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根据锐科技发布的文章《如何进行新冠病毒核酸检测?带你揭秘全过程》，目前的病毒核酸检测试剂盒，多数采用荧光定量PCR方法。检测原理是以病毒独特的基因序列为检测靶标，通过PCR扩增，使我们的选择这段靶标DNA序列指数级增加，每一个扩增出来的DNA序列，都可与我们预先加入的一段荧光标记探针结合，产生荧光信号，扩增出来的靶基因越多，累计的荧光信号就越强。所以，核酸检测，其实就是通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否有病毒核酸。
这次的新型冠状病毒的核酸检测是通过采集鼻咽试子、痰液或者下呼吸道标本的方式来检测的。要了解其原理，首先我们要了解一下什么是核酸。核酸分为脱氧核糖核酸和核糖核酸，那脱氧核糖核酸其实就是我们口中说的DNA啦，但又因为普遍DNA病毒的致病性不算太高，所以核酸检测可以是通过对病毒的遗传物质RNA去进行检测。因此现在采用的基本都是应用实时荧光定量PCR检测技术，从而来实现新型冠状病毒RNA的精准检测。
核酸检测是通过咽拭子、鼻拭子胸部ct 等方式进行检测的，新冠状病毒是一种仅含有RNA的病毒，利用其特异的核苷酸序列可以检测到。
新冠病毒肺炎早期检查有两种方法，开始的时候是采取患者的口腔鼻咽部位的分泌物进行实验室检查，以排除患者的感染新冠病毒肺炎的可能。而所谓的核酸检测是通过抽取受检者的血液与试剂盒里面的试剂进行反应，如果所测得的反应为阳性，就说明受检者感染了新冠状病毒肺炎病毒，反之就可以排除。核酸检测法（英文名：Nucleic acid detection method）是通过查找患者的呼吸道标本、血液或粪便中是否存在外来入侵的病毒的DNA和RNA，来判断是否被病毒感染的方法，是新型冠状病毒感染确诊的金标准。新冠病毒感染人体之后，首先会在呼吸道系统中进行繁殖，因此可以通过检测痰液、鼻咽拭子中的病毒核酸判断人体是否感染病毒。所有生物都含有核酸，核酸包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），新型冠状病毒是一种仅含有RNA的病毒，病毒中特异性RNA序列是区分该病毒与其它病原体的标志物。新型冠状病毒出现后，我国科学家在极短的时间里完成了对新型冠状病毒全基因组序列的解析，并通过与其它物种的基因组序列对比，发现了新型冠状病毒中的特异核酸序列。临床实验室检测过程中，如果能在患者样本中检测到新型冠状病毒的特异核酸序列，应提示该患者可能被新型冠状病毒感染。
我提供思路和框架。
可以的，毕业论文篇幅这么大，写一点操作步骤并无不可，但不建议这样写，除非真的字数不够
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PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。下面是我整理的关于pcr技术论文，希望你能从中得到感悟!
技术的研究进展
摘要 PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。因其高强的特异性和灵敏度以及检测速度快、准确性好等优点，已被广泛地应用于水产、微生物检测等许多领域。该文从PCR技术的原理及应用方面进行了综述，并对其发展做出了展望。
关键词 PCR技术;研究进展;应用
中图分类号 Q819 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2012)10-0047-02
PCR(polymerase chain reaction，PCR)即聚合酶链式反应，它是一种体外酶促合成，扩增特定DNA片段的方法。1985年，美国Karray等学者首创了PCR技术，并由美国Cetus公司开发研制[1]。随着科学技术的发展和突破，PCR技术已在多个领域得到广泛地应用，如微生物检测、兽医学、水产养殖等方面。由于该技术具有较强的灵敏度、准确度和特异性，又能快速进行检测，因而其应用领域也在不断延伸[2-3]。随着PCR技术的不断发展，在常规PCR技术的基础上又衍生出了许多技术，如多重PCR(mutiplex PCR)技术[4]、实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR，FQ-PCR)技术[5]、单分子PCR技术[6]。
1 PCR技术原理
PCR技术是根据待扩增的已知DNA片段序列、人工合成与该DNA 2条链末端互补的2段寡核苷酸引物，在体外将待检DNA序列(模板)在酶促作用下进行扩增。PCR的整个技术过程经若干个循环组成，一个循环包括连续的3个步骤：第1步是高温条件下的DNA模板变性，即模板DNA在93~94 ℃的条件下变性解链;第2步是退火，即人工合成的2个寡核苷酸引物与模板DNA链3’端经降温至55 ℃退火;第3步是延伸，即在4种dNTP底物同时存在的情况下，借助TaqDNA聚合酶的作用，引物链将沿着5’-3’方向延伸与模板互补的新链[7]。经过这个循环后，合成了新链，可将其作为DNA模板继续反应，由此循环进行。循环进程中，扩增产物的量以指数级方式增加，一般单一拷贝的基因循环25~30次，DNA可扩增l00万~200万倍[1]。PCR反应的步骤很简单，但是具体的操作是复杂的，如退火温度的确定、延伸时间的长短以及循环数等。因此，不同的反应体系应该确定适当的反应条件，以避免假阴性或假阳性等情况的产生。
2 PCR技术的分类
在传统PCR技术的基础上，根据人们的需要以及各个领域的应用要求，又衍生出很多种类的PCR技术。新技术在各领域广泛应用并逐渐改进，为进一步的研究提供了基础。
实时荧光定量PCR技术
1996年，学者经过研究，在传统PCR技术的基础上，首创了实时荧光定量PCR技术，新技术已经应用至医学领域、分子生物学和其他基础研究领域。实时荧光定量PCR技术基于传统技术的优势，还具有实时性、准确性、无污染，实现了自动化操作和多重反应，是PCR技术研究史上从定性到定量的飞跃[8]。
荧光定量PCR技术最大的特点是能将荧光基团加入到PCR反应体系中，借助于荧光信号，累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析[9]。实时监测这一特点是常规PCR技术所不具有的，因为其对扩增反应不能进行随时的检测。常规PCR技术的扩增终产物需要在凝胶电泳等条件下才能进行，无法对起始模板进行准确的定量，而荧光定量PCR技术的反应进程可以根据荧光信号的变化做出准确的判断[10-11]。一个PCR循环反应结束之后，定量PCR仪可以收集1个荧光强度信号，荧光信号强度的变化可以反映产物量的变化情况，这样就可以得到1条荧光扩增曲线[12]。荧光信号在指数扩增阶段，PCR产物荧光信号的对数值与起始模板量之间存在线性对应关系，然后进行定量分析[13]。
多重PCR技术
多重PCR(mutiplex PCR)技术是PCR技术的一种，为同一管中加入多对特异性引物，与PCR管内的多个模板反应，在一个PCR管中同时检测多个目标DNA分子。多重PCR技术可以扩增一个物种的一个片段，也可以同时扩增多个物种的不同片段[14]。
在同一反应体系中，多重PCR技术进行多个位点的特异性扩增时，引物间的配对、引物间的竞争性扩增等会对扩增效果产生重要影响。一方面，如果能选择适宜的反应体系和反应条件，可极大地提高多重PCR的扩增效果[15]。主要包括退火温度、退火及延伸时间、PCR缓冲液成分、dNTP的用量、引物及模板的量等。另一方面，DNA的抽提质量也影响多重PCR扩增效率，如DNA抽提不干净或降解都将影响PCR扩增效果[16]。
单分子PCR技术(SM-PCR)
单分子PCR技术是在传统PCR技术的基础上发展的，基本循环过程相同，但在反应条件、模板数量、DNA 聚合酶选择、引物设计方面具有不同点。该技术是以少量或单个DNA分子为模板进行的PCR[17]。
单分子PCR技术反应中，DNA 模板浓度极低，这就要求模板有较高的质量。因为这是试验成败的决定性因素。在设计引物时，应该严格控制GC的含量和Tm值，同时尽量避免引物间存在可配对序列。在反应混合物模板数极低的情况下，若引物之间存在少量配对序列，扩增时极易形成二聚体，使反应无法进行，得不到所需要的产物[18]。由于单分子PCR技术反应的变性温度(96~98 ℃)大多比常规PCR技术(94 ℃)略高，因而对DNA 聚合酶热稳定性的要求也更加严格，需要有较好的热稳定性，以防止温度过高而使其失活。其变性时间(5~15 s)、退火时间及延伸时间也短于常规PCR技术[17]。
3 PCR技术的应用
PCR技术在水产上的应用
基因表达是检测某个基因在不同发育期或不同组织中的表达量变化，或受到某种试验处理过程中的影响而出现表达量变化的情况。有学者应用real-time PCR技术研究碳水化合物含量对翘嘴红鲴糖代谢酶G6Pase、GK以及PEPCK表达量的影响[19-21]，研究结果可为翘嘴红鲴饲料配方中的最合适糖含量提供理论依据。孙淑娜等[22]研究叶酸拮抗剂对斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2表达的影响，表明叶酸拮抗剂对早期胚胎的心脏发育影响较大，可导致斑马鱼心脏发育延迟及心脏形态异常，并下调斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2的表达，这可能是叶酸生物学活性受抑后导致心脏发育异常的机制之一。Sawyer et al[23]以斑马鱼的未受精卵、胚胎、仔鱼和成鱼为研究材料，采用实时荧光定量PCR技术，检测了P450aromA和P450aromB在不同组织的表达量，表明在各组织中均有2种基因的表达，但表达量显著不同，呈现组织特异性。
PCR技术在微生物检测上的应用
1990年，Bej et al[24]在利用多重PCR的方法检测了Leg-ionella类菌种和大肠类细菌，其结果是通过点对点方法固定的多聚dT尾捕捉探针和生物素标记的扩增DNA进行杂交来检测的。张志东等检测口蹄疫病毒(FMDV)持续性感染的带毒动物，表明实时荧光定量PCR技术具有快速检测、准确、客观等优势，较优于传统的检测方法[25-26]。Metzger-Boddien et al[27]对PCR-ELISA的方法进行了评价，结果显示，样品中沙门氏菌的检出率可以达到98%。
4 展望
传统PCR技术以及衍生出来的新型PCR技术自面世以来，已被广泛应用到生命科学的各个领域。随着技术方法的不断改进与完善，荧光定量PCR技术将会逐渐完善并广泛应用。多重PCR技术在食品病原微生物、非致病微生物及环境微生物检测中具有重要作用;未来的研究主要集中在去除食品抑制因子干扰、改进样品前处理技术等方面，其次是整合应用多重PCR与其他技术，必将在未来食品微生物检测中有非常好的应用前景。
5 参考文献
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通过核酸检测试纸进行检测，通过试纸上面的药剂和人体组织内的物质发生反应，试纸的变化来判断，检测原理就像ph试纸一样
【综述】几种用于发现未知病毒核酸序列的技术及其应用翁康生 病毒是引发人类传染性疾病的主要病原体之一, 它们极大地威胁着人类健康。目前还存在人类尚未认知或新出现的病毒, 随时可能严重危害人类健康安全〔1 - 3〕。及早地发现,鉴别未知的或新出现的病毒, 是有效的预防和控制的先决条件之一。因此, 建立、储备、改良、发展、乃至创新应用于发现、鉴别未知或新出现病毒的技术方法是十分必要的。近20 多年来, 常采用传统的微生物学技术方法和现代分子生物学技术方法相结合的途径, 发现和鉴别未知病毒。通过细胞培养的方法分离病毒、电镜观察、用已知病毒的抗血清建立的免疫学方法作排他性检测、用已知病毒核酸序列建立的PCR、杂交等方法, 作特异核酸序列的检测、用分子生物学技术获得未知病毒核酸序列, 查询基因数据库, 检出并确定未知病毒基因组序列, 最终发现鉴别出未知病毒。对于无法用细胞分离培养的未知病毒, 有的采用免疫学与分子生物学技术相结合, 筛选获取病毒特异抗原编码基因的克隆, 进而发现鉴别出该病毒。更多的则是采用相应的分子生物学技术, 从被检样品中发现获取未知病毒的核酸序列,进而发现鉴别未知病毒。无论未知病毒是否可以用细胞培养分离, 最终对其基因组序列的测定分析, 是鉴别和判断的决定性依据之一, 而获取未知病毒的核酸序列是前提条件。从少量样品中, 从高度复杂的宿主细胞核酸物质中, 分离、扩增、获取足够量的无基因序列资料的未知病毒的核酸片段, 供进一步克隆、测序、生物信息学分析, 是用分子生物学技术发现、鉴别未知和新出现病毒的关键之一〔4〕, 也是最终测定分析, 拼接出未知和新出现病毒基因组序列的瓶颈步骤。病毒所携核酸物质有DNA 和RNA 之分, 可采用的技术方法也有所不同, 现将有关技术与其应用作一简介, 以供参考。1 代表性差异分析法代表性差异分析法是为寻找分析两个生物样品复杂的基因组间有何差异而发展建立起来的分子生物学技术方法, 并不断得到演化, 发展和应用。病毒感染宿主细胞后, 与未感染的同类细胞相比, 二者核酸物质间的差异主要在于是否存在病毒核酸。消减去二者核酸间相同序列的背景部分, 扩增、比较、选取余下可能存在差异的部分, 进一步分析以发现未知病毒的核酸序列。病毒的核酸结构各有不同, 可选用相应的代表性差异分析法, 见表1 。111 DNA 代表性差异分析法(DNA Representation differenceanalysis , DNA RDA)此方法是Lisitsyn 等〔5〕利用核酸消减杂交技术〔6〕、PCR 方法和双链DNA 热变性后互补链退火复性的二级动力学原理〔7 - 8〕作者单位:上海市疾病预防控制中心 200336表1 病毒核酸类型与各代表性差异分析法的选用病毒核酸类型DNA RDA c DNA RDA非rRNA 序列6 核苷酸引导c DNA RDAds DNA 线状√ds DNA 环状√ss RNA polyA( + ) √ss RNA polyA( - ) 3 √ds RNA polyA( - ) √ 3 负链ss RNA polyA( - ) 视病毒在宿主细胞的转录机制而定。而建立的。方法中将需分析的样品DNA(Test DNA ,T- DNA) 和对照DNA(Driver DNA ,D - DNA) 设为二组,分别用同一种限制性内切酶酶切处理,并接上5′端去磷酸化的人工接头,补齐接头后,加入与接头序列互补的引物作PCR 扩增。切除扩增产物上的人工接头后,切出的T - DNA 连上第二种人工接头,变性后与过量的变性D - DNA 杂交。通过杂交,消减去T- DNA 中与D - DNA 中同源的核酸序列,而只存在于T - DNA 中的靶序列DNA(Target DNA) 则自我退火复性,其两端连有第二种人工接头。加入与第二种接头互补的引物作PCR ,只有靶序列DNA呈指数扩增,因而得到进一步富集。进过如此重复的几个轮回后,以电泳检测比较T- DNA 和D - DNA ,将T- DNA 中呈现的差异部分作分离,克隆,序列分析。Lisitsyn 等以10μg 人淋巴细胞基因组DNA 作为D - DNA ,在相同的人DNA 中加入相当于单拷贝量的120 pg 腺病毒DNA作T- DNA。以此作为实验模型,用DNA 代表性差异分析法成功的寻找、鉴定出外加入的腺病毒DNA 序列。应用此技术,Chang 等〔9〕在艾滋病相关的卡波西肉瘤(Kaposis Sarcoma) 中发现一段类似人类疱疹病毒的基因, 并由此发现一种新的病毒HPV8。以后人们又以此技术发现鉴定了HPV6、TTV 病毒、黄热病毒样基因组、MDV 等〔10 - 13〕DNA 病毒。112 cDNA 代表性差异分析法(cDNA Representation differenceanalysis , cDNA RDA)Hubank 等〔14〕针对mRNA 所含序列相对简单的特点,提出了cDNA 代表性差异分析法。它的基本原理与DNA RDA 相同,主要不同在于,采用识别4 核苷酸序列的限制性内切酶,它的识别位点在mRNA 反转录成的cDNA 中出现的频率更高,平均酶切片段长度约256 bp ,保证了cDNA 序列群中绝大多数序列,至少被切出一个片段可扩增,供差异分析,分离鉴定。cDNA RDA 技术相对经济,可高效灵敏地用于非常少的起始材料而获得结果〔15〕。具有polyA( + ) - RNA 病毒,其核酸可类似于mRNA 分离纯化,因此可应用此技术。利用cDNA RDA技术,发现鉴定了TiV、MenV ,等〔16 ,17〕RNA 病毒。113 非rRNA 序列6 聚核苷酸引导反转录的cDNA RDA中国预防医学杂志2007 年6 月第8 卷第3 期 Chin Prev Med , June 2007 , Vol18 No13 ·317 ·© 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. ( - ) - RNA 病毒,其核酸物质不似于mRNA ,需和宿主细胞总RNA 同时分离,并用随机引物作反转录。因为宿主细胞总RNA 中rRNA 约占80 % ,由于竞争反应、靶序列信号被湮灭等原因,从这样的总RNA 抽提物中,用随机6 聚核苷酸引物引导反转录的cDNA RDA 技术,发现鉴别polyA( - ) - RNA 病毒核酸序列是困难的。Endoh 等〔18〕罗列了6 聚核苷酸所有可能的排列组合,共计4 096 个序列模式,以大鼠18S、518S、28S 等rRNA、微卫星重复序列、SARS - CoV、BI - 3 病毒等的序列数据为模型,筛选出在rRNA 序列中出现频率极低或不出现的6 聚核苷酸序列模式共96 种。将这些序列分别合成并混合后,称之为非rRNA 序列6 聚核苷酸引物。生物信息学分析96 种序列模式在哺乳动物病毒科具代表性的1 791 个病毒基因组序列中出现的频率,数据表明,非rRNA 序列6 核苷酸引物可引导绝大多数病毒的cDNA 合成。分别用非rRNA 序列6 聚核苷酸引物和随机6 核苷酸引物作cDNA 反转录效率、cDNA RDA 试验,结果表明,二类引物对人工合成的RNA (二类引物在其序列中出现的频率相似) 反转录效率几乎相等,而前者对细胞总RNA反转录效率远低于随机引物。用二类引物作cDNA RDA ,检测人工合成的RNA ,前者灵敏度是用随机引物的30 倍。在模拟实验中用非rRNA 序列6 聚核苷酸引物引导反转录,串联cDNARDA 技术,检测鉴别出感染细胞的BI - 3 和SRAS - Cov 核酸序列片段。此方法能从1μg 总RNA 中检测出3 ng 的外来RNA ,其检测灵敏度不及普通的PCR 检测方法,但对于检测鉴别在宿主细胞中复制,但不知其基因序列的poly A( - ) - RNA 病毒而言,也是一个可选择的方法。114 抑制消减杂交cDNA RDA 技术结合消减杂交和PCR 抑制作用〔19〕的技术原理,Diatchenks 等〔20〕等发展出了抑制消减杂交技术( suppressionsubtractive hybridization ,SSH) 。与前两种RDA 技术不同点在于,SSH 技术将内切酶酶切处理的T - cDNA 分为两份,分别接上不同序列的去磷酸化的接头1 和2 ,分别于过量的D - cDNA作第一轮杂交。杂交过程中两组中的单链T - cDNA 浓度趋同,T- cDNA 中的非靶序列单链cDNA 与D - cDNA 中相应序列形成杂交双链而被消减, T - cDNA 中差异表达的单链cDNA被显著富集。合并一轮杂交物,加入过量变性D - cDNA ,作第二轮杂交。合并的二组份一轮杂交物中剩下的趋同化、经消减杂交后的单链T - cDNA 能互补杂交, 可以形成: 原组内T- cDNA 单链间的杂交、T - cDNA 与D - cDNA 单链间的杂交、二组间T- cDNA 单链间的杂交。补齐杂交反应后双链cD2NA 末端,用分别与接头1 和2 的外侧部分序列互补的寡核苷酸为引物,作PCR 扩增。二组份间T- cDNA 互补单链杂交物,因两端分别具有接头1 和2 ,可被指数扩增;T - cDNA 与D -cDNA 杂交物和剩余单链T- cDNA ,因一端具接头序列,被线性扩增;而同组间T- cDNA 杂交物两端具反转重复长序列,因抑制性PCR 效应,在PCR 反应循环中分子内退火形成稳定的“锅柄结构”〔19〕而不被扩增。因此,SSH 技术通过二轮消减杂交和抑制性PCR 特异扩增,使假阳性大大降低,提高了检出低丰度靶mRNA 的灵敏度。Hu 等〔21〕应用SSH 技术,结合反转录酶的模板切换(tem2plate - switching) 功能, 以HCV RNA 阳性血清体外感染的人MOLT- 4 急性淋巴母细胞白血病T 细胞系为模型,通过反转录合成全长cDNA、抑制性消减杂交、消减的cDNA 文库构建、反相斑点杂交筛选,在被筛的96 个克隆里,T- cDNA 探针杂交呈特异阳性的16 克隆中,序列分析后得到4 个插入HCV 序列的克隆。2 非特异多重引导滚环式扩增法乳头瘤病毒、痘病毒等,其基因物质为环状DNA 分子。在事前未知基因序列的情况下,发现和鉴别这类病毒核酸序列还可选择非特异多重引导滚环式扩增法(multiply primed rolling -circle amplification ,RCA) ,扩增、分离、获取其基因片段供进一步分析。自然状况下,环状DNA 经常以滚环方式进行复制。Dean等〔22〕应用随机6 聚核苷酸作引物,加入φ29 DNA 聚合酶,以质粒DNA 和噬菌体DNA 为模型,建立了多重引物引导的滚环式扩增法。φ29 DNA 聚合酶可长距离( > 70 000 nt) 地结合于DNA模板,进行链置换DNA 合成。而随机6 聚核苷酸引物可多位点的与单链环状DNA 互补复性。在φ29 DNA 聚合酶作用下,以随机引物引导,合成与模板互补的DNA 链。当合成链延伸到与模板结合的随机引物5′端时,在φ29 DNA 聚合酶的链置换活性作用下,下游被延伸的随机引物链被“甩”出模板。而上游的延伸链继续在环状模板上复制合成。同时,被从单链环状模板上“甩”出的互补链,又成为新的模板,随机引物与之结合,在φ29 DNA 聚合酶作用下,继续以枝杈的形式进行链延伸和链置换,最后以双链DNA 串联体形式释放。用此法可使1 ng 纯pCU18 环状DNA 模板延展式地扩增至107倍。Rector 等〔23〕以此原理建立了不依赖已知的特定基因序列(非序列依赖性) 的多重引导滚环式扩增环状DNA 病毒基因组方法,并应用其扩增获取了HPV 16 的基因组DNA。在接近实样的试验样品中,由于稀释倍数和环状DNA 分子较大等原因,将HPV 16 基因组DNA 扩增了214 ×104 倍。3 病毒颗粒相关核酸的非序列依赖性PCR 扩增病毒核酸可包裹于病毒外壳内,病毒的蛋白外壳或脂膜对病毒核酸具有保护作用。而病毒颗粒具有不同于细菌或其他真核细胞的理化特性。利用这样的特点Allender 等〔24〕和Stang等〔25〕各自建立了病毒颗粒相关核酸的非序列依赖性PCR 扩增方法(sequence - independent amplification) 。两种方法的共同点在于,依据病毒颗粒小、具一定密度,用0122μm 滤器过滤、或再串上超速密度梯度离心,从样品中分离出病毒颗粒,DNA 酶酶解游离的DNA ,裂解病毒颗粒,抽提获取较纯的病毒颗粒相关核酸。Allender 等〔24〕借鉴RDA 原理,对病毒颗粒相关核酸用限制性内切酶酶切后,作非序列依赖性单引物PCR 扩增( sequence -independent single primer amplification ,SISPA) :将抽提获取的DNA或RNA 分别补齐,合成第二链DNA ,或反转录,合成双链cDNA。限制性内切酶酶切后,酶切片段两端连接一种接头,并以与接头同序列的单一寡核苷酸为引物,作PCR 扩增。扩增产物进一步克隆与序列分析。用此法检验HBV 阳性血清和GBV - B 阳性血清样品,结果在相当于106/ ml 个基因组拷贝浓度的50μl样品中,可重复试验检出相应的病毒基因片段。Stang 等〔25〕则在得到双链DNA 或双链cDNA 后加入k - 随机引物,此种引物5′端含有20 个固定序列的核苷酸,3′端则有·318 · 中国预防医学杂志2007 年6 月第8 卷第3 期 Chin Prev Med , June 2007 , Vol18 No13© 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. 核苷酸随机简并序列。与变性模板退火时,6 核苷酸随机简并序列随机地与模板相应序列互补退火,在T4 DNA聚合酶作用下作链延伸。然后在延伸产物中加入k - 随机引物中固定序列部分的20 寡核苷酸作引物,进行PCR 扩增。扩增产物电泳分析、克隆、测序。用此方法检验由实时- PCR 定量,包括病毒颗粒相关核酸及游离核酸在内的病毒基因组拷贝数为109/ ml 的Cox - 3 和MAV - 1 培养物。前者的12 克隆中,9 个克隆插入有肠道病毒的四个不同区域的同源基因片段;而6 个MAV - 1 中分离的克隆内,5 个含有99 % 同源MAV - 1 基因片段。基于病毒颗粒分离纯化、DNase 处理、病毒颗粒相关核酸的非序列依赖性PCR 扩增,获取、鉴定未知病毒的基因片段,尽管灵敏度不够高,但其实验时间较短,步骤相对简单,对于病毒拷贝数高,时间紧急的样品鉴别,是较适宜的一套方法。病毒的种类、结构、特性多种多样,感染病毒后需要检验的样品又各不相同,因此用于发现鉴别未知病毒的核酸序列的技术,也不是固定不变和完全通用的。以上的技术方法各有优缺点和适用范围。而针对扩增获取未知病毒基因组序列片断,这一发现鉴定未知病毒的分子生物学技术的要点或瓶颈,必然还会有新的改进、创新技术出现,将会更快、更灵敏、更简便、更准确的发现鉴别未知病毒。参 考 文 献〔1〕 Drosten C , Gunther S , Preiser W, et al1 Identification of novel corona2virus in patients with severe acute respiratory syndrome1 N Engl J Med ,2003 , 348 : 1967 - 19761〔2〕 ven den Hoogen BG, de Jong JC , Groen J , et al , A newly discoveredhuman pneumovirus isolated from young children with respiratory tractdisease1 Nat Med , 2001 , 7 : 719 - 7241〔3〕 Fouchier RA , Hartwig NG, Bestebroer TM, et al1 A previously unde2scribed coronavirus associated with respiratory disease in human1 ProcNatl Acad Sci U S A , 2004 , 101 : 6212 - 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食品快速检验检测技术以其简捷性和便携性两大优势得到了快速发展。 下面是我为大家整理的食品快速检测技术论文，希望你们喜欢。
食品的快速检验检测技术
摘要：食品安全已成为社会关注的焦点问题。文章介绍了目前常用的食品安全快检技术，并展望了其发展方向。
关键词：食品安全 快检 技术综述
引言
食品安全(food safety)是指食品无毒、无害，符合应当有的营养要求，对人体健康不造成任何急性、亚急性或者慢性危害。俗话说“民以食为天”，食品安全关系到人民群众的身体健康和生命安全，关系到社会和谐稳定，而近年来食品安全问题层出不穷，加了吊白块的面粉，有毒的大米，注了水的鸡肉，掺了石蜡的火锅底料，硫酸泡过的荔枝，以及假酒假烟假蜂蜜劣质奶粉充斥着市场，真让老百姓担心起这片“天”。因此，对食品的生产、加工和销售环节实施监测监控势在必行，食品安全分析检测技术应运而生。
传统的食品安全分析检测技术主要是指化学分析法和大型仪器检测法，相对成熟。但它们的操作只能局限于实验室，操作复杂，耗时长，不能满足对食品质量安全实时监督掌控的需求，尤其在突发事件时，快速检验检测技术以其简捷性和便携性两大优势得到了快速发展。
1、食品快速检验检测技术的研究现状
化学速测技术
化学速测技术主要是根据待测成分的某些化学性质，将样品与特定试剂发生水解、氧化、磺酸化或络合等化学反应，通过与标准品的颜色比较或特定波长下的吸光度比较，以获得检测结果，通常也成为化学比色分析法。
利用普通化学原理的速测法主要包括检测试剂和试纸，随着检测仪器的不断发展，国内外均已有与测试剂相配套的微型光电比色计。针对试纸检测的仪器也有报道，如硝酸盐试纸条[1]，主要是将硝酸盐还原为亚硝酸盐，在弱酸性条件下与对氨基苯磺酸重氮化后，和N-1-盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，试纸变色，插入检测仪读数即可。德国默克公司生产的与试纸联用的光反射仪技术相对成熟，国内尚无商品化仪器问世。
利用生物化学原理的速测法主要应用于微生物的检测，商品化成品以美国3M公司的PerrifilmTM Plate系列微生物测试片为代表，在检测金黄色葡萄球菌时，只需要测试片与确认片配套使用即可。测试片有上下两层薄膜组成，下层的聚乙烯薄膜上印有网格，便于计数，同时覆盖着含有特异性显色物质和抗生素的培养基，若样品中含有金黄色葡萄球菌，无须增菌，直接接种纸片培养24h后便可观察到显示出特殊颜色的菌落;确认片与测试片相似，只是含有不同的特异性显色物质，将有疑似菌落的测试片影印到确认片后，培养1-3h即可观察，不需进行繁琐的生理生化鉴定。而常规的Baird-Parker平板计数法耗时长达78h。
酶抑制速测技术
酶抑制速测技术主要用于食品中农药残留和重金属的快速检测。这些物质可通过键合作用造成酶的化学性质和结构的改变，产生的酶-底物结合体会发生颜色、吸光度或者pH值的变化，通过测定这些变化以达到定性或定量检测的目的。根据检测方式的不同，可分为试纸法、pH计法和光度法。相比而言，试纸法成本低、操作简单，更易于推广。它主要是将酶和底物分别固定在两张试纸片上，当样品中有待测组分时，会对酶产生抑制作用，两张试纸片接触后，酶和底物结合便会发生显著地颜色变化，比较适合农贸市场和超市等一些食品集散地的实时安全监管。由于该方法的检出限和保存性等方面的局限，只适用于初筛检测[2]。
生物传感器速测技术
生物传感器技术是利用生物感应元件的专一性，按照一定的规律将被测量转换成可用信号，使这种信号强度与待测物浓度形成一定的比例关系，具有快速、灵敏、高效的特点，是目前食品安全检测技术的研究热点，广泛应用于食品中农药残留、兽药残留等方面的检测，与传统的离线分析技术相比，它更适应于在复杂的体系内进行快速在线连续监测，在现场快速检测领域有着不可逾越的优势，按照传感器类型又可分为免疫传感器、酶传感器、细胞传感器、组织传感器、微生物传感器等等。
免疫传感器是在抗原抗体结合免疫反应的基础上发展起来的生物传感器。利用压电免疫传感器检测食品中常见肠道细菌时，通过葡萄球菌蛋白A将肠道菌共同抗原的单克隆抗体宝贝在10MHz的石英晶体表面，以大肠菌群为例，响应值可达10-6-10-9。
免疫速测技术
免疫速测是利用抗原抗体的专一、特异性反应建立起来的方法，根据选用的标记物可分为放射免疫检测、酶免疫检测、荧光免疫检测、发光免疫检测、胶体金免疫检测等。酶联免疫吸附检测法是应用较为广泛的一种免疫速测技术。它将酶标记在抗体/抗原分子上，形成酶标抗体/抗原即酶结合物，抗原抗体反应信号放大后，作用于能呈现出颜色的底物上，可通过仪器或肉眼进行辨别。目前，黄曲霉毒素酶联免疫试剂盒已广泛应用于食品检测中。
分子生物学速测技术
聚合酶链式反应(PCR)是近年来分子生物学领域中迅速发展并运用的一种技术，在食品检测中主要用于微生物的检测。它利用是否能从待测样品所提取的DNA序列中扩增出与目标菌种同源性的核酸序列来判定是否为阳性，该方法从富集菌体、提取遗传物质、PCR扩增到电泳、测序鉴定，可控制在24h，而致病菌的传统培养检测至少需要4-5天。
随着研究的逐深入，由PCR技术派生出的实时荧光PCR法、DNA指纹图谱法、免疫捕获PCR法、基因芯片法等也逐步得到了应用。基因芯片技术可以在很小的面积内预置千万个核酸分子的微阵列，利用细菌的共有基因作为靶基因，选用通用引物进行扩增，利用特异性探针检测这些共有基因的独特性碱基，从而区分出不同的细菌微生物。该法特异性强、敏感性高，可实现微生物检测的高通量和并行性检测。
2、食品快速检验检测技术的发展方向
食品安全快检法以其简捷性和便携性两大优势得到了快速发展，但缺点也显而易见，需要完善的地方依然很多：
简单 速检验检测技术往往是由一些非专业技术人员使用，因此，检测方法采样、处理、检测、分析等各个环节简单、易行是该方法的一大发展趋势。
准确 检法前处理简单，势必导致待测样品纯度不高，基体干扰大。因此，在今后方法的研究中，应更多关注与如何避免假阳性结果，尤其是在分子生物学速测法中，增强靶基因的特异性、引物的特异性、排除死菌体造成的假阳性应得到进一步探索。
便携 着微电子技术、智能制造技术、芯片技术的发展，检测仪器应向微型化、集约化、便携化方向发展，以满足更多的现场、实时、动态的检测要求。
经济 测成本的高低直接决定着检测技术能否得到广泛的推广和应用，如何在确保又好又快的检测基础上，尽最大可能的降低成本也是今后的研究方向。
标准化前，我国尚未制定出与食品安全快速检测技术相关的标准和规范，这也阻碍了快检法的推广和应用。随着技术的提高和检测中对快检法的需要，应及时制定出相关标准规范以增强快检结果的认可性和权威性。
参考文献
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[2]易良键。食品安全快速检测方法的应用和研究【J】中国信息科技，2012，3：46
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With the development of knowledge economy, people's living standards have greatly improved, for health, led to the emergence of medical and health services and more strong, in vitro diagnostic reagents as an important part of medical supplies, has its enormous market potential, each production enterprises have mushroomed in all around the country, new products constantly, the domestic and international market, and the impact of this phase is associated with the lack of intellectual property. Using relevant legal economics, economics theory, is to study the legal theory and method of legal issues, it is not only related to relevant legal value has philosophical sense of legal theory, but also involves specific legal problems and almost all sectors, including intellectual property. Domestic law in introducing law of intellectual property economy class, but not involved in vitro diagnostic reagents, especially in the field of intellectual property law analysis is almost zero. This paper explains economic growth and intellectual property rights of economic relations between in vitro diagnostic reagents, intellectual property, the existing social cost and benefit the necessity and restrictive in three aspects for intellectual property protection and the use of in vitro diagnostic reagents and urgency of the problem, and reveals the in vitro diagnostic reagents fields of intellectual property law system, and puts forward the practical requirements for future improvement suggestion, the rationality of in vitro diagnostic reagents in intellectual property related legal system, and provides the reference for future : HBeAg quantitative detection in chronic hepatitis b antiviral treatment has important scientific significance and economic value, the graduation topic selection, guangzhou was antibody engineering technology Co., LTD. Is developed "hepatitis b virus e antigen (HBeAg) quantitatively kit (time-resolved immunofluorescence)", through the representative for a certain amount of research, clinical samples to assess the clinical application of test, and its effectiveness and safety to provide important basis. Methods: according to the clinical diagnostic reagents clinical research technique guiding principles for design, according to the design of clinical epidemiology, randomized controlled "three principles" and the blind, the design of the test results and diagnostic kits and re-checked results compared to assess the clinical application of kit. Results: the testing results and comparison of diagnostic kits and review kit, sensitivity achieved respectively, specificity of reco-very and , for 100% on index of and greatly, and + LR, consistent - LR less rate , kappa value and per cent for (P < ), and the correlation coefficient r = (P = ). Conclusion: the kit, accurate, reliable and stable, safe, convenient with high value of clinical applications.
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本课题主要目标是设计并能够实现一个基于web网页的疫情核酸检查预约系统，整个网站项目使用了B/S架构，基于java的springboot框架下开发；；通过后台设置医院信息、录入医院科室信息、录入医生信息、设置医生排班信息、查看预约信息、留言等。
核酸检测个人工作总结5篇
工作总结是对这一个阶段中自己工作的一次检查和规划，通过工作总结我们能够更好的去认知了解自己工作，更方便之后将工作做好。下面是我整理的核酸检测个人工作总结，希望能够帮助到大家。
一、新冠疫情防控阻击战取得阶段性胜利
疫情发生以来，在县委、县政府的坚强领导下和上级业务部门具体指导下，县卫健委闻令而动，全面贯彻落实上级工作部署和要求，全民动员，精准施策，扎实做好疫情防控各项工作，确保了全县疫情防控形势总体平稳。
(一)以身垂范，机关党员干部全员参与。委里成立了县卫健委新冠疫情防控应对领导小组，多次召开了会议研究防控工作，制定下发了各种防控指引和文件。各班子成员不仅担任了县新冠疫情防控应急指挥部下设工作组的成员，而且身先士卒带队到高速路口、长运车站体温监测点值守，委里一名班子一直在县集中医学观察点坐镇指挥。机关干职工也纷纷投入到疫情防控一线工作，春节前后的40多天在家的干职工没有一个人临战退缩。
(二)排查监测，有效阻断疫情输入源头。疫情防控前期，委里按照指挥部指令在高速路口、国省道县际交界处均设置了临时检测点，机关工作人员和医疗机构抽调人员24小时值守，做好进出人员排查监测，要求外来人员入境一律居家观察14天，累计检查进出车辆11000余辆次(日最高车流量1230辆、日最低车流量200辆)、人员20000余人次。
(三)不惧危险，千余医护战士逆行“战疫”。疫情期间，我县出现了5例确诊患者、5例疑似病例，面对未知的危险，县乡村各级医疗机构的1000多名医护人员都牢牢坚守在抗疫的第一线工作，积极参与人员摸排、健康监测、流调消杀，防控指导、舍小家为大家，没有任何怨言。与此同时县人民医院王印花和县中医院11名医护人员自愿请缨分别赴武汉、疫情救治前线工作，谱写了一曲曲“战疫”壮歌。企业复工复产之际，抽调12名医务人员驻企全程指导企业疫情防控，为全县园区企业顺利复工复产提供保障。
(四)从无到有，核酸检测工作有序推进。截止10月20日，全县累计核酸检测5110人份，其中560名发热门诊患者、1086名新住院病人、183份冷链场所标本进行了核酸检测。县人民医院PCR实验室9月1日正式投入使用，县疾控中心PCR实验室已经完成主体工程，10月22日通过了评审验收并投入使用。
(五)中药干预，充分发挥中医特色优势。制定了《关于充分发挥中医药在新型冠状病毒感染的肺炎救治作用的意见》《关于新型冠状病毒感染的肺炎中医药防治方案》，采取中药汤剂、艾熏和热敏灸等中医药手段进行预防，每日向疫情防控一线的医务人员、工作人员、园区返岗人员等人群发放预防用中药汤剂，采取艾熏和热敏灸等中医药手段预防，累计向医院、复工复产企业和集中医学观察点等场所发放艾芯6645条;选派县中医院2名中医师加入市中医药专家组，协助配合定点救治医院的中医药治疗。
(六)严防死守，抓实医院感染防控工作。严格落实发热门诊管理要求，加强患者收入院管理，加强陪护、探视的管理，强化新冠病毒核酸检测，严格落实标准预防，开展院内感染风险排查整顿。通过抓实抓细医疗机构院内感染的各项工作措施，切实做到院内闭环管理，确保了医疗机构零感染。
(七)精心安排，全力以赴保障防控物资。一是多渠道争取物资来源，由各部门和社会各界踊跃提供采购信息，县卫健委一名班子专门负责对接落实;二是物资进出管理规范。入库填写入库单，由仓管人、审核人签字，物资出库填写申领单，审核同意后再领取防控物物资，紧缺物资申领报县疫情应急指挥长批准;三是物资分配每日日报，由县指挥部常务副指挥长、副指挥长等领导签字。四是捐赠物款统筹使用。社会各界捐赠的各类防控款物由县红十字会、县慈善总会、县物资保障组负责接收，接收物资统一由县物资保障组储备保管，接收款项纳入县新型冠状病毒感染的肺炎疫情防控应急资金统筹使用。
(八)储备人员，做好秋冬季疫情防控准备。一是组建了流行病学调查队伍，共计14人，均为县疾控中心、县乡医疗机构公卫人员，调查队伍分成了四个梯队，10月11日进行了集中业务培训;二是组建了核酸采样后备队伍，抽调了54名乡镇卫生院医护人员人作为核酸采样储备人员，从10月12日开始分批次到县人民医院跟班操作学习;三是组建了核酸检测检验后备队伍，乡镇卫生院7名检验专业人员全部作为后备力量，目前正分批次在县人民医院PCR实验室跟班操作学习。
(九)积极备战，开展防控实战应急演练。10月13日下午，我县在广场举行了秋冬季新冠疫情防控应急演练。副县长、指挥部常务副指挥长到场指导。县卫健委、县人民医院、县中医院、县疾控中心、县公安局、镇人民政府等单位60余人参加了演练，演练按照疑似病例发现、采样检测、信息报告、流行病学调查、病例转运、人员管控、环境消杀、集中留观、防控宣传等内容依次展开。
二、其他重点工作齐头并进
(一)党的建设方面。
全面从严治党，党的建设不断加强。卫健委党委始终把党的政治建设摆在首位，不断巩固拓展主题教育成果，扎实落实“不忘初心、牢记使命”的制度，强化政治监督，严明政治纪律和政治规矩，严格执行新形势下党内政治生活若干准则，引导全系统广大党员干部增强“四个意识”、坚定“四个自信”、做到“两个维护”。加强意识形态领域工作，深入推进“两学一做”学习教育常态化制度化。进一步加强机关党组织建设和公立医院党的建设，切实发挥党组织作用，提升各级党组织政治功能和组织力。全面落实公立医院党建重点任务，加强党对公立医院的领导，落实党领导下的院长负责制，健全相互制约又相互协调的权力结构和运行机制，推进权力运行程序化和公开透明。坚定不移正风肃纪反腐。落实党风廉政建设责任制，推行党风廉政建设重点工作项目清单制，持续深入整治“好人主义”突出问题，加大违反中央八项规定及其实施细则精神的查处力度。重点聚焦医疗卫生服务和行业监管中的不正之风，加大监督执纪问责力度，塑造行业风清正气。
(二)卫生县城创建方面。
今年以来，我委按照省、市、县关于开展城乡环境综合整治活动的有关要求，多次召开会议安排部署相关工作，各项工作扎实有效开展，取得了明显实效，推进了环境卫生综合整治行动。针对疫情防控中发现的环境卫生问题，特别是老旧小区、城中村、城乡结合部、农贸市场、小餐饮店、小作坊、流动摊贩等环境卫生管理的薄弱环节和一些长期存在的“老、大、难”问题，结合省级卫生城镇创建工作总体要求，逐项梳理问题清单，及时整改落实，切实为人民群众解决实际问题和困难。
卫健委把创建省级卫生县城作为一项重要的政治任务，统一思想、履职尽职主动作为，坚决打好这场攻坚战、持久战。主要做到了以下三个方面的“提升”：
一是明职责，提升了创卫工作的主动性。
卫健委在创建省级卫生县城工作中顺利完成以下四方面职责：
一、业务指导到位。按照创卫要求，全程对创建省级卫生县城全过程进行业务指导。
二、专线管理到位。认真贯彻落实《传染病防治法》《职业病防治法》《公共场所卫生管理条例》等有关法律法规，加强医疗、学校、社区、企业等重点领域公共卫生服务体系建设。对照《病媒生物预防控制管理规定》积极开展以环境治理为主的病媒生物综合防制工作，定期发布病媒生物密度监测结果和预警预报。规范医疗废弃物和排放的医源性污水处置。
三、医疗卫生机构创建的达标到位。建立完善卫健委机关、全县各级医疗机构环境卫生保洁工作制度，对办公楼、食堂、职工宿舍、厕所、仓库、车库等场所进行全方位大清扫，建立长效管理机制，做到环境整洁、不漏死角。
四、片区联创到位。__社区13项整治达标全到位，全面完成各项创卫指标。
二是懂业务，提升了创卫工作的指导性。
创卫工作是一项系统工程，技术含量高，省里评价指标有八大类四十小项，三项一票否决，共计1000分，验收评估获得800分以上才能获得省级卫生县城称号，为此，一是我们自身认真学，组织全系统干部认真学习创建省级卫生县城评分工作标准指引，做到人人懂业务。二是发挥行业自身优势，请省级创卫专家来现场培训指导，通过培训使全县创卫工作重点突出，目标明确，任务具体，责任清晰，整治范围全覆盖，不留死角，消除盲区，特别是背街小巷，城中村，城乡结合部，闲置地等薄弱环节创建效果显著，群众满意。
三是善落实，提升了创卫工作的实效性。
创卫工作难点多、堵点多、任务重、压力大、时间紧，我们办好自己的事，解决好思想认识不到位，干事没激情，好人主义思想严重的问题。一是依靠群众。依靠群众是创卫成功的关键，我们加大宣传力度，传播正能量，积极发动群众参与创卫工作。二是组织干部，一分部署，九分落实，干部是创卫的'重要群体。我们结合本系统创卫工作实际，将创卫工作任务清单化、项目化，明确责任人，使人人身上有担子、肩上有压力，干部的积极性得到充分调动，创卫激情得到充分涌动。三是班子带头。安排班子作为联创片区专线管理的责任人，积极负责片区的创卫工作。四是上下联动。委机关与全县各医疗卫生机构建立横向到边、纵向到底的创卫新格局。
(三)健康扶贫方面。
建档立卡贫困人口参加城乡居民基本医保个人缴费部分由财政给予补贴;优化医疗费用决算服务模式，按照《省贫困患者县域内“先诊疗、后付费”服务工作方案》，实行县域内住院“先诊疗、后付费”和一站式结算，贫困人口住院时不需缴纳住院押金，由定点医疗机构与基本医保，大病保险，商业补充保险，医疗救助经办管理机构之间进行决算，减轻贫困患者垫资压力，确保其得到及时、安全、规范、有效的治疗。至10月份底，贫困户门诊住院5996人次，贫困人口个人自付比例控制在10%;完善了定点医疗机构的扶贫病床(病房)设立，县人民医院及县中医院按照总床位数的5%设置扶贫病床，每个乡镇卫生院至少2张扶贫病床，全县共设置58张扶贫病床。
为有效应对可能出现的疫情，对防控区域人员实施“应检尽检”，根据__市疫情防控指挥办关于做好大规模核酸检测筹备工作的通知要求，我镇于X月__日晚上__在__、__村委会开展了大规模核酸检测工作。现将有关工作总结如下：
一、高度重视，做好核酸检测准备工作
我镇接到__市疫情防控指挥办关于做好大规模核酸检测筹备工作的通知要求后，镇高度重视，立即召开班子会议专题研讨，卫健办立即制定我镇区域大规模核酸检测的工作，成立以镇书记为组长的核酸检测指挥中心，同时将工作方案人员职责具体落实到镇村领导职工。同时，卫健办依方案要求购买核酸检测物资清单，保证核酸检测顺利进行。
二、做好区域大规模核酸检测宣传发动工作
X月__日上午，X镇、__宣传发动组工作人员通过入户通知的方式全方位开展核酸检测工作的发动工作，务求使更多的居民参与检测。宣传组入户的同时，还带上葵花码，指导村民提前扫码截图。
三、大规模核酸检测工作有序开展
X月__日晚上__：__，全体工作人员行动起来，按岗就位。晚上__：__，X镇、__大规模核酸检测工作有序开展，收到通知的居民群众早早戴好口罩排队参加核酸检测，在工作人员的指引下经过测温，亮码后进入等候区，按指引进行核酸扫码登记。现场群众严格按照一米间隔轮候，有序进入到核酸采样区，配合医护人员进行采样工作。为照顾老人、小孩及行动不便的人员，核酸检测点特设一条快速通道，体现了人性关怀。
本次演练截止时间为晚上__：__分，X镇采样点采集样本____份，__采样点采集样本__份，全镇总共采样__X份。我们这次演练取得了不错的成绩，但也存在以下几个问题：一是工作的人员安排不够合理。有一部分干部职工没有利用到位;宣传发动组的人员一部分也是后勤保障组人员，导致布置场地时缺乏人手，速度慢;二是场地的利用有待提高。布置场地时未能充分利用场地，缓冲区的设置与人流量不相匹配，人流量过多时人员密集，达不到一米间隔;三是基础设施薄弱。采集现场无安装加强信号器，采集人员用手机录入信息，无配备平板电脑，录入速度慢。
在今后的工作中，我们要做好方案，调动全体镇村干部积极参与并合理安排，同时做好合理规划、充分利用场地，并提前安装信号加强器，采购平板电脑，为必要时实施全镇全人群筛查做好准备。
为认真贯彻落实中、省、市、区关于肺炎疫情防控的决策部署，积极应对可能在辖区出现的肺炎病例，根据区肺炎疫情防控指挥部的要求，结合我镇实际和近期开展的村(居)委换届选举工作，决定开展一次镇村(居)委换届肺炎疫情防控应急演练。
一、演练目的
通过演练，检验我镇全员肺炎疫情防控处置能力和“四长联防、五级包保”疫情防控体系运作，统一和规范应急处置工作程序，及时发现存在的问题，采取针对性措施，确保一旦出现本土确诊病例或无症状感染者，按照国家有关要求能立即开展全镇疫情防控工作。
二、参演单位
参加单位：镇政府、镇卫生院、派出所、村。
三、演练地点
__镇__村。
四、演练时间
__年2月2日上午9：30
五、演练方式
采取桌面演练的方式，按照演练流程、有关技术规范实操演练。
六、演练内容
辖区管理、人员动员、秩序维护、流行病学调查、信息登记、核酸采集、标本转运、转运交接、消杀灭、隔离观察等内容。
七、演练背景
20__年2月2日上午，镇村召开社民代表大会商讨居委会选举事宜。
9：20现场村委干部为前来参会的村民代表测量体温时发现，陶某的体温经多次测量后仍处于°°，有发热症状。随即村委干部将陶某转移至临时隔离区域，并马上将情况报告给镇卫生院和镇政府。镇卫生院和镇政府工作人员立即赶往村参与处置。
2月2日上午9：40，镇卫生院医生到达村临时隔离区域，再次为陶某测量体温并询问旅居史，建议立即将陶某送至市第三人民医院。
中午12：20，报告陶某核酸检测呈阳性。镇卫生院立即将该情况报告给镇人民政府，并上报区疫情防控指挥部。
12：30，镇召开疫情防控紧急会议。镇卫生院通报陶某情况;镇肺炎疫情防控工作领导小组安排疫情防控工作并启动疫情应急预案。
经对陶某的流行病学调查得知：陶某，35岁，村9社人，家中有一名老人和一个5岁女儿。1月31日下午15：00，陶某独自驾车到我省某地参加朋友婚礼，当晚18：30独自驾车返回镇村家中，21：00在村文化室逗留近半小时，观看李某、谢某、陈某、王某四人打麻将，随后与其中李某、陈某、王某约定隔日在此打牌，并在小卖部席某处购买一包烟，21：40到家。1月27日上午未出门，下午14：00，前往村文化室与李某、陈某、王某打牌，晚19：30到家。1月28日上午9：00出门前往村办公室开会。经初步统计，陶某有密切接触者有其父陶某、其女陶某、李某、谢某、陈某、王某、席某、村干部王某、现场已到场参会的村民4人共12人，非密切接触者不详。
八、演练流程
(一)村干部为参会村民测量体温、转移隔离疑似病例、采集核酸样本并上报情况。
参演人员：村、镇卫生院
(由村文书做汇报。)
(二)对村进行封闭式管理。封闭村出入口，封闭陶某家、村文化室、小卖部。人员不出不进。
参演人员：镇干部、派出所、村、镇卫生院
(由村书记做汇报。)
(三)转运隔离密切接触者。将与陶某有密切接触的12名人员转运到区集中隔离点进行隔离，并进行核酸检测。
参演人员：镇干部、村、镇卫生院
(由村书记做汇报。)
(四)动员村民进行核酸样本采集。通过广播、电话、微信、上门等方式动员村民，与陶某及其亲属有接触者，去过村文化室和小卖部等人员进行核酸标本采集。
参演单位：镇干部、村、镇卫生院
(由镇卫生院做汇报。)
(五)在村办公室院坝设立核酸标本采集点，进行核酸采集。
采样过程：
1、秩序维护(由派出所负责)。
2、体温测量(对所有人员进行体温测量，人员需保持1米距离，由卫生院负责)。
3、核酸采样(以每组5人排队登记后由引领员带领到采样点进行采样。人员登记由驻村干部和村干部负责。引领由村医生负责，采样由卫生院负责)。
4、标本转运(由卫生院负责)。
参演单位：镇干部、派出所、村、镇卫生院
(由镇卫生院做汇报。)
(六)居家隔离观察。镇卫生院对相关人员进行居家隔离，派出所对拒不配合居家隔离的进行劝诫。
参演单位：派出所、村、镇卫生院
(由村书记做汇报。)
(七)终末消毒。对村办公室、村文化室、小卖部、陶某家、集中采样点进行终末消毒。
参演单位：村、镇卫生院
(由村书记做汇报。)
(八)点评总结。
镇疫情防控工作领导小组领导进行点评总结。
(由镇长做汇报。)
九、演练要求
各参演单位务必高度重视，抽调精兵强将参与演练，各流程牵头领导负责各流程的组织和调度工作;各参演单位按照各流程要求，做好人员、物资准备等工作，确保每个演练流程圆满完成;未参与演练的其他村(社区)现场观摩，熟悉流程。
演礼镇在尚礼村开展较小区域全员核酸检测突发预警式演练。本次演练严格按照上级要求，在规定时限内超额完成检测任务，经过社区动员、信息登记、核酸采样、样本转运、现场消杀、核酸检测、医疗废物处置等环节，有效验证了我镇在应对公共卫生突发事件时的宣传发动能力、快速组织能力、科学检测能力、高效转运能力。现将有关情况总结如下：
本次演练过程中，共设置2条采样通道，划设等候区、测温区、登记区、采样区、临时隔离区、样本转运区、医疗废物暂存区等区域。工作人员引导群众有序排队等候，保持“一米线”间隔，执行验码测温，佩戴口罩，按照实际情况分流受检人群，按规程进行信息登记、核酸采样、有序离场。采样结束后，医务人员严格按照操作规定进行样本转运、医疗废物处置、人员及场地消杀。
本次演练在一小时内完成266人采样工作，两条采样通道同时进行，提高了采样工作效率。通过现场实战演练，我镇全面掌握了全员核酸检测的各个环节，增强了突发事件的应急处置能力，为有效推进镇域全员核酸检测积累了宝贵经验，圆满完成了预期目标。下一步，我们将继续严格落实常态化疫情防控各项政策措施，做好人员管控和信息核查，并在此基础上进一步提高采样效率，推进镇村两级信息互联，以高度的责任担当和严密的防控举措做到“守土有责，守土负责，守土尽责”。
一、核酸检测开展情况：
沙子口卫生院严格按照省防指办下发文件按要求通知分类进行人员核酸检测工作，根据“应检尽检”和“愿检尽检”要求，安排专人负责全院职工和辖区内一体化卫生室、服务站人员核酸检测工作，分别为发热哨点人员2天一测，口腔科人员一周2测，外出采样人员作业期间2天一测，其他人员7天一测。及时动态调整维护“应检尽检”小程序，对工作人员进行分期分类严格管理监测，确保每期检测不漏一人。并对辖区内从事冷链、药店工作人员进行定期核酸检测。截止到11月底，辖区内冷链企业、食品加工行业等重点人群核酸检测采样共45591人次;为了方便愿检群众进行核酸检测，在沙子口卫生院设立青岛市首家24小时全天核酸检测基层医疗单位，为社会人员核酸检测提供极大便利。
为做好辖区全员核酸应急检测工作，成立全员核酸检测小组。先后在大河东、北龙口等社区参与街道组织的全员核酸检测实战演练3次，提高了全员核酸检测工作的能力。
二、培训演练开展情况：
1、定期开展新冠防控业务知识培训，对全院全员不同岗位定期开展培训考核，根据疫情处置不同场景，每月进行一次不同场景实战演练，截止到11月底，共开展不同场景实战演练7次，提高各类突发情况的应急处置能力。
2、开展常态化应急演练及理论知识和实践技能考核，演练后要进行总结，针对演练的每一个环节进行研判，不断完善工作措施。
三、存在的问题
1、人员状态发生变化时，未第一时间更改小程序。
2、日常院感工作细节方面做的不够精细。
3、演练过程配合熟练程度不够。
四、下一步打算及意见建议
加强医院工作人员在岗状态提醒，及时更改小程序。按时进行全员核酸检测实战演练，不断提高应急能力。
“云核酸”检测管理系统就是通过“哨点云”的方式实现对辖区内重点人群的分级分层大数据管理，确保重点人群在常态化疫情防控下按规定频次定期进行核酸检测。
核酸检测报告查询系统如何实现检测门诊与用户之间的即时信息共通？ 近两年，伴随疫情反复无常，加上新冠病毒传播速度快、隐匿性强等特点，要做好疫情常态化防控，避免出现更大范围的疫情，核酸检测是抗击疫情必不可少的一项标杆。 全国各地核酸检测的需求都不曾间断，相关医务工作者的工作事务也时常繁重。作为核酸检测点门诊，一般都有自己内部的信息管理系统，虽能实现将受检者相关信息的快速、准确录入。 但核酸检测采样一般时间灵活，检测数量不限，门诊虽能实现院内的信息化管理流通，但 核酸检测报告结果与用户之间却存在隔断。 传统线下管理方式，用户需前往门诊领取纸质核酸检测报告， 报告领取效率低、 门诊的防控压力也大、 且核酸报告具有鲜明的时效性， 48小时核酸报告是常见标准。 核酸检测报告查询系统，可恰到好处的补足这一间隙，成为很多门诊便捷为用户提供核酸检测结果的线上工具， 仅需 5 步！让用户实现高效自主快捷查询。 高清报告样本展示： 用户端如此简单，查询只需五步，那 管理端会不会需要相关医务工作者后台一份一份上传？ 核酸检测报告查询系统，旨在让医务工作者与检测群众双方，共同实现省心！省事！省时！ 管理端无需医务工作者投入大量时间精力，在后台 可达到上千份报告，十秒上传，用户端即查即存 ，便捷化轻松运作管理。