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荧光增白剂对人体有害\x0d\x0a荧光增白剂是一种荧光染料,或称为白色染料,也是一种复杂的有机化合物.它的特性是能激发入射光线产生荧光,使所染物质获得类似荧石的闪闪发光的效应,使肉眼看到的物质很白,达到增白的效果.由于其能显著提高纸张的白度,所以荧光增白剂在造纸行业中被广泛地应用,在餐巾纸的生产过程中,有些企业也采用荧光增白剂来达到提高白度的效果.\x0d\x0a由于近几年人们发现荧光增白剂有致癌作用,对人体健康有很大害处,所以在造纸行业中禁止使用荧光增白剂制造食品包装包装纸和餐巾纸等.\x0d\x0a餐巾纸中是否含有荧光增白剂,有一种简单的测试方法.先用水将餐巾纸浸泡一会儿,然后把滤纸条放入其中浸湿,待滤纸条干后在紫外光下检查.若滤纸显示较强的荧光,则纸样中含有荧光增白剂,需要说明的是,这种方法虽然速度很快,但准确性欠佳,如果纸样中荧光增白剂的添加量较少,则检验效果不明显,这样就需要用其他方法进行复检.
洗衣用品其发展历史从最早的洗衣皂，到后来随着洗衣机的普及和合成洗涤剂配方和生产技术的进步出现的洗衣粉，再到21世纪逐渐成为主流洗衣产品的洗衣液，洗涤产品越来越适合现代家庭洗衣的需求。对消费者来说，洗衣液是新一代的安全环保产品，使用方便。洗衣液的功能性较强，使用方便、溶解速度快、低温洗涤性能好，具有柔软、杀菌、提亮色泽及增白等功能。相对于洗衣粉来说，碱性较低，性能温和，对人体皮肤及织物损伤较小。 目前市场上常用的合成洗涤剂的成分主要分为五大类:活性成分、助洗成分、缓冲成分、增效成分和辅助成分。具体有表面活性剂、软水剂、碱剂、增白剂、抗再沉积剂、分散剂、缓冲剂以及酶制剂、填充剂和水等。 洗涤过程实际上是一个复杂的物理、化学相互作用的过程。在洗涤过程中反复的拉伸、摩擦及各种化学品如表面活性剂、助洗剂、漂白剂和洗涤剂其他成分都会影响到织物的性能。在日常护理过程中，合成洗涤剂不同程度上改变了纺织品服装的理化性能，如在洗涤剂中加入荧光增白剂，可以改善纺织品服装的白度，达到增白的效果。 荧光增白剂，是利用荧光给予人们视觉器官以增加白度感觉的白色染料。是一种能吸收紫外光并激发出蓝色或蓝紫色荧光的有机化合物，与材料上的黄光互补，达到增白的效果。在日光照射下，荧光增白剂不但能反射可见日光，同时还能吸收日光中肉眼不可见的紫外线(波长为300~400 nm使分子激发，再回到基态时，紫外线能量便消失一部分，转化成能量较低的可见光反射出来，其反射光为波长420~500 nm的蓝紫光，使织物上的反射光总量增加，织物上的蓝紫光波反射量提高，抵消了织物上因黄色光反射量多造成的黄色感，使织物具有明显的洁白感。 在颜色世界里，人们遇到最多的颜色是白色，这个颜色处于色空间占着大约470~570 nm主波长的相当狭窄的范围，它具有高明度和低彩度的颜色属性。基于目视感知而判断反射物体所能“显白的程度”，术语上称之为白度。白度的定义为:完全漫反射体在可见光谱范围内的漫射比均为1的理想表面的白度值为100。 白度及其定量评价是纺织产品检验中广泛遇到的问题，并成为许多产品的直接和间接的质量指标之一。白作为一种独特的颜色，白度的评价与测量可以说是一个以一般色度学为基础而又有其特殊性的复杂问题。想要全面考虑各种因素的影响来对白度进行合理的定量评价是困难的，CIE一直努力促成解决白度评价的一致性问题，在TC1. 3色度委员会下成立了一个“白度分技术委员会”，从事视觉实验与白度测量仪器的研究与交流，对白度测量的规范取得如下的约定: (1)推荐用D65光源为近似的CIE标准光源进行视觉的及仪器的白度测量; (2)在与(1)不一致的条件下得到的实验数据不能用于确立或检验白度公式; (3)推荐使用白度W = 100的完全反射漫射体作为白度公式的参照标准，确定或检验白度公式都必须使得完全反射漫射体的白度值等于100。 据此，任何白色物体的白度表示它对于完全反射漫射体的白色程度的相对量[3]。在纺织品的颜色测量中，由于纺织品表面的经纬结构在不同方向上表现出不同的反射特性，为了使测量不受织物表面特性的影响，照明条件多采用积分球漫射照明方式，同时为使测量可以根据需要保留或排除规则反射成分，其测量条件通常采用测量光束与样品法线成8度角的形式。这就是目前纺织品颜色反射测量中比较通用的照明和观察几何条件，称为d/8。 目前，在国际市场上出现的多通道快速分光测色仪多为双光束光学结构，照明光源以脉冲氛灯为主，也有卤钨灯等恒定光源;探测器基本上都是自扫描光电二极管列阵(SPD)，少数采用CCD列阵;样品测量尺寸一般都有几个孔径可供选择。同时，系统中都考虑了镜面反射成分，包括与排除(SCI/SCE)切换功能，另外，大多数系统是可以反射和透射测量两用的[4]。 为了了解含荧光增白剂的洗衣剂对织物白度的影响，本文选取了4种纯棉织物作为实验材料，使用含荧光增白剂的洗涤剂洗涤织物，同时以自来水洗涤作为对比，考察两种条件下不同织物多次洗涤织物白度的变化。 2结果与讨论 2. 1不同洗涤条件对织物白度的影响 图1和图2分别为洗涤条件1和洗涤条件2对所测样品白度的影响。 从图中可以看出，除2号面料外，其余三种面料经洗涤剂洗涤后白度都有明显的增加，引起织物白度的上升大于水洗条件的影响，且上升速率大于水洗条件下的速率。对于3号和4号本身白度较低的织物而言，两种洗涤条件下白度的变化速率差异更为显著。这表明水洗与使用含有荧光增白剂的洗涤剂洗涤，对织物白度的影响程度不同，使用洗涤剂洗涤时对白度的影响更为显著，但两种洗涤条件下白度变化的整体趋势大致相同。 2. 2多次洗涤对织物白度的影响 如图1和图2所示，前三次洗涤对织物白度产生的影响较大，白度的变化速率较快。第一次洗涤对白度的影响最为显著，其后，随着洗涤次数的增加，变化趋势渐缓。 水洗条件下洗涤十次之后，除2号面料仍有缓慢下降的趋势之外，其余三种织物的白度趋于稳定，变化幅度减小。洗涤剂洗涤条件下，3号面料仍有缓慢上升的趋势，其余三种织物的白度趋于稳定，变化幅度减小。 2. 3面料不同对织物白度的影响 不同织物在两种洗涤条件下织物白度的变化如图3所示。 1号和2号面料是使用荧光增白剂做过增白处理的面料，水洗时织物白度稍有下降，可能是因为面料上的荧光增白剂脱附所致，但变化不大。1号面料使用洗涤剂洗涤时，洗涤剂中的荧光增白剂吸附到面料上，使面料白度有所上升。2号面料在两种洗涤条件下，织物白度的变化都不大。在水洗条件下白度呈下降趋势，使用洗涤剂洗涤对白度的影响小于水洗条件。可能是由于2号面料吸附的荧光增白剂趋于饱和，使用洗涤剂洗涤时，白度变化不大。 3号面料与4号面料在两种洗涤条件下白度都有所上升，使用洗涤剂洗涤时白度的变化值大于水洗条件。3号为坯布，黄度较大，白度低。经水洗和洗涤剂洗，白度上升趋势都很显著。4号面料为奶白色，经洗涤后面料白度变化也较明显。这表明，用含有荧光增白剂的洗涤剂洗涤，对未做过增白处理的织物影响较大。 3结论 用含荧光增白剂的洗涤剂洗涤，对织物白度的影响比用水洗洗涤影响大，且对未经增白处理的织物的白度有较显著的影响。 (2)随着洗涤次数的增加，织物白度的变化速率渐缓，织物的白度趋于稳定。 参考文献 【1】郑翔龙，林尚鹏.国内外洗衣液市场及技术发展综述[J].日用化学品科学，2010, 33 【2】宋钧才.漫谈自度、黄度和灰度田.中国纤检,2003, (4) :47 -48. 【3】宋宗明.自度评价及自度公式[J].纺织基础科学学报，1990, (1):71一75. 【4】徐海松.计算机测色与配色新技术[M].北京:中国纺织出版社，1999: 38一47.
【关键词】 树突状细胞；绿色荧光蛋白；RNA；转染 Effect of dendritic cells transfected with total RNA of HepG2 cell line using GFP marker in vitro 【Abstract】 AIM: To investigate the feasibility of GFP as a marker to observe the dendritic cells (DCs) transfected with total RNA of tumor cells and the feasibility of the transfected DCs serving as a vaccine for potential immunotherapy. METHODS: Plasmid pGFPC3 was transfected into HepG2 stably. Total RNA was extracted from the HepG2GFP using Trizol; DCs were induced by liver cancer patients peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), and transfected with the total RNA. The effect of transfection was observed by a fluorescence microscope, the changes of phenotype were detected by flow cytometry, and the change of IL12 secretion in the supernatant of DCs was detected by ELISA assay. The cytotoxic effect of CTLs was assessed by MTT assay. RESULTS: GFP was expressed stably in the HepG2GFP cells that presented green fluorescence under a fluorescence microscope, so did DCs transfected with total HepG2GFP cell RNA. After transfection, the expression of membrane molecules such as CD80 ( to ), HLADR ( to ), CD83 ( to ), CD86 ( to ) was increased dramatically, IL12 secretion in the supernatant was elevated significantly 〔(±) ng/L to (±) ng/L, P＜〕. The CTLs activated by DCs transfected with total HepG2GFP RNA showed a potent specific lysis to HepG2 cells. CONCLUSION: GFP could be used as a marker to observe the effect of transfection of DCs with total tumor cell RNA. DCs transfected with total tumor cell RNA may serve as a promising vaccine of immunotherapy. 【Keywords】 dendritic cell；green fluorescent protein；RNA；transfection 【摘要】 目的：探讨GFP作为标记观察肝癌细胞RNA转染DCs效果的可行性及肿瘤细胞RNA转染DCs制备疫苗的可行性. 方法：绿色荧光蛋白质粒载体 pGFPC3稳定转染肝癌细胞HepG2，Trizol法提取筛选后细胞HepG2GFP总RNA；分离肝癌患者外周血单核细胞体外诱导DCs细胞，总RNA转染DCs，荧光显微镜下观察转染效果，流式细胞仪检测转染前后DCs表型变化；ELISA法检测转染前后上清中IL12变化情况；MTT法检测效应细胞对靶细胞的杀伤率. 结果：pGFPC3稳定转染肝癌细胞HepG2后可得到稳定表达GFP的细胞HepG2GFP，荧光显微镜下呈绿色荧光；总RNA转染的DCs荧光显微镜下呈绿色荧光，CD80(上升至)，HLADR(上升至)，CD83(上升至)，CD86(上升至)表达明显升高，上清IL12分泌量ng/L显著增高(±→±，P＜)；诱导的CTL能够对肝癌细胞株HepG2起特异性杀伤作用. 结论：GFP可以作为肿瘤细胞RNA转染树突状细胞的观察标记，肿瘤细胞RNA转染DCs可作为一种有效的肿瘤疫苗. 【关键词】 树突状细胞；绿色荧光蛋白；RNA；转染 【中图号】 0引言 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是一种常见的恶性肿瘤，适合手术治疗的患者只占一少部分，具有较高的复发率，预后很差，严重威胁人类健康〔1〕. DCs(dendritic cells, DCs)是体内功能强大的专职性抗原提呈细胞，它能够高效的摄取、处理抗原，并将处理后的多肽呈递给静息型T细胞，引起针对该抗原的特异性免疫反应〔2〕. 国内外类似的研究中，都没有明确的可以观察肿瘤RNA转染DCs效果的指标，我们应用绿色荧光蛋白质粒载体 pGFPC3稳定转染肝癌细胞HepG2，提取筛选后细胞HepG2GFP总RNA转染DCs，观察转染后DCs绿色荧光蛋白表达及特异性表面标志及功能相关分子表达，检测其上清细胞因子分泌，探讨其作为肿瘤疫苗的可行性. 1材料和方法 材料肝癌患者外周血单个核细胞来源于我科造血干细胞移植患者；HepG2肝癌细胞株由我科常规传代培养. 流式细胞仪（BD），DG3022A型酶联免疫检测仪（华东电子管厂），荧光显微镜Optiphot XIF（Nicon）等均为我院常备. FITCCD80，FITCHLADR，PECD83，PECD86抗体购自BD公司；rhGMCSF，rhIL4购自Peprorotec公司；TNFα购自我校生物技术中心；绿色荧光蛋白载体pGFPC3由陕西省肿瘤医院贾军博士惠赠；脂质体Transfection2000，Trizol Reagent购自Invitrogen；RPMI 1640培养基、胎牛血清、G418购自Gibco公司，Xvivo无血清培养基购自BioWhittaker；IL12 ELISA检测试剂盒购自Bioscience公司；MTT购自Sigma公司. 方法参照Transfection2000说明书，pGFPC3转染HepG2，G418筛选2 mon. 筛选细胞命名HepG2GFP，荧光显微镜下观察. Trizol试剂提取HepG2GFP总RNA，紫外灯下观察，-80℃冻存备用. 同样方法提取HepG2总RNA. 取肝癌患者造血干细胞分离液，贴壁法分离单核细胞，贴壁细胞在细胞因子rhGMCSF，rhIL4作用下，诱导DCs. 倒置显微镜、电子显微镜观察细胞形态，流式细胞仪检测细胞表型. 转染树突状细胞收集培养4 d的DCs，转入6孔板，转染HepG2GFP总RNA. 另设转染HepG2总RNA及空白对照组. 继续培养48 h. 荧光显微镜下观察. 细胞因子分泌的测定48 h后，收集各组DCs上清，ELISA法检测转染前后各组细胞上清中IL12分泌量. 效应收集各组DCs，30 Gy 60Co照射后与复苏冻存的非贴壁细胞按20∶1比例混合接种于24孔板，培养5 d，收集的细胞即为效应细胞. 收集对数生长期的HepG2细胞作为靶细胞，将效应细胞与靶细胞按20∶1比例混合接种于96孔板. 同时设单一靶细胞组、单一效应细胞组. 培养24 h后，MTT法检测.以下述公式计算杀伤效率.CTL杀伤效率=〔1-（效靶A490-效应细胞A490）/靶细胞A490〕×100%.统计学方法：结果采用SPSS 统计软件分析.2结果 总RNA转染DCs稳定转染及筛选后得到的HepG2GFP细胞，能够稳定的表达GFP，荧光显微镜下所有细胞都呈现绿色荧光（图1），传代20次以上仍无消失. 与对照细胞相比，GFP基因修饰细胞在形态、生长等特性上均无显著改变，也未见GFP表达对靶细胞的毒性. 使用Trizol提取HepG2GFP细胞总RNA后，取2 μL总RNA进行凝胶电泳，可见5 s，18 s和28 s条带（图2）. 单个核细胞贴壁后，贴壁细胞在细胞因子GMCSF，IL4的作用下，培养第2日出现细胞集落，但细胞集落较小. 5 d后，集落明显增加、变大，出现具有毛刺状突起的细胞. 至7 d，集落开始减少，产生大量具有树枝状突起的细胞（图3A，B）. 荧光显微镜下，HepG2GFP总RNA转染DCs组细胞呈绿色荧光，而HepG2总RNA转染组及空白对照组则无明显荧光表达（图4A，B，C）. 图1荧光显微镜下pGFPC3稳定转染后HepG2胞浆荧光阳性 ×250（略） 图2HepG2GFP细胞的总RNA电泳（略） 图3树突状细胞形态(第7日)（略） 流式细胞仪检测细胞表型诱导d 7，DCs表达CD80 ，HLADR ，CD86 ，CD83低表达，仅；转染后上述分子表达明显升高，分别为CD80 ，HLADR ，CD86 ，CD83 ，提示转染后细胞具有成熟DCs特征. 图4总RNA转染DCs×250（略） 检测IL12分泌HepG2GFP总RNA转染DCs组上清中IL12分泌明显增加，显著高于转染前〔（±) ng/L vs (±) ng/L； n=6，P＜〕. 介导细胞毒效应HepG2GFP总RNA转染DCs刺激的CTL对HepG2细胞杀伤率为（±）%，未转染的DCs刺激的T细胞对HepG2的杀伤作用为(±)%，无DCs刺激T细胞对HepG2的杀伤作用为(±)%，总RNA转染DCs刺激的CTL对HepG2细胞杀伤率明显高于两个对照组（n=6，P＜）. HepG2GFP总RNA转染DCs刺激的CTL对SMMC7721和K562细胞杀伤率分别为(±)%和(±)%，对HepG2细胞杀伤率明显高于SMMC7721和K562细胞（n=6，P＜）. 3讨论 DCs是体内功能最强大的专职性抗原提呈细胞，它在T细胞免疫中发挥着极其重要的作用〔2〕. 应用各种肿瘤抗原致敏DCs制备疫苗是近年来研究的热点 〔3-8〕. 肿瘤细胞总RNA转染DCs制备疫苗与其他方法相比，具有如下优越性：首先，它不受已知肿瘤抗原的限制，可诱导出多克隆的CTL；其次，转染所需的RNA可以通过扩增方法得到，很少量的肿瘤组织样本即可扩增得到大量的RNA〔8〕. 但目前国内外的研究中，尚未有可以明确观察总RNA转染DCs效率的方法. 我们应用稳定表达GFP的HepG2GFP总RNA转染DCs，以GFP为标记观察总RNA转染DCs的效率，探讨其作为肿瘤疫苗的可行性，为肝癌临床治疗提供实验基础. 本试验中，HepG2GFP总RNA转染后的DCs在荧光显微镜下观察，胞质呈现绿色荧光，证实GFP mRNA可以在DCs胞质内正常表达，同时说明肿瘤细胞总RNA同样也可以在DCs胞浆内进行翻译表达. 转染后CD83，CD80，CD86，HLADR表达明显升高，IL12分泌明显增加，说明RNA转染，促进了DCs的体外成熟. 成熟DCs主要通过MHCI类途径，将肿瘤细胞总RNA在DCs胞质内进行翻译表达的肿瘤抗原呈递给T淋巴细胞. 此途径诱导的T淋巴细胞主要为CD8+细胞毒性T淋巴细胞（CTL）. 本试验中，诱导的CTL对HepG2的细胞毒效应明显高于对照组T细胞，证实诱导的T淋巴细胞为肿瘤特异性的. 因此，在当前仍未发现肝癌特异性抗原情况下，应用肝癌细胞总RNA转染DCs制备瘤苗，诱导针对肝癌细胞的多克隆CTL，可以作为肝癌DCs疫苗的一个发展方向. 【参考文献】 〔1〕 Qin LX, Tang ZY. The prognostic molecular markers in hepatocellular carcinoma 〔J〕. World J Gastroenterol, 2002, 8(3):385-392. 〔2〕 张红梅,任军,张利旺,等. 外周血造血干细胞体外定向诱导树突状细胞及功能鉴定〔J〕. 第四军医大学学报,2003, 24(1):83-85. 〔3〕 Kaplan JM, Yu Q, Piraino ST, et al. Induction of antitumor immunity with dendritic cells transducted with adenovirus vector encoding endogenous tumorassociated antigens 〔J〕. J Immunol,1999, 163(2): 699. 〔4〕 Schnurr M, Galambos P, Scholz C, et al. Tumor cell lysatepulsed human dendritic cells induce a Tcell response against pancreatic carcinoma cells: An in vitro model for the assessment of tumor vaccines 〔J〕. Cancer Res, 2001, 61(17):6445-6450. 〔5〕 Barbuto JA, Ensina LF, Neves AR, et al. Dendritic celltumor cell hybrid vaccination for metastatic cancer 〔J〕. Cancer Immunol Immunother, 2004, 53: 1111-1118. 〔6〕 Heiser A, Maurice MA, Yancey DR, et al. Induction of polyclonal prostate cancerspecific CTL using dendritic cells transfected with amplified tumor RNA 〔J〕. J Immunol, 2001, 166: 2953-2960. 〔7〕 Heiser A, Coleman D, Dannull J, et al. 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1、二苯乙烯型：用于棉纤维及某些合成纤维、造纸、制皂等工业，具有蓝色荧光。
2、香豆素型：具有香豆酮基本结构，用于赛璐璐、聚氯乙烯塑料等，具有较强的蓝色荧光。
3、吡唑啉型：用于羊毛、聚酰胺、腈纶等纤维，具有绿色荧色。
4、苯并氧氮型：用于腈纶等纤维及聚氯乙烯、聚苯乙烯等塑料，具有红色荧光。
扩展资料
国外有机构对上述两个荧光增白剂的毒性，生态影响等做了大量的工作，得出的结论是将这两个荧光增白剂品种加入到洗涤剂中对人体和环境无甚伤害。
国际上关于分析荧光剂毒理学效应的论文也表明，此类物质的急性毒性很小，且摄入后基本完全从体内排出，没证据显示有刺激性、三致（致癌、致畸、致突变）效应、过敏性等。除非是接触过量，才可能有潜在的致癌风险。
很多生物试剂大多具有荧光，没有荧光就检测不出来，所以有荧光不一定就会对人体产生伤害，没有必要恐惧荧光。
参考资料来源：人民网-无处不在的荧光剂是否有害
参考资料来源：百度百科-荧光增白剂
荧光剂，又名荧光增白剂，是一种荧光染料。
一、作用：
1、用于各种纺织制品的增白和增艳。
2、用于合成洗涤剂，增加洗涤剂的洗涤效果。
3、用于纸张的增白，提高纸张的白度和商品价值。
4、用于塑料的增白，增加美观性。
二、危害：
1、荧光剂不像一般化学成分那样容易被分解，而是在人体内蓄积，产生许多有害的作用，大大削减人体免疫力。
2、荧光剂与伤口外的蛋白质结合，还会阻碍伤口的愈合。
3、荧光剂能使人体细胞出现变异性倾向，其毒性累积在肝脏或其他重要器官，会成为潜在的致癌因素。
4、造成血液系统受损：化学物质容易污染人体血液，虽然血液具有一定的自净能力，微量的有害物质进入其中，会被稀释、分解、吸附和排出，但长期、大量的有毒物质倾注而入，必致其发生质的变化。
5、进入血液循环，会破坏红细胞的细胞膜，引起溶血现象。
扩展资料：
荧光增白剂BAC使用注意事项：
1、腈纶专用特白增白剂,在使用时练达化工建议务必与亚氨酸钠同浴染色才能达到理想的增白效果,在染色时应用低硬度水加工,以保证荧光增白剂发色充分。
2、在加工时会放出二氧化氨及强酸,对设备有一定的腐蚀作用,请务必使用不锈钢染缸染色机,并加入硝酸钠以降低对设备的损伤。
参考资料来源：百度百科—荧光剂
荧光剂，又名荧光增白剂，是一种荧光染料，或称为白色染料，也是一种复杂的有机化合物。它的特性是能吸收入射光线产生荧光，使所染物质获得类似荧石的闪闪发光的效应，使肉眼看到的物质很白，达到增白的效果。
其作用是把制品吸收的不可见的紫外线辐射转变成紫蓝色的荧光辐射，与原有的黄光辐射互为补色成为白光，提高产品在日光下的白度。增白剂已经广泛应用在纺织、造纸、洗衣粉、洗衣液、肥皂、橡胶、塑料、颜料和油漆等方面。
扩展资料：
荧光相关延伸：石油的荧光性:
石油及其大部分产品，除了轻质油和石蜡外，无论其本身或溶于有机溶剂中，在紫外线照射下均可发光，称为荧光。
石油的发光现象取决于其化学结构。石油中的多环芳香烃和非烃引起发光，而饱和烃则完全不发光。轻质油的荧光为淡蓝色，含胶质较多的石油呈绿和黄色，含沥青质多的石油或沥青质则为褐色荧光。所以，发光颜色，随石油或者沥青物质的性质而改变，不受溶剂性质的影响。而发光程度，则与石油或沥青物质的浓度有关。
由于石油的发光现象非常灵敏，只要溶剂中含有十万分之一石油或者沥青物质，即可发光。因此，在油气勘探工作中，常用荧光分析来鉴定岩样中是否含油，并粗略确定其组分和含量。这个方法简便快速，经济实用。大庆油田就是这么被发现的。
参考资料来源：百度百科-荧光
参考资料来源：百度百科-荧光剂
荧光材料作为定制T恤材料的时候，它是一种纺织行业的原料。但是除了纺织行业之外，荧光材料还广泛应用于其他许多领域。究竟荧光材料在哪些方面都发挥作用？应用于标识位置将荧光材料用于电器开关，遥控板，墙壁开关，插头，插座，锁，手提电筒，门把手，扶手，灭火器材，火警报警器，救生用具等，可标示其存在的位置，方便使用。荧光标识荧光材料用于信号，注意事项书写，紧急疏散通道、地铁车站，地下通道、人防工程、卡拉OK厅、歌舞厅、放映厅、超市卖场、医院、火车站、机场、码头、避难场所等可以起到防止危险发生的作用。 荧光建筑物材料荧光材料涂于建筑物墙壁，瓷砖，电梯内表面，桥梁，道路如路牌、路钉、路障，港口，户外广告等不仅漂亮且有实际价值。其它：如工艺品：琥珀、水晶砂、玻璃、画;玩具：塑胶玩具、拼图、积木;服饰：鞋帽、手套、工作服、T恤衫、文化衫、头盔、印花服饰;挂历，钓具等。
稀土发光材料 自古以来，人类就喜欢光明而害怕黑暗，梦想能随意地控制光，现在我们已开发出很多实用的发光材料。在这些发光材料中，稀土元素起的作用很大，稀土的作用远远超过其它元素。 一、稀土发光材料��物质发光现象大致分为两类：一类是物质受热，产生热辐射而发光，另一类是物体受激发吸收能量而跃迁至激发态（非稳定态）在反回到基态的过程中，以光的形式放出能量。以稀土化合物为基质和以稀土元素为激活剂的发光材料多属于后一类，即稀土荧光粉。稀土元素原子具有丰富的电子能级，因为稀土元素原子的电子构型中存在4f轨道，为多种能级跃迁创造了条件，从而获得多种发光性能。稀土是一个巨大的发光材料宝库，在人类开发的各种发光材料中，稀土元素发挥着非常重要的作用。��自1973年世界发生能源危机以来，各国纷纷致力于研制节能发光材料，于是利用稀土三基色荧光材料制作荧光灯的研究应运而生。1979年荷兰菲利浦公司首先研制成功，随后投放市场，从此，各种品种规格的稀土三基色荧光灯先后问世。随着人类生活水平的不断提高，彩电已开始向大屏幕和高清晰度方向发展。稀土荧光粉在这些方面显示自己十分优越的性能，从而为人类实现彩电的大屏幕化和高清晰度提供了理想的发光材料。��稀土荧光材料与相应的非稀土荧光材料相比，其发光效率及光色等性能都更胜一筹。因此近几年稀土荧光材料的用途越来越广泛，年用量增长较快。��根据激发源的不同，稀土发光材料可分为光致发光（以紫外光或可见光激发）、阴极射线发光（以电子束激发）、X射线发光（以X射线激发）以及电致发光（以电场激发）材料等。二、光致发光材料—灯用荧光粉��灯用发光材料自70年代末实用化以来，促使稀土节能荧光灯、金属卤化物灯向大功率、小型化、低光衰、高光效、高显色、无污染、无频闪、实用化、智能化、艺术化方向发展。主要用于各类不同用途的光源，如照明、复印机光源、光化学光源等。其中三基色荧光粉（由红、绿、蓝三种稀土的荧光粉按一定比例混合而成）制成的节能灯，由于光效高于白炽灯二倍以上，光色也好，受到世界各国的重视。稀土发光材料的质量提高和应用技术的发展，推动了新一代节能光源的科研、生产、应用，并带动了许多相关行业的发展，配套能力不断增强。��典型的热阴极荧光灯是在玻璃管内壁涂有荧光粉，在紫外线激发下发出可见光。当灯通电时，封装在灯两端的钨丝电极之间放电。主要是通过荧光粉将短波辐射转变成可见光而发光。稀土三基色荧光灯，它含有钇、铕和铽稀土荧光粉，能发出更亮的光，比标准荧光灯更接近太阳光谱。同时这种光可以节省50%的能耗，三基色荧光粉是将三种发射窄带红（611nm）、绿（545nm）和兰（450nm）色光谱的三种荧光粉混合而成。灯管先涂一薄层卤磷酸盐荧光粉，然后再涂一薄层三基色荧光粉。每支三基色荧光灯管平均含克荧光粉，其中包括60%Eu3+掺杂的氧化钇（红粉）、30%Tb3+激活的铈镁铝酸盐（绿粉）和10%Eu2+激活的钡镁铝盐（蓝粉）。��三基色荧光粉常用的稀土激活荧光体有：红粉：铕（Eu3+）激活的氧化钇、有时用Bi3+共掺杂蓝粉：铕（Eu2+）激活的硅酸盐基质铕（Eu2+）激活的铝酸盐基质铕（Eu2+）激活的氯磷酸盐基质铕（Eu2+）激活的钡镁铝酸盐绿粉：铽（Tb3+）、铋（Bi3+）和铈（Ce3+）激活的镁铝酸盐铽（Tb3+）和钆（Gd3+）激活的镁钡铝酸盐1．稀土节能灯��稀土荧光粉主要应用于办公室、百货商店和工厂中的高性能荧光灯。80年代中期以来，随着含铽较少的较便宜的荧光粉开发成功，这种节能灯的应用迅速增长。90年代中期，国际上推出了TMT2直管型荧光灯，管径仅7mm，功率为6W～13W，光效为621m/W。T5直管型荧光灯管径为16mm，功率14W～35W，28W荧光灯光效可达104m/W，寿命大于16000h。我国新开发的大功率强光型55W～120W适用于室外照明的稀土紧凑型节能荧光灯管，光效801m/W以上。��新一代高频环保节能灯管T5荧光灯管，是理想的节能照明光源。灯管的特点是涂敷稀土三基色荧光粉为发光体，采用固态汞减少二次污染及高频电点灯的新技术，光效高、光色好、无频闪、提高了光的质量、缩短了工序、降低了能耗、减少了汞污染、净化了生产环境、提高了生产效率，是今后几年大力推广的产品，市场前景优于当前的紧凑型节能荧光灯。��近年国际上又推出加强型T5高频节能荧光灯管，提高了单位面积的光通量，充分发挥了细管径高光通的作用。��上海东利照明电器有限公司、江南节能灯厂、华星光电实业公司等单位近日以推出大功率、高光通、高显色、强光型紧凑型节能荧光灯。华星光电实业公司研制生产的T5管径55W～85W E40、E27灯头，体积与功率250W以下的高压汞灯、高压钠灯大致相同，显色指数Ra>80，适用于室外照明。��节能灯是绿色照明工程的重要组成部分，推广使用稀土三基色节能灯是节约能源、保护环境的有效措施之一。2．稀土荧光粉用其它类型灯（1）汞灯��稀土荧光粉用于高压汞灯中已有多年。这种灯的原理是利用氩气和汞蒸汽中的放电作用，它的光强度高于荧光灯。所用铕激活的钡酸钇荧光粉起改善光色作用。高压汞灯的主要应用是街道和工厂照明，这种场合需要强的白光。但是，近年来钠放电灯和金属卤化物HQT灯已代替了高压汞灯，它的市场已衰落。钠放电灯和金属卤化物HQT灯比汞灯的颜色再现性好，发天然白光。美国通用电报电话公司麻省实验室的研究人员已经研究出一种改良型低色温用的汞灯。将铈激活的钡酸钇荧光粉混入，制成400W的暖色汞灯，照明度25500流明，色温3350K，比普通汞灯的稳定性好、效率高。（2）碳弧灯��稀土氟化物加入到棒芯中，使弧光强度提高到10倍，同时弧光颜色由浅黄色变为接近日光色。这种碳弧灯用作探照灯以及彩色电影摄像和放映。（3）高压钠灯��高压钠灯中用半透明氧化铝作弧型管材料，氧化铝中添加少量氧化镁和氧化钇作烧结助剂来改善材料的光学性质，为了增强氧化铝的半透明度，氧化钇的粒径应在25微米左右。若粒径太大则会降低强度。目前高压钠灯中存在的问题是稀土杂质偏析导致钠浸蚀氧化铝管。
【关键词】 树突状细胞；绿色荧光蛋白；RNA；转染 Effect of dendritic cells transfected with total RNA of HepG2 cell line using GFP marker in vitro 【Abstract】 AIM: To investigate the feasibility of GFP as a marker to observe the dendritic cells (DCs) transfected with total RNA of tumor cells and the feasibility of the transfected DCs serving as a vaccine for potential immunotherapy. METHODS: Plasmid pGFPC3 was transfected into HepG2 stably. Total RNA was extracted from the HepG2GFP using Trizol; DCs were induced by liver cancer patients peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), and transfected with the total RNA. The effect of transfection was observed by a fluorescence microscope, the changes of phenotype were detected by flow cytometry, and the change of IL12 secretion in the supernatant of DCs was detected by ELISA assay. The cytotoxic effect of CTLs was assessed by MTT assay. RESULTS: GFP was expressed stably in the HepG2GFP cells that presented green fluorescence under a fluorescence microscope, so did DCs transfected with total HepG2GFP cell RNA. After transfection, the expression of membrane molecules such as CD80 ( to ), HLADR ( to ), CD83 ( to ), CD86 ( to ) was increased dramatically, IL12 secretion in the supernatant was elevated significantly 〔(±) ng/L to (±) ng/L, P＜〕. The CTLs activated by DCs transfected with total HepG2GFP RNA showed a potent specific lysis to HepG2 cells. CONCLUSION: GFP could be used as a marker to observe the effect of transfection of DCs with total tumor cell RNA. DCs transfected with total tumor cell RNA may serve as a promising vaccine of immunotherapy. 【Keywords】 dendritic cell；green fluorescent protein；RNA；transfection 【摘要】 目的：探讨GFP作为标记观察肝癌细胞RNA转染DCs效果的可行性及肿瘤细胞RNA转染DCs制备疫苗的可行性. 方法：绿色荧光蛋白质粒载体 pGFPC3稳定转染肝癌细胞HepG2，Trizol法提取筛选后细胞HepG2GFP总RNA；分离肝癌患者外周血单核细胞体外诱导DCs细胞，总RNA转染DCs，荧光显微镜下观察转染效果，流式细胞仪检测转染前后DCs表型变化；ELISA法检测转染前后上清中IL12变化情况；MTT法检测效应细胞对靶细胞的杀伤率. 结果：pGFPC3稳定转染肝癌细胞HepG2后可得到稳定表达GFP的细胞HepG2GFP，荧光显微镜下呈绿色荧光；总RNA转染的DCs荧光显微镜下呈绿色荧光，CD80(上升至)，HLADR(上升至)，CD83(上升至)，CD86(上升至)表达明显升高，上清IL12分泌量ng/L显著增高(±→±，P＜)；诱导的CTL能够对肝癌细胞株HepG2起特异性杀伤作用. 结论：GFP可以作为肿瘤细胞RNA转染树突状细胞的观察标记，肿瘤细胞RNA转染DCs可作为一种有效的肿瘤疫苗. 【关键词】 树突状细胞；绿色荧光蛋白；RNA；转染 【中图号】 0引言 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是一种常见的恶性肿瘤，适合手术治疗的患者只占一少部分，具有较高的复发率，预后很差，严重威胁人类健康〔1〕. DCs(dendritic cells, DCs)是体内功能强大的专职性抗原提呈细胞，它能够高效的摄取、处理抗原，并将处理后的多肽呈递给静息型T细胞，引起针对该抗原的特异性免疫反应〔2〕. 国内外类似的研究中，都没有明确的可以观察肿瘤RNA转染DCs效果的指标，我们应用绿色荧光蛋白质粒载体 pGFPC3稳定转染肝癌细胞HepG2，提取筛选后细胞HepG2GFP总RNA转染DCs，观察转染后DCs绿色荧光蛋白表达及特异性表面标志及功能相关分子表达，检测其上清细胞因子分泌，探讨其作为肿瘤疫苗的可行性. 1材料和方法 材料肝癌患者外周血单个核细胞来源于我科造血干细胞移植患者；HepG2肝癌细胞株由我科常规传代培养. 流式细胞仪（BD），DG3022A型酶联免疫检测仪（华东电子管厂），荧光显微镜Optiphot XIF（Nicon）等均为我院常备. FITCCD80，FITCHLADR，PECD83，PECD86抗体购自BD公司；rhGMCSF，rhIL4购自Peprorotec公司；TNFα购自我校生物技术中心；绿色荧光蛋白载体pGFPC3由陕西省肿瘤医院贾军博士惠赠；脂质体Transfection2000，Trizol Reagent购自Invitrogen；RPMI 1640培养基、胎牛血清、G418购自Gibco公司，Xvivo无血清培养基购自BioWhittaker；IL12 ELISA检测试剂盒购自Bioscience公司；MTT购自Sigma公司. 方法参照Transfection2000说明书，pGFPC3转染HepG2，G418筛选2 mon. 筛选细胞命名HepG2GFP，荧光显微镜下观察. Trizol试剂提取HepG2GFP总RNA，紫外灯下观察，-80℃冻存备用. 同样方法提取HepG2总RNA. 取肝癌患者造血干细胞分离液，贴壁法分离单核细胞，贴壁细胞在细胞因子rhGMCSF，rhIL4作用下，诱导DCs. 倒置显微镜、电子显微镜观察细胞形态，流式细胞仪检测细胞表型. 转染树突状细胞收集培养4 d的DCs，转入6孔板，转染HepG2GFP总RNA. 另设转染HepG2总RNA及空白对照组. 继续培养48 h. 荧光显微镜下观察. 细胞因子分泌的测定48 h后，收集各组DCs上清，ELISA法检测转染前后各组细胞上清中IL12分泌量. 效应收集各组DCs，30 Gy 60Co照射后与复苏冻存的非贴壁细胞按20∶1比例混合接种于24孔板，培养5 d，收集的细胞即为效应细胞. 收集对数生长期的HepG2细胞作为靶细胞，将效应细胞与靶细胞按20∶1比例混合接种于96孔板. 同时设单一靶细胞组、单一效应细胞组. 培养24 h后，MTT法检测.以下述公式计算杀伤效率.CTL杀伤效率=〔1-（效靶A490-效应细胞A490）/靶细胞A490〕×100%.统计学方法：结果采用SPSS 统计软件分析.2结果 总RNA转染DCs稳定转染及筛选后得到的HepG2GFP细胞，能够稳定的表达GFP，荧光显微镜下所有细胞都呈现绿色荧光（图1），传代20次以上仍无消失. 与对照细胞相比，GFP基因修饰细胞在形态、生长等特性上均无显著改变，也未见GFP表达对靶细胞的毒性. 使用Trizol提取HepG2GFP细胞总RNA后，取2 μL总RNA进行凝胶电泳，可见5 s，18 s和28 s条带（图2）. 单个核细胞贴壁后，贴壁细胞在细胞因子GMCSF，IL4的作用下，培养第2日出现细胞集落，但细胞集落较小. 5 d后，集落明显增加、变大，出现具有毛刺状突起的细胞. 至7 d，集落开始减少，产生大量具有树枝状突起的细胞（图3A，B）. 荧光显微镜下，HepG2GFP总RNA转染DCs组细胞呈绿色荧光，而HepG2总RNA转染组及空白对照组则无明显荧光表达（图4A，B，C）. 图1荧光显微镜下pGFPC3稳定转染后HepG2胞浆荧光阳性 ×250（略） 图2HepG2GFP细胞的总RNA电泳（略） 图3树突状细胞形态(第7日)（略） 流式细胞仪检测细胞表型诱导d 7，DCs表达CD80 ，HLADR ，CD86 ，CD83低表达，仅；转染后上述分子表达明显升高，分别为CD80 ，HLADR ，CD86 ，CD83 ，提示转染后细胞具有成熟DCs特征. 图4总RNA转染DCs×250（略） 检测IL12分泌HepG2GFP总RNA转染DCs组上清中IL12分泌明显增加，显著高于转染前〔（±) ng/L vs (±) ng/L； n=6，P＜〕. 介导细胞毒效应HepG2GFP总RNA转染DCs刺激的CTL对HepG2细胞杀伤率为（±）%，未转染的DCs刺激的T细胞对HepG2的杀伤作用为(±)%，无DCs刺激T细胞对HepG2的杀伤作用为(±)%，总RNA转染DCs刺激的CTL对HepG2细胞杀伤率明显高于两个对照组（n=6，P＜）. HepG2GFP总RNA转染DCs刺激的CTL对SMMC7721和K562细胞杀伤率分别为(±)%和(±)%，对HepG2细胞杀伤率明显高于SMMC7721和K562细胞（n=6，P＜）. 3讨论 DCs是体内功能最强大的专职性抗原提呈细胞，它在T细胞免疫中发挥着极其重要的作用〔2〕. 应用各种肿瘤抗原致敏DCs制备疫苗是近年来研究的热点 〔3-8〕. 肿瘤细胞总RNA转染DCs制备疫苗与其他方法相比，具有如下优越性：首先，它不受已知肿瘤抗原的限制，可诱导出多克隆的CTL；其次，转染所需的RNA可以通过扩增方法得到，很少量的肿瘤组织样本即可扩增得到大量的RNA〔8〕. 但目前国内外的研究中，尚未有可以明确观察总RNA转染DCs效率的方法. 我们应用稳定表达GFP的HepG2GFP总RNA转染DCs，以GFP为标记观察总RNA转染DCs的效率，探讨其作为肿瘤疫苗的可行性，为肝癌临床治疗提供实验基础. 本试验中，HepG2GFP总RNA转染后的DCs在荧光显微镜下观察，胞质呈现绿色荧光，证实GFP mRNA可以在DCs胞质内正常表达，同时说明肿瘤细胞总RNA同样也可以在DCs胞浆内进行翻译表达. 转染后CD83，CD80，CD86，HLADR表达明显升高，IL12分泌明显增加，说明RNA转染，促进了DCs的体外成熟. 成熟DCs主要通过MHCI类途径，将肿瘤细胞总RNA在DCs胞质内进行翻译表达的肿瘤抗原呈递给T淋巴细胞. 此途径诱导的T淋巴细胞主要为CD8+细胞毒性T淋巴细胞（CTL）. 本试验中，诱导的CTL对HepG2的细胞毒效应明显高于对照组T细胞，证实诱导的T淋巴细胞为肿瘤特异性的. 因此，在当前仍未发现肝癌特异性抗原情况下，应用肝癌细胞总RNA转染DCs制备瘤苗，诱导针对肝癌细胞的多克隆CTL，可以作为肝癌DCs疫苗的一个发展方向. 【参考文献】 〔1〕 Qin LX, Tang ZY. The prognostic molecular markers in hepatocellular carcinoma 〔J〕. World J Gastroenterol, 2002, 8(3):385-392. 〔2〕 张红梅,任军,张利旺,等. 外周血造血干细胞体外定向诱导树突状细胞及功能鉴定〔J〕. 第四军医大学学报,2003, 24(1):83-85. 〔3〕 Kaplan JM, Yu Q, Piraino ST, et al. Induction of antitumor immunity with dendritic cells transducted with adenovirus vector encoding endogenous tumorassociated antigens 〔J〕. J Immunol,1999, 163(2): 699. 〔4〕 Schnurr M, Galambos P, Scholz C, et al. Tumor cell lysatepulsed human dendritic cells induce a Tcell response against pancreatic carcinoma cells: An in vitro model for the assessment of tumor vaccines 〔J〕. Cancer Res, 2001, 61(17):6445-6450. 〔5〕 Barbuto JA, Ensina LF, Neves AR, et al. Dendritic celltumor cell hybrid vaccination for metastatic cancer 〔J〕. Cancer Immunol Immunother, 2004, 53: 1111-1118. 〔6〕 Heiser A, Maurice MA, Yancey DR, et al. Induction of polyclonal prostate cancerspecific CTL using dendritic cells transfected with amplified tumor RNA 〔J〕. J Immunol, 2001, 166: 2953-2960. 〔7〕 Heiser A, Coleman D, Dannull J, et al. 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荧光材料是由金属（锌、铬）硫化物或稀土氧化物与微量活性剂配合经煅烧而成。无色或浅白色，是在紫外光(200～400nm)照射下，依颜料中金属和活化剂种类、含量的不同，而呈现出各种颜色的可见光(400～800nm)。反光材料可以将照在其表面上的光迅速地反射回来。材料不同，反射的光的波长范围也就不同。反射光的颜色取决于材料吸收何种波长的光并反射何种波长的光，因此必须要有光照在材料表面，材料表面才能反射光，如各种执照牌、交通标志牌等。光致发光材料是向外发光，而不是反射光。荧光材料 吸收一定波长的光，立刻向外发出不同波长的光，称为荧光，当入射光消失时，荧光材料就会立刻停止发光。更确切地讲，荧光是指在外界光照下，人眼见到的一些相当亮的颜色光，如绿色、橘黄色、黄色，人们也常称它们为霓虹光。应用随着科学技术的进步，人们对荧光的研究越来越多，荧光物质的应用范围越来越广。荧光物质除用作染料外，还在有机颜料、光学增白剂、光氧化剂、涂料、化学及生化分析、太阳能捕集器、防伪标记、药物示踪及激光等领域得到了更广泛的应用.根据材质及应用，市面上荧光材料有三类。荧光布在印染过程中添加荧光剂，比如荧光针织布、荧光网布、荧光牛津布、荧光摇粒绒布、荧光莱卡布，主要使用在道路交通安全相关的产品（服装、箱包、手袋、户外用品）；荧光PVC料在塑胶颗粒中添加荧光助剂，比如荧光超透PVC膜、荧光PVC人造革，主要使用在箱包、手袋、包装行业；荧光粉荧光材料的粉状颗粒，主要添加使用在油漆、涂料、油墨中，主要使用在道路工程、标志标牌、移印转印行业。
营改增对高校财务管理的影响和对策探讨论文
导语：随着营改增政策的逐渐应用，对高校财务管理也产生一定的影响，在此情况下则需要在营改增实施下改革高校财务管理，以能够提高高校财务管理质量。本文在分析营改增对高校财务管理影响基础上，进一步探讨其对策。以下是我整理营改增对高校财务管理的影响和对策探讨论文的资料，欢迎阅读参考。
关键词：营改增；高校；财务管理
近年来，高校的发展很迅速，我国高等学校在保障了教育体制不断改善的同时，办学规模也在日益的扩大，自然而然就会有相应的财务出入，目前财务已经出现来源多样化，经济管理已经变得相当复杂，然而财务管理制度还是一成不变，很容易就处于混乱的状态，导致财务管理崩塌。在这种情况下，国家实行“营改增”是对高校的一种改革，也是高校自身的一种改善自我财务管理的机会。因此，做好“营改增”对高校财务管理是一种调整，具有非常重大的意义。
一、“营改增”实施背景及内容
“营改增”就是营业税改增值税，即是将属于营业税征收范围的行业改为增值税征收。最先是在2012年上海交通运输业和部分服务业作为试点开展，2013 年的时候开始在全国推广，2014 年正式实施高校会计制度。以致能够达到避免重复征税，可以进一步完善财税制度，进一步促进我国国民经济的稳定发展。目前，全国各高校正在逐步实施“营改增”政策，建立更为全面的相关财务管理制度，这也需要对财务工作人员进行一系列相关制度的培训及学习。目前为止，对实施程度不一样的高校也带来了一定的影响。其中营改增下的财务会计处理主要内容包括有：
（一）一般纳税人企业的会计处理
企业需要在以往的纳税科目下增设一项“抵减销项税额”，以此用来记录企业在实行了营改增政策后相应的抵销税款，同时企业还应该按照企业的经营种类来对企业的“主营业务收入”和“主营业务成本”来进行记录和核算。
（二）小规模纳税企业增值税的会计处理
在一些企业规模较小的企业中，如果纳税人提供的应税服务在营改增的内容规定相符合的情况下，则可以按照营改增政策的相关规定将销售额中给非试点纳税人所支付的价款扣除。营改增后试点纳税人在进行增值税的相关会计处理时，需要按照一定的相关规定进行有效的会计处理。
（三）关于增值税期末留抵额的会计处理
通常来说如果营改增的试行区域有相关的原增值税则不能够在实行营改增的基础上将其抵消而应该在相关规定的情况下重新核算增值锐，其中需要进行一定的比例进行核算。增值税期末留抵税额的会计处理：当该企业刚开始进行实行的这个月的开始，企业应该按照政策会计处理在处理的过程中应该记录借记方为“应交税费———增值税留抵税额”科目，同时应该贷记方应该记为“应交税费———应交增值税（进项税额转出）”的科目。等到做会计处理的时候能够允许抵扣时，同时应当按照其允许抵扣的金钱数目贷记则应该计入“应交税费———增值税留抵税额”科目，而它的借记应该为“应交税费———应交增值税（进项税额）”科目。
（四）关于取得过渡性财政扶持资金的会计处理
根据财务部的相关规定现就营业税改征增值税试点的有关试点的硬性要求能够得到一些补偿性的财政的支持和帮助，新老纳税人能够申请取得财税部门的帮助和补贴，后期的数据预计能够取得更多的支持的话，这些支持会在会计处理中按照正常的银行存款进行处理。这些过渡性的扶持资金能够更大限度的发挥自己的作用而且更能够发挥应该赠政策的优点。
二、“营改增”对高校财务管理的影响作用
自从实施“营改增”以来，在高校中都取得了不错的效果，可是在大范围来看，各高校的进展程度也有很大差别。有些高校积极配合，组织各种各样的培训活动，全面宣传新制度，有些还在适应、探索中。
（一）对纳税的影响
新政策实施前，高校签订任何项目合同时要缴印花税及相关需要的税务费，提供服务则缴纳营业税及附加，还会涉及土地及房产等众多税务。“营改增”后，将不会重复缴纳相关税费。高校的纳税角色主要是由两种，小规模纳税人和一般纳税人。这两种的纳税角色不同，所以“营改增”对其的影响也会不一样。
对于小规模纳税人高校来说，征收营业税时是按5%的税率缴纳，“营改增”后，缴纳增值税的3%，税率降低40%。因此，“营改增”对小规模纳税人高校来说所缴纳的税务是降低的。对于一般纳税人高校来说，征收营业税时是按5%的税率缴纳，“营改增”后，缴纳增值税范围是6%，税率增长20%。因此，“营改增”对一般纳税人高校来说所缴纳的税务是增长的。
所以说，“营改增”政策会有所差异，跟纳税角色的不同是有一定的关系。
（二）对会计核算的影响
营业税改为增值税后，缴纳增值税的多少不但与营业额有关，还与可抵扣的进项税额的多少和有效抵扣凭证的取得有关。所以说，高校的会计核算相关职责不但要由财务部负责，还要求高校对外提供服务的人员提高增值税知识，积极配合财务部门取得专用发票。
首先营改增对高校交税有着特别重要的影响，当营改增正式试点实行的过程中，能够在高校内部是大力推行的应为营改增政策的实行是对着大多数人有很大的影响的，能够在获得物质补贴更多的工资报酬的同时也获得个人的心理的愉悦心情，更加积极的投入工作。
其次营改增在对财务审核方面也有很大的影响。对于高校来说营业税额的计算和审核是相对来说比较明显和简单的，而对于增值税的核算来说相对的是比较复杂的，营改增的试行是在一些区域进行，这就使的在我国的内部分成了两种税收核算制度，而这样的制度对于高校也是一种挑战，而高校的会计处理的人员也将面临重要的挑战。
最后还有对于发票的影响，发票和营业税的发票的差别不是很大，对于纳税人使用发票的范围，税务部门提供了一个明确的规范。所以在采用了营改增制度后，发票的存在本身就设计的比较广泛而这也是各个高校都不容小觑的一个环节。
（三）对发票使用和管理的影响
增值税发票分两种，普通发票和专用发票。抵扣增值税进项税额时必须出具增值税发票，所以会影响增值税缴纳的多少，对于专用发票的管理也比普通发票严格很多。对于政策的实行，不仅要靠财务部门，更要让所有部门都积极配合，熟悉各程序。营改增后高校的管理也必须不断的适应新政策的实行而发展，当高校在其公司运作中的表现能够越来越好的情况下他们的最后获得的成效越好，在提升了高校的经济效益的同时还给一些相关的下边的高校增加了抵扣额。总体来说，为了能够更好的适应营改增这个税收制度，高校需在高校管理的各个方面进行改革。例如很多高校都是从商业链的构建开始，使得高校管理的水平大幅度上升，努力地能够在税收方面做到不断改进并且能够有效的提高高校自身的利益。
三、营改增实施下的.高校财务管理改善对策
（一）提高财务管理规范
“营改增”可调整税制机构，降低整体税负，从长远来看是一项利国利民的措施，各高校应积极配合，要从财务内部开始管理，对相关工作人员进行培训，逐步提升有关政策的知识。更要宣传其他部门配合财务部，把相应的制度逐渐完善到每个人身上，都能了解新政策对高校本身带来的利益并切实实行。实行对发票的规范管理。对于专用发票可影响缴纳税额这一情况，应制定相对应的管理，对增值税的使用有个严格的规范，保障高校正常活动的开展。建立财务明细账目。“营改增”政策为高校带来了更多的挑战和变化，为了保障高校能够更好的掌握和适应，财务管理部门应把增值税明细做到切实、清晰、一目了然，完善财务管理工作。
（二）高校加大对外联系和对内学习宣传
营改增的实施，进一步促进了我国税制改革，基于长远角度是一项利国利民的改革策略。高校在此环境下财务负责人则需要加大对外联系，其中包括税务部门以及业务主管部门，以能够在对实际问题解决的基础上，进一步了解相关政策和实施监督，对内则需要向广大教师将营改增税收政策及其程序加大宣传，并做好相关解释和指导工作。
（三）加强合同管理，紧密贴合流程管理
在部分高校横向科研收入管理过程中，其中包括研发及技术服务税收优惠政策等均面临改革，从之前的免征营业税转变为免征增值税，从一开始的向地税申请免税资格直接转变到现在的向国税申请。在国税局进行省科技厅认定的免税合同审核过程中，如果发现之中存在不符合免税条件的，则会立即要求将全部税金、滞纳金以及罚金补齐。因此在此环境下一定要强化合同管理，在进一步提高合同管理系统规范的基础上，提高相关操作规范性及详细性，并和业务流程紧密贴合。
综上所述，“营改增”目前已经在国内逐渐全面的推行，是一项改革我国税务的重要决定与发展。“营改增”税务制度是对税种的转换和对税率的调整，提升了我国税务的完善发展，具有重要的意义。目前“营改增”也已经遍布到各高校，这就对高校内的财务管理水平也带去了挑战，需要各高校能提高各自的财务水平。虽然“增值税”政策的施行给各高校带来了不同程度的影响，同时也是一个完善各部门的机会，给高校的制度也会带来一定的提升，让高校能更快的发展，也对我国的教育事业有很大的帮助。本文主要对“营改增”实行的背景、对高校的影响以及对策提出了建议和看法，以供参考。
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企业增值税筹划策略研究论文
一、前言
增值税纳税筹划，是企业发展战略中的一个重要组成部分，尤其对于融资较难、资金流不足的中小企业来说，一个良好的增值税筹划策略可谓价值连城。目前，新的增值税条例给予了企业更多的筹划空间，尤其是中小企业，可以依据增值税条例从纳税主体身份、混合销售及兼营销售、增值税纳税期限延长、运输方式、折扣销售等几个主要方面入手，寻求最优增值税筹划策略，降低企业税务负担，使企业在税后的利润达到最高。
二、企业增值税纳税筹划的意义所在
在增值税条例的要求下进行的企业增值税纳税筹划，有着多方面的显著意义，具体来说包括：第一，帮助企业按规定缴税，增值税纳税应当符合增值税条例的规定，如果纳税不经过科学筹划，很可能出现违反纳税规定的情况，由于增值税纳税筹划是在增值税条例的规定下进行的，所以就避免了纳税行为违反增值税条例规定的情况的出现；第二，实现企业税后利润的最大化，增值税纳税的多少，和纳税筹划的优劣有着很密切的关系，企业在增值税条例的规定下，找出最佳纳税筹划策略，最终会使企业在纳税行为完成后实现企业利润的最大化；第三，降低企业的税务负担，目前很多企业尤其是中小企业面临税务负担过大的问题，导致企业发展缓慢，此时利用合理的纳税筹划，可以在一定程度上减少企业的缴税额，降低企业的税务负担，帮助企业更好地发展；第四，促进市场经济不断健全和完善，纳税筹划是市场经济环境下的企业生存的一种科学、合理的行为，实践证明，良好的纳税筹划行为，对于促进市场经济的进一步完善是有推动作用的。
三、企业增值税纳税筹划的具体策略
企业增值税纳税筹划策略，在制定和完善过程中，要牢牢把握以下几个主要的方面，才能使增值税纳税筹划策略达到最佳，帮助企业获得最大的税后利润。下面进行具体分析：
1.纳税主体身份筹划
新的增值税条例实施以来，成为小规模纳税主体的要求进一步被放宽，对于工业小规模纳税人来说，销售额标准从100万直降一半成为50万，而对于商业小规模纳税人来说，销售额标准从180万直降100万变为80万，可以明显看到，企业成为小规模纳税人的门槛显著降低，可见，以纳税主体身份为切入点进行纳税筹划是非常必要的。一般纳税人和小规模纳税人的税负标准是不同的'，多数情况下，小规模纳税人的税负是比一般纳税人要重的，原因是小规模纳税人无法除去进项税，因而很多企业为了避免进项税，纷纷从小规模纳税人向一般纳税人转化，但是这一行为会促成会计成本的增加。很多企业发现在转化过程中，新增的支出成本比节税收益还高，于是又开始后悔当初的转化行为，这就是因为纳税筹划做得不够精细的缘故。科学地进行分析，在销售额是定量的情况下，小规模纳税人应缴税款是确定的，而一般纳税人可以根据规定按抵扣的进项税对应缴税款进行合理抵扣，进项税和应缴税款之间呈现负相关关系。因此可以得出结论，将小规模纳税人和一般那是人进行比较进而制定筹划策略时，应当把握平衡点，即二者税负相同时的增值率，无差别平衡点增值率，将实际增值率与此平衡点进行比较分析后，得到最佳的纳税主体身份筹划策略。
2.混合销售及兼营销售筹划
兼营销售是一个重要的企业销售类别，兼营，指的是同时经营或从事增值税和营业税的应税货物或者应税劳动。对于兼营销售来说，增值税和营业税都会在经营过程中产生，因此进行兼营销售纳税筹划时，要科学衡量增值税和营业税二者税负的大小，根据税负较低的税种进行纳税。很多人认为进行兼营销售筹划时，增值税税负必然高于营业税税负，其实并不一定如此。根据税法规定，企业兼营增值税项目和营业税项目时，应当分开核算两种税种的销售额，分开计算应缴税款，如果没有分开核算，则以二者中较高的税率为标准进行应缴税款计算。因此，进行兼营销售的企业在进行增值税筹划时，务必谨慎细致，采取增值税和营业税区分核算的方式，达到降低综合缴税额的目标。
3.增值税纳税期限延长筹划
增值税纳税期限延长，标准说法为延期纳税，根据我国税法的规定，准许企业在合理的时间内分期或者延期缴纳税款。根据企业的实际请款和增值税的具体条例，纳税期限延长的情况是多种多样的，因此，企业在增值税纳税筹划过程中，应当充分利用增值税相关条例的规定，在合理的范围内尽量延缓纳税，保持企业更多的资金流，这对于企业的资金运转是非常有利的。在进行延期纳税时，期关键点在于将纳税义务的发生时间延迟，并采取适当的结算方式达到这一目的，实践表明，相比于全部直接收款的结算形式，企业采取赊账销售和分期收款的结算形式对筹划延期缴纳增值税更加有利。
4.运输方式筹划
税法中规定，企业的营利方式为销售货物并用自由的车辆进行运输，属于混合销售，必须缴纳增值税，并且，运输车辆的保养、维修、燃料等支出可以作为进项税的抵扣依据。基于此，为了避免将运费收入计入混合销售额中进而出现增值税，企业可以成立一个运输公司进行独立的运输核算，实现企业整体税负的降低。在企业需要运输货物时，由企业成立的独立的运输公司进行运输，在企业需要向购货方收款时，由企业成立的独立的运输公司向购货方单独收取运费。当然，在新建运输公司的时候，也必须统筹兼顾，全面衡量各项利弊因素，达到最佳筹划，因为成立一个新的运输公司，不仅需要注册费用，还需要新增管理费用和其他费用，如果不能科学预测新建公司的费用支出，那么很可能导致新建运输公司产生的费用支出比企业税负降低节省的资金还要多。
5.折扣销售筹划
折扣销售也是增值税筹划中可筹划的一个重要方面，其筹划切入点为“进行折扣销售的企业，其折扣销售的部分应税销售额的计算可以取折扣销售余额”。目前，很多企业在经营过程中，都存在折扣销售行为，并且取得了不错的销售效果，所以，企业进行折扣销售筹划非常具有现实意义。具体来说，不同的折扣销售方式，对企业纳税产生的影响是不同的，相比之下，折扣销售方式比销售折扣方式产生的税负更小，因此，企业应当尽可能将和客户签订的合同中的销售折扣方式改为折扣销售方式，当然，前提是购买企业产品的客户具有较高的信誉度，货款回收风险较小，如果客户信誉度差且存在较大货款回收风险时，就必须谨慎行事，尽量修改既定的销售方式，以降低货款回收风险为第一要务。相对于其他的增值税筹划项目，折扣销售的筹划空间相对较小，方式也更加简单，对于企业来说更加容易把握。
四、结语
由于多种原因导致的增值税纳税政策的差别，给企业在增值税纳税筹划方面带来了较大的空间，给企业提供了通过选择优势增值税纳税策略实现税负降低的可能。在新的增值税条例下，企业的增值随纳税筹划空间进一步扩大，企业在进行增值税纳税筹划时的选择也进一步增加，此时，如果企业可以充分利用增值税条例中的相关规定，制定出更优的增值税纳税方案，无疑可以使企业的增值税纳税后利润实现更大化，增加企业可流动资金流，降低企业融资风险，帮助企业更好地进行发展。
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