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上海复旦mem项目招生人数是50人，去年入学上海复旦mem项目录取分数线分别是C：175/50/100；B：190/50/100；A：205/50/100（其中C对应的是面试优秀、B对应的是面试良好、A对应的是面试还行）。MEM一般指工程管理硕士。工程管理硕士（MasterofEngineeringManagement，简称MEM），专业代码125600。是2010由中国工程院提议，委托清华大学进行学科论证，同年批复新设置的一种专业学位。如果想要以很好的成绩考入，可以去专业的辅导机构进行学习一下。比如社科赛斯就是一个不错的考研辅导机构。凭借优质的教资和具有独特性的教学方案，帮助不少的学生完成了研究生的梦想。
两个都还不错，只有结合自身的实际情况，选择一个适合自己的才是最好的。在选择学校时，可以从以下几个原则来看：1、结合高校的师资力量、授课方式、教学方法来考虑选择院校。2、考量高校的MEM项目积淀，包括校方品牌影响力、综合资源、学校文化等。3、考虑学费，交通等客观因素是否适合。4、通过职业规划来明确自己的选择方向以及侧重点。从以上几个方面来看，社科赛斯能够帮助你做出更好选择，社科赛斯图书包括《管理类、经济类联考写作高分突破》、《管理类、经济类联考逻辑决胜1000题》、《MPAcc复试高分指南》、《MBA面试高分指导》等，其中深受广大师生欢迎。
上海复旦大学的MEM教学质量是非常好的。复旦大学信息科学与工程学院（简称“信息学院”）组建于2000年5月，其前身是1982年重建的电子工程系、1954年设立的光学学科和1975年建立的计算机科学系。学院原下设六系二院，2008年5月，根据学校学科建设发展需要，学院调整为四系一院，下设电子工程系、光科学与工程系、通信科学与工程系、微电子学系以及依托学院的微电子研究院。2008年12月22日，根据学校决定，复旦大学光源与照明工程系（简称“电光源系”）并入信息学院。2013年4月，根据学校学科建设发展需要，学院进一步调整为四系一中心，即电子工程系、光科学与工程系、通信科学与工程系、光源与照明工程系及微纳系统中心。学院现有格局基本形成。
同学你好，从2019年开始，复旦大学开始开设mem专业喽。复旦大学在职mem属于信息科学与工程学院，目前开设项目管理以及物流工程与管理两个专业。项目管理：招生人数：30人学费：12万元人民币（待审核）学制：3年物流工程与管理：招生人数：20人学费：12万元人民币（待审核）学制：3年上海交大mem项目招生有三个学院，分别是：机械与动力工程学院，电子信息与电气工程学院，材料科学与工程学院。三个学院共计划招生300人左右。交大mem项目成立的比复旦大学早，所以mem项目更成熟一些，当然竞争也会大一些。复旦大学是2019年刚成立mem项目，分为两个研究方向，教学质量不会差，毕竟是复旦大学，而且刚成立不久，竞争会低于些，对于想考名校的同学来说，是个机会。建议各位同学还是根据自身的发展方向来选择项目，适合自己的才是最好的，教学质量这两个院校在上海都是最好的。
"港大-复旦IMBA项目的含金量毋庸置疑，但你说的“更好”是个主观问题，“更好”永远是更合适你自己的。要选出最适合自己的方案，我们可以简单考察这个项目和其他项目之间的区别：师资：港大-复旦IMBA师资由复旦大学和香港大学名师组成，各占50%左右。课程：港大-复旦IMBA是国际MBA项目，采用国际化教学模式，参照香港大学关于MBA的教学要求，需要完成12门必修课（含1门香港必修课及1门Capstone顶点课程），7门选修课，无需撰写论文。学生构成：70%来自于外资企业；学生平均年龄为35岁，工作年限为11年，管理年限为6年，甚至超过了EMBA的最 低年限要求（8年）。申请方式：港大-复旦IMBA多年来一直实行全 国工商管理硕士入学联考（GRK）和GMAT兼收的选拔标准。2019年，本科毕业取得学士及以上学位、有3-7年（不含7年）工作经验的报考者，可以通过GRK或者GMAT成绩两种方式“二选一”申请。本科毕业取得学士或以上学位者，有7年以上工作经验、3年以上管理经验者，可选择参加自主新东方英语笔试，或选择以TOEFL、IELTS、GMAT、GRK的有效成绩或海外学位，申请免英语笔试。通过GRK或GMAT方式第 一志愿申请并被录取的学生，均有机会申请各类新生奖学金。2019年该项目预计发放奖学金总额度达200万元，覆盖率近40%，一等奖学金学费全免。授课模式：港大-复旦IMBA是非全日制MBA项目，采用模块制中英文授课，一个月集中授课一次，周四-周日连续四天，学制为两年。定制化的授课模式和灵活的申请周期，为报考者在时间上提供更多选择，在繁忙的工作与紧张的备考之间取得最 佳平衡点。而其他常规MBA项目通常采用学期制授课。学位学历：港大-复旦IMBA学成后获得香港大学工商管理（国际）硕士学位；学位证书可通过教育部留服中心认证后获得相应学历学位证明；复旦大学管理学院提供学习证明书。境外学位与国内大陆高校不同，只提供学位证书，学成之后所获学位可以在中国教育部留学服务中心进行学历学位认证。教育部留服中心会颁发相应的认证书，表明对该学位的认可，认证书上同时会写明该学位表明其具有相应的学历。所以，如果你的职业发展规划更倚重国际教育背景和国际视野、经验；英文听说读写俱佳；希望兼顾工作与修炼；手头又多金，那么对于你来说，港大-复旦IMBA项目显然是更好的选择。如果你的发展更倚重本土资源；有更多时间可以投入；而全日制的双证对你突破职业发展瓶颈来说更有一劳永逸的说服力，那么复旦MBA项目更值得考虑。大概就这些，仔细权衡一下吧。希望对你有帮助！"
复旦MBA项目是中国开办最早、最具品牌影响力和最受考生欢迎的MBA项目。自1991年成立至今，复旦MBA项目坚持专业化的精神，荟萃精英、开拓进取、努力打造亚洲一流、世界著名的MBA项目。从2006年起，复旦MBA先后成为PIM和GMAC成员，并获得EQUIS,AACSB等认证，并在2018年英国《金融时报》全球商学院MBA排名中，位列第42名。复旦MBA项目目前已经培养了9000余名MBA毕业生，他们遍布在全国以及世界各地众多行业和领域，很多已经成为企业的中高级管理人才。判断MBA院校的含金量，除了基本的院校排名，院校认证之外，主要还是看你自己目前的工作状态以及未来发展方向。复旦MBA相对来说比较注重文科，录取的学员行业主要以：金融服务、工业品、信息通讯等为主。复旦MBA项目包括：非全日制MBA项目、全日制IMBA项目、全日制S3亚洲MBA项目、复旦-港大IMBA项目、复旦-BI（挪威）MBA项目。复旦MBA分数线为自主划线，以2018Ian在职MBA中文项目为例，中文项目A档：联考两门总分220分及以上，外国语不低于80分，综合能力不低于135分；中文项目B档：联考两门总分205分及以上，外国语不低于70分，综合能力不低于125分；中文项目C档：联考两门总分175分及以上，外国语不低于60分，综合能力不低于105分；复旦MBA报考的基本要求：1、（至入学时）本科毕业满三年，大专毕业满五年，研究生毕业满二年（如有变化，以教育部规定为准）；2、考生需参加复旦MBA组织的预审，在联考前完成背景评估和面试，联考后不再安排复试（详见申请流程）。除了这些基本要求外，随着复旦MBA知名度及报考人数的上升，还对考生的学历背景，职业背景，认知及表达能力，领导力等各方面都有较高的考核要求。参考资料：HZMBA
说实话，复旦MBA近几年都已经不怎么样了，有点暮气沉沉的感觉了，建议还是选择交大下面的三大学院吧：中欧、安泰、高金，应该这个学院任何一个都比复旦好
MBA是工商管理硕士，当然比本科学士高水平。能考可以考。得看你是哪所MBA院校毕业的了。清华北大这样的学校肯定好，很难考。后面职业发展如何，也得结合你上学前的工作履历来看。如果以前管理经验丰富，在名企或创新型企业，那再加上名校MBA的教育背景，应该会发展得不错。如果目前没有作为管理层在工作，我是觉得管理能力更多的需要实践经验。看个人情况吧，考研是对自己的提升。至于学不学到东西，真心看人来。学习这件事太功利只会事倍功半，你不管学什么所花费的时间和金钱都不会是浪费，取得硕士学位，眼界、圈子、思维都会上升一个台阶，而成功的事业和生活与这些密切相关。至于选择MBA还是学硕还是什么，取决于你自己的职业规划和兴趣，考虑“烂大街”的逻辑反而是次要的，因为只要是好的证书就会有人考，考的人越多就越泛滥，越泛滥就越难，这是一个市场问题，不是你需要考虑的。
近年来着重进行的问题研究为：行政中的公众参与问题研究、行政立法问题研究、政府依法行政问题研究、社会保障制度改革与完善问题等。作为项目负责人，目前正在承担国家社会科学基金项目《依法行政的有效路径研究》（批准号：06BZZ014）。此外，作为项目负责人已经研究结项的课题为北京科技大学2002年自选课题《中国自由民主理念的源头》，2004-2005年北京科技大学一般项目《医疗体制改革的价值取向与行为选择》，2006-2007年北京科技大学一般项目《我国土地听证制度研究》。作为主要参加人于1999-2000年参与吉林省政府项目《为民执政 科学理政 依法行政 从严治政》研究。近年来出版著作1部，参与编写著作7部，发表文章40余篇。已经指导和正在指导的MPA毕业论文选题如下：2004年，《医疗领域“红包现象”分析》、《论我国地理标志的行政保护》、《我国政府打假问题分析与对策建议》、《我国质量监督管理标准问题探析》；2005年，《中国工伤保险制度运行问题分析与对策建议》、《转型期我国社区矫正问题研究——以北京市为例》、《行政许可法对公安行政管理影响分析》、《我国法医鉴定相关程序之研究》、《规范我国药品广告市场的对策研究》；2006年，《我国食品安全监管机制研究》、《试论我国权力机关对行政立法的监督》、《关于加强我国水权市场管理的研究》、《我国土地听证制度问题研究——以济宁市辖区征地补偿标准听正会为例》、《中国统筹城乡养老保险制度初探》；2007年，《城市化进行中的失地农民社会保障问题研究——以山东省泰安市某区为例》、《泰安质量技术监督局实施食品作坊区域监管责任制研究》、《海东地区“三农”问题研究》、《政府规章以下行政规范性文件问题分析和对策研究》、《公共图书馆提供中的政府责任分析》。
会。mpa毕业论文需要收集、分析和解释数据，尤其是涉及公共政策和管理问题的论文，是会涉及数据的。mpa学位论文的写作是mpa研究生培养的重要环节，mpa学位论文可分为学术型和应用型等，以应用型为主。
这个论文还是很难写的，可以从以下几个方面来了解一下：1、学术价值和现实要求。MBA论文的学术价值体现在揭示经济生活和管理过程中的规律、探求真理，寻找解决问题的途径和对策，促进企业成长、推动经济发展。因此从这个意义上说，凡是有学术价值的课题，都应在选择之列。2.、题目不宜大。选题要考虑自身的主、客观条件，从实际出发，量力而行。主观条件主要是指个人的理论基础、知识面、知识层次、文字功底、兴趣和科研能力等。3.写熟悉的对象。MBA学员都有一定时期的工作经验和社会阅历。工作、生活中会遇到各种各样的经济、管理方面的问题，处理这些问题可能正是自己的专长所在，以此确定选题不仅写起来容易得多而且富有现实意义。而对于想报考在职研究生的同学是可以选择到社科赛斯公司进行了解，社科赛斯公司成立于2002年，到目前为止已有十九年的悠久历史，是一家专注于为考研学生创造的公司，致力于为这些考研学子打造一家有内涵、有质量、有保障的考研辅导公司，并且是一家线上线下结合的综合性硕士入学规划、辅导机构。其综合实力是非常强大的。并且社科赛斯公司的师资力量是非常强大的，汇聚了全国多个著名高校的的研究生毕业生组成的专业考研辅导机构，其专业性是非常好的，各个著名高校的研究生给你毕生汇聚一堂必然使得社科赛斯公司的专业性和专业能力是非常突出的。其核心业务涵盖考研全程规划、考研试题教研、教材规划出版、考研教学实践、研究生入学专业课辅导、复试（面试）规划指导、考研资讯发布等，是一家线上线下结合的综合性硕士入学规划、辅导机构。
复旦大学本科毕业论文不可以缓交。原因是：复旦大学本科毕业论文管理条例规定：学生必须按教学计划要求参加并完成毕业论文，实际工作时间不少于12周。
一个月。经查询上海复旦大学官方网站得知，上海复旦大学自考毕业论文需要写一个月的时间。复旦大学（FudanUniversity）是中华人民共和国教育部直属、中央直管副部级建制的全国重点大学，世界一流大学建设高校（A类）。
本科毕业论文书写规范一、本科生毕业论文主要内容1. 题目 （宋体，小二，居中）2. 中文摘要(200字以上)，关键词；字体：宋体、小四号，字符间距：标准；行距：20磅3. 英文摘要，关键词；4. 目录5. 正文；字体：宋体、小四号，字符间距：标准；行距：20磅6. 参考文献。期刊内容包括：作者 题名，刊名，年，卷(期)：起始页码-结束页码。著作内容包括：作者、编者，文献题名，出版社，出版年份，起止页码。7. 附件：开题报告和检查情况记录表二、格式要求1. 书写格式要求：填写项目必须用碳素或蓝黑墨水钢笔书写；2. 文稿要求：文字通顺，语言流畅，版面整洁，便于装订。Word文稿A4纸打印。3. 图纸要求：图面整洁，布局合理，线条粗细均匀，圆弧连接光滑，尺寸标准规范，文字注释必须使用工程字书写；4. 曲线图表要求：所有曲线、图表、线路图、流程图、程序框图、示意图等不得简单徒手画，须按国家规范标准或工程要求绘制；5. 公式要求：所有公式不得徒手书写，利用Microsoft公式编辑器或Mathtype编辑。三、毕业论文份量要求：毕业论文字数一般不少于万字或相当信息量。外文文献阅读量的具体要求，由指导教师量化。四、毕业论文规范审查工作由指导教师具体负责，从毕业论文质、量、形式等规范方面对论文答辩资格进行审查。审查合格者方能参加答辩。凡质、量、形式等方面审查不合格者，应责令其返工，直到达到要求为止，否则不准参加毕业答辩。对于在校外进行毕业论文的学生，其论文答辩资格审查回校进行。五、毕业论文档案应包括以下内容：1. 复旦大学毕业论文（设计）封面（教务处统一印制）；2. 毕业论文，包括题目及目录、开题报告、内容提要、正文及相关图表、参考文献及其他附件等；3. 指导教师、答辩委员会评阅意见、成绩评定表；4. 其他附件；该档案一式三份，原件留存院系，其余指导教师和学生各留一份
毕竟现在都一直在提倡“小政府，大社会”，虽然这个专业在内地才刚刚起步，可是在以后的10年里会有相当大的发展社会工作这个专业在内地来说前景还是非常不错的，以后社会工作就会成为社会中的一种润滑剂社会工作硕士(MSW)是个什么性质的专业啊,哪位专业点的能告知一下此专业的就业前景怎样呢?： 社会工作硕士(MSW)是个什么性质的专业啊,哪位专业点的能告知一下此专业的就业前景怎样呢? 本人已经...社会工作专业硕士最新院校排名是怎样的： 目前社会工作专业学位硕士研究生招生院校:安徽大学、长春工业大学、安徽师范大学、吉林农业大学、北京大学...南师大有社会工作专业型硕士研究生吗?： 南师大有社会工作专业型硕士研究生吗?有,是第二批批准招收MSW的学校。... 有,是第二批批准招收M...社会工作硕士MSW 复旦大学和社科院哪个更好： 复旦的社工是和港大、港中文合办的,有联合培养的机会。上次的全国专业评测是第一的。社会工作的研究生毕业去向是什么啊?很矛盾!： 不少社工专业的学生觉得自己“就业前景太不乐观”了,专家认为,造成这种“不...社会工作专业博士 社会...MSW社会工作专业硕士毕业是什么学位?报考公务员可以报哪些呢?： 这个,你们的是统招的全日制学校的话,学位是硕士,学历是研究生。 考公务员的话,你可以进中公网网上或者...在广东开办MSW社会工作硕士的学校有几所啊. 录取情况怎么? 好考吗?： 有中山大学和江西财经大学MSW广东教育中心 . 录取情况嘛.江西财大因该通过情况好些. 他们教育中心...哪些学校今年开始招收社会工作硕士MSW了?： 哪些学校今年开始招收社会工作硕士MSW了?河北省有么?河大有么?好考么?...社会学就业前景
社会学硕士在职研究生同社会工作硕士专业学位MSW的区别？社会工作硕士MSW社会工作研究生根据培养类型可分为“学术型学位”硕士研究生（社会学硕士社会工作方向）和“专业学位”硕士研究生（社会工作硕士MSW）。1、培养目标的区别。“学术性学位”（academic degree）与“专业学位”（professional degree）处于同一层次，但培养规格各有侧重，在培养目标上有明显差异。“学术性学位”按学科设立，其以学术研究为导向，偏重理论和研究，主要培养大学教师和科研机构的研究人员；而“专业学位”以专业实践为导向，重视实践和应用，培养在专业和专门技术上受到正规的、高水平训练的高层次人才，授予学位的标准要反映该专业领域的特点和对高层次人才在专门技术工作能力和学术能力上的要求，其突出特点是学术性与职业性紧密结合，获得专业学位的人，主要不是从事学术研究，而是从事具有明显的职业背景的工作。2、教育类型的区别。“学术性学位”与“专业学位”在培养目标上各自有明确的定位，因此，在教学方法、教学内容、授予学位的标准和要求等方面均有所不同。就“社会学社会工作方向”研究生而言，国内各社会学研究生培养单位主要招收“全日制学术型研究生”，学制一般两到三年；而“社会工作硕士专业学位”研究生明确划分为“全日制专业学位研究生”、“非全日制专业学位研究生”两种类型，学制一般两年。3、入学方式的区别。“社会学硕士社会工作方向”研究生需要参加每年年初的全国研究生“统考”入学考试；而“社会工作硕士专业学位”研究生的招生考试有10月份的“联考”和年初的全国研究生“统考”两次机会，考生可以自行选择，10月份“联考”入学的是按非全日制培养的，而参加全国研究生“统考”入学的是按全日制培养的（注：由于我国的社会工作硕士(MSW)从2010年才开始正式招生，培养方式有全日制和在职攻读两种。具体招生事宜如有变动，请以官方正式消息为准）。 4、毕业待遇的区别。“社会学硕士社会工作方向”研究生在培养单位脱产学习，毕业后通过学位论文答辩，就可以获得毕业证、学位证。“社会工作硕士专业学位”研究生分全日制和非全日制研究生两种，全日制专业学位研究生与学术研究生一样，在培养单位脱产学习，毕业后通过学位论文答辩，就可以获得毕业证、学位证；非全日制专业学位研究生，因不是脱产学习，通过论文答辩后，可以获得学位证，但是没有毕业证。5、招生院校的区别。就“社会学社会工作方向”研究生而言，根据学位委员会《社会工作硕士专业学位设置方案》（2009年2月20日）提供的数据，目前我国共有社会学一级学科硕士点17个、社会学二级学科硕士点61个，2003年以来，中国人民大学、北京大学、中山大学、中南民族大学等高校陆续在社会学或公共管理等学科下招收培养社会工作方向的研究生。就“社会工作硕士专业学位”研究生而言，社会工作硕士是2009年增设的一种专业学位，根据学位委员会办公室《关于开展社会工作硕士专业学位教育试点工作的通知》（学位办[2009]44号）精神，全国首批开展社会工作硕士专业学位教育试点工作的研究生培养单位一共有33所，其中部委属院校18所，地方高校15所。社会工作硕士专业学位招生从2010年开始，列入全国硕士在职研究生统一招生计划管理。考研政策不清晰？同等学力在职申硕有困惑？院校专业不好选？点击底部官网，有专业老师为你答疑解惑，211/985名校研究生硕士/博士开放网申报名中：
分子生物技术在微生物降解环境 污染物中的应用 [摘要〕介绍了与环境微生物关键降解酶基因的筛选、克隆及应用相关的分r生物技术，包括聚合酶链式反应技 术、基因重组技术、荧光原位杂交技术和生物信息学等技术，并对这些技术在污染物降解基因检测、筛选和克隆方 面的应用进行了阐述与探讨、 [关键词]分子生物技术;微生物;基因;环境污染物;降解 随着现代j:\地技术的发展，多环芳烃、含氯有 机物和硝基苯类化合物等人工合成井难以降解的 污染物大量排放，造成世界范围内的环境污染和生 态破坏，严重地威胁人类和其他生物的正常生存和 发展。利用微生物修复技术对受污染的水体及土 壤进行处理，凸显了其重要的意义和可行性。研究 人员发现并筛选到一些微生物，它们不仅对环境有 较高的适应性、对污染物有较高的耐受性，而且对 污染物有较强的降解效率和专一性。然而环境中 存在的大量微生物中仅有少于1%可通过传统的培 养方法进行培养、分离和纯化，绝大多数细菌需要 非常严格的营养条件川。因此，为了对修复环境有 所贡献却难以培养的微生物进行更全面了解，也为 了筛选到更多有利于降解环境污染物的微生物菌 种及其关键酶基因，分子生物技术和手段逐渐被广 泛应用到环境可降解污染物及降解机理方面的研 究中。 本文对近年来发展起来的聚合酶链式反应 (PCR)技术、基因重组技术、荧光原位杂交(FISH) 技术和生物信息学等多种分子生物技术进行了介 绍，并总结了它们在污染物降解基因检测、筛选和 克隆方面的应用。 1与环境污染物降解相关的分子生 物技术 及其相关技术 PCR是一种利用脱氧核糖核酸(DNA)半保留 复制原理，在体外扩增位于两段已知序列之间的 DNA区段从而得到大量拷贝的分子生物技术。根 据其模板、引物来源或扩增条件的不同，PcR技术 可分为以下几种:(l)反转录pCR(RT一PeR)技 术，将mRNA反转录为cDNA后再对其进行PCR 扩增，可用来构建cDNA文库，分析不同生长时期 的mRNA表达状况和相关性以及mRNA的定量测 定等;(2)巢式PCR技术，在扩增大片段目的DNA 时，先用非特意性引物扩增再用特意性引物对第一 次扩增产物进行第二次扩增，以获得可供分析的 DNA;(3)竞争PCR技术，是一种定量PCR，向PCR 反应体系中加人人工构建的带有突变的竞争模板， 通过控制竞争模板的浓度来确定目的模板的浓度， 对目的模板作定量研究;(4)实时荧光定量PCR技 术，在PCR反应体系中加人荧光基团，利用荧光信 号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线 对未知模板进行定量分析，该法已广泛用于基因表 达研究、转基因研究等方面;(5)扩增的rDNA限制 酶切分析技术，根据原核生物rDNA序列的保守性， 将扩增的rDNA片段进行酶切，通过酶切图谱来分 析菌间的多样性;(6)RNA随机引导PCR技术，基 于任意寡核昔酸引物与RNA之间可能的配对，在 低严谨度条件下经聚合酶催化使链延伸，将细胞总 RNA或InRNA作为反转录反应的模板，此技术结 合单链构象多态性，用非变性胶分辨大小相同而构 象不同的片段，可用于诊断遗传突变及分析污染条 件下序列的多态性;(7)随机扩增多态DNA (RAPD)技术，是一种基于PCR检测PCR引物结合 位点序列改变的方法，通常以10bp的寡核昔酸序 列为引物，对基因组DNA随机扩增，电泳分离染色 扩‘增产物，再分析多态性。 技术 FISH技术利用荧光标记的探针在细胞内与特 异的互补核酸序列杂交，通过激发杂交探针的荧光 来检测信号。荧光探针比放射性探针更安全，具有 较好的分辨力，不需要额外的检测步骤。近年来， 由于FISH技术具有灵敏、便捷等优点，迅速发展完 善成为研究环境微生物的有力工具。此外，可用不 同激发和散射波长的荧光染料标记探针，在一步反 应中同时检测几个靶序列。该技术主要包括试样 固定、预处理、预杂交、探针和试样变性、杂交、漂洗 去除未结合的探针、检测杂交信号等步骤。由于 165rRNA具有遗传稳定性，因此成为FISH技术检 测最常用的靶序列。 基因重组技术 基因重组技术是从供体生物的基因组中通过 酶切扩增等手段获取目的基因，与载体连接形成重 组DNA分子，再导入到受体细胞中，让外源基因得 以表达。在已经分离出的许多菌株中，与降解能力 有关的基因多在质粒体上。由于质粒很容易在细 菌的繁殖过程中遗失，对细菌降解能力的长期稳定 非常不利，可将其与污染物降解有关的酶基因重组 到大肠杆菌等微生物中进行表达，以此构建的各种 生物降解特性增强的重组菌可用于污染环境的治 理修复或发酵某些废弃物。 生物信息学 20世纪后期，生物学的迅猛发展，从数量上和 质量上极大地丰富了基因组数据库、蛋白质数据 库、酶数据库和文献数据库等许多生物科学的数据 资源。已有多个国家和国际科研组织建立了生物 信息数据库，如欧洲分子生物学实验室(Eur叩ean MolecularBiologyLaboratory)核酸序列数据库和美 国国家生物技术情报中心(Nationaleente:fo:Bio- technologyInformation，NCBI)基因序列数据库等。 科学家利用计算机及生物信息分析软件分析这些 数据资源，确定大分子序列、结构、表达模式和生化 途径与生物数据之间的关系，区分生物个体间遗传 差异，揭示DNA多样性。例如，基本局部比对搜索 工具(BasieLoealAlignmentSearehTool，BLAST)， 是一套在蛋白质数据库或DNA数据库中进行相似 性比较的分析工具。它基于Altschul等的方法「2〕， 在序列数据库中对查询序列进行同源性比对工作。 BLAST程序可对一条或多条、任何数量、任何形式的 序列在一个或多个核酸或蛋白序列库中进行比对，甚 至将有缺口的比对序列也考虑在内，利用比较结果中 的得分对序列进行相似性说明。基因的序列分析可 揭示出生物物种之间的关系，在污染治理研究中可用 于生物基因组特殊区域或特异基因的测序。 2分子生物技术在环境污染物降解 中的应用 土壤试样总DNA的提取 用适当方法直接从土壤中提取DNA并纯化， 是从分子生物学角度对土壤微生物进行研究的前 提条件，而后可进行酶切、PCR扩增、核酸分子杂交 等分子生物学技术操作。从土壤中提取微生物 DNA主要分为汽接法和间接法}’{。直接法是在 ogram等的方法基础卜发展起来的，其主要包括2 个步骤:(l)原位细胞裂解;(2)DNA提取和纯化。 直接法提取的DNA超过细菌总DNA的60%且省 力，但提取的DNA常常有折断、腐殖酸污染、甚至 提取物中还夹杂有未知的胞外DNA和真核生物的 DNA。最先报道间接法的是Faegri等[‘〕，其主要包 括4个步骤:(l)分散土壤;(2)分离细胞与土壤; (3)细胞裂解;(4)DNA纯化。间接法提取DNA 产量低且费力，但纯度较高、DNA损伤小，提取的 大片段DNA可用来构建cos而d和细菌人工染色体 文库等。 采用PCR及相关技术扩增分析DNA片段 可降解污染物的微生物必然能产生分解代谢 该污染物的酶。selvaratnam等L’l用编码苯酚单加 氧酶dmpN摹因的RT一PCR技术来检测序列间歇 式活性污泥反应器‘{一，降解酚的假单胞菌。检测结 果表明，RT一PCR技术不仅能检测微生物降解酚的 能力，还能测量dmpN基因的转录水平，从而确定假 单胞菌特殊的分解活性，发现了在转录水平下，酚 浓度与通气时间之问存在正相关关系。 将PCR技术和变性梯度凝胶电泳(DGGE)结 合起来，在变性条件适当的情况下能分辨一个碱基 对，分辨率较高。染色后的凝胶用成像系统进行分 析，可在一定程度l几反应试样的复杂性。条带的多 少能反应试样「 一 }1微生物组成的差异，条带的亮度能 反应试样中微生物的多少。基于以上优点，日前该 技术在微生物群落结构的分析和动态研究方面得 到了厂‘泛应用。DGGE可通过分析PCR扩增的基 因点突变来探索微生物的复杂性。徐玉泉等[“〕从 某废水中分离出一株能以苯酚为惟一碳源的菌株 PHEA一2，使用PCR一DGGE技术对该菌165 rDNA进行分析，发现该菌与醋酸钙不动杆菌同源。 M盯sh等r了)利用PcR一DGGE技术获得了活性污泥 中真核微生物的种群变化情况。王峰等下8〕采用 PCR一DGGE技术对城市污水化学生物絮凝处理中 活性污泥和生物膜微生物种群结构进行了分析，结 果表明活性污泥培养前后微生物种群结构发生r 很大改变。 RAPD技术也是一种应用比较广泛的以多态性 引物来扩增某些片段的技术。RAPD技术可用于检 测含有混合微生物种群的各种微生物反应器中微 生物的多样性。用RAPD技术分析检测实验室规 模的油脂淤泥培养料中的细菌菌群发现，用油脂淤 泥改良过的培养料比未改良的更适于不同的微生 物种群生长[9j。vainio等t’。〕从516种孤立的菌落 中提取出165rDNA，经PCR扩增后进行测序，检测 活性污泥中微生物种群的结构。这些组合技术的 应用显著增强r对微生物的检测和鉴定能力，为理 论研究工艺优化及提高生物处理效率提供了条件。 基因重组 基因工程技术应用于环境保护起始于20世纪 80年代。其基本原理是通过基因分离和重组技术， 将目的基因片段，比如可编码降解某种污染物的 酶，转移到受体生物细胞中并表达，使受体生物具 有该目的基因表达显现的特殊性状，从而达到治理 污染的目的。找到特定污染的抗性基因，利用基因 重组技术转基因后也可获得其他抗性植株以及筛 选到可转化污染物的植物，还可开发超量积累植物 进行污染土壤的生物修复。 罗如新等L”〕用放射性同位素标记tfdc基因片 段作探针，Southemblot杂交定位Ll菌株的邻苯二 酚1，2一双加氧酶基因位于Pstl的I片段和BamH I的M、N片段，回收并将其直接克隆至表达载体 pKT230卜，获得的重组子能转化不具开环酶活性 的甲胺磷降解菌P2，得到高于天然宿主21倍的邻 苯二酚1，2一双加氧酶。stingley等{”〕通过构建基 因文库和重组质粒等基因工程方法证实了NidAB 双加氧酶是降解菲的关键酶类，并首次鉴定出此基 因通过磷苯二甲酸实现降解功能。chae等‘”}发现 不能降解苯酚的su如lobusso扣taricu、98/2菌株中 的儿茶酚2，3一双加氧酶基因与能降解苯酚的 sulfolo右u，，o如taricu、咫有[6J源区，分析得知它们 是山共同祖先进化而来。把儿茶酚2，3一双加氧酶 基因克隆到大肠杆菌中表达，可获得有较高降解活 性的双加氧酶。 重金属污染是环境污染的重要方面之一。随 着分子生物学技术的发展，越来越多的修复性蛋白 基因正被从植物、微生物和动物中陆续分离出来， 如汞离子还原酶基因、有机汞裂解酶基因、汞转运 蛋自基因、金属硫蛋白基因、植物络合素合成酶基 因、铁离子还原酶基因和锌转运蛋白基因L’‘〕。这些 基因通过基因工程的改造，重组到合适的受休细胞 中表达相应的蛋白质和酶，达到治理难以降解的有 毒有害污染物的目的。sorsa等〔”〕把MTS插人 LamB序列的153位点，在中表达MTs，解决 r细胞内MTs对金属离子有限的吸附能力。综L 所述，基因重组技术具有快速、高效的特性，已逐渐 成为环境生物技术的研究热点。 技术 FISH技术利用核糖体内长度适中(约1500bp)、 高度保守的165:RNA序列作为理想的基因分类靶 序列，其中使用的165:RNA寡核普酸探针一般是 进行了荧光标记的20bp左右特异性核昔酸片段， 利用该报告分子(如生物素、地高辛)与荧光素标记 的特异亲和素之间的免疫化学反应，经荧光检测系 统对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。 FISH技术能提供处理过程中微生物的数量、空间分 布和原位生理学等信息。 硝化细菌是一类生理上非常特殊的化能自氧 菌，传统的研究方法要经过富集、分离、分类和鉴定 步骤，耗时长。HSH技术的引人解决了上述困难。 FlsH技术还被广泛用于活性污泥系统、硝化流化床 反应器和膜生物反应器等废水处理系统}’61。 基因工程微生物越来越多地被用于农业害虫 控制和环境污染的生物修复，对人类健康和环境的 影响引起广泛关注。1994年出现了一种新的标记 系统:绿色荧光蛋白(GFP)，由于GFP基因表达产 物对细胞没有毒害作用，且由GFP产生的荧光标记 检测卜分方便、简单。在某些被污染的环境中可分 离出降解该污染物的细菌，通过基因重组等手段使 用GFP分子标记，可更容易的分离检测被标记的 细胞叫。 Bastes等[’8]进行了苯酚降解菌染色体GFP基 因标记实验。通过PCR和Southemblot分析，证明 GFP基因已成功整合到宿主细胞的染色体中。对 标记菌与野生型的降解能力比较结果证明，GFP分 子标记的插人并不影响细胞的苯酚降解能力。 用G即标记Pseudomonasputida，研究活性淤 泥中细菌存活情况{’9飞。Pseudomonasputida被转到 活性淤泥2min后，观察到细胞在淤泥絮凝物间自 由游动;培养3d后，发现荧光细胞减少，大部分已 被合并到淤泥絮凝物中，以防止细菌被原生动物捕 食。用oFP标记石.eozi和Serraliamarceseern，考 察菌株附到絮凝物卜的过程{’()j。使用表面荧光显 微镜能将带有GFP标记的细胞从活性污泥中区分 开，井进行观察和记数。而聚焦激光扫描显微镜 (cLsM)可使GFP标记细菌产生三维轮廓，结合表 面荧光显微镜和CLSM观察GFP标记细胞，结果表 明，细胞表面疏水性在细菌附到絮凝物的过程中起 重要作用，两种细菌附在絮凝物上的模式有很大不 同，通过这种方法可更好地理解细菌赫附机理，有 助于提高废水处理效果。 3结语 分子生物技术的应用使研究人员可从微观的 角度更细致深人地了解微生物对污染物降解的具 体生理生化机制，在分子水平 _ _ [揭示生物体吸收、 迁移、积累有害物质最终被毒害，及适应、抗性等生 态问题，从而筛选到更多有利用价值的微生物。随 着越来越多微生物全部基因序列的解码，对各种细 菌体内可降解基因的分布和表达会有更深人的了 解，有关技术的发展和成熟必将对污染物的降解过 程有一个整体的、生态水平上的认识。 参考文献 l李凤，刘世贵 . 分子生物学技术在环境微生物研究中的 应用 . 世界科技研究与发展，2003，25(4):88一92 2AltsehulSF，GishW，MillerW， mentsearehtool . 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