4] Singh N D, et al. The effect of TDZ on organogenesis and somatic embryogenesis in pigeonpea (Cajanus cajan L. Millsp)[J].Plant Science, 2003,164(3): 341-347.[5] 王关林,等. 高活性细胞激动素TDZ 在植物组织培养中的应用[J]. 植物学通报, 1997,14(3): 47-53.[6] 宣朴,等. 生姜茎尖组培快繁技术研究[J]. 西南农业学报, 2004,17(4): 484-486.[7] Kromer K, et al. In vitro cultures of meristem tips of Canna indica L.[J]. Acta Horticulturace, 1985,167: 279-286.[8] Vendrame W A, et al. In vitro propagation and plantlet regeneration from Doritaenopsis Purple Gem 'Ching Hua' flowerexplants[J]. HortScience, 2007,42(5): 1 256-1 258.[9] 刘敏. 花卉组织培养与工厂化生产[M]. 北京: 地质出版社, 2002: 101-102.
植物组织培养及其应用研究概况在世界各国科学家的不断努力下，近几十年来，植物组织培养技术迅速发展。利用组织培养，不仅可以大量生产优良无性系，获得人类需要的多种代谢物质，还可获得单倍体、三倍体、多倍体及非整倍体。通过细胞融合可以打破种属间的界限，克服远缘杂交不亲合性，在植物新品种的培育和种性的改良中发挥了巨大作用。组织培养的植物细胞是在细胞水平上分析研究的理想材料，从植物快繁、花药培养发展到细胞器培养、原生质融合以及DNA重组技术等，植物组织培养技术广泛应用于植物科学的各个领域及农业、林业、工业、医药等多种行业，已经成为当代生物科学中最有生命力的一门学科。1 植物组织培养的基本概念、原理和试验步骤1．1概念植物组织培养是在无菌条件下，将离体的植物器官(根尖、茎尖等)、组织(形成层、花药组织等)、细胞(体细胞、生殖细胞等)、胚胎(成熟或未成熟的胚)、原生质体等在人工配制的培养基上培养，给予适宜的培养条件，诱发其产生愈伤组织或潜伏芽或长成完整的植株的技术。1．2原理 植物组织培养的依据是植物细胞的“全能性”及植物的“再生作用”。1902年，德国著名植物学家 G．Haberlandt根据细胞学理论提出了一个观点，“高等植物的器官和组织可以不断分割，直至单个细胞，即植物体细胞，体细胞在适当的条件下具有不断分裂、繁殖并发育成完整植株的潜力”。1943年，美国人White在烟草愈伤组织中偶然发现形成一个芽，证实了G．Haberlandt的论点。 不同植物所需要的生长条件不同，所用的培养基也有所不同。较常用的基础培养基有MT、MS、 SH、N6、White等。在组织培养中，愈伤组织和胚状体能否形成是培育出新植株的关键。通过在基础培养基里添加一定浓度的外源激素，可以诱导出愈伤组织、胚状体、不定芽、根等器官，最终获得再生植株或次生物质。 用于植物组织培养的材料称为外植体，其主要形式有器官、胚胎、单细胞、原生质体等。根据外植体的不同，所需要的培养基种类、培养条件、外源激素的种类及比例等均不同。植物组织培养中，影响培养力的因素是多方面的，诱导愈伤组织成败的关键在于培养条件，植物激素是诱导愈伤组织和绿苗分化的关键因素。最常用的诱导愈伤组织的生长素是IAA、NAA和2，4一D，所需浓度为O．01～10 mg／L。最常用的细胞分裂素是KT和ABA，使用浓度为O．1～10 mg／L。KT的主要作用是促进细胞分裂和愈伤组织分化。ABA对植物体细胞胚的发生与发育具有重要作用。各类植物激素的生理作用虽有相对专一性，但是植物的各种生理效应是不同种类激素之间相互作用的综合表现。1．3试验步骤1．3．1选择和配制培养基 培养基是植物组织培养中的“血液”，血液的成分及其供应状况直接关系到培养物的生长与分化，因此了解培养基的成分、特点及其配制至关重要。1．3．2灭茵灭菌是组织培养中的重要工作之一，通常采用物理的或化学的灭菌方法。培养基用常压或高压蒸煮等湿热灭菌、器械采用灼烧灭菌、玻璃器皿及耐热用具采用干热灭菌、不耐热的物质采用过滤灭菌、植物材料表面用消毒剂灭菌、物体表面用药剂喷雾灭菌、接种室等空间采用紫外线或熏蒸灭菌。1．3．3接种将已消毒好的根、茎、叶等离体器官，经切割或剪裁成小段或小块放入培养基，整个接种过程要在无菌条件下进行。 ．4培养把培养材料放在有一定光照和温度等条件的培养室里，使之生长、分裂和分化，形成愈伤组织或进一步分化成再生植株。1．3．5试管苗驯化移栽 试管苗是在特殊环境条件下生长的幼苗，与自然生长的幼苗有很大差异，只有通过驯化，使之适应自然环境后才能移栽。2 植物组织培养的应用2．1植物快速繁殖和无病毒种苗生产植物快速繁殖技术始于20世纪60年代，法国的Morel用茎尖培养的方法大量繁殖兰花获得成功，从此揭开了植物快速繁殖技术研究和应用的序幕。目前，通过离体培养获得小植株并且具有快速繁殖潜力的植物已有100多科1 000种以上，有的已经发展成为工业化生产的商品。世界上80％～85％的兰花是通过组织培养进行脱毒和快速繁殖的。培养的植物种类也由观赏植物逐渐发展到园艺植物、大田作物、经济植物和药用植物等。在我国，同类的研究始于20世纪70年代。马铃薯无毒种薯和甘蔗种苗已在生产上大面积种植，30余种植物已进行规模化生产或中间试验。利用组织培养进行植物快速繁殖及无病毒种苗生产，不仅能够挽救珍惜濒危物种，而且能够解决植物野生资源缺乏的问题。2．2植物花药培养和单倍体育种 将植物花药培养成单倍体植株，再经过染色体加倍，能很快得到纯合的二倍体，这样将大大缩短育种年限。到目前为止，世界上通过花粉和花药培养已获得了几百种植物的单倍体植株。印度科学家应用这种方法培育的水稻品系，比对照产量提高15％～49％。韩国先后育成了5个优质、抗病、抗倒伏的水稻品种。我国自20世纪70年代开始该领域的研究，已经培育了40余种由花粉或花药发育成的单倍体植株，其中有10余种为我国首创。玉米获得了100多个纯合的自交系；橡胶获得了二倍体和三倍体植株。仅“九五”期间就育成高产、优质、抗逆、抗病的农作物新品种44个，种植面积超过660万 hm2。2．3植物胚胎培养杂交育种中，杂种胚常常败育，因此将早期生长的胚取出，应用组织培养方法，就有可能培育出杂交植物。已经有100篇以上幼胚培养成为植株的报道。国内外科学家应用植物胚胎培养技术获得了多种远缘杂交的重组体、栽培种和杂交品种。2．4植物愈伤组织或细胞悬浮培养利用植物愈伤组织或细胞悬浮培养可以生产用于预防和治疗疾病的植物次生代谢产物。近年来，这一领域的发展极为迅速，已经研究了400多种植物，从培养细胞中分离到600多种次级代谢产物，其中60多种在含量上超过或等于原植物，20种以上干重超过原植物的1 9，6。例如，从薯芋愈伤组织和悬浮细胞生产的diosgenin用于合成甾体药物。最近抗癌药物紫杉醇一红豆杉细胞培养物，可用75t发酵罐培养，已达到商业化生产水平。另外，达到商品化水平的还有紫草、人参、黄连、老鹳草等；长春花、毛地黄、烟草等已实现工业化生产；牙签草、红花等20多种植物正在向商品化过渡。2．5细胞融合与原生质体培养自1960年英国学者Cocking首次利用纤维素酶从番茄幼苗的根分离原生质体获得成功以来，到1990年已有100种以上植物的原生质体能再生植株。我国获得了30余个品种的原生质体再生植株，其中包括难度较大的重要粮食作物和经济作物，如大豆、水稻、玉米、小麦、谷子、高梁、棉花等。在木本植物、药用植物、蔬菜和真菌原生质体培养方面的进展也十分迅速。国外已先后获得了种内及种间的体细胞杂种植株。植物原生质体培养还可应用于外源基因转移、无性系变异及突变体筛选等研究，因而越来越受到人们的重视。2．6植物细胞突变体筛选植物细胞突变体的筛选最早始于1959年，G． Melchers在金鱼草悬浮细胞培养中获得了温度突变体。1970年，P．S．Carlson，H．Binding和Y．M． Heimer等分别分离出烟草营养缺陷型细胞、矮牵牛抗链霉素细胞系及烟草抗苏氨酸细胞系。迄今为止，已经在不少于15个科45个种的植物细胞培养中筛选出100个以上的植物细胞突变体或变异体。其中包括抗病细胞突变体，如玉米抗小斑病突变体和小麦抗赤霉病、根腐病突变体；抗氨基酸及其类似物细胞突变体，如甘蓝型油菜抗HYP突变体[263；抗逆境胁迫细胞突变体，如水稻耐盐突变体和小麦抗盐突变体；抗除草剂细胞突变体及营养缺陷型细胞突变体，如玉米抗除草剂变异体；株高突变体的筛选，如水稻矮秆变异体。2．7植物体细胞胚胎和人工种子1958年，Reinert在胡萝卜的组织培养中最先发现了体细胞胚胎(胚状体)。据不完全统计，能大量产生胚状体的植物有43科92属100多种。一些重要作物如水稻、小麦、玉米、珍珠谷等，也能通过离体培养产生胚状体。这些胚状体用褐藻酸钠等包埋，再加上人工种皮，就形成了人工种子。人工种子的优点是：繁殖快速，成苗率极高；不受气候影响，四季皆可工厂化生产。上世纪80年代初，美、日、法等国家相继开展了人工种子的研究，我国也于“七五”期间开展了此项研究，并于1987年列入了国家“863”高技术研究发展计划。2．8 植物组织细胞培养物的超低温保存与种质库建立植物细胞全能性的发现和证实，为植物种质资源的长期保存开辟了一条新途径。采用液氮超低温保存技术，能保持很高的存活率，并且能再生出新植株和保持原来的遗传特性。如建立茎尖分生组织培养物的超低温保存种质库，不仅可以防止种质的遗传变异和退化，而且可以长期保存无病毒的原种。2．9 植物组织培养与转基因技术的应用 我国第一个T—DNA插入突变体库的构建和研究为我国水稻功能基因组学研究奠定了良好的技术和材料基础，为确保我国拥有一批有自主知识产权的基因资源做出了积极贡献。由中国水稻研究所农业部水稻生物学重点开放实验室和中科院上海植物生理研究所合作，通过建立大规模、高效的农杆菌介导的转基因技术体系，将玉米转座子Ac—Ds等外源基因导入水稻未成熟胚和种子诱导的愈伤组织，获得了1．2万个独立的T—DNA插入株系，并构建了水稻突变体的数据库。 3 展望植物组织培养研究与应用是20世纪科技进步的重大成果之一，为研究植物生长发育、抗性生理、激素及器官发生与胚胎发生等提供了许多良好的实验材料和有效途径。植物组织培养方法不断提高的同时，也相应拓宽了其应用范围。由于组织培养在人工控制的条件下进行，容易掌握花芽分化和开花成因；通过胚胎培养，能够得到杂种或自交种；通过分离单倍体细胞，能培育纯合的二倍体优良品系；提高育种多样性的同时缩短了育种时间；通过突变体筛选，提高植物的品质，增强抗逆境胁迫能力，扩大植物的生长范围；将体细胞冷藏在低温下，建立基因库，达到保存物种的目的；获得药用价值高和工业生产所需要的次生产物，加快药物生产的时间并且减少了单纯依靠天然植物的被动性。植物组织培养技术已经渗透到科研、生产和生活各个领域，必将日臻完善。黑龙江农业科学2006，(3)
我就是学农水的，我们班今年就也率相当不错了，各个工程局都有，工作地点全国各地，四级过了的可以去外国，工资很丰厚，工作环境比较艰苦点，如果不想干施工还可以去一些小型设计院，工作环境比较优越，如果想进大设计院就得考河海大学或者武汉大学，大型设计院只招一般院校的研究生。
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首先，从大学层次角度来讲，甘农大不是985不是211，仅仅是省部共建小211工程大学，从这点上就决定了它在全国的知名度仅仅一般，而且它在西部，又不占地理优势。要知道现在找工作用人单位很看重985和211的，所从以这一点上来讲，就业不会特别好；其次从专业上来讲甘农大前身是西北畜牧兽医学院，那么它的畜牧机兽医行业肯定是较好的，传统农学各专业也还不错，这就决定了它的农业水利工程是偏向于农的，而不偏向于水，它的农水专业在全国来看就不会排的很靠前，中央一号文件的推出，水利行业是火了一把，但是农水专业比较尴尬，就业率一直不温不火，这几年稍微好点；从就业形势来看，那就不用我多说了，今年的就业率已经到了最惨的地步，各个行业都如此，毕竟毕业生太多了现在。所以总体来说甘农大农水专业就业一般，不很看好。具体说在哪就业，水利行业现在的大趋势是本科一般都去工程局，少数能去业主单位和地市级设计院，硕士毕业之后一般去大一点的设计院，如各省省院甚至全国水利7大院，也有去高校的，可研单位的，水利事业单位的以及公务员，具体去哪要看你自己的想法还有你自身的综合条件，这些综合条件包括你的学校知名度、专业影响力、学习成绩、科研成果（论文情况）、证书情况，当然最重要的是有没有硬关系，有没有一个好爹~
垃圾学报不是本校的学生就别发吧，不怎么样。
字数要求
本科论文字数一般在5000字以上即可,一般6000-8000字比较合适,过长或者过短都是不合适的,本科论文一般不会有什么特别高的要求,发表普刊就可以,有些甚至不要求见刊,因此本科毕业论文的字数无需太多,只要做到结构完整,思路清晰,再加上一定程度的创新,一般都可以通过考核的。
拓展阅读：
查重
本科毕业论文查重率一共是分成四个等级。在其中A级的标淮是：毕业论文的重复率在10%之内。这种毕业论文是能够立即通过。而且还能够作为优秀论文的参考范围。B级的标淮是：重复率在10%至20%，这种毕业论文能够通过，与此同时也可以作为优秀论文选拔范围。
C级的标淮是：20%至50%之内，这种毕业论文是不予通过的，因为其重复率过高，存有大量抄袭的文字，大学生们必须要进行修改和再次检测。D级的标淮是：论文查重率在50%以上，这种毕业论文几乎就是抄袭的代名词。只有实现A,B两个等级的标淮才能够参加论文答辩。
5000——8000字。一般来说，一篇本科毕业论文的字数要求就在5000—8000字之间，当然不同的学校可能要求有所出入。1、封面字数应在20以内；2、中文论文题目字数应在20以内；3、中文摘要一般为150-300字；4、正文：文理科毕业论文字数一般不少于4000字，工科、艺术类专业毕业设计字数一般不少于3000字。
本科毕业论文一般要求在6000字到15000字左右。
本科论文一般初稿写15000字左右，再跟导师精简优化部分内容，最终在8000到一万字左右为宜。
本科毕业论文初稿一般要求是万字以上。各高校的规定也不都是一样，一般较普遍的规定是 万字以上，也就是说论文是A4纸15页以上，这15页纸包含论文封面，目录，摘要，文字，图表，计算公式等。论文中应包括文献综述，研究或设计内容，实验数据及结果分析，参考文献等
大多数本科生的毕业论文都只要求重复率小于30％以下就行，但需要注意的有的高校要求会比较严格，有的需要小于20％才行，甚至还有的要求10％以内才能合格。
无论初稿还是终稿最少都要包括五部分：
1、引言
2、文献回顾
3、理论框架
4、结果与讨论
5、结论 不同的学校对论文字数应该有不同的规定，一般情况下，研究生一万五到两万左右，博士生十万左右。 写论文重要的是内容，不是字数。初稿的字数有可能不够，以后看到其他的文章或书了，又有了新想法，可以添内容，当然也有写得太多，要做出取舍，删除不太重要的内容。
每个学校要求和规定不一样，而且每个专业差别也很大。这个学校会有相应的文本，即论文范本的，希望对您有所帮助。
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我国对大学生的挫折教育是自上世纪末研究和开展的，但时至今日仍实效不足，大部分学校并未将大学生挫折教育作为一个系统的必要的工程去实施，以致不少悲剧连连发生。下面是我给大家推荐的大学生心理挫折及对策论文，希望大家喜欢!
《大学生挫折教育论》
[摘 要] 我国对大学生的挫折教育是自上世纪末研究和开展的，但时至今日仍实效不足，大部分学校并未将大学生挫折教育作为一个系统的必要的工程去实施，以致不少因大学生无法正面应对挫折而导致的悲剧连连发生。当今社会竞争愈发激烈，社会矛盾更加多元化，人际关系的复杂化等诸多因素都给涉世未深的“90后”带来了巨大的压力和挫败感。加强对“90后”大学生的挫折教育是改善当前“90后”大学生普遍心理素质较低、耐挫能力差的迫切要求。在科学分析大学生挫败感产生原因的基础上，应顺应时代发展，不断提出切实有效的策略，提高大学生心理素质和抗逆力，建立正确的世界观、人生观、价值观，保障大学生的全面发展。
[关键词] 大学生挫折教育;心理素质;干预对策;素质教育
【中图分类号】 G641 【文献标识码】 A 【文章编号】 1007-4244(2013)05-072-2
一、含义的界定
挫折和挫折感是普遍存在的一种社会现实和心理现象，是个体在实现目标过程中遇到难以克服的阻碍或干扰，使需要和动机无法满足而产生的紧张状态和情绪反应。
大学生挫折即大学生在大学期间在学习生活及人际等方面想达到某种目的或满足某种需求的过程中因情感、心理、行为等方面遭到阻碍或是干扰而导致形成的一种由烦恼、焦虑、困惑、迷茫等因素交织而成的一种负面的心理感受，此种心理感受有可能引发非正常思维或行为。
二、大学生挫折教育的现状
随着市场经济的不断深入，当代大学生自我实现的愿望不断提高，理想与现实的差距越来越大，同时他们正处于成年早期， 心理迅速走向成熟但又尚未完全成熟，往往表现出心理承受能力弱、耐挫折能力差的弱点，然而日趋激烈的社会竞争对人才的心理素质要求在不断提高。据调查，在北京市的大学生中，约的学生感觉有强烈挫折感，约的学生受挫折感困扰而处于心理上亚健康的状态。他们大多出生在20世纪90年代，相对优裕的生活环境为他们的成长提供了良好的物质条件，使他们减少了面对困难与承受挫折的机会，以至于许多大学生的抗挫折能力较差。由于家庭的溺爱，使他们很少接触到社会实践，抵抗挫折的能力得不到提高，因而容易产生脱离现实的虚幻想法，一旦遇到挫折，便产生消极的心理反应，导致情绪恶化或厌世，严重者甚至走向轻生。2012年7月12日，甘肃农业大学17号公寓一女大学生因无法正确看待自己考试作弊被校方发现这一事件而跳楼自杀，终结了自己宝贵的生命。挫折是每个人必然遭遇的问题，大学生因生活、学习中的小挫折频频陷入情感危机状态进而产生自我毁灭行为警示着社会各方对大学生进行抗挫折教育已刻不容缓。随着时代的进步、社会的发展，挫折教育日益被社会和广大家长接受和重视，并且成为教育界用心研究的课题，取得了一定的理论成果，但其中具有可行性的对策少之又少。
三、大学生挫折教育的重要意义
加强对“90后”的挫折教育既是我国素质教育新目标的必然要求，又是帮助学生“德、智、体、美”全面发展以更好地适应社会的历史重任，更是当前构建社会主义和谐社会的基本前提。高校学生工作者要注意培养学生的心理承受能力，增强学生的抗挫折能力，帮助他们树立科学的世界观、人生观和价值观，为他们提供情绪宣泄的安全机制，减轻他们的心理压力，从而使学生能更好的适应环境，迎接挑战。
四、当代大学生挫折感成因分析
大学生产生挫折感不是单一因素引发的，而是多种主客观原因综合互动的结果，主要可以归结为以下几方面：
(一)客观原因主要包括来自社会、学校、家庭环境等方面的因素。教育体制在学生挫折教育培养方面的欠缺，校方对学生挫折教育未给与足够重视，还有来自家庭方面的压力等都对大学生的心理挫折都有直接或间接的影响。
(二)主观原因主要包括来自学生自身智力、体力、外貌以及某些生理缺陷带来的限制。具体表现在：学业方面对专业学习缺乏兴趣;人际关系障碍;青春期的恋爱困扰;生理缺陷及疾病原因;期望值过高，理想追求受阻;就业挫折;物质需求性挫折等。
五、当代大学生挫折教育的对策
针对以上对当代大学生产生挫折感原因的分析和总结，另外在参考当前各高校在大学生挫折教育方面的一些具体实施办法的基础之上，就高校对于当代大学生的挫折感心理干预提出以下几点对策：
(一)教育大学生树立科学的世界观、人生观和价值观，确立正确的挫折观。一个人如果树立了正确的世界观、人生观和价值观，就能对社会、对人生、对世界上的事物有正确的了解和认识，并能采取适当的态度和反应，做到冷静而稳妥地处理问题。同时也能心胸开阔、乐观地面对生活，从而锻炼了抵抗挫折的能力。要教育学生面对挫折，培养挫折辩证观，挫折对人既是挑战，又是机遇，挫折可以使人生丰富多彩，帮助我们更好地认识自我和世界，大学生只有学会客观地分析挫折的原因，才能更好地了解自身及所处客观环境以及时调整个人努力的目标。
(二)教育大学生掌握一些应付挫折的具体方法。一是学会及时调整目标，当某一目标屡次无法达到时，可以考虑降低要求或采取其他方式。二是学会自我安慰， 挫折是走向成功的必经之路，遭遇挫折是每个人都会面临的事，我们不能在挫折面前全盘否定自己。三是学会转移注意力。经历挫折之后，通过短期内转移注意力，调节自我情绪，使心情得到放松，藉以减少精神痛苦，排遣烦闷。四是学会对亲人、朋友倾诉。遭受挫折后与亲人、朋友交谈，倾吐自己的不快，发泄自己的不满，一般情况下可以达到缓解自身压力，平衡自我心理的目的。
(三)学校应设立配备有高素质心理咨询指导人才的心理咨询室，开展热线咨询电话、心理咨询以及第二课堂活动。从新生入学起就重视学生心理素质的培养。可以为每一个学生建立保密心理档案，对发现有心理问题甚至心理疾病的同学要进行跟踪教育并建立预警机制。定期开展挫折教育讲座，从根源上解决问题，让挫折教育作为工作常态贯穿于素质教育的始终。
(四)发挥榜样的作用。高校可以将社会上勇敢战胜挫折的典型人、事，作为榜样，融于校园文化中，激励学生向榜样看齐;也可以组织学生观看励志类影视作品，陶冶性情、寓教于乐。
(五)提供情绪宣泄的安全机制，提高大学生对挫折的排解力。一个人处在受挫情境之中时往往会出现紧张的情绪反应，而这种紧张的情绪如果不能适时地宣泄出来，就可能被“累积”而导致病态心理乃至攻击行为的发生。所以，高校思想政治工作者要不断加强自身的思想政治理论素养，多与受挫者进行心理交流，采取个别谈话、意见箱等方式，给受挫者提供各种抒发受挫情绪的场所和机会，让他们自由地、毫无顾忌地倾诉自己的烦恼、苦闷和优虑，把不满的情绪全部宜泄出来，以达到内心的平衡。
(六)创设良好的群体环境，减轻大学生心理压力。大学生所在群体的人际关系以及环境氛围同其遭受挫折后，到底是战胜挫折、积极进取，还是畏缩不前、消极退却有很大关系。充满温暖、互相关心、爱护、体贴和帮助的群体氛围，会使受挫折从中获得战胜挫折的力量;而相互疏远、冷漠的群体氛围，则会降低受挫者战胜挫折的勇气。因此，高校思想政治工作者应该为受挫者创设一个良好的群体环境，使他们感受到集体的温暖。对于家庭比较贫困的大学生，要启动校园“爱心工程”，建立贫困生奖、贷、助、勤、免制度，鼓足他们克服困难的勇气;对于学习有困难的学生，建立班级“一帮一”互助小组，不让其在学习上掉队;特别对于心理有障碍的同学，教师要有更多的爱心和耐心，多和他们谈心、交流，鼓励其参加校园文体活动，帮助其克服孤僻、离群的心理，使他们在活动中意志得到磨练、情感得到升华。
(七)积极组织社会实践活动，完善大学生的个性。心理学研究表明，人对挫折的容忍力受到人的生理条件、遭受挫折的经验以及个人对挫折的思想准备的影响。磨炼大学生意志，提高大学生心理素质是提高大学生挫折容忍力的重要途径。教育工作者要积极引导大学生深入社会实践，引导大学生参加青年志愿活动、暑期“三下乡”等活动，使他们更好地认识社会，了解国情民情，接受生动的革命传统教育和吃苦耐劳、艰苦奋斗的教育。鼓励学生以义务的身份到社区医院、老人院、孤儿院、福利中心、收容所提供服务，奉献爱心培养自身的社会责任感和参与意识，发现个人价值的内容和体现方式，完善自身社会性人格和心理机制，增强战胜挫折、克服困难的能力，培养自己的挫折容忍力、情绪调适能力及心理承受能力。
(八)获得战胜挫折的经验。学生在学习、生活的过程中不免遭遇到一些小困难，一方面学校及家庭应形成教育合力，灌输给学生独立思考和处理问题的观念，培养学生凡事不过分依赖他人的好习惯，给与学生足够的信赖，摒弃以往事事包办的惯例，仅给予适当的引导和鼓励，让学生学会自己走出困境，获得战胜挫折的成就感。
(九)重视就业指导。当代大学生固有的优越感较强烈，不乏存在着眼高手低的现象，一方面高校应切实了解就业形势，在学生尚未毕业之前，多联系一些社会就业服务机构开展讲座，为在校大学生分析当前就业形势，给予就业建议，让学生对自身有个准确的定位。另一方面学生应重视实践、实习环节，高校老师应引导学生积极参与社会实践，严格完成实习工作任务，为大学生顺利步入工作岗位奠定基础。
(十)高校应在全校课程平台上专门开设挫折教育课程。可以将挫折教育从思想政治教育中单独分离出来，让学生更全面更系统地掌握挫折的基本知识、产生原因、应对办法，提高学生的抗挫折意识，增强学生应对挫折的自觉性。课程应本着理论教育与实践教育相结合的原则，采取多元灵活的授课方式，教师可以为学生创设各种遭遇挫折的情境，例如组织学生参加室外课堂或者野外生存训练，磨练学生的意志力和奋斗精神，培养他们冷静处理问题的能力。
(十一)组织学生学习如何正确应对突发的自然灾害和意外的危险状况。学校可模拟地震、海啸、泥石流、龙卷风等自然灾害突发的情境，教育学生在灾难来临时如何冷静理性地应对，求得生存。学校应教会学生如何在发生火灾、遭遇歹徒等意外状况中更好地确保自身安全，让学生在逆境中勇于面对挫折、挑战挫折。
(十二)号召学生积极参加体育活动。学校可以在夏、冬季节举办马拉松比赛，使参赛学生能在相对恶劣的天气状况下，勇于挑战自我，发现自我，使之身心得到锻炼，增强竞争和拼搏意识。学校可成立徒步旅行协会、山地自行车协会和攀岩协会等大学生感兴趣的与运动相关的协会，使学生在运动中磨练心智，发现潜能，培养良好的心理素质。
总而言之，大学生挫折教育根本上要依靠大学生自觉提高抗挫能力，同时需要社会、学校、家庭多方形成教育合力去完成，是一项长期复杂的工程，高校应发挥主力作用，同时家庭、社会应给与足够的配合和支持，切实提高大学生耐挫能力，保障大学生“德、智、体、美”全面发展。
参考文献：
[1]杜庆梅.90后大学生挫折教育研究.
[2]由雪莲，曲长旭，焦建亭. 大学生心理挫折感根源分析及解决途径调查研究[J].青年探索，2011，(04).
作者简介：李清怡(1991-)女，汉族，甘肃庆阳人，西北师范大学文学院文秘教育系，研究方向：文秘教育。
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北京1篇5000字。其他省3篇3000字。多省文件规定：中级以后在公开发行的省级以上学术刊物发表本专业论文三篇以上。详搜：高级职称论文郑密路全国办、高级经济师论文郑密路全国办、高级农经（会计、审计、统计、政工、工程、人力资源管理、教）师郑密路全国办等。论文查重率10-30%，2000-3000字以上，中级以后发表的在副高评审合格之前永远有效。未指定刊物名称。要求合法（有CN刊号且能在新闻出版总署网站查到）、正刊，不能是增刊、专刊、特刊。必须是第一作者，提前一年发表且能在在维普、知网、万方检索到。郑州论文大学郑密路全国办总结的职称评审经验：紧扣条件、大胆尝试。一、紧扣条件。评审的唯一依据是评审条件。愚蠢行为：背离评审条件。二、大胆尝试。不要被评审条件吓倒。不符合评审条件也可能评审合格。郑州论文大学高级职称论文郑密路全国办总结的职称评审愚蠢行为：背离评审条件大道至简。评审思路简单：对照评审条件找差距。委托论文更简单：收刊物、付款、完了。但每年都有1%-3%的论文学员（全部是大龄底层愚蠢贫穷女性），背离最重要、最关键的评审条件。反而在评审条件之外的小事上计较，自造问题、自寻烦恼、搬石砸脚、挖坑自进。这就是职称评审愚蠢行为（背离评审条件）。我指导发表论文15年，指导学员200人以上。发现两个基本规律：规律一：凡是熟人或老学员介绍的、又要求0预付（承诺收到刊物再付款）的新学员，都是收到刊物后耍赖、拖欠。200名学员中出现4人，占2%：L晓H（原文是姓名，下同）、F向Q等。L晓H收到刊物后耍赖，F向Q收到刊物几个月后“忙的连微信付款的时间也没有”。他们这样搞的结果，就是断本单位后来学员的路，这就是我秒拒DXM的原因。还想干这事？不可能了。规律二：凡是不知道抓关键（评审条件）、委托后反悔、不懂还干涉、颠倒黑白、抓小放大、班门弄斧、评审前没事找事、把好事搞坏的，都是大龄底层愚蠢贫穷女性。200多名学员中出现6人。占3%。这种人是祸害、四害：一害自己，HL华已经5年评审不合格。人生有几个5年？二害同事，断了本单位后来学员发表权威刊物的路。三害编辑，浪费编辑半年的时间。四害我，浪费我半年精力。根本原因是：这种人缺乏高层思维、全局观念，没有识人用人能力和判断能力，不知道轻重缓急，不懂最重要的评审条件，再简单的事也会搞复杂、再好的机会也不知道珍惜、更抓不住，一生只会没事找事、计较小事。扒粪堆的鸡子上不了麦草垛。（一）是女性。没有一个男性干这事。（二）是大龄女性。没有一个年轻女性干这事。（三）是底层女性。没有一个中高层女性干这事。成为底层、中层、高层的根本原因是：对同一件事，思路、行动、结果不同。人由此分成三六九等。（四）贫穷。愚蠢导致贫穷（老底层），贫穷（老底层）导致愚蠢，由此形成恶性循环。（五）愚蠢。表现为：1.颠倒黑白。学报编辑审稿半年、决定发表了，HL华一句颠倒黑白的话把好事搞坏“学报名称不好听、季刊不如月刊、评审无效”。她这一句话不仅让编辑和我半年的努力白费，也害了她自己和同事。编辑把她列入黑名单并通知期刊联盟，她以后再难发表。期刊联盟特别是学报不再接受她单位的论文，也害了同事。她5年评审不合格。她不穷，谁穷？她不烂在单位最底层，谁烂？你现在就问任何一个论文老师：能否在学报发表？你很难找到。学报是标准的学术刊物，是最权威的。2.抓小放大。论文学员WYH收到刊物后开始研究标点符号：“这个标点符号是否用错、那个字是否用错”？结果评审不合格后问我“是否还要业绩”？她就愚蠢到这种程度。她不穷，谁穷？她不烂在单位最底层，谁烂？3.班门弄斧。外行指导内行，合作必败。
甘肃农业大学招收成人高等学历教育有三种类型：高中起点升本科、高中起点升专科、专科起点升本科。高中起点升本科学制为5年、高中起点升专科学制为年、专科起点升本科学制为年。对于甘肃农业大学成人高考本科学历学位证的获取，一般需要达到以下要求：1.英语成绩达标（本科在读期间通过学位英语考试），这是最基本的要求也是最重要的要求，学位英语目前大部分省份都是统一考试，个别省份取消学位英语，由报考院校单独组织考试。2.课程达标，学位课程一般每个专业都是三门课程，学位课程的成绩一般要求是单科成绩不低于75分，平均分达到80分，不过学位课程相对来说都是比较简单的。3.论文（普通本科院校其实对论文要求不是很严格，只要字数达标、格式正确即可）通过上述的介绍，相信大家对学位证书有了一定的了解，总体而言，学位的申请有一定的难度，但是只要努力还是可以拿到的，拿到之后对你的职业发展有一定的帮助。另外，2023年甘肃农业大学成人高考预报名已经开启，有意向的朋友们也可以来点击底部官网报名咨询。我们在线做出专业的解答，为你保驾护航，让你在提升学历的道路上少走弯路！甘肃农业大学自考成考社会报名入口：
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