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不相关是不可以的。正常来讲，小论文应该是大论文的一部分。但是在实际研究中，小论文研究内容可能不完全属于大论文。所以小论文与大论文有交叉，比较相对应即可，无需完全对应。发表小论文的作用：1、小论文可能是研究生毕业条件要求。很多学校要求研究生毕业必须要发表论文，省级、国家级的，有的甚至还要求发表北大核心期刊，而具体发表要求根据各自学院、专业而定。2、小论文是评奖学金的加分项。虽然说研究生发表论文不一定就可以评奖学金，因为论文只是加分项，不是起决定作用的，但发表论文可以加分，虽然比重并不大，但是每年有很多同学评奖时可能就差那么两三分，与奖学金失之交臂，所以一般都是要发的。3、小论文有助于找工作、评职称。研究生毕业后，论文通常对找工作帮助不大。但比如当老师，进研究所等等注重学问研究的工作单位，那论文就是敲门砖。普通的论文是没多大价值，但一些核心、EI、SCI，上档次的论文对找工作、评职称都会发挥比较大的作用。
小论文和大论文的区别如下：
大论文和小论文的区别：两者定义不同。大论文是指毕业或者学位论文，这个不需要发表的，至少两到三万字。小论文是指发表在期刊上的论文，字数方面在两到三千字。
两者写作工程不同。大论文按研究生论文书写格式，一般需要一个月时间能够完成，而小论文一般都是由论点、论据、论证三要素组成，时间周期会长很多。
大论文就是学位论文，硕士一般五部分，博士一般七部分。小论文是投给期刊的论文，一般学校或者学院有要求要投什么样的期刊才能毕业，通常是SCI、核心、C刊这些类别。只有被这样的期刊接收了小论文才能毕业，当然每个学校不一样。
大论文属于答辩论文，需要按照答辩论文的格式要求撰写，包括确定主题、开题报告完成、论文书写及查新完成、送外审通过等过程。一个月时间就可以完成，撰写的字数比较多，最起码得上万。
小论文则是根据专业内容来撰写论文，论文得体现出论点、论证以及论据三大要素，要在职称评定截止时间之前准备好。论文字数要求在几千字，审核周期比较长，所以作者要提前做好准备。
一种不规范的说法～现在读研的孩子们都这么叫～其实所谓小论文是指发表在期刊上论文～大论文是你的毕业论文～
大论文与小论文的区别：定义不同、写作过程不同、用途不同。
1、定义不同
大论文是指毕业或者学位论文，这个不需要发表的，至少两到三万字。
小论文是指发表在期刊上的论文，字数方面在两到三千字。
2、写作过程不同
大论文一般作为答辩论文，有按研究生论文书写格式，一般需要30个工作日完成基本写作。阶段分为：确定主题、开题报告完成、论文书写及查新完成、送外审通过。后期经由导师指导后进行修改论文。
出选题和做开题报告都需要查阅大量的参考文献，这就比较讲究慢工出细活，一般出题1-3天，最迟不超过5天，开题报告写作一般是10天。确定写作后，大概需要二十到三十天，写好后需要三到五天做质控，然后才提交文章。
小论文一般都是由论点、论据、论证三要素，它作为需要发表的论文，需要将论点、方法和材料反映出来。
即论点具有创新，基本使用自己调研所获或挖掘出的论据，论证明确，行文流畅。在学科理论研究中有很大的突破，比如解决了目前国内还没解决的一些问题，对国民经济发展又产生重大的影响并具有普遍的意义，这样的写作水平高。这就是写作论文时的新观点、新材料、新方法。
3、用途不同
一般小论文，比如评中职和高职，中职一般发表省级以上就可以，高职就需要有国家级的，甚至核心论文。大论文的话是根据学校的要求。
扩展资料：
论文作用的作用：
1、显示研究的水平与价值
2、提高研究者的研究水平
撰写科研论文，不仅是反映科研成果的问题，而且也是个深化科研成果和发展科研成果的问题，在撰写科研论文过程中，对实验研究过程所取得的大量材料进行去粗取精，实现由感性认识向理性认识的飞跃和升华，使研究活动得到深化，使人们的认识得到深化。
3、推广经验，交流认识
教育科研过程，是人们获得直接经验的过程。这种经过精心设计、精心探索而获得的直接经验不仅对直接参加者来说是十分宝贵的，而且对于所有教育工作者，对于人类整体认识的提高和发展都是十分宝贵的。
4、推动教育科研活动自身不断完善
教育科研活动是个探索未知领域的活动，并无既定模式和途径可循，在一定意义上可以讲，教育科研活动均属创造性活动。为了保证教育科研活动越发卓有成效，为了给进一步开展教育科研活动提供可靠依据，在每一科研活动终端都撰写报告或论文是十分必要的。
参考资料来源：百度百科-论文
可以不一样。研究生大论文是指毕业或者学位论文，这个不需要发表的，至少两到三万字，只有通过了论文答辩才有可能拿到毕业证以及学位证；而小论文是指发表在期刊上的论文，字数方面在两到三千字即可。
小论文和大论文的区别如下：
大论文和小论文的区别：两者定义不同。大论文是指毕业或者学位论文，这个不需要发表的，至少两到三万字。小论文是指发表在期刊上的论文，字数方面在两到三千字。
两者写作工程不同。大论文按研究生论文书写格式，一般需要一个月时间能够完成，而小论文一般都是由论点、论据、论证三要素组成，时间周期会长很多。
大论文就是学位论文，硕士一般五部分，博士一般七部分。小论文是投给期刊的论文，一般学校或者学院有要求要投什么样的期刊才能毕业，通常是SCI、核心、C刊这些类别。只有被这样的期刊接收了小论文才能毕业，当然每个学校不一样。
大论文属于答辩论文，需要按照答辩论文的格式要求撰写，包括确定主题、开题报告完成、论文书写及查新完成、送外审通过等过程。一个月时间就可以完成，撰写的字数比较多，最起码得上万。
小论文则是根据专业内容来撰写论文，论文得体现出论点、论证以及论据三大要素，要在职称评定截止时间之前准备好。论文字数要求在几千字，审核周期比较长，所以作者要提前做好准备。
可以不一样。研究生大论文是指毕业或者学位论文，这个不需要发表的，至少两到三万字，只有通过了论文答辩才有可能拿到毕业证以及学位证；而小论文是指发表在期刊上的论文，字数方面在两到三千字即可。
可以。在小论文的基础上扩展内容，变成自己的大论文是完全可以的，大论文本身就是小论文的集合，都属于自己的论文工作。区别是：1、小论文一般是指发表在期刊上的论文，这类论文要求不像毕业论文那么多，相对来说较为简单，侧重于学术研究或事件评论，算是入门级的论文。2、大论文是相对小论文而言的，即学位论文，是学位论文作者为获得中国人民大学某个专业学位而撰写的研究报告或科学论文。
选择论文研究课题、研究论文课题、制定论文大纲、写作毕业论文初稿、修改、编辑、校对论文
一、选择论文研究课题
硕士毕业论文要选择一个自己专业的研究课题，论文写作步骤的最基础事件，在选择论文研究可以时可以参考平时自己的研究重点或者感兴趣的方向，还要和自己的导师商议哪个课题适合研究。
二、研究论文课题
对于论文课题的研究需要参考大量的文献资料，因此阅读大量课题相关论文内容，找到相关资料和论据以支持自己论文课题的论点，在搜索到相关论据和材料时一定要详细记录，以便得到更好的运用。
三、制定论文大纲
论文提纲对于整理论文写作思路有重要意义，我们需要在写毕业论文前先列出论文大纲，这对于论文而言是个简易且结构全面的论文草稿，可以逐步整理混乱的论文想法。
四、写作毕业论文初稿
按照论文提纲逐步丰满论文全文，在写作完成后即为论文初稿，论文初稿并非最终成稿，但是基本算是完了研究生毕业论文。
五、修改、编辑、校对论文
论文初稿完成后对论文进行细致的检查和反复阅读，理顺逻辑和语言表达。
考研与就业 考验与就业对于大学生来讲，虽然并不是一个去此即彼的二选一，两者可以同时进行，但人的时间、物力、财力和精力都是有限的。 一般而言，与人生关联度越紧密的事情越容易成为两难，因为存在着这样一个铁定的前提：人生是有限的，不能复制，不能重来。于是，任何有关于人生的选择就显得尤其重要。就个人而言，谁都愿意使自己的人生活出质量来。在有限的生命历程中，谁的人生质量高，谁的人生价值就大。人生的最初阶段的选择将在很大程度上决定今后的人生发展。那么，作为在校大学生，考研与就业，应该是我们人生路上最重要的选择。其选择结果的正确性，在某种情况下决定着人生的质量。因此，它也就顺理成章地成了令我们头疼的两难选择。所以，面对考验与就业，我们应该在当前的社会大背景下根据个人实际情况作出理性的选择。我们应该加强对社会的了解和对自我的认识，选择正确的人生发展之路。 就业与考研，在八十年代被称为“红道”与“白道”，即毕业后在国家机关就业的就算是走“红道”，而考研则是走学问之道，故称“白道”。由于当时大学生就业是由国家包办，所以不存在考研与就业之间的交叉现象。于是大路朝天，一人半边。而进入本世纪以来，尤其是2003年以来，上世纪末第一批扩招的本科生已经毕业，而就业的市场有限，于是就促使一大批本科生往考研的路上转移，这可是人生的战略转移。于是，考研便不再仅仅具有学术意义，或者说学术意义正在淡化。为了规避艰难的就业形势，为了学历升级以提升自己就业的价码，为了考博，等等，不一而足。 就业的艰难，难就难在预期的就业目标与残酷的就业现实之间的矛盾上。由于中国高等教育的不发达，大学生曾经是天之骄子，作为国家未来的栋梁，他们有理由获得最好的就业机会。于是，上大学可以获得好工作已成为社会共识。同时，上大学也成了身份和地位的象征。然而，随着高等教育的扩展，尤其是扩大招生，上大学只能获得进入社会入场券，并不能保证获得以前的东西。再则，由于市场经济的逐渐成熟，市场对人才的需求不再仅仅依据文凭，更看实践能力，即从学历本位走向能力本位。在这种情况下，大学毕业生要相获得好的工作，除了学习优秀外，还得看实践的能力。这是就业难的内在原因。 就外在原因看，当今严峻的就业形势也加剧了大学生就业难。据调查统计，2000年以来，我国城镇登记失业率分为、、和，呈明显的上升趋势，同时，政府对下一年失业率的调控目标，也一再相应放宽，即分别为、、和。许多权威专家认为，这些指标虽然明显低于发达国家的同期水平，但是如果考虑到统计口径等问题，我国目前的失业率要远远高于上述指标，即可能达到10%左右的较高水平。在这种情况下，将有很多人去竞争一个职位，尤其是理想的职位。归纳起来，大学生就业难在于这样的因素：第一，高失业率带来的严峻的就业形势，第二，毕业生数量的迅猛增长导致理想职位的竞争度增大。 其实，如果仅仅从大学生所占从业人口比例来说，我们不存在什么就业难的问题。据统计，目前，我国从业人口中具有各类大专以上学历的仅占5％，而1998年工业发达国家为26％。因此，在相当长的一段时间内，都不能说我国的大学毕业生饱和或供大于求。所谓就业难，主要难在大城市、机关、国营的企事业单位、外企等；而在大城市之外，以及许多发展迅速的民营经济领域和广大的西部地区，人才匮乏的现象仍很明显。为什么不去人才匮乏的地区呢？其实道理同样简单，在市场经济条件下，作为人力资源，人才也离不开市场的配置，这种配置是在价格信号的引导下进行的。人才匮乏不等于价格就高，换言之，不等于人才的待遇高。而且，作为人才的大学毕业生，不仅要看到工作的待遇，更要预测自己在这个岗位上的发展空间，而现在人才匮乏的单位和地区，同样待遇比较匮乏，发展前景也难以预测。这样就造成大学毕业生就业难的现象。 考研的变味，主要在于两个方面：一是人才市场对学历的要求水涨船高。很多地方，尤其是经济发达地区，动辄就要硕士以上文凭。二是研究生扩招比率逐年提高，大大超过本科的增长率。第一点是压力，不得不考研，因为理想的工作需要理想的文凭。第二点是条件，即大量的扩招使考研的成功率大大提升。这样一来，考研便成了获得理想工作的一块敲门砖。但实质上，学问之道应该建立在兴趣上，即把做学问视为游戏一般，这样，他才能以全部的精力投入其中。而有这样兴趣的人不是很多，而且也不需要太多，大部分则是把考研视为工具，这是正常的。所以，在这个意义，考研的变味其实也体现了时代的发展，人们对研究生的定位发生了变化。这是不是时代进步呢？ 逻辑地看，任何选择都是以一定的利益取向为参照的。因此，考研与就业自然也是以个人的利益取向为选择依据的。从心理学的角度，所要选择的事物在不能确定的情况下，常常会产生焦虑。其两难就难在两者基本上同时进行，都有一定的风险。 首先说考研吧，虽然扩招，但招考和人数也在增长，其录取的比例并不因此而有多大的提高。最头疼的是，复习考研差不多需要一年的时间，而这一年中又是找工作的黄金时间。如果两线作战，既找工作又准备考研，这很难兼顾。对一部分同学来说，如果能找到理想的工作，当然就不用考研了。道理很明确，既然考研是为了理想的工作，那么如果已经找到理想的工作了，当然就不用考研了。但是，有些同学也会有这样的忧虑，现在社会上对文凭的要求越来越高，这个本科文凭可能会限制自己的发展空间。那这很简单，工作后再考研。 当然，随着时间的推移，这种机会对于本科生将越来越少，因此，考研就成了当下的一种现实的选择。看来，这个所谓的两难，归根结底还是考研上。这里起码包括这样几个问题：一是考上了要学三年，三年以后的就业形势如何？二是有的同学没考研却找到了理想的工作，我三年后出来如果找不到比他好的工作，我会怎么样？三是如果考不上怎么办？一直考下去，还是找工作？一直考下去，如果还考不上怎么办？如果找不到工作或者工作不好怎么办？不论如何，这都令人烦恼。 如果我们放开来想，就觉得这也不是什么难事。只要你有需要，你就得面对困难。人生的选择其实就是一场搏弈，个人跟自己的命运搏弈。所以，当二者不可兼得的时候，我们必须有所取舍。而且，人生的道路并不是我们今天就能规划好，这还有许多不可预见的因素。我时常在想，如果人的一生在他出生的时候就规划很精确，那么，他的一生还有意义吗？如果一个人什么都能预见到，那么他的奋斗过程还有什么乐趣可言。因此，在这个意义上，人生的不可知反倒使我们对自己的人生充满了好奇心，充满了幻想。 考研与就业，看似两难，其实不难。关键在于你的人生目标定位，如果过于追求完美，不允许自己出错，则势必在面临选择时如临深渊，如履薄冰，则易导致两难境地；如果你不过于追求完美，而是追求过程的乐趣，则面临选择时，你会果断地作出决定，不会过多考虑这种选择的得失，因为人生本来就是不可知的，一切要在实践中检验。 无处安放的青春，也注定会找到本属于我们自己的那个“萝卜坑”。只要我们不虚度自己的年华，无论是工作，还是读研；只要我们对得起自己的良知，无论是为人做事，还是为了自己学术理想，我们都会一往无前，承担起本属于我们这代人的历史责任。
问题一：研究生论文怎么写 你好，同学，你的研究生论文开题报告老师让你往哪个方向写？ 开题报告有什么要求呢 开题报告是需要多少字呢 你可以告诉我具体的排版格式要求，希望可以帮到你，祝开题报告选题通过顺利。 1、研究背景 研究背景即提出问题，阐述研究该课题的原因。研究背景包括理论背景和现实需要。还要综述国内外关于同类课题研究的现状：①人家在研究什么、研究到什么程度？②找出你想研究而别人还没有做的问题。③他人已做过，你认为做得不够（或有缺陷），提出完善的想法或措施。④别人已做过，你重做实验来验证。 2、目的意义 目的意义是指通过该课题研究将解决什么问题（或得到什么结论），而这一问题的解决（或结论的得出）有什么意义。有时将研究背景和目的意义合二为一。 3、成员分工 成员分工应是指课题组成员在研究过程中所担负的具体职责，要人人有事干、个个担责任。组长负责协调、组织。 4、实施计划 实施计划是课题方案的核心部分，它主要包括研究内容、研究方法和时间安排等。研究内容是指可操作的东西，一般包括几个层次：⑴研究方向。⑵子课题（数目和标题）。⑶与研究方案有关的内容，即要通过什么、达到什么等等。研究方法要写明是文献研究还是实验、调查研究？若是调查研究是普调还是抽查？如果是实验研究，要注明有无对照实验和重复实验。实施计划要详细写出每个阶段的时间安排、地点、任务和目标、由谁负责。若外出调查，要列出调查者、调查对象、调查内容、交通工具、调查工具等。如果是实验研究，要写出实验内容、实验地点、器材。实施计划越具体，则越容易操作。 5、可行性论证 可行性论证是指课题研究所需的条件，即研究所需的信息资料、实验器材、研究经费、学生的知识水平和技能及教师的指导能力。另外，还应提出该课题目前已做了哪些工作，还存在哪些困难和问题，在哪些方面需要得到学校和老师帮助等等。 6、预期成果及其表现形式 预期成果一般是论文或调查（实验）报告等形式。成果表达方式是通过文字、图片、实物和多媒体等形式来表现。 问题二：硕士毕业论文怎么写？ 自己动手找一下，可不要照搬啊，参考一下，用自己的语言写出来那才是自己的，嫌麻烦的话，也可以找人帮忙写，佳博论文写的论文很顺利，可以试一试。 问题三：硕士论文结论部分应该怎么写 英盛观察认为论文的结论部分，应反映论文中通过实验、观察研究并经过理论分析后得到的学术见解。结论应是该论文的最终的、总体的结论。换句话说，结论应是整篇论文的结局，而不是某一局部问题或某一分支问题的结论，也不是正文中各段的小结的简单重复。结论应当体现作者更深层的认识，且是从全篇论文的全部材料出发，经过推理、判断、归纳等逻辑分析过程而得到的新的学术总观念、总见解。 结论应该准确、完整、明确、精练。该部分的写作内容一般应包括以下几个方面：①本文研究结果说明了什么问题;②对前人有关的看法作了哪些修正、补充、发展、证实或否定。③本文研究的不足之处或遗留未予解决的问题，以及对解决这些问题的可能的关键点和方向。 结论部分的写作要求是：措词严谨，逻辑严密，文字具体，常象法律条文一样，按顺序1、2、3……列成条文，用语暂钉截铁，且只能作一种解释，不能模棱两可、含糊其词。文字上也不应夸大，对尚不能完全肯定的内容注意留有余地 问题四：研究生论文都是怎么写的啊？？好难的。。 论文格式 1、论文题目：要求准确、简练、醒目、新颖。 2、目录：目录是论文中主要段落的简表。（短篇论文不必列目录） 3、提要：是文章主要内容的摘录，要求短、精、完整。字数少可几十字，多不超过三百字为宜。 4、关键词或主题词：关键词是从论文的题名、提要和正文中选取出来的，是对表述论文的中心内容有实质意义的词汇。关键词是用作机系统标引论文内容特征的词语，便于信息系统汇集，以供读者检索。每篇论文一般选取3-8个词汇作为关键词，另起一行，排在“提要”的左下方。 主题词是经过规范化的词，在确定主题词时，要对论文进行主题，依照标引和组配规则转换成主题词表中的规范词语。 5、论文正文： （1）引言：引言又称前言、序言和导言，用在论文的开头。引言一般要概括地写出作者意图，说明选题的目的和意义, 并指出论文写作的范围。引言要短小精悍、紧扣主题。 〈2）论文正文：正文是论文的主体，正文应包括论点、论据、论证过程和结论。主体部分包括以下内容： a.提出-论点； b.分析问题-论据和论证； c.解决问题-论证与步骤； d.结论。 6、一篇论文的参考文献是将论文在和写作中可参考或引证的主要文献资料，列于论文的末尾。参考文献应另起一页，标注方式按《GB7714-87文后参考文献著录规则》进行。 中文：标题--作者--出版物信息（版地、版者、版期）：作者--标题--出版物信息所列参考文献的要求是： （1）所列参考文献应是正式出版物，以便读者考证。 （2）所列举的参考文献要标明序号、著作或文章的标题、作者、出版物信息。 问题五：硕士毕业论文 绪论怎么写 小木虫 绪论对于硕士学位论文而言，并非可有可无，而是一篇成功论文的一个关键点。一般而言， 绪论应该包括一下内容： 一、选题的意义 该部分要写的内容是本文要解决的是什么问题，为什么要解决这个问题，不解决这个问题有什么危害或后果。也就是说作者发现了一个必得要研究解决的真问题。 写作的要求是： 1、问题要明确，不能太宽泛，没有边，比如一篇环境法的硕士论文不能上来就说环境问题如何严重等等。因为环境问题严重虽然是问题，但太大。 2、问题得是某种的矛盾，而不是一个现象。现象只是问题的表现形式，须得分析出现象背后的隐藏的矛盾。 3、问题得是法律问题，不能是其他学科或领域的问题。 4、如果可能， 论证一下这是一个真问题，而不是伪问题。 二、研究的范围 也就是说本文能够在多大程度上解决前述问题， 不能解决什么问题，还有那些问题留待解决等。其中可能还得界定相应的概念。 三、研究的方法 大多数硕士学位论文，能够充分运用规范分析法已属不易，实证研究在很大程度上是不现实的。因为研究的时间和经费都不允许作者进行实证分析。但如果能够充分占有已有的资料，也能够写出很好的论文来。 比较研究则或多或少都会用到一些。其他方法根据作者的能力选用。 四、研究的思路和进路或技术路线 本部分不是必须的， 可以根据情况来选择。 综上，问题最重要，一篇论文的成败首先取决于要研究的问题是否有价值，是否清楚? 问题六：硕士论文怎么写 您好，可以安排本科、硕士、博士等毕业论文，包修改，包通过，信誉保证，希望我的回答对您有帮助，望采纳！！！ 问题七：参考文献中引用别人的硕士论文怎么写 作者. 题名[D]. 学位授予地址：学位授予单位，年份.就可以啦 问题八：硕士研究生的论文怎么写？ 一、基本格式： 论文只能打印在每页纸的一面上，不得打印在正反面上。论文纸的大小尺寸为A4纸打印。侧面装订。 二、题名页： 论文题名页上打印格式基本相近，中、英文对照，中文题目页在第一页，英文题目页在第二页。一般由顶部往下三分之一页处打印论文题目，论文题目都用大写字母，下隔八行打印论文调查者姓名、所属电大，再下隔八行视实际情况打上提交日期XX年XX月XX日以及课程名称：论文项目设计 上述各项内容都应打印在论文题名页的中间部位。 三、摘要及关键词页 摘要及关键词页上打印格式同论文题名页，中、英文对照，中文题目页在上，英文题目页在下。一般根据提要的内容多少安排打印。中文题目摘要采用宋体一号，加粗，摘要正文部 无忧论文网 51lunwen/...7 分采用宋体，小四号。关键字题目部分采用宋体三号，加粗，关键字短语部分采用宋体，小四号。英文题目摘要采用Times New Roman字体，字号为一号，加粗，摘要正文部分采用Times New Roman字体，字号为小四。 四、致谢页 学员可以自选致谢页，一般不要求写中文。英文大标题采用Times New Roman字体，字号为一号，加粗，正文部分采用Times New Roman字体，字号为小四。 五、目录页 英文大标题采用Times New Roman字体，字号为一号，加粗，小标题部分统一采用Times New Roman字体，字号为三号，加粗。注意在右方注明对应的页号，中间虚线连接。 六、正文页 问题九：研究生小论文怎么写 让我根据上一年毕业的师兄的毕业论不 比较多,顺的肯定好 问题十：硕士毕业论文怎么写？硕士毕业论文的要求是什么？ 一般相关硕士毕业论文的内容都可在百度上去找的。 如果你不能自己完成，你可以到高质高价论文网看一下。 可应对高难度论文创作，写作也很精细。 企鹅.
动物生物技术是以大量的实验为基础，涉及的实验动物、生化试剂、仪器设备种类繁多，是一门非常强调实验技术和技能的学科，我整理了动物生物技术论文，有兴趣的亲可以来阅读一下! 动物生物技术论文篇一 动物生物技术实验室的安全监控和管理 摘 要 实验室作为高校教学科研的重要组成部分，其安全管理具有举足轻重的作用。目前，动物生物技术实验室在实验过程中需运用大量的生物组织、化学试剂、仪器设备等。生物组织的安全操作、化学试剂的合理归放以及仪器设备的正确操作和管理是科研顺利进行的基础条件。高校应加强 安全 教育 ，采取积极的防范 措施 ，保证高校实验室的正常高效运转。 关键词 动物生物技术实验室;安全管理;仪器设备 中图分类号：G482 文献标识码：B 文章 编号：1671-489X(2015)16-0166-03 随着科学技术的迅速发展，越来越多的高校纷纷设立动物生物技术实验室进行这方面的研究工作。动物生物技术是以大量的实验为基础，涉及的实验动物、生化试剂、仪器设备种类繁多，是一门非常强调实验技术和技能的学科，旨在培养具备生物学、医学、公共卫生学、环境保护和野生动物保护、基因工程、人类疾病模型和医药工业等基础理论知识和实践能力，能在动物生物科学领域前沿承担创新研究和管理的高级科学技术人才。 目前，大部分实验室都缺乏专业技术人员的管理、维护。实验室的使用、人员流动和内部管理产生许多新情况，其安全问题已经迫切地摆在人们面前。因此，如果希望实验室安全、顺利、高效地为教学和科研提供服务，就要求重视实验室的安全管理，进而预防事故的发生。 1 动物生物技术实验室现状 自2009年新版《实验室生物安全通用要求》(GB19489―2008)开始实施，国家检验检疫局和标准化管理委员会对生物技术类实验室的安全设施、安全管理体系做出统一的执行方案[1]。虽然国家把高校实验室的安全管理一直视为重点，人们的环保意识和安全意识也在不断增强，但免不了还有很多问题存在。例如：实验室的 规章制度 不能有效执行;师生的安全意识薄弱，管理混乱，不规范操作仪器，对化学有毒有害药品不合理归置;对实验动物质量检测、生物安全控制不重视，病原微生物检测实验室的设施条件未达到国家颁布的生物安全实验室标准;实验中产生的废弃物未进行无害化处理便与生活垃圾混放或倾倒入下水道，实验后的动物组织、尸体随意扔入垃圾桶;等等。这都为实验室的安全和人员的安全埋下了隐患。 基于此，本文提出一些关于动物生物技术实验室的安全管理措施来和大家共同探讨。 2 动物生物技术实验室安全管理的改进措施 加强人才队伍建设 实验室的安全监控离不开人的作用，提高专业技术人员的基本素质是做好实验室管理工作的基础。这要求实验技术人员不但要有扎实的理论基础、过硬的实验技能、良好的品德修养、较强的管理能力，还要能熟练掌握仪器设备的安全操作，解决实验中出现的种种问题[2]。 要达到以上要求，可通过如下途径： 1)认真学习实验室生物安全手册以及实验室安全管理的各项规章制度; 2)定期组织专业技术人员技能、仪器设备的安全规范操作、有毒有害试剂的管理等方面的培训; 3)定期举办实验室紧急状况的处理和应急程序的演练，如洗眼装置的正确使用、伤口的正确处理、水电安全的应急措施、紧急逃生能力等; 4)学校要对实验室加强监督与考核，以严格认真的科学态度对实验室进行计划管理、技术管理和经济管理，只有这样才能实现实验室的科学化和规范化[3]。 加强生物安全意识 动物生物技术实验室是一类与动物(小鼠、大鼠、豚鼠、兔、鸡、犬、羊、牛等)、动物组织(细胞、血液、皮毛、排泄物、组织器官等)密切接触的实验室。这些动物、动物组织可能携带一些已知或未知的病原体，通过各种方式(空气、器械污染、操作不慎等)对实验技术人员和环境造成污染。据报道，在过去几十年里，时有发生实验室相关感染的调查 报告 ，例如：2004年4月中国疾病预防控制中心病毒所实验室由SARS冠状病毒引起实验人员的感染[1];2011年3月，黑龙江省东北农业大学的27名学生及1名教师因使用4只未检疫山羊进行实验而感染布鲁氏菌病。为此，提出以下安全控制措施。 1)实验动物的来源确定及实验前观察。动物生物技术实验室所采购的动物，其来源一定要遵循国家的规定。所选动物必须是由符合《实验动物管理条件》《医学实验动物管理实施细则》的规定并取得动物检疫合格证明的实验室提供[4]。在实验前，要观察、了解参加实验的动物，掌握其生活习性与 饲养 要求;在预实验中，要对动物组织、器官等生理解剖部位、动物对各种处理因素的反应情况作初步评估，以便预防正式实验过程中，动物在生理、精神状态等方面可能出现的问题，确保实验过程的顺利进行。 2)实验过程中的安全操作。首先要进行外观检查，包括：毛色光泽是否清洁贴身，行动是否异常，头脸有无肿大，背有无穹起，四肢、尾和皮肤有无缺损，动物有无喘息、鼻分泌物增多、肛门不洁等现象。外观异常是某些疾病发病前出现的临床症状，是疾病诊断的前期信号。如鼠的唇部、四肢、尾部出现水肿和小疱，则有可能是得鼠痘病毒感染所致;小鼠出现斜颈、眼鼻分泌物增多，有可能是肺支原体感染所致。 其次，在实验过程中要有防护措施，根据GB19489―2004《实验室生物安全通用要求》，动物生物技术实验室应当具备生物安全防护二级水平[5]。具体要求如下： ①实验室制定生物安全手册及规章制度，限制非实验人员进入; ②远离公共区域，与外界进行有效隔离; ③硬件设施包括二级生物安全橱、个人防护设备、工作台(耐热、耐酸碱、耐有机溶剂消毒剂腐蚀)、通风系统、洗手池、眼部冲洗装置、防蚊纱窗; ④实验结束后，实验人员用消毒水泡手，工作服、手术器械要进行高温灭菌，离开后开启紫外灯。 3)动物尸体及组织的合理清除。动物尸体作为一种废弃物，要进行无害化处理。必须按照兽医卫生的要求和程序，严格动物尸体的收集、运输和无害化处理。在运输过程中，车厢需做到无泄漏、密封严格，小型动物需装入密封塑料袋中。常用的的无害化处理方式包括以下几种。 ①深埋法处理：在远离居民区、水源、泄洪区、草原和交通要道，挖深度不少于2米、能容纳动物尸体侧卧的坑，坑底铺2～5厘米厚的生石灰，将尸体放入使之侧卧，再铺上2～5厘米厚的生石灰，用土覆盖土层厚度不少于米，并与周围持平。 ②焚烧法处理：这也是处理尸体最彻底的 方法 ，一般用焚尸炉即可。 ③发酵法处理：将尸体抛入专门的尸体坑内，用生物热的方法将尸体发酵分解，堆尸体的坑封闭待尸体完全分解就可挖出作肥料[6]。 加强设备的统筹管理、化学试剂正确存放 1)对设备的管理。 一是明确职责：实验室管理人员对仪器的保管、使用及维护进行管理。 二是对仪器进行分类标识，标明每台仪器的编号、名称、使用部门、保管人等，同时在仪器醒目位置标明“合格”“准用”(仪器设备某些功能已丧失，但检测工作所需要的功能正常且经检定/校准合格者)“停用”标识[7]。 三是资源充分利用：将闲置设备为多个实验室共用，避免资源浪费。 2)药品的管理。 一是完善实验室管理制度。设立专职人员负责制，实验危险品入库前，必须进行检查登记，切实做到“四无一保”(无被盗、无事故、无丢失、无违章、保安全)和“五双”(双人保管、双人收发、双人领用、双把门锁、双本账目)[8-9]。 校内相关部门定期或不定期检查危险化学药品的登记记录(领、用、剩、废、耗)，核对账物，检查个体防护设备及实验室安全设备状况。 二是对药品进行集中存放和统一管理。根据药品的种类、性质，设置相应的通风、防爆、泄压、防火、防雷、报警、灭火、防晒、调湿、消除静电等安全设施，将药品存放在条件完备的专用仓库中。对实验危险品，特别是爆炸物品、剧毒物品，应严格遵守分类专库保存，精确计量和记载，严加保管，不得转送、转让给其他单位和个人，或用于食品、药品或其他非实验室使用。储存实验危险品的仓库内严禁吸烟和使用明火，并根据消防条例配备消防力量、消防设施以及通讯、报警等必要装置。 三是定期对实验室管理人员进行培训。进一步了解危险化学品的种类、性质、储存、使用管理规定，防护设备的正确使用以及必要的应急措施等，以便有效地防止事故的发生。 加强废弃物的清理措施 实验中产生的废弃物如卤素有机物、一般有机物、无机物废液要分别回收，不可混放，更不能作为生活垃圾随意倾倒，除了玻璃仪器的洗刷废水。且要注意剧毒废液应单独回收。集中回收后，可先对回收的废弃物做一些初步处理，处理时注意可能产生的发热、有毒气体、喷溅及爆炸等危险。对于危险性较小、普通实验室就可处理的废弃物可自行完成。如易挥发的有机试剂用量较小时，可使其在通风环境下向空气中自然稀释挥发;废酸、碱液，可加入相应试剂中和至pH值呈中性，再和大量水稀释后排入下水道;乙醇及醋酸之类有机溶剂，能被细菌作用而易于分解，经用大量水稀释后，即可排放;不富集重金属且不溶于水的此类溶剂，如乙醚可采用燃烧法进行处理(燃烧时装入铁制或瓷制容器，选择室外安全地方，点燃时取一长棒，站在上风方向点燃，监视至烧完为止)。其有害物质浓度不得超过国家和环保部门规定的排放标准。对于剧毒废液和过期实验危险品要定期联系专业的处理厂进行销毁，并做好处置记录。 实验室危险化学品管理是一种风险管理，认真研究探索适应新时期高校实验室危险化学品管理的措施非常必要，以切实保证学校实验教学及科研工作顺利进行[10-11]。 3 结束语 实验教学和实验室建设是高等学校教学和科研活动的重要载体，是培养学生较强的动手能力和创新能力的基地，是培养高科技人才的摇篮。必须本着预防为主、安全第一的原则，使学生树立安全意识和环保意识，自觉维护自身安全和环境安全。同时加强工作人员的业务培训，有效地排除可能发生的各种危险因素，保障实验室的安全、高效运行。 参考文献 [1]梁宏伟，王玉兵，陈发菊.浅谈分子生物学实验室安全管理及研究生的作用[J].中国电力教育，2012(7)：92-93. [2]张凌.浅谈实验室的科学管理与实验教学[J].科技信息：学术研究，2008(8)：168-170. [3]刘惠珠.浅谈高校实验室在人才培养中的作用[J].科技信息，2010(33)：215-216. [4]赵忠华，樊春玲，汪淑英.管理在医学动物实验实施中的意义[J].中国实用医药，2008(19)：204. [5]代小伟，刘云波.浅谈实验动物病理检测[J].中国比较医学杂志，2010(8)：65-68. [6]李亚妮，韩建业，张海利.浅谈当前动物尸体处理的现状、危害及对策[J].经济研究导刊，2009(16)：199. [7]向峰，王立前.做好实验室仪器设备的标识化管理[J].云南科技管理，2012(3)：45-47. [8]韩燕，王淑红，雷莉.生物化学与分子生物学实验室的安全监控和管理[J].西北医学教育，2011(1)：118-119. [9]莫寅斌.高校实验室管理中存在的问题及对策[J].实验科学与技术，2011(6)：175-177. [10]程月琴，刘春元，王杰.新形势下的实验室建设和管理[J].科技信息，2011(12)：1-9. [11]应佩蓓，杨奕，王磊.高职院校实验室危险化学品安全管理探讨[J].卫生职业教育，2011(23)：110-111. 动物生物技术论文篇二 生物技术专业动物生物技术课程建设与改革 摘要 动物生物技术是生物技术专业的一门专业必修课，针对该课程特点，从教学思想与目标、师资队伍、教材、课程内容、 教学方法 以及考核方法等6个方面探索该课程建设和改革思路，旨在提高该课程的教学质量，满足新时期人才培养的需求。 关键词 动物生物技术;课程建设;教学改革 中图分类号 G642;G420 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2013)01-0326-02 21世纪是生命科学的世纪。生物技术是人类科学技术发展历史中最悠久、对人类社会具有重大贡献的学科之一。随着分子生物学前沿学科的不断进步，生物技术也得到了突飞猛进的发展。动物生物技术是一门现代生物科学理论和技术相结合的综合性学科，主要涉及动物基因工程、动物细胞工程、动物胚胎工程等几大领域，在诸多行业都得到了广泛的应用，如农业、食品业、医学行业等[1]。生物技术这门学科在各大高校中都占有很重要的地位，可见该门学科的重要性，因此学好生物技术这门学科对今后的就业至关重要。笔者在介绍生物技术的概念的基础上， 总结 了动物生物技术课程的建设与改革措施，以期为学生的就业打下坚实的基础[1]。 1 生物技术的概念 生物技术是指在现代生命科学的基础上，利用各种先进的技术手段和其他类科学的原理和技术来对生物体或生物原料等进行加工或改造等，目的是生产出人类所需的产品。先进的工程技术包括基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程和蛋白质工程等新技术。对生物体的改造是指按照人类的需要，改造或加工生物包括植物、动物、微生物等，使其能够生产出对人类有利的产品[1-2]。 2 教学现状与分析 内蒙古农业大学生命科学学院生物技术专业自1996年开始招生，2006年成为内蒙古自治区品牌专业，经过了16年的专业建设，首先于2003级生物技术专业学生中开设36学时的动物胚胎工程课程(专业选修课)，随着现代生物技术的迅猛发展，36学时的理论讲授明显不足，于2005级学生中更改教学大纲，内容上增加了动物组织、细胞的培养技术、基因工程技术等，理论教学增加到54学时，并增加18学时实验教学，课程性质首次转为专业必修课，并创新性地更名为动物生物技术，当时整个生物领域还未出现命名为动物生物技术的课程，直到2009年5月1日，科学出版社出版了普通高等教育十一五规划教材《动物生物技术》，至此这一新课程有了正式出版的教材可参考。笔者调查了部分农林院校生物技术专业开设的主干课程，主要有11门(动物学，植物学，微生物学，生物化学，遗传学，细胞生物学，分子生物学，基因工程，细胞工程，发酵工程和酶工程)，在调查的农林院校中(安徽农业大学，西北农林科技大学，山东农业大学，湖南农业大学，吉林农业大学，东北林业大学，青岛农业大学，江西农业大学，福建农业大学，华中农业大学，华南农业大学，云南农业大学)，都开设《细胞工程》课程，目前只有内蒙古农业大学生命科学学院生物技术专业开设与《细胞工程》相近课程《动物生物技术》和《植物生物技术》课程。 3 动物生物技术课程建设与改革 教学思想与目标改革 落实科学发展观，逐步树立“以学生为中心”、“一切为了学生”的意识。教师要改变传统的教学观念[3]，正确处理传授知识与提高学生学习能力之间的关系，使学生在学习一些课程基础知识的情况下，掌握一种主动学习课程相关知识的能力，成为富有知识和具有学习知识能力的复合型人才。 师资队伍建设 组建教学团队，将教学内容分为不同的教学模块，打破传统的一人一课的教学模式，每一模块由具有相应专业背景的教师承担，业务上要精益求精，力争紧跟各教学内容的学科前沿。定期开展教学研讨，督导组专家听课、评课，同时不定期开展自评和互评及学生评教，以促进整体教学水平的提高。 教材建设与改革 根据调研，笔者选用了科学出版社出版的普通高等教育十一五规划教材――蒋思文教授主编的《动物生物技术》作为教材，该书比较全面系统地介绍了动物生物技术的概况、基本原理、技术方法和最新发展。同时，由于课时的限制，在教学过程中，不可能做到面面俱到，且课程知识更新速度较快，一些最新 热点 在教材中没有体现的，自行编写部分讲义，以文本形式拷贝给学生，并推荐其阅读中外文的优秀参考书。 课程内容改革 动物生物技术属于多学科交叉课程，也是各国科研工作者研究的热点领域，大量的研究成果层出不穷，也在不断地更新和充实着这一新兴学科的知识。无论是教师的教，还是学生的学都具有一定的难度，这就要求在授课内容的选择上，既要注意授课内容的完整性，又要保证实用性和先进性，同时做好与其他课程交叉内容的增、减和衔接。在课程内容上，首先介绍绪论，动物胚胎工程技术概述，体外受精，胚胎移植，性别控制，胚胎分割，嵌合体;其次，介绍分子生物学及基因工程基础;最后重点介绍细胞核移植技术、干细胞技术、转基因技术、动物生物反应器、动物细胞培养技术，动物细胞融合技术，杂交瘤技术和单克隆抗体技术。通过精心的安排，使学生能在有限的时间内，全面系统地了解动物生物技术课程体系的基本内容。 教学方法改革 利用重大科研成果，激发学生学习的兴趣，提高其学习的主动性。如美国科学家马里奥?卡佩基、奥利弗?史密斯和英国科学家马丁?埃文斯，利用“基因靶向”技术让小鼠体内的特定基因失去活性，培养出研究价值极高的“基因敲除”小鼠，为人类遗传病研究提供了药物试验的动物模型。有了这些动物模型后，人类就能更有效地找到治疗各种遗传病的新疗法，彻底攻克遗传病就为时不远了，这一成果使得他们一起获得2007年诺贝尔生理学或医学奖。罗伯特?杰弗里?爱德华兹爵士，英国生理学家，生殖医学的先驱者，因创建了“体外受精技术”，被授予2010年诺贝尔生理学或医学奖。一门课程的讲授，不但要使学生掌握和了解课程相关的一些基础知识，更重要的是要教会学生如何通过有效途径尽可能的获取更多的、更丰富的相关知识，特别是对于像动物生物技术这样一门新兴的学科领域，许多知识都处于动态更新和完善的过程中[1]。 跟踪学科科研动态，开拓学生视野，培养 创新思维 。本科生的课堂教学过程不仅仅是传授书本知识，更重要的是启发学生的开拓性思维能力和创新意识，培养和提高其发现问题、分析问题和解决问题的能力[3-5]。因此，在应用范围广、知识更新快的动物生物技术教学过程中，介绍学科研究的新动态和新进展，有意识地拓宽学生视野，打开学生思路，培养学生创新性思维是十分必要的。例如诱导多能干细胞(Induced pluripotent stem cell，IPS cell)，由日本的2位科学家于2006年发表于世界顶级杂志《Cell》上。通俗地讲，就是通过某种方法，把高度分化的成体细胞去分化，使之成为多能干细胞，重新获得分化成多种细胞的能力。IPS技术是干细胞研究领域的一项重大突破，它回避了历来已久的伦理争议，解决了干细胞移植医学上的免疫排斥问题，使干细胞向临床应用又迈进了一大步，该成果的研究者获得了2012年的诺贝尔生理学或医学奖。随着IPS技术的不断发展以及技术水平的不断更新，它在生命科学基础研究和医学领域的优势也已日趋明显[6]。 创新教学形式，提高教学效果。在课堂教学过程中，要认真倾听学生意见，像朋友一样对待学生，拉进教师与学生的距离，让学生感受课堂 文化 ，使其融入其中，积极思考，成为课堂的主体。同时可适当增加专题讨论会，通过学生准备ppt演讲等形式，一改以往整节课教师讲、学生记，缺乏沟通的模式，使学生处于主动学习的状态[7]。 优化多媒体教学，引入现代信息技术。利用有限的课时，着重讲授课程的重点、难点、关键点、知识点间的联系，引导学生自觉地去思考，对于容易掌握的部分课程内容可安排学生自学。利用计算机和Internet等手段，从国外引进和下载原版图书和动感图像，进行多媒体教学，可以有效提高教学组织效率，充实教学内容。不仅可以多层次、多角度地向学生提供丰富多彩的教学信息，还可以提供更加生动形象的人机交互界面，充分调动学生学习的积极性[8]。例如，细胞融合，精卵受精，细胞核移植等内容。在多媒体教学中，坚持适度运用原则和有机结合原则，留出足够的时间给学生理解、思考，且结合使用板书、实物等各种教学媒体，取长补短，将教学内容化繁为简，增强教学的生动性和创造性，使学生喜欢学习[2]。 考核方法改革 首先，改变以往的考核方法，将重视课本上的知识转变成重视实践、将重视成绩转变成重视课堂教学，今后不以单一的考试成绩为总成绩，而要加上一定比例的实践考核成绩，让教师、学生都能重视实践;其次，增减考核方式的多样性，以平时成绩、实验成绩、期中成绩和期末考试等作为综合考查学生学习成绩的考核体系，即20%平时成绩、20%实验成绩、20%期中成绩和40%期末成绩[9]。 4 结语 随着科学技术的快速发展，动物生物技术方面的研究也会更加深入，因此各个高校要建设好动物生物技术专业已迫在眉睫。课程组立足于内蒙古农业大学生命科学学院自身特色，通过分析生物工程、生物技术、制药工程3个专业之间的内在联系，准确把握动物生物技术课程的教学地位，注重该门课程特点，围绕课程内容，加强教学建设，创新教学形式及考核体系，逐步完善优化动物生物技术多媒体教学，提高教学质量，达到人才培养的目的和要求[10]。 5 参考文献 [1] 王伟霞，李福后.生物技术专业《细胞工程》课程建设与改革[J].科技创新导报，2008(9)：245. 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从20世纪70年代中期开始，就有人尝试用各种办法向动物体内转移外源基因。如将牛奶成分中特有的基因转移到白鼠体内，这些外来基因在白鼠体内重组后，白鼠分泌的乳汁便含有牛奶成分。这种通过人工方法获得外来基因的白鼠，称为转基因鼠。 转基因动物技术的核心，是把遗传的功能单位——基因转移到动物体内，使它成为动物体内的一部分。被转移的基因可以来自同种或异种动物，也可以来自植物或微生物。这样一来，就打破了物种之间的界线，也可以说动物能与植物、微生物杂交了。不过目前的杂交是低水平的，只限于主管一两个性状的一两个基因。随着科学技术的发展，一次可以转移的遗传信息将越来越多，那时就可以实现真正意义上的动植物之间的杂交。从科学上讲，这将是一个大突破。 目前，世界上已报道了多种生产转基因动物的方法，但真正成熟并可以稳定生产转基因动物的方法只有两种，即显微注射DNA的方法和精子介导的基因转移法。 显微注射DNA的方法是对单细胞的胚胎进行基因操作，涉及复杂的操作步骤。首先是要准确掌握母畜的性周期，在此基础上加以人工调节，使母畜在预先确定的时间排卵，保证获得大量的刚刚受精的单细胞胚胎。第二步是用手术或非手术的方法收集单细胞胚胎，经短暂的离心处理后，放在显微镜下用口径1 μm玻璃微管向细胞核注射500～600拷贝基因。然后把经过DNA注射的胚胎移植到另外一头处于相同性周期的母畜的体内。经过这样处理后，在后代中就会出现1%～3%的转基因动物。效率虽然不高，但结果相当稳定。全世界已在各种动物身上进行了上万次的试验，都能生产出转基因动物。 精子介导的基因转移是把精子作适当处理后，使其具有携带外源基因的能力。然后，用携带有外源基因的精子给发情母畜授精。在母畜所生的后代中，就有一定比例的动物是整合了外源基因的转基因动物。同显微注射方法相比，精子介导的基因转移有两个优点：首先是它的成本很低，只有显微注射法成本的1／10。其次，由于它不涉及对动物进行手术处理，因此，可以用生产牛群或羊群进行试验，以保证每次试验都能够获得成功。 生产转基因动物的研究自20世纪90年代以来日趋活跃，转基因动物技术的实用意义是：①生产出性状优良的家畜家禽，如长得快的，繁殖力高的，能抗病的等；②利用动物体作为反应器，生产珍贵的蛋白质，如一些只能从人体内提取的蛋白质；③利用动物作研究模型，比如，知道高血压症是由某种原因造成，可以生产一些高血压小鼠，让医生在小鼠身上试用各种疗法；④生产玩赏动物，如同猫一样大的小马，如同鼠一样大的兔子，以及各种不同毛色和花纹的观赏动物。 在转基因动物方面，我国也取得了许多可喜的成果，目前已获得了转基因鱼、兔、鸡等多种转基因动物。1998年2月中国科学家又获得了在所分泌的乳汁中含有蛋白凝血因子X的转基因山羊。把两只老鼠放在一个仿真环境中，并将其中一只小白鼠的压力基因全部抽取出来，结果那只未被抽取压力基因的灰颜色的老鼠走路或者觅食物总是小心翼翼的。 在那个面积约500平方米的仿真自然环境里面，灰老鼠一连生活了十几天，没有出现任何意外。它甚至开始为自己积蓄过冬的食物，也开始习惯这一种没有人类恐吓的空间。而另一只被抽取了压力基因的小白鼠则从一开始就生活在兴奋之中。小白鼠只用一天时间把500平方米的全部空间都大摇大摆地观察了一遍，灰老鼠用了近四天的时间才把整个仿真空间全部熟悉。小白鼠爬上了仿真空间高达13米的假山，而灰老鼠最高只爬上了盛有食物的那个仅高2米的吊篮。 结果是小白鼠在仿真空间的第三天，因为没有任何压力而爬上了那个高达13米的假山，在试验能不能通过一个小石块时一下子摔了下来，死了。而灰老鼠因为有一定的压力，它鲜活地出来了。